如何進行轉基因產(chǎn)品的檢測*

李永光，李文濱

（東北農(nóng)業(yè)大學大豆研究所，哈爾濱　15500003300）

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如何進行轉基因產(chǎn)品的檢測*

李永光，李文濱****

（東北農(nóng)業(yè)大學大豆研究所，哈爾濱15500003300）

第一作者：李永光，博士，助理研究員，主要研究方向大豆生物技術

**通訊作者：李文濱，博士，教授，主要研究方向大豆遺傳育種，E-mail: wenbinli@neau.edu.cn

近30年來，轉基因食品的生產(chǎn)發(fā)展十分迅猛，各國都紛紛投入大量的人力、物力和財力進行研究，就連聯(lián)合國前秘書長安南也曾在聯(lián)合國大會上贊揚轉基因食品是“繼綠色革命后的一次藍色革命”［1］。因此，轉基因食品的安全問題也逐漸引起各國的關注，許多國家加強了對轉基因食品的安全性評估和風險性分析，并制定了相應的管理法規(guī)。轉基因產(chǎn)品的檢測已經(jīng)納入了國內(nèi)外檢驗檢疫部門的檢測項目。

轉基因作物的檢測主要是從染色體水平、轉錄組水平、蛋白組水平以及代謝組水平對外源基因及其表達產(chǎn)物進行檢測，主要是針對外源轉入基因的核苷酸序列以及蛋白表達產(chǎn)物進行檢測。轉基因產(chǎn)品的檢測方法要求快速、準確、靈敏，適應樣品量大、目標基因種類繁多等特點。

檢測外源基因核苷酸序列的方法有常規(guī)性PCR，實時熒光定量PCR，基因芯片和微陣列，高通量測序，生物傳感器技術等［2］。一般來說，對樣品中的轉基因成分進行檢測的流程如下：

（1）是否含有轉基因成分：檢測樣品中是否含有轉基因作物的通用元件、標記基因等；

（2）具體含有什么轉基因的作物品系：通過品系特異性的鑒定方法來確認基因成分屬于某個特定的轉基因品系；

（3）含有多少轉基因成分：利用定量PCR的方法確定樣品中轉基因成分的具體含量［3］。因DNA較RNA和蛋白質具有更好的穩(wěn)定性，已經(jīng)成為轉基因檢測中最主要的靶標分析對象。目前，轉基因生物檢測主要是通過聚合鏈式反應（PCR）進行。PCR檢測方法因具有快速、靈敏、費用低、檢測僅需微量的DNA，并且可以同時檢測多個樣品的特點，正成為這一領域日趨成熟的方法之一。

檢測外源蛋白表達產(chǎn)物的方法主要采用免疫學檢測法，即Western雜交、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和免疫層析試紙法［4］。ELISA具備了酶反應的高靈敏度和抗原抗體反應的特異性，具有簡便、快速和費用低等特點，但易出現(xiàn)本底過高的問題，且只能檢測目的蛋白抗原性沒有明顯變化的粗加工產(chǎn)品。側向流動免疫測定試紙條是一種快速簡便的定性檢測方法，將試紙條放在待測樣品抽提物中，5～10 min就可得出結果，不需要特殊儀器和熟練技能，適合種業(yè)公司和農(nóng)戶使用。

隨著轉基因植物的種植面積逐年增加，轉基因食品的安全問題越來越受到大家的重視。經(jīng)典的定性定量PCR的檢測方法依然是公認的通用方法，而新技術的涌現(xiàn)更給大家?guī)砹讼Ｍ汉怂岬葴財U增技術不需要溫度的循環(huán)和精密的儀器；毛細管電泳檢測方法逐步實現(xiàn)自動化；而芯片檢測技術更使高通量檢測成為可能。

［參考文獻］

［1］蔡八弟.中國轉基因食品商業(yè)化，何去何從?［J］.法制與經(jīng)濟, 2007（7）: 7-8.

［2］Querci M, Van B M, Zel J, et al. New approaches in GMO detec?tion［J］. Anal Bioanal Chem, 2010, 396（6）: 1991-2002.

［3］張建中,劉鐵男,張海波,等.轉基因生物核酸檢測新技術研究進展［J］.上海農(nóng)業(yè)學報, 2011, 27（1）: 117-120.

［4］Stave J W. Protein immunoassay methods for detection of biotech crops: applications, limitations, and practical considerations［J］. J AOAC Int, 2002, 85（3）: 780-786.

中圖分類號：Q344

文獻標志碼：B

文章編號：1674-3547（2016）02-0003-02

收稿日期：2016-03-31

*基金項目：抗逆轉基因大豆新品種培育（2014ZX08004002）