產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的臨床特點(diǎn)及耐藥監(jiān)測(cè)*

林麗英,郭旭光,鄧穗燕,陳　瓊，陳金桃，夏　勇

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科　510150)

·論著·

產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的臨床特點(diǎn)及耐藥監(jiān)測(cè)*

林麗英,郭旭光,鄧穗燕,陳瓊，陳金桃，夏勇△

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科510150)

摘要:目的監(jiān)測(cè)廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院2014年和2015年大腸埃希菌的分離情況及其對(duì)抗菌藥物的耐藥狀況，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。方法常規(guī)方法培養(yǎng)分離患者感染的病原菌，并采用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀鑒定到種，藥敏試驗(yàn)方法按CLSI規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，采用WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果2014年和2015年共分離到大腸埃希菌1 202株，標(biāo)本分布前5位分別為尿液、血液、痰液、分泌物和組織，本次分離得到的大腸埃希菌對(duì)替加環(huán)素敏感率為99.9%，對(duì)亞胺培南敏感率為99.2%，對(duì)阿米卡星敏感率為97.7%，對(duì)哌拉西林/他唑巴坦敏感率為97.2%，對(duì)呋喃妥因敏感率為85.2%。2014年和2015年分離得到的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌陽性菌共643株，占53.5%。2年分離得到的ESBLs陽性的大腸埃希菌對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、頭孢唑啉耐藥率達(dá)99.0%；而對(duì)亞胺培南、替加環(huán)素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因敏感率達(dá)80.0%以上。結(jié)論大腸埃希菌對(duì)多種抗菌藥物的耐藥趨勢(shì)相對(duì)穩(wěn)定，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)對(duì)多重耐藥菌株的監(jiān)測(cè)，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞:超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；大腸埃希菌；耐藥監(jiān)測(cè)

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，臨床上細(xì)菌的耐藥性越來越嚴(yán)重，多重耐藥菌(MDRO)已經(jīng)逐漸成為醫(yī)院感染的重要病原菌[1]。目前常見的包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐萬古霉素腸球菌(VRE)、產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的細(xì)菌和多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌[2]。本文就廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院近2年的產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的臨床特點(diǎn)及耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)，為臨床合理使用抗菌藥物提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1菌株來源收集本院2014年1月1日至2015年12月31日分離到的大腸埃希菌1 202株，剔除同一患者的重復(fù)菌株。

1.2抗菌藥物替加環(huán)素、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、頭孢吡肟、頭孢西丁、阿莫西林/克拉維酸、氨曲南、妥布霉素、慶大霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、環(huán)丙沙星、頭孢曲松、氨芐西林、頭孢唑啉。

1.3質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株為大腸埃希菌(ATCC 25922)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)，每周進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.4藥敏試驗(yàn)方法采用微量肉湯稀釋法，按CLSI M100 S25規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用WHONET5.6軟件結(jié)合Microsoft office Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)數(shù)資料以n(%)表示。

2結(jié)果

2.12014年和2015年大腸埃希菌標(biāo)本分布結(jié)果見表1。本院2014年和2015年收集的1 202株大腸埃希菌標(biāo)本分布前5位分別為尿液、血液、痰液、分泌物和組織，主要為尿液標(biāo)本，占總菌株來源的50.0%以上，其次是血液標(biāo)本，約為20.0%。

表1　　2014年和2015年大腸埃希菌標(biāo)本分布結(jié)果[n(%)]

2.22014年和2015年大腸埃希菌科室分布見表2。

2.32014年和2015年大腸埃希菌耐藥情況分析見表3。2年收集的1 202株大腸埃希菌對(duì)氨芐西林耐藥率為74.9%，對(duì)頭孢唑啉耐藥率為59.8%，對(duì)頭孢曲松耐藥率為56.1%，對(duì)復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率為52.4%，對(duì)環(huán)丙沙星耐藥率為46.6%。

2.42014年和2015年ESBLs陽性和ESBLs陰性的大腸埃希菌耐藥情況見表4。本院2014年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌354株，占54.8%；2015年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌289株，占52.0%。本院2年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、頭孢唑啉耐藥率達(dá)99.0%；對(duì)亞胺培南、替加環(huán)素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因敏感率達(dá)80.0%以上。

表2　　2014年和2015年大腸埃希菌科室分布[n(%)]

表3　　2014年和2015年大腸埃希菌耐藥情況分析(%)

表4　　2014年和2015年ESBLs陽性和ESBLs陰性的大腸埃希菌耐藥情況(%)

續(xù)表4　　2014年和2015年ESBLs陽性和ESBLs陰性的大腸埃希菌耐藥情況(%)

3討論

大腸埃希菌常引起人類泌尿系統(tǒng)感染，還可以引起膽囊炎、新生兒腦膜炎、菌血癥、膿毒血癥等[3-5]。常見于腹腔內(nèi)膿腫、腸穿孔繼發(fā)腹膜炎、腸道手術(shù)后繼發(fā)感染或大面積燒傷創(chuàng)面感染[5]。根據(jù)其致病特點(diǎn)腸道外致病性大腸埃希菌至少分為尿道致病性大腸埃希菌和腦膜炎/膿毒癥相關(guān)大腸埃希菌[6]。

本院本次分離得到大腸埃希菌標(biāo)本主要來自腎臟內(nèi)科、婦產(chǎn)科、神經(jīng)內(nèi)科、泌尿外科、呼吸內(nèi)科、內(nèi)分泌科、心血管內(nèi)科、普通外科、重癥監(jiān)護(hù)室、消化內(nèi)科、神經(jīng)外科等科室，共計(jì)1 202株。標(biāo)本分布前5位分別為尿液、血液、痰液、分泌物和組織，其中尿液標(biāo)本占總菌株來源的50.0%以上，其次是血液標(biāo)本，約為20.0%。本次分離得到的大腸埃希菌對(duì)氨芐西林耐藥率為74.9%，對(duì)頭孢唑啉耐藥率為59.8%，對(duì)頭孢曲松耐藥率為56.1%，對(duì)復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率為52.4%，對(duì)環(huán)丙沙星耐藥率為46.6%，對(duì)替加環(huán)素敏感率為99.9%，對(duì)亞胺培南敏感率為99.1%，對(duì)阿米卡星敏感率為97.7%，對(duì)哌拉西林/他唑巴坦敏感率為97.3%，對(duì)呋喃妥因敏感率為85.1%。

細(xì)菌在抗菌藥物的選擇下仍然產(chǎn)生耐藥，目前大腸埃希菌的耐藥機(jī)制主要有抗菌藥物靶位的改變、酶對(duì)抗菌藥物的修飾和破壞、主動(dòng)外排機(jī)制的產(chǎn)生、細(xì)菌外膜通透性的改變、質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性5種[7-10]。大腸埃希菌耐藥機(jī)制比較復(fù)雜,近年來對(duì)其研究較多,尤其是在質(zhì)粒介導(dǎo)耐藥性的研究上取得了一些進(jìn)展。ESBLs是指有質(zhì)粒介導(dǎo)的能水解所有青霉素類、頭孢菌素類和單環(huán)β內(nèi)酰胺類氨曲南的一類絲氨酸蛋白酶的衍生物[2,11-12]。本院2014年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌354株，占54.8%；2015年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌289株，占52.0%，2年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌共643株，占53.5%。2年分離得到的大腸埃希菌ESBLs陽性菌對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、頭孢唑啉耐藥率達(dá)99.0%；而對(duì)亞胺培南、替加環(huán)素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因敏感率達(dá)80.0%以上。

綜上所述，對(duì)于本院分離到的大腸埃希菌最敏感的抗菌藥物為替加環(huán)素、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦。臨床醫(yī)生可以根據(jù)患者的感染部位，藥物的體內(nèi)分布等因素綜合考慮作為經(jīng)驗(yàn)選取抗菌藥物的依據(jù)。

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Analysis of drug resistance and clinical significance of ESBLs-producing Escherichia coli*

LINLiying,GUOXuguang,DENGSuiyan,CHENQiong,CHENJintao,XIAYong△

(DepartmentofClinicalLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou510150,China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the drug resistance of extended spectrum β-lactamases (ESBLs)-producing Escherichia coli,and to provide evidence for reasonable use of antibiotics in clinic.MethodsGram-negative bacilli were isolated from various infected specimens from the inpatients from 2014 and 2015.Isolation and identification of the strains were performed according to National Clinical Laboratory Operation Rule.And by automatic analyzer,the strains were identified.Drug sensitivity testing was performed by micro-broth dilution method.Data were statistically analyzed by WHONET5.6 software.ResultsBetween 2014 and 2015,1202 strains of Escherichia coli were isolated from samples of urine,blood,sputum,secretion and tissue.The sensitive rates of Escherichia coli for tigecycline,imipenem,amikacin,piperacillin/tazobactam and nitrofurantoin were 99.9%,99.2%,97.7%,97.2% and 85.2%.643 strains of ESBLs-producing Escherichia coli were isolated,which accounted for 53.5% of the total strains.The resistant rate of ESBLs-producing Escherichia coli for ceftriaxone,ampicillin and cefazolin was up to 99% and the sensitive rate for tigecycline,amikacin,piperacillin,piperacillin/tazobactam and nitrofurantoin was over 80%.ConclusionDrug resistance status of gram-negative bacilli is very serious.It should pay attention to the detection of pathogens and drug resistance of the bacteria in hospital.

Key words:extended spectrum β-lactamases;Escherichia coli;drug resistance detection

* 基金項(xiàng)目：廣東省廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技一般引導(dǎo)資助項(xiàng)目(20151A011083)。

作者簡介：林麗英，女，主管技師，主要從事臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail:gysyxy@gmail.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.004

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1459-03

(收稿日期：2016-01-21修回日期：2016-03-22)