龍利葉止咳藥理作用及化學(xué)成分研究

張武圣

摘 要： 目的：研究分析龍利葉的止咳藥理作用和化學(xué)成分。方法：選擇150只SPF級(jí)小鼠為研究對象，將其隨機(jī)分為10組，每組各15只，龍利葉提取液分別用石油醚，氯仿，乙酸乙酯以及正丁醇進(jìn)行萃取，采用小鼠氨水引咳法觀察分析上述四個(gè)部位的止咳作用，觀察分析小鼠的咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)等指標(biāo)，采用正相硅膠柱色譜法，重結(jié)晶法以及波普法等進(jìn)行止咳有效部位的化學(xué)成分分析和鑒定。結(jié)果：除石油醚組外，上述各藥物部位組均降低小鼠的2分鐘咳嗽次數(shù)，且咳嗽潛伏期顯著長于空白對照組，其中以龍利葉中的氯仿高濃度組和乙酸乙酯組以及正丁醇組的止咳效果最為突出。結(jié)論：龍利葉的止咳有效部位為乙酸乙酯部位和正丁醇部位以及氯仿高濃度組，其有效部位化學(xué)成分主要包括黃酮類化合物，甾體類化合物，揮發(fā)油類化合物，以及核苷類化合物。

關(guān)鍵詞：龍利葉 止咳 藥理作用 化學(xué)成分

中圖分類號(hào)：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1003-9082（2016）04-0284-01

龍利葉，又名龍舌草，牛耳葉等，原產(chǎn)地為越南北部地區(qū)，是我國的廣東和廣西民間傳統(tǒng)的食療藥材和涼茶材料，根據(jù)有關(guān)資料[1]，龍利葉具有的藥用功效主要為止咳化痰，潤肺定喘，因此，臨床上常采用龍利葉進(jìn)行支氣管炎，肺結(jié)核咳嗽等疾病的治療，截至目前，我國有關(guān)龍利葉的研究報(bào)道仍然較少，研究采用小鼠實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行龍利葉的止咳藥理作用和化學(xué)成分研究分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

一、資料和方法

1.一般資料

研究所用的龍利葉購自藥材專業(yè)市場，并且經(jīng)過藥材專家鑒定為大戟科守宮木屬龍利葉（干燥葉），選擇150只SPF級(jí)小鼠為研究對象，將其隨機(jī)分為10組：空白對照組，陽性對照組，氯仿組（包括高濃度和低濃度2組），乙酸乙酯組（包括低濃度組和高濃度組），正丁醇組（包括低濃度組和高濃度組），石油醚組（包括低濃度組和高濃度組），每組15只，所選小鼠的體重范圍為18g到22g，雌雄各半。

2.納入標(biāo)準(zhǔn)

第一，采用氨水引咳法試驗(yàn)時(shí)，小鼠的2分鐘咳嗽次數(shù)為10次到80次之間；第二，噴霧后，小鼠咳嗽潛伏期為15秒到50秒之間；第三，小鼠的反應(yīng)平穩(wěn)，狀態(tài)良好。

3.方法

3.1止咳藥理作用研究方法

將上述小鼠按照體重進(jìn)行灌胃給藥，給藥標(biāo)準(zhǔn)為0.2ml/10g，每天1次，連續(xù)灌胃5天后進(jìn)行正常飼養(yǎng)，給予空白對照組小鼠灌胃藥物為生理鹽水（劑量相同），給予陽性對照組小鼠采用枸櫞酸噴托維林進(jìn)行灌胃，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行12小時(shí)的禁食，并且于最后一次給藥之后的30分鐘時(shí)，將上述小鼠放置分別在500ml的玻璃瓶內(nèi)，采用WH-2000超聲霧化器（生產(chǎn)企業(yè)為廣東粵華醫(yī)療器械有限公司）向玻璃瓶內(nèi)噴注濃氨水（生產(chǎn)企業(yè)為廣州化學(xué)試劑廠），維持15s。

3.2化學(xué)成分萃取方法

取20g干燥的龍利葉粉碎成粗粉，采用90%的乙醇進(jìn)行加熱回流提取（每次2h，共提取2次），將得到的6750g總浸膏懸于水中，并且采用石油醚和氯仿，乙酸乙酯，正丁醇等進(jìn)行多次萃取，減壓得到最終的萃取液，包括石油醚部位浸膏423.8g，氯仿浸膏141.3g，乙酸乙酯部位浸膏21.4g，正丁醇部位浸膏40.0g，進(jìn)一步采用波普法和硅膠柱層析，凝膠色譜柱和重結(jié)晶等進(jìn)行行分離純化和分析鑒定。

4.觀察指標(biāo)

觀察分析小鼠的咳嗽潛伏期（放入小鼠即刻到發(fā)生咳嗽反應(yīng)的時(shí)間差）和2分鐘咳嗽次數(shù)（小鼠出現(xiàn)咳嗽的標(biāo)準(zhǔn)為，腹肌的劇烈收縮和張嘴，伴有輕微的咳嗽聲）。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對上述兩組患者各項(xiàng)記錄數(shù)據(jù)進(jìn)行分類和匯總處理，采取統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0對上述匯總數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)數(shù)資料采取率（%）表示，計(jì)量資料采取平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)， P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.001為差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.龍利葉止咳藥理作用

除石油醚組外，上述各藥物部位組均降低小鼠的2分鐘咳嗽次數(shù)，且咳嗽潛伏期顯著長于空白對照組，其中以龍利葉中的氯仿高濃度組和乙酸乙酯組以及正丁醇組的止咳效果最為突出，各組別小鼠的2分鐘咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期情況如表1所示。

2.龍利葉止化學(xué)成分

針對止咳藥理作用有效成分進(jìn)行進(jìn)一步的化學(xué)成分分析，共得到8個(gè)化合物，研究就其中6個(gè)化合物進(jìn)行鑒定，包括：黃酮類化合物，①山奈酚；甾體類化合物：②β-谷甾醇，③谷甾醇-3-O-葡萄糖苷；揮發(fā)油類化合物（乙酸乙酯部位）：④鄰苯二甲酸二丁酯；核苷類化合物：⑤腺苷，⑥尿苷。

討論

根據(jù)資料[2]，龍利葉氣微，味淡，微甘，是大戟科守宮木屬植物，常見于我國的廣東和廣西地區(qū)的食療藥材中，龍利葉常用語進(jìn)行呼吸道疾病例如支氣管哮喘，支氣管炎等疾病的治療，但是截至目前，針對龍利葉的止咳藥理作用和活性成分的臨床研究仍然處于初期階段，有關(guān)的報(bào)道也較少，因此，研究龍利葉的藥理作用和生物活性具有重要的意義[3]。

龍利葉的止咳作用由大量臨床事實(shí)證實(shí)[4]。研究就其止咳藥理作用進(jìn)行小鼠實(shí)驗(yàn)，根據(jù)研究結(jié)果，龍利葉的各個(gè)萃取部位（除石油醚部位外）的止咳作用均良好，與空白對照組差異顯著，龍利葉的化學(xué)成分鑒定方面，研究針對其中8個(gè)化合物進(jìn)行鑒定，氯仿部位提取的化合物主要為甾體類化合物-山奈酚，這是一種具有一定的止咳和抑菌作用；腺苷具有調(diào)節(jié)心肌供需平衡的作用，是一種良好的抗心律失常的藥物，因此提示龍利葉具有一定治療心腦血管疾病的作用[5]。

綜上所述，龍利葉的止咳有效部位為乙酸乙酯部位和正丁醇部位以及氯仿高濃度組，其有效部位化學(xué)成分主要包括黃酮類化合物，甾體類化合物，揮發(fā)油類化合物，以及核苷類化合物。

參考文獻(xiàn)

[1]丘琴.王瑩.甄漢深.等. 龍利葉根化學(xué)成分的初步研究[J]. 中國民族民間醫(yī)藥. 2013（05）： 31-32.

[2]劉紅麗.龍利葉和桫欏的化學(xué)成分及桫欏指紋圖譜的研究[D]. 暨南大學(xué)， 2012.

[3]丁聰.賀勤.柳賢福. 龍利葉水提物的止咳祛痰作用研究[J]. 華西藥學(xué)雜志. 2015（01）： 49-50.

[4]林慧.林斌.龍利葉抗過敏作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 海峽藥學(xué). 2011（04）： 23-24.

[5]丘琴.張玲.甄漢深.等.龍利葉石油醚部位的化學(xué)成分研究[J]. 華西藥學(xué)雜志. 2015（03）： 269-271.