肺癌組織中胞漿型磷脂酶A2和前列腺素E2合酶-1的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

帥　萍　肖秋香

(贛南醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室，江西　贛州　341000)

肺癌組織中胞漿型磷脂酶A2和前列腺素E2合酶-1的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

帥萍肖秋香

(贛南醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室，江西贛州341000)

〔摘要〕目的探討肺癌組織中胞漿型磷脂酶(cPL)A2和前列腺素E2合酶(mPGES)-1的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。方法選擇58份肺癌組織標(biāo)本(肺癌組)及其周邊正常組織(距離所切肺癌組織超過5 cm，癌旁組)，采用RT-PCR和免疫組化方法檢測樣本中cPLA2和mPGES-1 mRNA和蛋白的表達(dá)，分析其在肺癌組及不同臨床病理參數(shù)中的差異。結(jié)果肺癌組mPGES-1 和cPLA2 mRNA表達(dá)水平顯著高于癌旁組(P<0.05)；肺癌組mPGES-1和cPLA2蛋白的總表達(dá)陽性率，均顯著高于癌旁組(P<0.05)。腫瘤分化程度較低、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期越高，mPGES-1蛋白表達(dá)陽性率越高(P<0.05)，而不同腫瘤直徑、病理類型、分化程度、臨床分期以及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肺癌組織的cPLA2蛋白的表達(dá)陽性率無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論肺癌組織中cPLA2和mPGES-1呈現(xiàn)高表達(dá)，cPLA2表達(dá)與臨床病理參數(shù)無關(guān)，而mPGES-1表達(dá)與分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及不同臨床分期有關(guān)，兩者檢測對肺癌的早期診斷和靶向治療有一定的臨床意義。

〔關(guān)鍵詞〕肺癌；胞漿型磷脂酶A2；前列腺素E2合酶-1

目前肺癌的治療主要采用手術(shù)切除為主、化療為輔的綜合治療方法，但治療效果較差。近年來隨著肺癌分子學(xué)機(jī)制和靶向治療研究的不斷深入，尋找特異性的分子靶點(diǎn)開展靶向治療成為肺癌治療新的契機(jī)〔1〕。本研究探討胞漿型磷脂酶(cPL)A2和前列腺素E2合酶(mPGES)-1在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1資料和方法

1.1一般資料隨機(jī)選取我院2013年1月至2014年12月58例肺癌患者手術(shù)切除的肺癌組織標(biāo)本(肺癌組)及其周邊正常組織(距離所切肺癌組織超過5 cm〔2〕，癌旁組)，所有肺癌組織均經(jīng)病理學(xué)檢查確診，且組織切除前患者均未接受放療和化療等任何治療。標(biāo)本在手術(shù)切除后1 h內(nèi)放置于液氮中保存待檢。其中女21例，男37例，年齡34～76〔平均(57.62±10.47)〕歲；腺癌26例，鱗癌32例；低分化型28例，高-中分化型30例；TNM分期〔3〕：Ⅰ期12例、Ⅱ期25例、Ⅲ期21例；轉(zhuǎn)移程度：局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例、無轉(zhuǎn)移27例。

1.2指標(biāo)檢測

1.2.1mPGES-1和cPLA2的mRNA表達(dá)水平〔4〕參照RNA提取試劑盒的操作說明進(jìn)行所有組織RNA提取，從所提取的RNA中提取一部分進(jìn)行電泳，觀察RNA的完整性(完整即出現(xiàn)5 s、18 s和28 s三條清晰條帶)。隨即通過反轉(zhuǎn)錄途徑將所有樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，最后通過PCR方法將所有樣本進(jìn)行cDNA擴(kuò)增，引物序列：mPGES-1：正義：5′-CTTCCCGATCAAACACATAAGG-3′；反義：5′-CAGTGGGCTCACATTTAACCT-3′；cPLA2：正義：5′-ACCTTGAAGGAGTCAGGCATGAG-3′；反義：5′-TGGAGACCATCTACCCCTT-3′；β-actin：正義：5′-CGTCATACTCCTGCTTGCTGATCCACATCTG-3′；反義：5′-ATCTGGCACCACACCTTCTACAATGAGCTGCG-3′。分別從每份肺癌組織和癌旁組織中獲得mPGES-1、cPLA2和內(nèi)參β-actin基因片段，序列長度分別為860 bp、620 bp和400 bp。所得基因片段置于1%瓊脂糖凝膠內(nèi)進(jìn)行電泳，獲得mPGES-1、cPLA2和內(nèi)參β-actin電泳帶。采用凝膠成像分析系統(tǒng)檢測所有樣本中三條條帶的吸光度，最終以mPGES-1、cPLA2條帶與內(nèi)參β-actin吸光度值的比值作為mPGES-1、cPLA2的表達(dá)水平。

1.2.2mPGES-1和cPLA2蛋白表達(dá)水平采用免疫組化SP方法〔5〕對組織樣本分別進(jìn)行染色以檢測其中mPGES-1和cPLA2蛋白的表達(dá)。每張切片中隨機(jī)選取高倍鏡下4個不同的視野，觀察每個高倍視野內(nèi)100個細(xì)胞，記錄其中細(xì)胞質(zhì)被染成棕黃色的陽性細(xì)胞數(shù)，取4次讀數(shù)的平均值為最終值，最后計算陽性細(xì)胞百分比(陽性細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%)。

1.3臨床資料收集分別收集并記錄其一般資料(年齡、性別等)、腫瘤直徑、病理類型、分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1兩組mPGES-1和cPLA2的mRNA表達(dá)水平對比肺癌組mPGES-1 和cPLA2 mRNA表達(dá)水平〔(0.81±0.23)和(0.56±0.08)〕顯著高于癌旁組〔(0.07±0.02)和(0.09±0.02)〕(P<0.05)。

2.2mPGES-1和cPLA2蛋白表達(dá)水平與臨床病理特征關(guān)系肺癌組mPGES-1和cPLA2蛋白的總表達(dá)陽性率〔67.24%(39/58)、79.31%(46/58)〕顯著高于癌旁組〔8.62%(5/58)、0.00%(0/58)〕(P<0.05)。不同腫瘤直徑和病理類型肺癌組織的mPGES-1蛋白表達(dá)陽性率差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)，而不同分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及不同臨床分期的肺癌組織間mPGES-1蛋白表達(dá)陽性率差異顯著(P<0.05)，而不同臨床病理特征肺癌組織中的cPLA2蛋白的表達(dá)陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1　mPGES-1和cPLA2蛋白表達(dá)水平與

3討論

Cox-2在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中主要參與腫瘤血管的誘導(dǎo)產(chǎn)生、細(xì)胞凋亡和免疫功能的抑制以及腫瘤侵襲浸潤過程〔6〕。在Cox-2介導(dǎo)產(chǎn)生前列腺素E2的過程中，需要上游cPLA2和下游mPGES-1的參與才能正常進(jìn)行。其中cPLA2的主要作用是將胞膜磷脂轉(zhuǎn)化為PEG E2合成所需的花生四烯酸，cPLA2的表達(dá)和活性可決定PEG E2合成的速率和利用率〔7〕。本研究提示肺癌中cPLA2呈現(xiàn)高表達(dá)。但是cPLA2表達(dá)與臨床病理特征無相關(guān)性，對肺癌的發(fā)展無明顯作用，可能是由于cPLA2在肺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制中僅通過產(chǎn)生花生四烯酸提供給Cox-2，僅是與Cox-2協(xié)同作用，而無炎癥因子刺激作用。Cox-2介導(dǎo)PEG E2合成的過程中也少不了下游mPGES-1的參與。在PEG E2的合成過程中，cPLA2介導(dǎo)合成花生四烯酸后，Cox-2將花生四烯酸催化并轉(zhuǎn)化為PEGH2，PEGH2經(jīng)mPGES-1催化最終生成PEG E2〔8〕。因此mPGES-1在PEG E2的合成過程中起著重要作用。本研究提示肺癌組織中存在mPGES-1高表達(dá)，與臨床既往研究結(jié)果相似〔9〕。另外mPGES-1表達(dá)可預(yù)測肺癌的進(jìn)展程度和后期預(yù)后情況。

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〔2015-07-10修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

〔中圖分類號〕R73

〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)10-2415-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.10.047

第一作者：帥萍(1979-)，女，講師，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤病理學(xué)方面的研究。