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    16種殺菌劑及其復(fù)配對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力測(cè)定及溫室防效

    2016-07-08 03:18:19張雪王曉梅逯忠斌王巖侯志廣趙曉峰王鑫宏張浩
    吉林蔬菜 2016年5期
    關(guān)鍵詞:毒力測(cè)定殺菌劑

    張雪王曉梅逯忠斌王巖侯志廣趙曉峰王鑫宏張浩*

    (1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院 長(zhǎng)春 130118)(2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院 長(zhǎng)春 130118)

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    16種殺菌劑及其復(fù)配對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力測(cè)定及溫室防效

    張雪1王曉梅2逯忠斌1王巖1侯志廣1趙曉峰1王鑫宏1張浩1*

    (1.*吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院長(zhǎng)春130118)(2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院長(zhǎng)春130118)

    摘要:采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定16種殺菌劑單劑藥效并篩出對(duì)番茄晚疫病增效作用較好的混劑配比。結(jié)果表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉的EC50值分別為0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L,抑菌效果均較好。將氰霜唑分別于其他四種殺菌劑復(fù)配,其中咯菌腈和氰霜唑以質(zhì)量比為1∶1混配時(shí),EC50值為0.08mg/L,增效系數(shù)為3.38,增效作用明顯。在溫室防效試驗(yàn)中,采用常規(guī)噴霧法,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑在100g.a.i/hm2劑量下防效最好,達(dá)到93.66%,可為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供有效的科學(xué)理論指導(dǎo)。

    關(guān)鍵詞:番茄晚疫??;殺菌劑;毒力測(cè)定

    張雪,吉林農(nóng)安人,碩士,主要從事有害生物抗藥性及綜合治理研究。

    E-mail:529562839@qq.com

    地址:(130118)吉林省長(zhǎng)春市新城大街2888號(hào)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,E-mail:haozhang100@163.com。

    番茄晚疫病菌是由卵菌中的致病疫霉引起的,是一種常見的植物病原真菌,侵染番茄等茄科植物。我國(guó)多數(shù)省份都有番茄晚疫病的發(fā)生現(xiàn)象,尤其是連續(xù)陰雨天氣、日夜溫差較大的地區(qū)影響番茄的正常生長(zhǎng)。對(duì)于北方保護(hù)地栽培條件來(lái)看,也較容易發(fā)生此病害[1-2]。

    對(duì)該病害的防治主要采用化學(xué)藥劑[3],主要有甲霜靈、苯霜靈等,但通過(guò)試驗(yàn)可知,許多國(guó)家已對(duì)此類藥劑產(chǎn)生抗性[4-6]。本文通過(guò)對(duì)常用防治番茄晚疫病的各種殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力試驗(yàn),篩選出抑菌效果較好的單劑按照不同比例進(jìn)行混配,選擇增效作用最好的藥劑復(fù)配并對(duì)其進(jìn)行溫室防效試驗(yàn),從而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上為防治該類病害提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料

    1.1.1供試菌株

    番茄晚疫病菌,由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥生物測(cè)定實(shí)驗(yàn)室分離鑒定并保存。

    1.1.2供試藥劑

    95%氰霜唑原藥(Cyazofamid,TC),諾農(nóng)(北京)國(guó)際生物技術(shù)公司;97%咯菌睛原藥(Fludioxonil,TC),河北冠龍農(nóng)化有限公司;90%氨基寡糖素原藥(Chitosam-oligosacchrins,TC),青島博智匯力生物科技有限公司;95%吡唑醚菌酯原藥(Pyrazole kresoxim,TC),京振農(nóng)化工有限公司,98%烯酰嗎琳原藥(Dimethomorph,TC),98%甲霜靈原藥(Metalaxyl,TC),廣州瑞豐生物科技有限公司;90%烯肟菌酯原藥(Enestroburin,TC),沈陽(yáng)科創(chuàng)化學(xué)品有限公司;95%咪鮮胺原藥(Prochloraz,TC),江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司;90%多抗霉素原藥(Polyoxin,TC),績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司;95%甲基硫菌靈原藥(Thiophanate-methyl,TC),江蘇百靈有限公司;1萬(wàn)億活芽孢/g枯草芽孢桿菌母藥(Bacillus subtilis,TC),德強(qiáng)生物股份有限公司;96%異菌脲原藥(Iprodione,TC),湖北佳諾信生物化工有限公司;96%福美雙(Thiram,,TC),淄博華王化工有限公司;99%多菌靈原藥(Carbendazim,TC),上海開蒙環(huán)境工程有限公司;95%百菌清原藥(Chlorothalonil,TC),鄒平德睿商貿(mào)有限公司;98%苯醚甲環(huán)唑原藥(Difenoconazole,TC),石家莊伊宏化工有限公司。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1實(shí)驗(yàn)藥劑篩選與濃度確定

    將16種藥劑分別用少量有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解,然后加入無(wú)菌水,按照實(shí)驗(yàn)需要均配制成質(zhì)量濃度為1000mg/L母液備用,然后依次稀釋不同的濃度。氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素的質(zhì)量濃度為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L;吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉、苯醚甲環(huán)唑、烯肟菌酯的質(zhì)量濃度為40、8、1.6、0.32、0.064mg/L;咪鮮胺、多抗霉素、甲基硫菌靈、枯草芽孢桿菌的質(zhì)量濃度為50、10、2、0.4、0.08mg/L;福美雙、多菌靈、異菌脲、甲霜靈、百菌清的質(zhì)量濃度為80、16、3.2、0.64、0.128mg/L。

    1.2.2單劑室內(nèi)毒力測(cè)定

    測(cè)定16種藥劑的室內(nèi)毒力采用菌絲生長(zhǎng)速率法[6]。將滅菌后的PDA培養(yǎng)基自然降到60~70℃,按上面濃度加入計(jì)算好的固定藥量,使帶藥培養(yǎng)基含有不同藥量,至完全冷卻后,接種直徑為5mm的番茄晚疫病菌餅,空白對(duì)照加等量無(wú)菌水,3次重復(fù)。接種后平板放到培養(yǎng)箱中(25℃)培養(yǎng),72小時(shí)后測(cè)量生長(zhǎng)菌落直徑采用十字交叉法,然后計(jì)算抑菌率,用DPS評(píng)價(jià)系統(tǒng)分析,從而得出毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50值[7-10]。

    抑菌率(%)=(對(duì)照培養(yǎng)基中菌落直徑-含藥培養(yǎng)基中菌落直徑)/對(duì)照培養(yǎng)基中菌落直徑×100%

    1.2.3殺菌劑復(fù)配對(duì)番茄晚疫病藥效測(cè)定

    復(fù)配毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)用Horsfall法,在測(cè)定單劑毒力的基礎(chǔ)上,選擇機(jī)制作用不同的殺菌劑混配[11],試驗(yàn)中對(duì)番茄晚疫病菌抑菌效果最好的氰霜唑分別和咯菌腈、生物農(nóng)藥氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰嗎啉混配進(jìn)行聯(lián)合毒力測(cè)定。每種混劑按5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5進(jìn)行混配,且復(fù)配劑質(zhì)量濃度梯度均為10、2、0.4、0.08、0.016mg/L,以加等體積無(wú)菌水為空白對(duì)照,3次重復(fù)。實(shí)驗(yàn)與計(jì)算方法均同單劑室內(nèi)毒力測(cè)定。

    1.2.4數(shù)據(jù)處理

    根據(jù)Wadley方法判斷混劑是否有增效作用[11]。按菌絲生長(zhǎng)抑制率計(jì)算單劑和混劑的EC50值,再用Wadley公式計(jì)算混劑的SR,Wadley法計(jì)算如下:

    EC50(th)=(a+b)/(a/EC50A+b/EC50B)

    增效系數(shù)(SR)=EC50(th)/EC50(ob)

    EC50(ob)代表實(shí)際EC50,EC50(th)代表理論EC50,A、B為單劑,a、b為兩者在混劑中的質(zhì)量比。SR=0.5-1.5為相加作用;SR>1.5為增效作用;SR<0.5為拮抗作用。

    1.2.540%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟〉臏厥宜幮г囼?yàn)

    試驗(yàn)于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)溫室內(nèi)進(jìn)行,肥力水平均勻一致、栽培管理為中等水平[12]。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將加工后的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑懸浮劑按照150、100、50g.a.i./hm2三種劑量進(jìn)行噴施,試驗(yàn)共設(shè)計(jì)8個(gè)處理,3次重復(fù),共24個(gè)小區(qū)。本試驗(yàn)共施藥兩次間隔為7天,第二次施藥10天后調(diào)查番茄晚疫病病況。取樣采用對(duì)角線5點(diǎn)法,記下總株數(shù)、各病級(jí)數(shù)與病株數(shù),計(jì)算出病情指數(shù)與防治效果。

    分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)與計(jì)算公式如下:

    0級(jí),無(wú)病斑;1級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積5%以下;2級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積6%~10%;3級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積11%~20%;4級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積21%~50%;5級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積50%以上。

    病情指數(shù)=[∑(各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)值數(shù))/(最高級(jí)值×調(diào)查總株數(shù))]×100%

    防治效果=[(空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù))/空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)]×100%

    2 結(jié)果與分析

    2.116種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病的EC50值測(cè)定結(jié)果

    從試驗(yàn)結(jié)果(見表1)可知:在16種殺菌劑中,吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對(duì)番茄晚疫病有較好的抑制效果,EC50值分別為0.74、0.92mg/L,生物農(nóng)藥中氨基寡糖素表現(xiàn)出良好的抑菌效果,EC50值為0.46mg/L,擬除蟲菊酯類殺蟲劑中咯菌腈表現(xiàn)出較好的抑菌活性,EC50值為0.37mg/L,磺胺咪唑類殺菌劑中氰霜唑EC50值為0.21mg/L,對(duì)番茄晚疫病菌具有最高的抑菌活性,為混劑復(fù)配提供了有效依據(jù)。

    表1 16種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病的室內(nèi)毒力

    2.2氰霜唑與其它四種殺菌劑混配對(duì)番茄晚疫病菌的試驗(yàn)效果

    2.2.1咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

    咯菌腈與氰霜唑藥劑復(fù)配后的結(jié)果見表2。從表可知,當(dāng)咯菌腈和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1和1∶3時(shí),增效系數(shù)為0.92、0.94 和0.92,SR在0.5~1.5之間,為相加作用;兩藥劑混劑比例為1∶5 和1∶1時(shí),增效系數(shù)為1.53和3.38,抑菌效果較好,表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為1∶1時(shí),抑菌效果最強(qiáng)。

    表2 咯菌腈與氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.2氨基寡糖素與氰霜唑混配的試驗(yàn)效果

    表3 氨基寡糖素和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

    氨基寡糖素與氰霜唑藥劑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。從表可知,當(dāng)氨基寡糖素和氰霜唑混劑比例為1∶1、1∶3、1∶5時(shí),其增效系數(shù)為1.26、1.01、0.51,SR在0.5~1.5之間,為相加作用;兩藥劑混劑比例為5:1和3:1時(shí),增效系數(shù)為2.95和1.77,SR>1.5,抑菌效果較好,表現(xiàn)出增效作用。尤其當(dāng)兩藥劑質(zhì)量比為5∶1時(shí),抑菌效果最強(qiáng)。

    2.2.3吡唑醚菌酯和氰霜唑混配的試驗(yàn)結(jié)果

    吡唑醚菌酯與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。從表可知,當(dāng)吡唑醚菌酯和氰霜唑混劑比例為5∶1、1∶1、1∶3、1∶5時(shí),其增效系數(shù)為0.71、0.71、0.74、1.00,SR在0.5~1.5之間,為相加作用;兩藥劑混劑比例為3∶1時(shí),增效系數(shù)為2.26,SR>1.5,抑菌效果較好,表現(xiàn)出增效作用。

    表4 吡唑醚菌酯和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.4烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

    烯酰嗎啉與氰霜唑復(fù)配的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。從表可知,當(dāng)烯酰嗎啉和氰霜唑混劑比例為5∶1、3∶1、1∶3、1∶5時(shí),其增效系數(shù)為1.24、1.29、1.08、0.86,SR在0.5~1.5之間,為相加作用;兩藥劑混劑比例為1∶1時(shí),增效系數(shù)為1.65,SR>1.5,抑菌效果較好,表現(xiàn)出增效作用。

    表5 烯酰嗎啉和氰霜唑混配試驗(yàn)結(jié)果

    2.3咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

    溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果(見表6)。質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%咯菌腈·氰霜唑?qū)Ψ淹硪卟∮泻芎玫姆乐涡Ч?0、100、150g.a.i./hm2三種劑量下,防效分別為86.91%、93.66%、90.08%,與單劑相比防效顯著,其中以100g.a.i./hm2劑量下對(duì)番茄晚疫病的防治效果最好。

    表6 咯菌腈與氰霜唑溫室藥效試驗(yàn)結(jié)果

    3 結(jié)果與討論

    氰霜唑能夠較好抑制疫霉菌不同階段的生長(zhǎng),例如孢子囊的形成、萌發(fā)、游動(dòng)孢子的釋放、移動(dòng)以及菌絲的生長(zhǎng)等。氰霜唑用量要求低,對(duì)人及其他動(dòng)物物具有較低毒性[13]。

    試驗(yàn)結(jié)果表明:氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉對(duì)番茄晚疫病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度分別是0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L,表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰嗎啉均具有良好的抑制效果。將氰霜唑與其他四種殺菌劑進(jìn)行混配試驗(yàn),結(jié)果表明,四種混配藥劑中咯菌腈與氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時(shí),其增效系數(shù)最高,抑菌效果更好。

    農(nóng)藥混配使用是目前生產(chǎn)上普通采用的藥劑混用方式,具有使用方便和靈活、易于操作等優(yōu)點(diǎn),而且還能夠避免混劑有效成分因相互作用而失效的可能性。對(duì)番茄晚疫病的溫室防效試驗(yàn)中咯菌腈和氰霜唑質(zhì)量比為1∶1時(shí),其防效較好,當(dāng)用量為100g.a.i./hm2時(shí),對(duì)番茄晚疫病的防效為93.66%,優(yōu)于對(duì)照藥劑,為防治番茄晚疫病提供更多的用藥參考,可在日常農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。

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    ●園林花卉●

    Toxicity Determination and Greenhouse efficacy of several Fungicides to phytophthora infestans ZHANG Xue1,WANG Xiao-mei2,LU Zhong-bin1,WANG Yan1,HOU Zhi-guang1,ZHAO Xiao-feng1,WANG Xin-hong1,ZHANG Hao1

    (1.College of Resource and Environmental Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China)(2.College of Agronomy,Jilin Agricultural University, Changchun 130118,China)

    Abstract:The study aims to test sixteen effective fungicides and screens out the proportioning ratio for controlling on phytophthora infestans through indoor screening.The results showed that the EC50 value of cyazofamid、fludioxonil、chitosam-oligosacchrins、pyrazole kresoxim、dimethomorph were 0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L,had obviously inhibitory activity.The mixture of fludioxonil and cyazofamid is the most obvious synergism at the ratio of 1∶1 with EC50 value of 3.38,exhibiting obvious synergic effect.The greenhouse efficacy of the mixture at 100g.a.i/hm2was best against phytophthora infestans with the method of greenhouse was spraying,which laid a foundation for better controlling phytophthora infestans.

    Key words:phytophthora infestans;fungicide;toxicity test

    作者簡(jiǎn)介:10.16627/j.cnki.cn22-1215/s.2016.05.030

    通訊作者:張浩,吉林洮南人,教授,博士,碩士生導(dǎo)師,主要從事農(nóng)藥環(huán)境毒理研究。

    基金項(xiàng)目:長(zhǎng)春市國(guó)際科技合作計(jì)劃(13GH06)。

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