一種甘薯新病害的初步研究

宋紅++張志超++楊俊譽(yù)++徐可成++黃瓊

摘 要：對山東魯東南地區(qū)窖藏的甘薯種薯進(jìn)行調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，每個窖的甘薯發(fā)病率均在50%左右。其典型癥狀表現(xiàn)為甘薯表面有黑色凹陷的病斑，并隨著窖藏時間的延長，其病斑面積不斷擴(kuò)大，嚴(yán)重時不能食用。對壞死的病斑組織進(jìn)行病原物分離，純化培養(yǎng)后，按照柯赫氏法則進(jìn)行接種試驗，將病原鑒定為鏈格孢菌（Alternaria sp.）。該文對其病害的癥狀、病原形態(tài)、發(fā)病情況等進(jìn)行研究，確定為甘薯的一種新病害。

關(guān)鍵詞：甘薯；新病害；鏈格孢屬；山東省

中圖分類號 S531 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）11-0021-03

Preliminary Study on a New Disease of Sweet Potato

Song Hong et al.

（College of Plant Protection，Yunnan Agricultural University ，Kunmimg 650201，China）

Abstract：A survey was done on the store sweet potato in southeast Shandong，and then a new disease was found on them.The disease infested more than 50 percent of them and occurred commonly.The typical symptom was black sunk spots on the surface of the sweet potato.With the time extended，more spots got into one big spot.When it got heavy disease，it can not be used as food.The diseased tissue was cultured on the PDA culture medium，the Alternaria sp.was gotten.Then the next step was to inoculate on the sweet potato，at last Alternaria sp.was identified.The disease symptom，the pathogeny and the situation of the disease were gave a detailed research，the disease was identified as the new disease of sweet potato in China.

Key words：Sweet potato；New disease；Alternaria sp.；Shandong Province

甘薯（Ipomoea batatas Lam）是山東丘陵地區(qū)一種主要糧食作物[1]，是該地區(qū)淀粉加工和牲畜飼料的主要原料，大部分地區(qū)都有種植，其含熱量高，富含維生素、礦物質(zhì)、纖維素等多種人體所需的營養(yǎng)物質(zhì)?，F(xiàn)在甘薯作為保健佳品已經(jīng)得到廣泛承認(rèn)，近些年我國的甘薯種植面積穩(wěn)中有升。甘薯在生長和窖藏的過程中發(fā)生多種病害，主要有甘薯黑斑病[2-3]、莖線蟲病、干腐病等。根腐病[4-6]、軟腐病[7-10]等。其中，生理性病害主要是由低溫引起的凍害；貯藏期病害可造成甘薯爛窖，其損失約占貯藏量的10%。甘薯莖線蟲病、甘薯根結(jié)線蟲病、甘薯瘟病等，都嚴(yán)重威脅甘薯的正常生長。在甘薯穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)栽培過程中，安全貯藏是豐產(chǎn)、保產(chǎn)的重要環(huán)節(jié)。薯塊發(fā)生該病變苦，就像黑斑病難以食用一樣。2005年在對山東省鄒城市農(nóng)村窖藏的甘薯進(jìn)行調(diào)查的過程中，發(fā)現(xiàn)貯藏的甘薯有黑斑狀的發(fā)病癥狀（圖1），此病害年年發(fā)生，有些年份發(fā)病較輕，有些年份較重。作者對窖藏發(fā)病的甘薯塊莖進(jìn)行了采集、分離，發(fā)現(xiàn)該病是由一種鏈格孢屬病原真菌引起的。查閱國內(nèi)文獻(xiàn)資料，未見相關(guān)報道?，F(xiàn)將鑒定結(jié)果報道如下：

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本的采集 病害采自山東省鄒城市官莊村窖藏的發(fā)病甘薯，用PDA進(jìn)行組織分離培養(yǎng)。

1.2 菌株的分離 將感病組織的病建交界處用清水沖洗干凈后，用滅菌手術(shù)刀切取病健交界3mm×4mm小塊組織，經(jīng)70%酒精溶液消毒10～30s，再用0.1%的升汞消毒3min，用滅菌水漂洗3次，每次浸泡3min，用（高壓滅菌）濾紙吸干水后移到PDA培養(yǎng)基，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。然后，觀察所獲得菌落，記錄各菌株菌落形態(tài)、孢子形狀、大小，拍照并記錄觀察結(jié)果。

1.3 菌株的純化 從菌落邊緣挑取少量菌絲移植于PDA培養(yǎng)基平板上，再從移植的菌落邊緣挑取菌絲，移入另一PDA平板上，重復(fù)上述操作直到獲得純菌落。

1.4 菌株的保存 菌種短期保存采用低溫保存。將在PDA平板上純化培養(yǎng)的菌絲體移入PDA斜面，25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3d，于4℃冰箱中保存。

1.5 菌株的致病性測定 用分離到的病原菌接種甘薯，一是用孢子懸浮液針刺接種薯塊；二是用孢子懸浮液涂片接種薯片。針刺接種薯塊：選取中等大?。?00～250g）的薯塊，用清水洗凈，放入0.1%的次氯酸鈉中浸泡10min，然后用滅菌水沖洗3次，每次3min，取出涼干后，在薯塊中部占全薯塊1/2的部位，用直徑約2mm的圓釘刺入薯皮3～4mm深度，刺孔位置盡可能選擇比較光潔的表面，每個薯塊刺孔3～5個。采用傳統(tǒng)方法制備孢子懸浮液，用微型注射器往刺孔內(nèi)注入新鮮的孢子懸浮掖。濃度是100倍顯微鏡下觀察，每個視野平均含60個孢子，每個刺孔注入孢子液容量5～10μL（圖3）。涂片接種薯片：將塊根切成2～3cm厚的圓片，將孢子涂于兩側(cè)。每次試驗均應(yīng)設(shè)置對照最少各4個。將接種后的薯塊放入白瓷盤中，盤內(nèi)放入泡水棉花的小培養(yǎng)皿，盤外罩塑料薄膜，以保持較高的相對濕度（95%以上）。把罩好的白瓷盤置于27～28℃的恒溫箱中7d后，取出觀察，測量病斑的平均直徑。從接種發(fā)病病塊上分離到菌落形態(tài)、菌體形態(tài)和接種真菌相同的真菌。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原分離 先后分離帶病薯塊3批，均得到同一病原菌，后經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定為鏈格孢菌（Alternaria sp.）。

2.2 致病性測定 致病性測定結(jié)果：接種后7d發(fā)病，回接成功率均為100%，重新分離均獲得原接種病菌。

2.3 病原菌的鑒定[12-13]菌落鋪展，暗褐色或黑色；菌絲褐色，很少形成子座。分生孢子梗分化不明顯，不規(guī)則稀疏分枝，淡褐色；分生孢子，串生，磚格狀，2～6個橫隔，3～8個縱隔；頂部有喙?fàn)罴?xì)胞，孢子大小差異懸殊，（40～216）μm×（20～24）μm（圖2）。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定及致病性測定，確認(rèn)病原菌為鏈格孢菌（Alternaria sp.）.

3 小結(jié)與討論

以山東魯東南地區(qū)窖藏種薯上采集到的病塊為材料，經(jīng)分離獲得病原菌，再經(jīng)致病性測定，病原菌形態(tài)學(xué)，培養(yǎng)性狀觀察等，確認(rèn)病原菌為鏈格孢菌（Alternaria sp.）。帶病的甘薯癥狀表現(xiàn)為，帶有明顯邊緣的、褐色或黑色、塌陷的斑點，發(fā)病初期，甘薯表面出現(xiàn)黑色斑點；隨著時間的延長，圓形病斑逐漸擴(kuò)大，到最后通體變黑；如果濕度較大，則腐爛難聞。黑色病斑縱向拋開表現(xiàn)為暗褐色，質(zhì)地堅硬。在過去很長一段時間里，人們一直誤認(rèn)為是由甘薯長喙殼引起的黑斑病。但經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)：該病是由鏈格孢菌引起，在潮濕的條件下，會長出稀疏的白色菌絲，不會長出帶喙的子囊殼。

該病害是山東地區(qū)窖藏的一種主要病害，一旦條件適宜，即可大范圍內(nèi)發(fā)生嚴(yán)重流行，造成爛窖的發(fā)生。并且?guī)в胁“叩母适碇笫旌螅兜朗挚酀?，不能食用。國?nèi)還沒有相關(guān)報道，因此相關(guān)部門應(yīng)予以高度重視，積極開展抗病育種工作。對該病的發(fā)生規(guī)律及防治需進(jìn)一步的深入研究。

參考文獻(xiàn)

[1]陳冬生.甘薯在山東傳播種植史略[J].農(nóng)業(yè)考古，1991，01：219-222.

[2]賈趙東，郭小丁，尹晴紅，等.甘薯黑斑病的研究現(xiàn)狀與展望[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，01：144-147.

[3]張勇躍，劉志堅.甘薯黑斑病的發(fā)生及綜合防治[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，19：5997-5998.

[4]李鵬，馬代夫，李強(qiáng)，等.甘薯根腐病的研究現(xiàn)狀和展望[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，01：114-116.

[5]劉泉姣，葉道純，徐作珽.甘薯根腐病的初步研究[J].植物病理學(xué)報，1982，03：23-30+67-70.

[6]王亞琴，李崇德.甘薯根腐病的發(fā)生與防治[J].中國農(nóng)業(yè)信息，2013，11：131.

[7]楊冬靜，徐振，趙永強(qiáng)，等.甘薯軟腐病抗性鑒定方法研究及其對甘薯種質(zhì)資源抗性評價[J].華北農(nóng)學(xué)報，2014，S1：54-56.

[8]植文.甘薯軟腐病[N].河北科技報（農(nóng)村版），2001-01-09002.

[9]喬巖，楊伍群，王福賢.甘薯貯存期注意防治軟腐病[N].農(nóng)民日報，2014-10-29T06.

[10]閆加啟.甘薯貯藏期病害發(fā)生與預(yù)防[J].北京農(nóng)業(yè)，2007，07：42.

[11]周忠，馬代夫.甘薯莖線蟲病的研究現(xiàn)狀和展望[J].雜糧作物，2003，05：288-290.

[12]方中達(dá).植病研究法（第三版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1997，122-125.

[13]張中義.病原真菌學(xué)[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，1988，376-377. （責(zé)編：吳祚云）