桑葉粉和發(fā)酵桑葉粉對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及抗氧化指標(biāo)的影響

黃　靜　鄺哲師　廖森泰　趙祥杰　潘木水

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣州510610；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，廣州510640)

桑葉粉和發(fā)酵桑葉粉對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及抗氧化指標(biāo)的影響

黃靜1鄺哲師1廖森泰2*趙祥杰1潘木水1

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣州510610；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，廣州510640)

摘要：本試驗(yàn)旨在研究飼糧中使用桑葉粉(MLM)和發(fā)酵桑葉粉(FMLM)對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及抗氧化指標(biāo)的影響。試驗(yàn)選用95日齡嶺南黃Ⅲ號(hào)胡須雞392只，按照體重和性別隨機(jī)分為7個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)14只雞(公母各占1/2)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，6個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中使用5%、10%、20% MLM和5%、10%、20% FMLM。預(yù)試期4 d，正試期28 d。結(jié)果表明：1)胡須雞的生長(zhǎng)性能隨飼糧中MLM使用水平的增加而逐漸降低；與對(duì)照組相比，飼糧中使用不同水平的MLM和FMLM均顯著或極顯著地降低了平均日增重(P<0.05或P<0.01)；20% MLM組的平均日采食量較對(duì)照組顯著下降(P<0.05)；各MLM水平組和20% FMLM組的料重比顯著或極顯著高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。2)各試驗(yàn)組胡須雞血清堿性磷酸酶(ALP)活性較對(duì)照組顯著降低(P<0.05)，其中，10% MLM組血清ALP活性最低；各試驗(yàn)組血清總蛋白(TP)和球蛋白(GLO)含量均高于對(duì)照組，其中，10% MLM組和20% FMLM組極顯著提高了血清TP和GLO含量(P<0.01)；各試驗(yàn)組血清白球比(A/G)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；與對(duì)照組相比，20% MLM組血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量顯著降低(P<0.05)。3)10% MLM組胡須雞血清、肝臟總抗氧化能力(T-AOC)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，血清、肝臟過(guò)氧化氫酶(CAT)活性較對(duì)照組顯著降低(P<0.05)。20% FMLM組血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)?？傊?，飼糧中使用MLM降低了胡須雞的生長(zhǎng)性能，F(xiàn)MLM對(duì)生長(zhǎng)性能的影響較MLM有所改善；MLM和FMLM均有降低血脂含量、增強(qiáng)免疫力、提高抗氧化能力等作用，但2者的最適使用水平仍需進(jìn)一步研究。

關(guān)鍵詞：胡須雞；桑葉粉；發(fā)酵桑葉粉；生長(zhǎng)性能；血清生化指標(biāo)；抗氧化指標(biāo)

桑葉是桑樹(shù)的葉子，作為傳統(tǒng)的藥食兩用植物，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，并含有桑葉多酚、黃酮、多糖等多種生物活性物質(zhì)，具有抗菌消炎、鎮(zhèn)靜寧神、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用。我國(guó)現(xiàn)有桑園面積80多萬(wàn)hm2，但約有1/2的桑園所產(chǎn)的桑葉沒(méi)有用于養(yǎng)蠶，且據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全國(guó)日益發(fā)展的生態(tài)桑已超過(guò)53萬(wàn)hm2[1]，但并未找到合理高效的利用方式，如能將這些桑葉資源用作畜禽飼料原料，一是可以避免對(duì)環(huán)境造成危害，二是可緩解我國(guó)飼料原料尤其是蛋白質(zhì)飼料原料嚴(yán)重短缺的現(xiàn)狀，再則可延伸蠶桑產(chǎn)業(yè)鏈，促進(jìn)蠶桑產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)回升。

目前有關(guān)桑葉在豬、雞、牛、羊等畜禽飼糧中的應(yīng)用研究主要是以桑葉粉(mulberry leaf meal,MLM)的形式直接飼喂，在動(dòng)物上的飼喂效果表現(xiàn)出提高畜禽產(chǎn)品品質(zhì)、增加肉質(zhì)風(fēng)味、促進(jìn)動(dòng)物健康等優(yōu)勢(shì)[2-5]。但在實(shí)際生產(chǎn)中很少真正將桑葉作為飼料原料廣泛應(yīng)用到動(dòng)物飼糧中，這是因?yàn)樯Ｈ~中含有單寧、植物凝集素等抗?fàn)I養(yǎng)因子，大量添加會(huì)導(dǎo)致畜禽生長(zhǎng)性能降低[6-8]。因此，桑葉的有效加工處理方式成為桑葉在動(dòng)物飼糧中大量利用的瓶頸。固態(tài)發(fā)酵技術(shù)是飼料工業(yè)加工處理飼料原料的最有效手段之一。鑒此，試驗(yàn)前對(duì)桑葉粉進(jìn)行了固態(tài)發(fā)酵處理。 本試驗(yàn)研究了處理后的發(fā) 酵 桑 葉 粉(fermented mulberry leaf meal,FMLM) 與MLM對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、血清及肝臟抗氧化指標(biāo)的影響，為桑葉及其加工產(chǎn)品在畜牧業(yè)中的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

MLM為2014年5月采摘于廣州花都寶桑園大10品種的鮮葉，經(jīng)80 ℃恒溫烘干粉碎后制得，其主要營(yíng)養(yǎng)成分的實(shí)測(cè)值為：粗蛋白質(zhì)18.00%，粗脂肪3.10%，粗纖維10.60%，粗灰分13.60%，鈣

2.68%，總磷0.29%，賴氨酸0.79%，蛋氨酸0.10%。FMLM是將80% MLM、15%麩皮、5%豆粕混合，以醬油曲霉、釀酒酵母、植物乳桿菌及桑葉厭氧內(nèi)生菌聯(lián)合發(fā)酵48 h，60 ℃烘干粉碎后制得，其主要營(yíng)養(yǎng)成分的實(shí)測(cè)值為：粗蛋白質(zhì)24.47%，粗脂肪3.40%，粗纖維7.80%，粗灰分10.80%，鈣2.58%，總磷0.49%，賴氨酸0.97%，蛋氨酸0.17%。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選取健康的95日齡嶺南黃Ⅲ號(hào)胡須雞392只，按照體重和性別隨機(jī)分為7個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)14只雞(公母各占1/2)。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，6個(gè)試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中使用5%、10%、20% MLM和5%、10%、20% FMLM。試驗(yàn)飼糧參照廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所推薦的《嶺南黃Ⅲ號(hào)胡須雞大雞飼料營(yíng)養(yǎng)水平》和中國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《黃羽肉雞仔雞營(yíng)養(yǎng)需要》(NY/T 33—2004)進(jìn)行配制，試驗(yàn)飼糧均為粉料，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。預(yù)試期4 d，正試期28 d，試驗(yàn)雞采用地面平養(yǎng)，常規(guī)管理，自由采食和飲水。

表1　飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items對(duì)照組ControlgroupMLM水平MLMlevel/%51020FMLM水平FMLMlevel/%51020有效磷AP0.360.360.360.360.360.360.36賴氨酸Lys0.960.960.960.960.960.960.96蛋氨酸Met0.480.480.480.480.480.480.48蘇氨酸Thr0.680.680.680.680.680.680.68蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0.730.720.720.700.720.710.68

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Premix provided following per kg of diets：植酸酶 phytate 200 mg，尼卡+馬杜拉霉素 nicarbazin+madubamycin 600 mg，抗氧化劑 antioxidant 200 mg，10%硫酸粘桿菌素 10% colistine sulfate 300 mg，8%黃霉素 8% flavomycin 350 mg，復(fù)合酶制劑(配黃粉)complex enzyme preparation(wheat middling) 400 mg，枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis500 mg，多種維生素 multi vitamins 250 mg，賴氨酸 lysine 2 g，蛋氨酸 methionine 1.7 g，多種礦物質(zhì) multi mineral 1.5 g，50%氯化膽堿 50% choline chiorlde 1.3 g，NaCl 2 g，NaHCO31.5 g，加麗素紅(配黃粉)carophyll red(wheat middling) 400 mg，次粉 wheat middling 6.8 g。

2)營(yíng)養(yǎng)水平均為計(jì)算值。Nutrient levels were all calculated values.

1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

生長(zhǎng)性能：以重復(fù)為單位，在試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)空腹稱重，并統(tǒng)計(jì)全期采食量，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

血清生化指標(biāo)：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)分別選取接近平均體重的公、母雞各1只，每組8只，翅靜脈采血，3 000 r/min、4 ℃離心15 min，分裝血清，-20 ℃保存?zhèn)溆谩Ｑ骞缺D(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量的測(cè)定采用全自動(dòng)生化分析儀，所用試劑盒均購(gòu)于上海科華生物工程股份有限公司。

抗氧化指標(biāo)：將各組用于采血的8只雞，在采血后立即屠宰并取肝臟稱重后分裝，投入液氮中，再轉(zhuǎn)移到-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。血清、肝臟的總抗氧化能力(T-AOC)，丙二醛(MDA)含量，以及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性采用Multiskan GO全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(Thermo)測(cè)定，所用試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。P<0.01為差異極顯著，P<0.05為差異顯著。

2結(jié)果

2.1飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧中使用不同水平的MLM均極顯著地降低了胡須雞的平均日增重(P<0.01)，且隨MLM使用水平的增加，平均日增重逐漸降低；飼糧中使用FMLM對(duì)胡須雞平均日增重的影響與使用MLM效果相似，但較MLM有所改善，10%、20% FMLM組的平均日增重與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)，且與10%、20% MLM組差異極顯著(P<0.01)，5% FMLM組的平均日增重與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。隨飼糧中MLM使用水平的增加，胡須雞的平均日采食量呈逐漸降低的趨勢(shì)，且20% MLM組的平均日采食量較對(duì)照組顯著下降(P<0.05)；飼糧中使用FMLM對(duì)胡須雞平均日采食量的影響與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。飼糧中使用MLM和FMLM提高了胡須雞的料重比，其中10%、20% MLM組的料重比極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，5% MLM組和20% FMLM組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，且10%、20% MLM組的料重比極顯著高于其他各組(P<0.01)。

表2　飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01), and with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).The same as below.

2.2飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，各試驗(yàn)組胡須雞血清ALT活性與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)，其中5% MLM組血清ALT活性顯著高于20% MLM組和10% FMLM組(P<0.05)；各組胡須雞血清AST活性無(wú)顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組胡須雞血清ALP活性較對(duì)照組顯著降低(P<0.05)，其中，10% MLM組血清ALP活性最低，較對(duì)照組降低了58.6%。

各試驗(yàn)組胡須雞血清TP和GLO含量均高于對(duì)照組，其中，10% MLM組和20% FMLM組極顯著提高了血清TP和GLO含量(P<0.01)，10% FMLM組顯著提高了血清GLO含量(P<0.05)；10% MLM組血清TP含量與20% MLM組差異極顯著(P<0.01)，與5% MLM組、5% FMLM組差異顯著(P<0.05)；10% MLM組血清GLO含量與5%、20% MLM組及5% FMLM組差異極顯著(P<0.01)，與10% FMLM組差異顯著(P<0.05)；20% FMLM組GLO含量與20% MLM組差異顯著(P<0.05)。各試驗(yàn)組胡須雞血清ALB含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)，其中以20% FMLM組血清ALB含量最高，較對(duì)照組提高了11.2%；20% FMLM組血清ALB含量與20% MLM組、5% FMLM組差異顯著(P<0.05)。5% MLM組胡須雞血清A/G顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其他各試驗(yàn)組血清A/G極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)；10% MLM組血清A/G極顯著低于其他各組(P<0.01)。

各試驗(yàn)組胡須雞血清GLU含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)，以10% FMLM組血清GLU含量最高，10% MLM組最低，二者差異顯著(P<0.05)。各組胡須雞血清UN和UA含量差異均不顯著(P>0.05)。

與對(duì)照組相比，20% MLM組胡須雞血清TC含量顯著降低(P<0.05)。5%、20% MLM組胡須雞血清TG含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，5% FMLM組血清TG含量顯著高于其他試驗(yàn)組(P<0.05)；飼糧中使用MLM和FMLM有增加胡須雞血清HDL-C含量的趨勢(shì)，但各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.3飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞抗氧化指標(biāo)的影響

2.3.1飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼糧中使用MLM和FMLM有增加胡須雞血清T-AOC的趨勢(shì)，其中10% MLM組血清T-AOC顯著高于其他組(P<0.05)。與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組胡須雞血清GSH-Px活性均增加，其中，20% FMLM組血清GSH-Px活性最高，與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)，較對(duì)照組增加了18.3%；20% FMLM組血清GSH-Px活性顯著高于10%、20% MLM組和5%、10% FMLM組(P<0.05)。10% MLM組胡須雞血清CAT活性較對(duì)照組極顯著降低(P<0.01)，其他MLM和FMLM水平組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)；10% MLM組血清CAT活性極顯著低于5% MLM組和10% FMLM組(P<0.01)，顯著低于5%、20% FMLM組(P<0.05)。5%、10%、20% MLM組胡須雞血清SOD活性分別較對(duì)照組分別提高了11.0%、7.9%、9.1%；10% FMLM組血清SOD活性較對(duì)照組提高了3.6%，但各組間差異不顯著(P>0.05)。各試驗(yàn)組胡須雞血清MDA含量較對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)；5% FMLM組血清MDA含量顯著高于10% FMLM組(P<0.05)。

表3　飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞血清生化指標(biāo)的影響

表4　飼糧中MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞血清抗氧化指標(biāo)

續(xù)表4項(xiàng)目Items對(duì)照組Controlgroup桑葉粉水平MLMlevel/%51020發(fā)酵桑葉粉水平FMLMlevel/%51020超氧化物歧化酶SOD(U/mL)111.25±7.11123.51±5.80120.00±1.79121.34±3.29108.02±8.12115.23±4.51111.60±7.40丙二醛MDA/(nmol/mL)7.98±0.05ab7.82±0.86ab7.47±0.75ab7.72±0.18ab8.89±0.65a7.01±0.66b8.34±0.32ab

2.3.2飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，10% MLM組胡須雞肝臟T-AOC較對(duì)照組顯著增加(P<0.05)；10% MLM組肝臟T-AOC與10%、20% FMLM組、5% MLM組差異顯著(P<0.05)。與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組胡須雞

肝臟CAT活性均降低，其中10% MLM組肝臟CAT活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；10% MLM組肝臟CAT活性與5% MLM組、10% FMLM組差異顯著(P<0.05)。各組胡須雞肝臟GSH-Px、SOD活性和MDA含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表5　飼糧中MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞肝臟抗氧化指標(biāo)

3討論

3.1飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能的影響

有關(guān)飼糧中使用MLM對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響，各研究者結(jié)論不一。吳萍等[9]指出，在飼糧中使用2%～6% MLM能顯著提高黃羽肉雞的日增重、成活率等指標(biāo)；Simol等[10]研究表明，在肉雞飼糧中使用30%的MLM對(duì)采食量、生長(zhǎng)性能和死亡率無(wú)不利影響；而范京輝等[6]研究表明，飼糧中使用5%、10% MLM均顯著降低了肉雞體重，且使用水平越高，對(duì)生長(zhǎng)性能的影響越大，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。相比于MLM，飼糧中使用FMLM可改善對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能的影響。Has等[7]在飼糧中使用10%、20%的MLM和10%、20%的瘤胃液FMLM，隨使用水平的增加，肉雞末期體重越低，與本試驗(yàn)結(jié)果一致，但其10%瘤胃液FMLM組肉雞末期體重較10% MLM組有降低的趨勢(shì)，與本試驗(yàn)中使用10% FMLM胡須雞的平均日增重較使用10% MLM顯著提高的結(jié)果不一致，這可能是因?yàn)镕MLM是在本試驗(yàn)前期經(jīng)過(guò)菌種篩選和發(fā)酵工藝優(yōu)化后而生產(chǎn)的，其發(fā)酵MLM的效果及降解桑葉中抗?fàn)I養(yǎng)因子的作用較直接采用瘤胃液發(fā)酵效果更好。

本試驗(yàn)中，飼糧使用MLM對(duì)胡須雞生長(zhǎng)性能的影響與桑葉中存在較高含量的粗纖維及單寧、植物凝集素等抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)。本試驗(yàn)中，隨飼糧中MLM和FMLM水平的增加，飼糧粗纖維含量增加，而動(dòng)物難以消化吸收過(guò)量的粗纖維，過(guò)量的粗纖維會(huì)降低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的有效濃度和飼料消化率，增加飽腹感，降低采食量，從而對(duì)胡須雞的生長(zhǎng)性能造成影響。而MLM進(jìn)行發(fā)酵處理后，微生物產(chǎn)生的酶系將桑葉中的纖維素、蛋白質(zhì)等難以消化的大分子分解為容易吸收的小分子，并可能通過(guò)微生物的作用轉(zhuǎn)變了單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子，從而減少了其對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響。姜丹等[11]研究酵母菌和木霉對(duì)豆粕中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和抗?fàn)I養(yǎng)因子的影響時(shí)指出，酵母菌降低胰蛋白酶抑制因子和植酸效果顯著，木霉能顯著降低豆粕中粗纖維含量。付敏[12]采用枯草芽孢桿菌、黑曲霉、白地霉混合固態(tài)發(fā)酵菜籽餅，結(jié)果也顯示發(fā)酵后小肽和游離氨基酸含量提高3倍以上，總硫甙含量降低93.4%，異硫氰酸酯全部降解。

3.2飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是衡量動(dòng)物健康狀況、氧化代謝、生理機(jī)能等的重要指標(biāo)。正常情況下，ALT和AST大量存在于肝細(xì)胞中，當(dāng)肝細(xì)胞受損后即大量擴(kuò)散于血清中，造成血清ALT和AST活性升高。血清ALP是一種在堿性條件下具有較高活性的酶，由肝細(xì)胞合成分泌，自膽道排泄，其半衰期為3 d，正常情況下血清ALP活性很低，當(dāng)肝臟和膽囊發(fā)生病變時(shí)才大量釋放到血液中，導(dǎo)致血清ALP活性升高[13]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中使用MLM和FMLM有增強(qiáng)胡須雞肝功能的作用，這主要是由于桑葉中的黃酮類物質(zhì)[14]及γ-氨基丁酸[15]等活性成分具有改善肝功能的作用。

血清TP是血清中ALB和GLO之和。血清中TP和ALB含量可以反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)及蛋白質(zhì)的吸收和代謝情況，其含量增加，表明蛋白質(zhì)的合成代謝加強(qiáng)[16]。GLO是機(jī)體內(nèi)參與免疫反應(yīng)的蛋白質(zhì)，其含量的高低是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫水平特別是體液免疫水平的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，各試驗(yàn)組ALB含量較對(duì)照組無(wú)顯著差異，但GLO含量較對(duì)照組增加，導(dǎo)致各試驗(yàn)組血清TP含量較對(duì)照組提高，A/G顯著或極顯著降低。GLO含量增加，表明機(jī)體的抗體水平增加，即飼糧中使用MLM和FMLM能增強(qiáng)胡須雞的免疫功能。20% FMLM組ALB含量較對(duì)照組提高11.2%，表明飼糧中使用高劑量的FMLM更易于蛋白質(zhì)的沉積。

動(dòng)物機(jī)體生命活動(dòng)所需的能量大部分來(lái)源于GLU，正常情況下GLU保持在一定的水平以保證機(jī)體能量的供給，GLU過(guò)高、過(guò)低都會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一定的影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，各試驗(yàn)組血清GLU含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，表明飼糧中使用MLM和FMLM對(duì)胡須雞血清葡萄糖水平影響不大，與Zhou等[17]用8%的青貯桑葉飼喂育肥牛，其血清GLU含量無(wú)顯著變化的結(jié)果一致；而10% FMLM組血清GLU含量較10% MLM組顯著提高，這可能是由于經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理，飼糧中動(dòng)物可消化吸收的糖類及其他營(yíng)養(yǎng)成分增加，從而增加了血清GLU含量，而使用20% FMLM血清葡萄糖水平?jīng)]有進(jìn)一步提高，可能又受到FMLM中其他成分及機(jī)體吸收代謝的影響。

UN是蛋白質(zhì)水解和氨基酸代謝的終產(chǎn)物，UA主要由蛋白質(zhì)和核酸降解生成。血清UN或UA含量降低，表明蛋白質(zhì)分解速度減緩，氨基酸合成蛋白質(zhì)的效率提高；血清UN和UA含量與飼糧蛋白質(zhì)水平和氨基酸平衡呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，是衡量飼糧蛋白質(zhì)水平高低與氨基酸平衡與否的重要指標(biāo)，故血清UN和UA含量可直接反應(yīng)鳥(niǎo)類飼糧的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和代謝水平[18]。本試驗(yàn)研究表明，10% MLM組和20% FMLM組血清UA含量較對(duì)照組分別降低了6.0%、6.5%，血清TP、ALB含量高于對(duì)照組，表明飼糧中使用10% MLM和20% FMLM在體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成與沉積過(guò)程中有一定的促進(jìn)作用。

血清膽固醇(cholesterol，CHO)、TC、HDL-C是血脂的主要組成成分，其含量的高低反映機(jī)體脂類代謝狀況。本試驗(yàn)研究表明，飼糧中使用MLM和FMLM能有效降低血清TC、TG含量，增加血清HDL-C含量，與Park等[19]、Panja[20]、Islam等[21]將MLM運(yùn)用到肉雞飼養(yǎng)上的研究結(jié)果一致。MLM和FMLM對(duì)胡須雞血脂的影響主要與桑葉中含有多種具有降脂功能的生物活性物質(zhì)有關(guān)。除桑葉中的多糖、黃酮類物質(zhì)具有降脂功能外，桑葉中含有的植物甾醇能競(jìng)爭(zhēng)性抑制乳糜微粒中的CHO，使其處于不被吸收的狀態(tài)，從而降低血清CHO含量[15]，且桑葉中的豆甾醇、谷甾醇也能有效抑制腸道對(duì)CHO的吸收[22]；桑葉中的不飽和脂肪酸亞油酸能促進(jìn)CHO及膽汁酸的排出，從而降低血清CHO含量[23]。另外，使用MLM和FMLM提高了飼糧粗纖維水平，這也是導(dǎo)致胡須雞血脂水平降低的另一個(gè)原因。

3.3飼糧MLM和FMLM水平對(duì)胡須雞抗氧化指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體在氧化代謝過(guò)程中不斷產(chǎn)生自由基，具有強(qiáng)氧化性，機(jī)體對(duì)自由基的清除主要依賴于機(jī)體完整的抗氧化防御系統(tǒng)的預(yù)防性或阻斷性控制，從而保護(hù)機(jī)體組織和細(xì)胞免受自由基的氧化損傷[24]。機(jī)體的抗氧化指標(biāo)主要包括T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT、MDA[25]。

T-AOC是衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀態(tài)的綜合性指標(biāo)，反應(yīng)機(jī)體的總抗氧化能力。SOD是機(jī)體清除自由基的首要物質(zhì)，是超氧陰離子自由基(·O2-)的主要清除劑，催化O2-生成過(guò)氧化氫(H2O2)，而H2O2又可通過(guò)CAT分解為·O2和H2O。MDA是自由基作用于脂質(zhì)后發(fā)生的過(guò)氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，是脂質(zhì)過(guò)氧化強(qiáng)度和膜系統(tǒng)損害程度的重要指標(biāo)。GSH-Px能特異性催化還原型谷胱甘肽對(duì)H2O2等氫過(guò)氧化物的還原反應(yīng)，從而清除細(xì)胞內(nèi)H2O2和脂質(zhì)自由基，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的作用。

本研究表明，飼糧中使用MLM和FMLM對(duì)機(jī)體抗氧化能力有一定的調(diào)節(jié)作用，10% MLM組顯著增加了血清、肝臟T-AOC，顯著降低了血清、肝臟CAT活性；20% FMLM組極顯著增加了血清GSH-Px活性。李偉玲[26]研究表明，飼糧中使用MLM能提高肉羊血清T-AOC和SOD活性，降低MDA含量，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。Andallu等[27]在鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠飲食中加入25% MLM飼喂8周，結(jié)果表明，小鼠紅細(xì)胞中GSH-Px、SOD活性分別增加151%、106%，CAT活性顯著下降，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

桑葉提高動(dòng)物抗氧化能力歸于桑葉中的多種生物活性物質(zhì)，其主要通過(guò)2個(gè)方面來(lái)發(fā)揮抗氧化作用：一是可以提高動(dòng)物機(jī)體內(nèi)抗氧化酶的活性，二是桑葉中含有的多種生物活性物質(zhì)本身具有抗氧化作用。陳玲玲等[28]研究桑葉黃酮對(duì)糖尿病小鼠降血液葡萄糖機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，桑葉黃酮能提高肝臟SOD活性，并且降低肝臟MDA含量；李杰等[29]研究發(fā)現(xiàn)，桑葉總黃酮可以增加力竭性運(yùn)動(dòng)后的小鼠心臟SOD活性，降低MDA含量，從而減輕運(yùn)動(dòng)后大量產(chǎn)生的氧自由基對(duì)心肌細(xì)胞的損傷。大量體外抗氧化試驗(yàn)[30-33]表明，桑葉中的黃酮類、多糖物質(zhì)本身就是天然的強(qiáng)抗氧化劑，能夠清除超氧離子自由基、氧自由基、脂質(zhì)過(guò)氧化物、H2O2及酶類不能清除的羥自由基等。而經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后，MLM的抗氧化能力有一定程度的下降，可能是由于發(fā)酵過(guò)程中微生物的作用轉(zhuǎn)變了桑葉中的部分抗氧化功能物質(zhì)，如將桑葉多糖分解為小分子物質(zhì)從而失去了抗氧化活性，且本研究前期對(duì)桑葉發(fā)酵工藝優(yōu)化的結(jié)果也表明MLM經(jīng)發(fā)酵后黃酮含量有所下降。

4結(jié)論

① 飼糧中使用MLM和FMLM均降低了胡須雞的生長(zhǎng)性能，且隨使用水平的增加生長(zhǎng)性能呈下降趨勢(shì)，但FMLM對(duì)生長(zhǎng)性能的影響較MLM有所改善。

② 飼糧中使用MLM極顯著降低血清ALP活性，增加血清TP、GLO含量，顯著增加A/G，降低血清TC、TG含量，提高血清、肝臟抗氧化能力；飼糧中使用FMLM也有類似作用。

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(責(zé)任編輯李慧英)

Effects of Mulberry Leaf Meal and Fermented Mulberry Leaf Meal on Growth Performance, Serum Biochemical Indexes and Antioxidant Indexes ofHuxuChickens

HUANG Jing1KUANG Zheshi1LIAO Sentai2*ZHAO Xiangjie1PAN Mushui1

(1. Sericulture and Agri-Food Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510610,China;2. Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China)

Abstract:This experiment was conducted to investigate the effects of mulberry leaf meal (MLM) and fermented mulberry leaf meal (FMLM) in diets on growth performance, serum biochemical indexes and antioxidant indexes of Huxu chickens. Three hundred and ninety-two Lingnan Ⅲ Huxu chickens at ninety-five days of age were assigned to 7 groups with 4 replicates per group and 14 birds per replicate (male and female in half) according weight and sex. Chickens in control group were fed basal diet and the others in 6 test groups were fed basal diet supplemented with 5%,10%,20% MLM and 5%,10%,20% FMLM, respectively. The pre-trial period lasted for 4 days, and the experimental period lasted for 28 days. The results showed as follows: 1) the growth performance of Huxu chickens was decreased with the increase of the amount of MLM in diets. Compared with control group, different levels of MLM and FMLM in diets significantly decreased the average daily gain (P<0.05 or P<0.01). The average daily feed intake in 20% MLM group was significantly lower than that in control group (P<0.05). The ratio of feed to gain in all MLM level groups and 20% FMLM group was significantly higher than those in control group (P<0.05 or P<0.01). 2) The activity of alkaline phosphatase (ALP) in serum of Huxu chickens in all test groups was significantly lower than that in control group (P<0.05), and the activity of serum ALP in 10% MLM group was the lowest. The contents of serum total protein (TP) and globulin (GLO) in all test groups were higher than those in control group, and the contents of TP and GLO in 10% MLM and 20% FMLM groups were extremely significantly increased (P<0.01). The ratio of albumin to globulin (A/G) in serum in all test groups was significantly lower than that in control group (P<0.05). Compared with control group, the contents of total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) were significantly decreased (P<0.05). 3) The total antioxidant capacity (T-AOC) in serum and liver of Huxu chickens in 10% MLM group was significantly higher than that in control group (P<0.05). The activity of catalase (CAT) in serum and liver in 10% MLM group was significantly lower than that in control group (P<0.05). The activity of glutathione peroxidase (GSH-Px) in serum in 20% FMLM group was extremely significantly higher than that in control group (P<0.01). In conclusion, MLM in diets decreases the growth performance of Huxu chickens, and the effect of FMLM on growth performance is better than that of MLM. MLM and FMLM in diets can reduce serum lipids contents, enhance immunity and the antioxidant capacity. But the optimum application amount still needs further research.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(6)：1877-1886]

Key words:Huxu chicken; mulberry leaf meal; fermented mulberry leaf meal; growth performance; serum biochemical indexes; antioxidant indexes

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.06.031

收稿日期：2015-12-01

基金項(xiàng)目：國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201403064，201403049)；廣東省科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2014A010101008)

作者簡(jiǎn)介：黃靜(1989—)，女，重慶萬(wàn)州人，碩士，主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail: hjing89@126.com *通信作者：廖森泰，研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: liaost@163.com

中圖分類號(hào)：S831；S816.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)06-1877-10

*Corresponding author, professor, E-mail: liaost@163.com