博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響

胡雄貴　侯振東　郭　敏　譚　超　陳宇光*

(1．湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，長(zhǎng)沙410131；2．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙410128；3．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)沙410128)

博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響

胡雄貴1,2侯振東2郭敏2譚超3陳宇光2*

(1．湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，長(zhǎng)沙410131；2．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙410128；3．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)沙410128)

摘要：本試驗(yàn)旨在探討博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能、器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)和免疫功能的影響。選取了280只體重相近、健康的10日齡乳鴿，采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)分為7個(gè)組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只乳鴿，對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(B、C、D、E、F、G組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加30、40、50 mg/kg博落回散，40 mg/kg博落回提取物PE50，40 mg/kg博落回提取物BE60和150 mg/kg金霉素。預(yù)試期5 d，正試期15 d。結(jié)果顯示：1)各組間平均日增重和料重比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。2)各組間胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)均無(wú)顯著差異(P>0.05)。E組脾臟指數(shù)極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，D組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。D組胰腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組、B組和F組(P<0.05)。3)E組血清總蛋白含量顯著高于G組(P<0.05)。B組血清低密度脂蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。4)D組血清免疫球蛋白G含量極顯著高于對(duì)照組和B組(P<0.01)，顯著高于其他組(P<0.05)；E組血清白細(xì)胞介素-6含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。由此可見(jiàn)，博落回提取物可提高乳鴿免疫器官指數(shù)和血清中總蛋白、低密度脂蛋白、免疫球蛋白G含量，從而提高機(jī)體免疫力。

關(guān)鍵詞：博落回提取物；生長(zhǎng)性能；器官指數(shù)；生化指標(biāo)；免疫功能

博落回中主要的活性成分為生物堿，如血根堿和白屈菜紅堿等具有抗菌、殺蟲(chóng)、抗腫瘤、改善肝功能等多方面的藥理作用[1-5]。博落回在我國(guó)分布較廣，資源蘊(yùn)藏十分豐富，極易栽培和管理，因此博落回的開(kāi)發(fā)利用有著充足的資源供給和原料保障。目前博落回生物堿的研究主要在臨床、獸藥和生物農(nóng)藥方面，在養(yǎng)殖業(yè)中能顯著提高早期斷奶仔豬的生長(zhǎng)，降低料重比，減少斷奶應(yīng)激反應(yīng)，但其對(duì)動(dòng)物免疫、生化指標(biāo)影響的報(bào)道很少，對(duì)乳鴿的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在通過(guò)研究博落回不同提取物產(chǎn)品對(duì)乳鴿的生長(zhǎng)性能、免疫器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響，摸索出最適合乳鴿生長(zhǎng)發(fā)育的博落回提取物添加劑量，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)和探討博落回提取物對(duì)乳鴿的不同作用效果和作用機(jī)制，為其在動(dòng)物生產(chǎn)中更好地應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

種鴿料為廣州市粵虹飼料有限公司生產(chǎn)的“639種鴿配合飼料”；乳清蛋白粉為上海怡俊貿(mào)易有限公司進(jìn)口F&A Dairy products,InC公司生產(chǎn)的高蛋白乳清粉；植物油為九三糧油工業(yè)集團(tuán)有限公司的“津樂(lè)一級(jí)大豆油”；酵母粉為普菲克生物科技生產(chǎn)的“核康旺啤酒酵母粉”；微量元素為BeBon公司生產(chǎn)的“微量元素氨基酸螯合物”；蛋白消化酶為黃驊市渤海獸藥有限公司生產(chǎn)的“錦海牌復(fù)合酶”；多維為南寧市惠佳農(nóng)飼料有限公司生產(chǎn)的“速補(bǔ)14”，含水溶性維生素A、維生素D3、維生素E、維生素C、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12等，吸收率為45%～60%。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將280只10日齡乳鴿隨機(jī)分為7個(gè)組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只乳鴿，對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧(表1)和保健砂(表2)，試驗(yàn)組(B、C、D、E、F、G組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加30、40、50 mg/kg博落回散，40 mg/kg PE50，40 mg/kg BE60和150 mg/kg金霉素。預(yù)試期為5 d，預(yù)試期統(tǒng)一飼喂基礎(chǔ)飼糧。乳鴿15日齡正式試驗(yàn)，試驗(yàn)期為15 d。

1.3飼養(yǎng)管理

1.3.1試驗(yàn)飼糧

基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3.2飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在瀏陽(yáng)市普跡鎮(zhèn)良利生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，場(chǎng)內(nèi)自然通風(fēng)、電熱控溫，試驗(yàn)鴿采取網(wǎng)上籠養(yǎng)。采用改進(jìn)的100 mL大注射器進(jìn)行人工灌喂，每日3餐，在第2餐后1 h左右喂保健砂1次。每2天噴灑高錳酸鉀稀釋溶液對(duì)整個(gè)養(yǎng)殖試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行1次消毒，清掃1次糞便和殺蠅滅蚊。

1.4樣品采集與制備

在乳鴿第31日齡時(shí)早晨空腹，從每組中隨機(jī)抽取6只乳鴿；宰殺前稱重并記錄每只鴿的活體重，采用頸動(dòng)脈放血方法進(jìn)行宰殺。用10 mL離心管采集血液至7 mL，蓋好離心管蓋，放置離心管架上靜置2 h，待有淡黃液體析出時(shí)用離心機(jī)分離血清。血清樣本置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。宰殺后?0～80 ℃熱水浸燙去毛，干凈后稱屠體重。取脾臟、胰腺、法氏囊、胸腺拭去表面血污后稱重并做好記錄。然后取胸肌50 g左右記錄編號(hào)，于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

表2　乳鴿保健砂成分與配制比例

1.5檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.5.1生長(zhǎng)性能的測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)，對(duì)鴿進(jìn)行稱重，記錄初始重和末重，計(jì)算各組重復(fù)鴿的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)，統(tǒng)計(jì)死亡率。

1.5.2免疫器官指數(shù)和免疫性能測(cè)定

于試驗(yàn)結(jié)束后，乳鴿第31日齡時(shí)早晨空腹稱重，然后采血褪毛干凈后解剖，采集胸腺、脾臟和法氏囊，用吸水紙拭去表面液體，稱重得各免疫器官重量。每組隨機(jī)抽取6只乳鴿，稱重后頸動(dòng)脈和靜脈放血致死，解剖剝離并摘取脾臟、胸腺、法氏囊，稱量各免疫器官重量。免疫器官指數(shù)的計(jì)算公式如下：

胸腺指數(shù)(mg/g)=胸腺重量(mg)/鴿體重(g)；

脾臟指數(shù)(mg/g)=脾臟重量(mg)/鴿體重(g)。

血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)含量的測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒，根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定。

1.6統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行方差分析，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。

2結(jié)果與分析

2.1博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，各組之間平均日增重和料重比均無(wú)顯著差異(P>0.05)，說(shuō)明博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能無(wú)明顯影響。

表3　博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2博落回提取物對(duì)乳鴿器官指數(shù)的影響

由表4可知，各組胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)均無(wú)顯著差異(P>0.05)，E組脾臟指數(shù)最高，D組次之，且E組極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，D組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)；D組胰腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組、B組和F組(P<0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)果說(shuō)明，D組和E組明顯提高了乳鴿的脾臟指數(shù)，D組提高了乳鴿的胰腺指數(shù)。

2.3博落回提取物對(duì)乳鴿血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，各組間白蛋白和高密度脂蛋白含量無(wú)顯著差異(P>0.05)；E組總蛋白含量顯著高于G組(P<0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)；B組低密度脂蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.4博落回提取物對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響

由表6可知，D組免疫球蛋白G含量極顯著高于對(duì)照組和B組(P<0.01)，顯著高于其他各組(P<0.05)；各組間免疫球蛋白A和白細(xì)胞介素-1含量無(wú)顯著差異(P>0.05)；E組白細(xì)胞介素-6含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其他各組間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表4　博落回提取物對(duì)乳鴿器官指數(shù)的影響

表5　博落回提取物對(duì)乳鴿血清生化指標(biāo)的影響

表6　博落回提取物對(duì)乳鴿血清免疫指標(biāo)的影響

3討論

3.1博落回提取物對(duì)乳鴿生長(zhǎng)性能的影響

李美荃等[6]選用五元雜交斷奶仔豬飼喂不同劑量的博落回提取物，得出飼喂5.0 mg/kg博落回提取物顯著提高了仔豬的日增重和日采食量，降低了料重比。蔡鵬等[7]在三元雜交斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中分別添加不同劑量的博落回提取物，在抗生素對(duì)照組中添加30 mg/kg金霉素，結(jié)果顯示博落回提取物能降低料重比，提高日增重和日采食量，并且優(yōu)于抗生素組，其最佳劑量為0.675 mg/kg。滿意等[8]開(kāi)展了在飼糧中添加不同劑量博落回提取物對(duì)35日齡斷奶仔豬的影響，得出5.0 mg/kg博落回組日增重、日采食量、料重比均優(yōu)于對(duì)照組和抗生素組。饒華等[9]研究顯示，博落回提取物對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能有促進(jìn)作用，日增重分別提高了17.26%，日采量分別提高了12.32%，料重比下降了4.5%。本試驗(yàn)研究顯示各組間差異不顯著，這可能受乳鴿不會(huì)自行采食的影響，因?yàn)橥ㄟ^(guò)人工灌喂，各組間每只乳鴿食量一致。

3.2博落回提取物對(duì)乳鴿免疫器官指數(shù)的影響

免疫器官的基本功能是動(dòng)物機(jī)體分泌免疫物質(zhì)(細(xì)胞因子、免疫分子等)、合成免疫細(xì)胞，并執(zhí)行機(jī)體細(xì)胞與體液免疫的功能。胸腺、脾臟和法氏囊是免疫細(xì)胞形成、分化和產(chǎn)生抗體的主要場(chǎng)所，是重要的免疫器官，其臟器指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱[10-11]。一般認(rèn)為，動(dòng)物免疫器官重量的增加是由其自身細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和分裂增殖所致。本試驗(yàn)研究得出博落回提取物對(duì)乳鴿胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)無(wú)明顯影響，但D組和E組明顯提高了乳鴿的脾臟指數(shù)，因脾臟中有豐富的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，但B淋巴細(xì)胞比例較大，與體液免疫關(guān)系密切。因此，本結(jié)果初步說(shuō)明博落提取物對(duì)乳鴿體液免疫功能具有提高作用。

賀喜等[12]研究報(bào)道，博落回血根堿相對(duì)提高仔豬門(mén)靜脈血漿流率，增加門(mén)靜脈必需氨基酸和總氨基酸凈吸收量。李杰等[13]報(bào)道博落回生物堿在一定濃度范圍內(nèi)可促進(jìn)豬腸上皮細(xì)胞的增殖，并推測(cè)博落回生物堿提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能可能是通過(guò)促進(jìn)小腸細(xì)胞增殖分化更新，從而增強(qiáng)小腸消化、吸收、免疫屏障和應(yīng)激反應(yīng)等途徑實(shí)現(xiàn)的。胰腺是體內(nèi)重要的消化器官，本試驗(yàn)結(jié)果表明，D組胰腺指數(shù)高于對(duì)照組，這可能是由于博落回提取物提高了飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，因?yàn)橐认僦亓吭黾訒?huì)增多胰液分泌，促進(jìn)機(jī)體對(duì)食物的消化吸收。這也可解釋前人報(bào)道博落回提取物有提高動(dòng)物采食量作用的原因。

3.3博落回提取物對(duì)乳鴿免疫功能的影響

免疫球蛋白是具有結(jié)合抗原、激活補(bǔ)體和調(diào)節(jié)作用等生物功能的動(dòng)物蛋白，由動(dòng)物免疫系統(tǒng)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，經(jīng)抗原的誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)化為抗體。免疫球蛋白主要可分為免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M。免疫球蛋白G能與帶有抗原的靶細(xì)胞結(jié)合并引起K細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用，對(duì)開(kāi)放器官中入侵的微生物的防御以及局部免疫具有重要意義。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，C組、D組、E組、F組血清中免疫球蛋白G含量均提高，另外，E組總蛋白含量顯著高于G組，B組低密度脂蛋白含量顯著高于對(duì)照組。筆者推測(cè)博落回提取物通過(guò)提高血液中總蛋白和免疫球蛋白G水平，抑制和中和病原，固定補(bǔ)體進(jìn)而殺傷細(xì)菌和病毒，從而使博落回具有抑菌、抗病毒、殺蟲(chóng)功能。

4結(jié)論

乳鴿飼糧中添加博落回提取物在機(jī)體免疫器官發(fā)育、免疫細(xì)胞因子的水平等方面發(fā)揮一定的作用，從而提高機(jī)體免疫力，其中添加50 mg/kg博落回散效果最明顯。

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(責(zé)任編輯武海龍)

Effects ofMacleayacordataExtracts on Growth Performance and Immune Function of Squabs

HU Xionggui1,2HOU Zhendong2GUO Min2TAN Chao3CHEN Yuguang2*

(1. Hunan Institute of Animal and Veterinary Science, Changsha 410131, China; 2. College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128 China;3.College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128 China)

Abstract:In order to investigate the effects of Macleaya cordata extract on growth performance, organ index, serum biochemical index and immune function of squabs, the trial had adopted one-factor completely random design. A total of 280 healthy ten-day-old squabs with similar weight were randomly divided into 7 groups with 10 replicates per group and 4 squabs per replicate. The control group (group A) was fed a basal diet, and the experimental groups (groups B to G) were fed diets added 30, 40 and 50 mg/kg of Macleaya powder, 40 mg/kg Macleaya cordata extract PE50, 40 mg/kg Macleaya cordata extract BE60 and 150 mg/kg chlortetracycline, respectively. The experiment lasted for 15 days after pre trial period of 5 days. The results showed as follows: 1) no significant differences were found in average daily weight gain and feed to gain among all groups (P>0.05). 2) No significant differences were found in thymus index and bursa index among all groups (P>0.05). The spleen index of group E was significantly higher than that of control group (P<0.01), and the spleen index of group D was significantly higher than that of control group (P<0.05). The pancreas index of group D was significantly higher than that of control group, group B and group F (P<0.05). 3) Serum total protein content of group E was significantly higher than that of group G (P<0.01). Serum low density lipoprotein content of group B was significantly higher than that of control group (P<0.05). 4) Serum immunoglobulin G content of group D was significantly higher than that of control group and group B (P<0.01), and was higher than that of other groups (P<0.05). Serum interleukin 6 content of group E was significantly lower than that of control group (P<0.05). The results indicate that Macleaya cordata extract can increase the immune organ index and the content of total protein, low density lipoprotein and immunoglobulin G in serum, thereby enhancing immunity of squabs.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(6)：1783-1788]

Key words:Macleaya cordata extract; growth performance; organ index; biochemical index; immune function

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.06.020

收稿日期：2015-12-30

基金項(xiàng)目：湖南省科技廳項(xiàng)目(2015JC3100，2014NK3042)；長(zhǎng)沙市科技項(xiàng)目(141401100999-K1307037)

作者簡(jiǎn)介：胡雄貴(1975—)，男，湖南雙峰人，副研究員，從事動(dòng)物健康養(yǎng)殖研究。E-mail： 59601723@qq.com *通信作者：陳宇光，副教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail： ayu800@126.com

中圖分類號(hào)：S828

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)06-1783-06

*Corresponding author, professor, E-mail： ayu800@126.com