傳統(tǒng)及趁鮮加工工藝對(duì)何首烏飲片質(zhì)量的影響

寇婉青，金傳山，胡　雨，梁德勤

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院　安徽道地中藥材品質(zhì)提升協(xié)同創(chuàng)新中心，安徽 合肥　230012)

傳統(tǒng)及趁鮮加工工藝對(duì)何首烏飲片質(zhì)量的影響

寇婉青，金傳山，胡雨，梁德勤

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院安徽道地中藥材品質(zhì)提升協(xié)同創(chuàng)新中心，安徽 合肥230012)

[摘要]目的 以二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌含量為測(cè)定指標(biāo)，比較傳統(tǒng)和趁鮮加工工藝對(duì)何首烏飲片質(zhì)量的影響。方法 采用高效液相色譜法對(duì)傳統(tǒng)及趁鮮加工所得何首烏飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果 趁鮮加工制得的飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量均高于傳統(tǒng)加工所得飲片，且趁鮮工藝節(jié)約時(shí)間。結(jié)論 趁鮮加工工藝省時(shí)省力，所制得飲片質(zhì)量較好，可以用于工業(yè)化生產(chǎn)。

[關(guān)鍵詞]何首烏；加工工藝；二苯乙烯苷；結(jié)合蒽醌

何首烏為蓼科植物何首烏(PolygonummultiflorumThunb)的干燥塊根[1]，始載于宋代《開(kāi)寶本草》。何首烏主產(chǎn)于河南、湖北、廣西、廣東、貴州等地，是傳統(tǒng)中藥之一，資源豐富[2]。其生品味甘、微苦、性平，具有潤(rùn)腸通便、解毒消腫之功，主要有效成分為二苯乙烯苷類、蒽醌類衍生物及多糖、卵磷脂等[3]?，F(xiàn)代藥理研究[4-9]發(fā)現(xiàn)，何首烏具有調(diào)節(jié)血脂、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、延緩衰老、益智等藥理作用。現(xiàn)在何首烏飲片仍沿用傳統(tǒng)加工方式，即鮮品干燥成藥材后，再軟化切制成飲片。該加工模式費(fèi)工費(fèi)時(shí)，且在軟化環(huán)節(jié)中由于與水長(zhǎng)時(shí)間接觸會(huì)導(dǎo)致其有效成分的損失，甚至發(fā)生霉變，從而影響飲片的質(zhì)量。本研究擬在前期趁鮮加工研究[10]的基礎(chǔ)上，將新鮮的何首烏藥材經(jīng)一定干燥處理后直接切成飲片再干燥的方法，以期省去藥材軟化的步驟。并且以具有保護(hù)神經(jīng)作用的二苯乙烯苷及具有抗菌、消炎、抗氧化作用的結(jié)合蒽醌為評(píng)價(jià)指標(biāo)[11-12]，探討何首烏趁鮮切片的可行性。

1儀器與試藥

1.1儀器QY-300型高速截?cái)嗤鶑?fù)式切藥機(jī)：亳州康華制藥機(jī)械有限公司；Y112M-4B35型箱式干燥機(jī)：安徽協(xié)和成藥業(yè)飲片有限公司；LC-15C型高效液相色譜儀(包括LC-15C泵、SPD-15C紫外檢測(cè)器、天津東康DT-230A型柱溫箱、LC-Solution色譜工作站)：日本Shimadzu；AS3120型超聲清洗儀：天津奧特斯公司；FA2004型十萬(wàn)分之一電子天平：德國(guó)Sartorius公司；HL-200A型打粉機(jī)：上海塞耐機(jī)械有限公司。

1.2試藥甲醇(色譜純)：天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司；乙腈(色譜純)：美國(guó)TEDIA；2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對(duì)照品(純度98%，批號(hào) 82373-94-2)、大黃素甲醚對(duì)照品(純度98%，批號(hào) 521-61-9)、大黃素對(duì)照品(純度98%，批號(hào) 518-82-1)：均購(gòu)自四川省成都純化標(biāo)準(zhǔn)公司。何首烏藥材于2014年2月18號(hào)采集于安徽省亳州市，經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學(xué)金傳山教授鑒定為蓼科植物何首烏(PolygonummultiflorumThunb)的干燥塊根。

2方法與結(jié)果

2.1何首烏飲片的制備為了比較不同加工工藝對(duì)何首烏飲片質(zhì)量的影響及考察趁鮮加工工藝的可行性，課題組在咨詢企業(yè)生產(chǎn)人員及實(shí)驗(yàn)室預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上確定了何首烏飲片的切片厚度(5 mm)及干燥溫度(50 ℃)，并在企業(yè)生產(chǎn)人員的指導(dǎo)下，在協(xié)和成藥業(yè)飲片有限公司進(jìn)行了驗(yàn)證及中試試驗(yàn)，確定了何首烏藥材的最佳趁鮮加工工藝，并用已優(yōu)選的傳統(tǒng)加工工藝及趁鮮加工工藝分別制備了何首烏飲片。

2.1.1傳統(tǒng)加工工藝制備飲片將采集的何首烏鮮品經(jīng)過(guò)干燥處理(50 ℃條件下烘72 h左右)加工成藥材，使用前將何首烏藥材(直徑為4 cm)置于水中浸泡81 h，取出，切5 mm厚片，置于50 ℃箱式干燥機(jī)干燥8 h后取出。

2.1.2趁鮮加工工藝制備飲片將采集的何首烏鮮藥材置于40 ℃炕房烘12 h，取出，水洗，悶潤(rùn)12 h，取出后切5 mm厚片，置于50 ℃箱式干燥機(jī)干燥8 h后取出。

2.2二苯乙烯苷的含量測(cè)定二苯乙烯苷是何首烏中重要的有效成分，是2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》一部規(guī)定的檢測(cè)指標(biāo)，因此參照藥典的二苯乙烯苷測(cè)定方法測(cè)定何首烏飲片中二苯乙烯苷的含量。

2.2.1色譜條件色譜柱為Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；柱溫：30 ℃；流動(dòng)相：乙腈-水(25∶75)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：320 nm；進(jìn)樣量：20 μL。按照該色譜條件分別注入二苯乙烯苷的對(duì)照品及樣品液進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1對(duì)照品(A)和供試品(B)的高效液相色譜圖(1. 二苯乙烯苷)

2.2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(簡(jiǎn)稱二苯乙烯苷)對(duì)照品2.06 mg置于10 mL容量瓶中，加稀乙醇至刻度處，即得。

2.2.3供試品溶液的制備取本品粉末(過(guò)4號(hào)篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25 mL，稱定質(zhì)量，加熱回流30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，靜置，上清液濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3結(jié)合蒽醌的含量測(cè)定結(jié)合蒽醌也是何首烏中重要的有效成分，也是2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》一部規(guī)定的檢測(cè)指標(biāo)，因此參照《中華人民共和國(guó)藥典》中結(jié)合蒽醌的測(cè)定方法測(cè)定何首烏飲片中結(jié)合蒽醌的含量。

2.3.1色譜條件色譜柱為Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；柱溫：25 ℃；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸水溶液(80∶20)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；進(jìn)樣量：20 μL；理論塔板數(shù)按大黃素峰計(jì)算不低于3 000，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2大黃素對(duì)照品(A)、大黃素甲醚對(duì)照品(B)、游離蒽醌(C)和總蒽醌(D)的高效液相色譜圖(1.大黃素；2.大黃素甲醚)

2.3.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取大黃素對(duì)照品2.28 mg，置于25 mL容量瓶中，精密稱取大黃素甲醚對(duì)照品2.15 mg，置于50 mL容量瓶中，分別加甲醇至刻度處，即得。

2.3.3供試品溶液的制備取傳統(tǒng)及趁鮮加工制得的何首烏樣品粉末，按2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》一部何首烏項(xiàng)下方法[1]制備供試品溶液，按干燥品計(jì)算樣品中結(jié)合蒽醌的含量(結(jié)合蒽醌含量=總蒽醌含量-游離蒽醌含量)，結(jié)合蒽醌以大黃素及大黃素甲醚的總量計(jì)算。

2.4樣品含量測(cè)定按照上述實(shí)驗(yàn)方法，測(cè)定兩種加工工藝所得的何首烏飲片及何首烏干燥藥材中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果表明，趁鮮與傳統(tǒng)加工工藝所制得的飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌含量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，趁鮮加工工藝所制得的飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量均明顯高于傳統(tǒng)加工工藝所制得的飲片中二者的含量，且趁鮮加工工藝省時(shí)省力。結(jié)果提示，趁鮮加工工藝優(yōu)于傳統(tǒng)加工工藝，這也在一定程度上證實(shí)了何首烏趁鮮切片的可行性。

表1　不同何首烏飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量±s)

3討論

本研究說(shuō)明，趁鮮加工工藝制得的飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量均高于傳統(tǒng)加工工藝所得的飲片，且兩種工藝所制得的飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌含量均符合《中華人民共和國(guó)藥典》的要求(二苯乙烯苷含量不少于1.0%，結(jié)合蒽醌含量不少于0.05%)。此外，趁鮮加工工藝省去了何首烏由鮮品加工成藥材及藥材再軟化的步驟，省時(shí)省力。再者，趁鮮與傳統(tǒng)加工工藝相比，有效地降低了二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌這兩種有效成分的損失。因此，趁鮮加工工藝具有一定的可行性及優(yōu)越性。

與何首烏藥材比較，兩種工藝加工制得的何首烏飲片中二苯乙烯苷及結(jié)合蒽醌的含量均降低，表明何首烏在由藥材加工成飲片的過(guò)程中其有效成分有不同程度的損失。因此，控制何首烏飲片加工工藝的相關(guān)參數(shù)，對(duì)降低其有效成分的損失是非常必要的。再者，在實(shí)驗(yàn)中筆者發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)加工工藝中浸泡何首烏藥材后的水呈紫色，出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因是否是由色素溶解造成的，還需要進(jìn)一步研究。

(本研究得到安徽高?？蒲衅脚_(tái)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)——中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制一體化關(guān)鍵技術(shù)研究創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)的支持，謹(jǐn)致謝意！)

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Influence of Traditional and Fresh Processing Techniques on Quality ofPolygonummultiflorumDecoction Pieces

KOUWan-qing,JINChuan-shan,HUYu,LIANGDe-qin

(SchoolofPharmacy,AnhuiUniversityofChineseMedicine&SynergeticInnovationCenterofAnhuiAuthenticChineseMedicineQualityImprovement,AnhuiHefei230012,China)

[Abstract]ObjectiveTo comparatively analyze the influence of traditional and fresh processing techniques on the quality of Polygonum multiflorum decoction pieces using the content of stilbene glucoside and combined anthraquinone as the index. MethodsHigh-performance liquid chromatography was used to measure the content of stilbene glucoside and combined anthraquinone in Polygonum multiflorum decoction pieces prepared by traditional or fresh processing technique. ResultsPolygonum multiflorum decoction pieces prepared by fresh processing technique had a higher content of stilbene glucoside and combined anthraquinone than that prepared by traditional processing technique. Fresh processing technique had a shorter processing time than traditional processing technique. ConclusionThe fresh processing technique saves time and effort, yields the decoction pieces of improved quality, and thus can be used in industrial production.

[Key words]Polygonum multiflorum; Processing technique; Stilbene glucoside; Combined anthraquinone

基金項(xiàng)目：安徽省科技攻關(guān)項(xiàng)目(1501041174)

作者簡(jiǎn)介：寇婉青(1981-)，女，碩士研究生

通信作者：金傳山，jcs4@sohu.com

[中圖分類號(hào)]R282.72[DOI]10.3969/j.issn.2095-7246.2016.03.27

(收稿日期：2015-12-24；編輯：張倩)