山楂提取物對(duì)地高辛誘導(dǎo)大鼠心律失常的拮抗作用

李　馨　黃海燕

(重慶市江北區(qū)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，重慶　400020)

山楂提取物對(duì)地高辛誘導(dǎo)大鼠心律失常的拮抗作用

李馨黃海燕

(重慶市江北區(qū)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，重慶400020)

〔摘要〕目的探討山楂提取物對(duì)地高辛誘導(dǎo)心律失常的拮抗作用。方法研究分為實(shí)驗(yàn)組(n=8)和對(duì)照組(n=8)。地高辛，以40 μg·kg-1·min-1劑量，注射到實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠誘導(dǎo)心律失常。與此同時(shí)，山楂提取物滴注實(shí)驗(yàn)組大鼠；等量0.9%NaCl滴注到對(duì)照組大鼠。分析大鼠心電圖QRS波增寬及動(dòng)脈血壓變化。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠比對(duì)照組存活時(shí)間長(zhǎng)(P=0.002)。地高辛注射起始兩組間QRS波增寬無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.812)。對(duì)照組心動(dòng)過(guò)緩特別明顯(P=0.01)。在地高辛和0.9%NaCl滴注期間對(duì)照組觀察到最大QRS波時(shí)間是53.29±3.99 ms(P=0.001)。而實(shí)驗(yàn)組室性心律失常持續(xù)時(shí)間比較短。實(shí)驗(yàn)組動(dòng)脈血壓降低到(32.67±6.89)mmHg(P<0.001)。結(jié)論山楂提取物具有拮抗地高辛誘導(dǎo)心律失常作用。

〔關(guān)鍵詞〕山楂攝取物；心律失常；地高辛

山楂中主要含黃酮類化合物、有機(jī)酸、微量元素及氨基酸等〔1〕。研究證明，山楂提取物能顯著降低家兔和大鼠的血脂，并對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有治療作用〔2〕。山楂中的黃酮苷及復(fù)雜的二聚黃烷和多聚黃烷類，有顯著的擴(kuò)張血管、降低血壓效果〔3〕。另外，山楂還具有增加心肌收縮力、減慢心律的作用；可擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈并降低心肌耗氧量，改善心肌的血液供應(yīng)，并能降低外周阻力，對(duì)心血管系統(tǒng)起到改善作用〔4〕。洋地黃中毒死亡通常是由于致命的心律紊亂〔5〕。盡管已有報(bào)道山楂提取物可以抑制烏頭堿、氯化鈣和腎上腺素所致的心律失?！?〕。但是山楂提取物對(duì)地高辛誘導(dǎo)心律失常的作用未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。因而，本研究評(píng)價(jià)山楂提取物對(duì)地高辛誘導(dǎo)大鼠心律失常的拮抗作用。

1材料和方法

1.1試劑山楂提取物購(gòu)于臨沂愛(ài)康藥業(yè)有限公司，批號(hào)AKH010-A，然后溶于0.9% NaCl，配成5 mg/ml溶液(pH7.4);地高辛注射液購(gòu)于杭州民生藥業(yè)有限公司(國(guó)藥準(zhǔn)H33021711)。

1.2動(dòng)物及分組雄性Wistar大鼠，體重250～300 g(山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組(n=8，同時(shí)滴注地高辛和0.9%NaCl)及實(shí)驗(yàn)組(n=8)，同時(shí)滴注地高辛和山楂提取物。

1.3方法

1.3.1手術(shù)操作取Wistar大鼠，稱重，戊巴比妥鈉(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，先分離出大鼠右側(cè)頸動(dòng)脈，一手用顯微外科鑷子在靠近頭側(cè)結(jié)扎處小心夾起頸動(dòng)脈,另一手用顯微外科直剪小心在頸動(dòng)脈上剪一斜口，小心將管插入,然后結(jié)扎固定，連接多導(dǎo)生理儀連續(xù)監(jiān)測(cè)大鼠血壓。左、右頸內(nèi)靜脈也同樣插管，滴注山楂提取物或0.9%NaCl。

1.3.2地高辛誘導(dǎo)心律失常在研究開(kāi)始前，6只大鼠被用于明確地高辛誘導(dǎo)心律失常的劑量。地高辛通過(guò)左頸內(nèi)靜脈滴注，起始劑量是5 μg·kg-1·min-1，滴注時(shí)間是60 min。如果沒(méi)有觀察到心律失常(QRS波延長(zhǎng)；室性心律失常)，地高辛劑量逐漸增加到40 μg·kg-1·min-1〔7〕。最終，40 μg·kg-1·min-1的地高辛滴注10 min時(shí)觀察到室性心律失常。比較各組大鼠QRS波延長(zhǎng)間期、室性期前收縮持續(xù)時(shí)間、室性心動(dòng)過(guò)速和室顫的持續(xù)時(shí)間。

1.3.3提取物滴注兩組大鼠穩(wěn)定30 min后(心率:340～380次/min;收縮壓:100～140 mmHg)，通過(guò)左頸內(nèi)靜脈滴注地高辛(40 μg·kg-1·min-1)。同時(shí)，對(duì)照組以0.9%NaCl通過(guò)右頸內(nèi)靜脈滴注(1 ml·kg-1·min-1)；而實(shí)驗(yàn)組通過(guò)右頸內(nèi)靜脈滴注山楂提取物(4 mg·kg-1·min-1)。地高辛、0.9%NaCl和山楂提取物滴注時(shí)間都持續(xù)60 min,0.9%NaCl和山楂提取物滴注量相等。

1.3.4數(shù)據(jù)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖置于大鼠胸腔四肢附近的四個(gè)區(qū)域，記錄心電圖波形。心電圖儀在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中持續(xù)監(jiān)視大鼠心電圖，根據(jù)心電圖分析心律失常。從心電圖記錄計(jì)算心率。多導(dǎo)生理儀連續(xù)記錄大鼠動(dòng)脈血壓。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0軟件進(jìn)行Wilcoxon秩和檢驗(yàn)及單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1山楂提取物對(duì)大鼠心電圖和存活的影響大鼠穩(wěn)定以后(心率和血壓在30 min內(nèi)穩(wěn)定)，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠開(kāi)始滴注地高辛，導(dǎo)致QRS間期延長(zhǎng)、心動(dòng)過(guò)緩、心臟停搏。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠心動(dòng)過(guò)緩分別起始于滴注后(21.03±1.67)min和(27.12±2.61)min。與對(duì)照組(49.86±2.34 min)相比，實(shí)驗(yàn)組(62.13±2.20 min)大鼠的存活時(shí)間更長(zhǎng)(P=0.002)。實(shí)驗(yàn)組有4只大鼠在地高辛滴注后還存活。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間QRS波延長(zhǎng)起始時(shí)間無(wú)顯著差別〔(29.94±2.47)min vs (28.01±1.99)min,P=0.812〕。

2.2山楂提取物對(duì)大鼠心率的影響盡管在穩(wěn)定期間兩組大鼠心率相似，但在滴注地高辛后兩組大鼠心率逐漸降低，對(duì)照組大鼠心動(dòng)過(guò)緩更加明顯(P=0.01)。對(duì)照組大鼠在地高辛和0.9%NaCl滴注期間最大QRS期間更長(zhǎng)(P=0.001)。實(shí)驗(yàn)組QRS持續(xù)時(shí)間在滴注期長(zhǎng)于穩(wěn)定期(P=0.001)，見(jiàn)表1。

表1　實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組測(cè)量數(shù)據(jù)的比較±s,n=8)

與本組穩(wěn)定期比較：1)P<0.01；與對(duì)照組地高辛滴注期比較：2)P<0.001

2.3山楂提取物對(duì)大鼠心律失常的影響實(shí)驗(yàn)組大鼠室性期前收縮持續(xù)時(shí)間為(29.25±1.98) min，室性心動(dòng)過(guò)速持續(xù)時(shí)間是(39.19±8.02)min,室顫時(shí)間是(11.94±4.46)min,均低于對(duì)照組(48.56±7.19)min、(41.25±7.03)min及(23.12±6.71)min(均P<0.001)。

2.4山楂提取物對(duì)大鼠血壓的影響各組大鼠的動(dòng)脈血壓都降低。實(shí)驗(yàn)組大鼠血壓降低幅度更顯著(P<0.05)。對(duì)照組大鼠動(dòng)脈血壓在滴注期降低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　各組大鼠研究期間動(dòng)脈血壓的變化

與對(duì)照組同時(shí)點(diǎn)比較：1)P<0.05，與本組0 min比較：2)P<0.05

3討論

本研究表明，山楂攝取物對(duì)地高辛誘發(fā)大鼠心律失常具有保護(hù)作用。由于不同大鼠誘導(dǎo)產(chǎn)生不同類型的心律失常，本研究采用QRS間期延長(zhǎng)以及室性期前收縮、室性心動(dòng)過(guò)速和室顫的持續(xù)時(shí)間作為心律失常的標(biāo)志。結(jié)果證實(shí),與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠室性心律失常均下降。

研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，地高辛引起動(dòng)物心臟毒性模型，包括多種室性和室上性心律失?！?〕。而且，QRS間期延長(zhǎng)早于其他心律失常出現(xiàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，過(guò)量洋地黃與心肌細(xì)胞膜上Na+-K+-ATP酶結(jié)合而抑制該酶活性，使心肌細(xì)胞膜內(nèi)外Na+-K+主動(dòng)耦聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)受損，心肌細(xì)胞內(nèi)Na+濃度升高，使細(xì)胞膜上Na+-Ca2+交換增多，細(xì)胞內(nèi)Ca2+增多，肌漿網(wǎng)內(nèi)Ca2+也增多，導(dǎo)致正性肌力和心律失?！?〕。最近Gonano等〔9〕人證實(shí)激活的鈣-鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱ通過(guò)磷酸化Ryanodine受體，導(dǎo)致肌漿網(wǎng)內(nèi)Ca2+漏出，調(diào)節(jié)哇巴因誘發(fā)的心律失常和毒性影響。山楂提取物抗心律失常的確切機(jī)制目前尚不清楚。在一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)山楂提取物可以延長(zhǎng)動(dòng)作電位時(shí)程并且推遲復(fù)極；另一方面，還可以阻止心肌細(xì)胞K+外流，這與Ⅲ類抗心律失常藥物的作用機(jī)制一樣〔10〕。山楂提取物抗心律失常的機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)山楂當(dāng)中的皂苷和黃酮化合物分別具有降低血壓和抗心律失常作用〔11〕。

山楂植物提取物是世界公認(rèn)的藥物來(lái)源。山楂中分離得到的物質(zhì)主要有黃酮類、黃烷及其聚合物類、有機(jī)酸類，另外還有三萜類和甾體類等。Salehi等〔12〕研究發(fā)現(xiàn)，在缺血性心肌損傷大鼠模型中，山楂提取物具有抗低血壓和心律失常的效應(yīng)。此外，Swaminattan等〔13〕人實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示山楂提取物減少大鼠心臟缺血再灌的氧化應(yīng)激反應(yīng)，抑制細(xì)胞凋亡，具有保護(hù)心臟的作用。本研究進(jìn)一步證實(shí)了山楂提取物對(duì)地高辛誘發(fā)的大鼠心律失常具有保護(hù)作用。

本研究具有一定的局限性。首先，我們沒(méi)有具體分析山楂提取物中各種不同成分對(duì)地高辛誘發(fā)的大鼠心律失常的影響。其次，地高辛誘導(dǎo)大鼠心律失常劑量是40 μg·kg-1·min-1，但沒(méi)有進(jìn)一步的增加劑量，還需要在臨床上進(jìn)一步的研究。

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〔2015-12-30修回〕

(編輯曹夢(mèng)園)

〔中圖分類號(hào)〕R514.7

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)11-2628-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.027

第一作者：李馨(1980-)，女，主治醫(yī)師，在讀碩士，主要從事心血管內(nèi)科疾病研究。