天仙果預(yù)防關(guān)節(jié)炎活性部位篩選

張秋萍，陳雪梅，李少華，王增烈，高忠坂

（1.廈門市中醫(yī)院藥劑科，福建廈門361009；2.武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院，福建武夷山354300；3.廈門市馬巷衛(wèi)生院藥劑科，福建廈門361009；4.三明市食品藥品檢測中心，福建三明365001）

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天仙果預(yù)防關(guān)節(jié)炎活性部位篩選

張秋萍1，陳雪梅1，李少華2，王增烈3，高忠坂4

（1.廈門市中醫(yī)院藥劑科，福建廈門361009；2.武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院，福建武夷山354300；3.廈門市馬巷衛(wèi)生院藥劑科，福建廈門361009；4.三明市食品藥品檢測中心，福建三明365001）

摘要：采用溶劑法提取分離天仙果不同極性部位，以Freund's完全佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠模型對天仙果提取分離的各部位進(jìn)行預(yù)防關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)篩選。實(shí)驗(yàn)表明天仙果醇提、醇提水沉部位具有明顯的預(yù)防關(guān)節(jié)炎作用，其中以醇提水沉組效果最佳，即中等極性部位具有預(yù)防關(guān)節(jié)炎作用。

關(guān)鍵詞：天仙果；活性部位；預(yù)防關(guān)節(jié)炎；Freund's完全佐劑

天仙果為?？崎艑僦参锾煜晒‵icus erecta）的根，俗稱“牛奶籽根”、“牛奶漿根”。在福建省武夷地區(qū)民間常將天仙果與肉類煲湯食用，香氣四溢，湯水醇美，是當(dāng)?shù)鼐用耦A(yù)防關(guān)節(jié)炎藥膳煲湯首選食材。本文以佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型［1］對天仙果提取分離的各部位［2］進(jìn)行預(yù)防關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)篩選，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 材料

天仙果，購于福建省武夷山市，足容量測量裝置，70%酒精（食用級），F(xiàn)reund's完全佐劑（批號：SLBK1731V sigma），蒸餾水。

1.2 動物

Wistar大鼠，體質(zhì)量（180±20）g，清潔級（上海斯萊克公司，合格證號：2014-0005）。正常飼養(yǎng)3天后供試。

2 方法與結(jié)果

2.1 天仙果不同部位的制備

2.1.1 天仙果水提部位的制備：

取天仙果粉末（過12目篩）40 g，置于1 L燒瓶中，加20倍量水，浸泡1 h，煎煮兩次，每次1 h，濾過，合并濾液，濃縮至2.5 g/mL（以生藥量計(jì)），備用。

2.1.2 天仙果水提醇沉部位的制備：

取天仙果粉末（過12目篩）40 g，置于1 L燒瓶中，加20倍量水，浸泡1 h，煎煮兩次，每次1 h，濾過，合并濾液，濃縮至1∶1.1，加3倍量70%乙醇沉淀，冰箱靜置過夜，除去上清液，下層溶液回收乙醇至無醇味，加水調(diào)整為2.5 g/mL（以生藥量計(jì)），備用。

2.1.3 天仙果醇提部位的制備：

取天仙果粉末（過12目篩）40 g，置于1 L燒瓶中，加20倍量70%乙醇，浸泡1 h，煎煮兩次，每次1 h，濾過，合并濾液，回收乙醇至無醇味，加水調(diào)整為2.5 g/mL（以生藥量計(jì)），備用。

2.1.4 天仙果醇提水沉部位的制備：

取天仙果粉末（過12目篩）40 g，置于1 L燒瓶中，加20倍量70%乙醇，浸泡1 h，煎煮兩次，每次1 h，濾過，合并濾液，回收乙醇至無醇味，加3倍量水沉淀，冰箱靜置過夜，除去上清液，濃縮，加水調(diào)整為2.5 g/mL（以生藥量計(jì)），備用。

2.2 方法與結(jié)果

2.2.1 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響

?。?80±20）g Wistar雄性大鼠，實(shí)驗(yàn)前先適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d，隨機(jī)分為六組，每組10只，預(yù)留一組做為空白對照組，其余各組于每只大鼠右后足跖皮內(nèi)注射Freund's完全佐劑0.1 mL致炎。測量致炎及給藥后大鼠足腫脹度，造模后第8 d開始灌胃給藥，連續(xù)給藥7 d，各給藥組按照為5 g/kg（以生藥量計(jì)）體重劑量的灌胃，空白對照組、模型對照組給予相同體積的生理鹽水。觀察天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響［3］。

用藍(lán)色記號筆在大鼠右足踝關(guān)節(jié)處劃圈，用足容量測量裝置測量大鼠足腫脹度。采用graphpad prism5.01［4］，各組結(jié)果以（mean±s）表示，組間比較采用均數(shù)比較法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，分析結(jié)果見圖1。計(jì)算公式：

其中Ec和Et分別代表模型對照組和給藥組的平均腫脹度。

表1 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響（mean±s，n=10）

圖1 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響

根據(jù)統(tǒng)計(jì)，模型組與空白組比較，受試大鼠足腫脹度P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示造模成功；給藥后，醇提部位組與模型組比較P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；醇提水沉組與模型組比較P＜0.05，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2.2 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠體質(zhì)量的影響

稱量致炎前及給藥前后2.2.1中大鼠體質(zhì)量，采用graphpad prism5.01，各組結(jié)果以（mean±s）表示，組間比較采用均數(shù)比較法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2，分析結(jié)果見圖2。

表2 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠體重的影響（mean±s，n=10）

圖2 天仙果提取物對弗氏完全佐劑型大鼠體質(zhì)量的影響

各組在造模前和給藥后體質(zhì)量比較P＞0.05，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一類致殘性極高的自身免疫功能障礙性疾病，現(xiàn)今抗風(fēng)濕藥物一線藥物以激素、非甾體抗炎藥為主，療效明確、毒副作用較大。天仙果作為武夷山地區(qū)民間藥食同源植物，主要用于預(yù)防關(guān)節(jié)炎性疾病，因此本實(shí)驗(yàn)選用弗氏完全佐劑型關(guān)節(jié)炎模型，采用造模后7 d給藥方法進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，天仙果對弗式完全佐劑型關(guān)節(jié)炎模型具有明顯的效果，其中尤以醇提、醇提水沉組效果為佳，也側(cè)面印證了當(dāng)?shù)孛癖妼⑻煜晒c肉類煲湯方法的科學(xué)性；通過對弗氏完全佐劑型大鼠體重的分析，天仙果各提取部位均對大鼠體重?zé)o影響，不影響大鼠體重的正常增長，大鼠的體重波動都在正常范圍內(nèi)。

參考文獻(xiàn)：

［1］夏麗娟，陳飛虎，阮晶晶，等.重組人內(nèi)抑素誘導(dǎo)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡的研究［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2008，24 （8）∶52-56.

［2］龔莉，向大雄，隋艷華.黃精心血管活性部位的篩選［J］.中藥新藥與臨床藥理，2007，18（4）∶301-302.

［3］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京∶人民衛(wèi)生出版社，2001∶920-921.

［4］彭芳，金建華，余方.Graphad prism 5.01在科技期刊統(tǒng)計(jì)圖表中的應(yīng)用［J］.中國科技縱橫，2010（1）∶104-105.

（責(zé)任編輯：夏婷婷）

Screening on the Active Fractions of Prevent Arthritis from Ficus Erecta

ZHANG Qiuping1，CHEN Xuemei1，LI Shaohua2，WANG ZengLie3，GAO Zhongban4

（1.Department of Pharmacy，Xiamen TraditionaL Chinese HospitaL，Xiamen，F(xiàn)ujian 361009；2.SchooL of Tea and Food Science，Wuyi University，Wuyishan，F(xiàn)ujian 354300；3.Xiamen Maxiang HospitaL Pharmacy，Xiamen，F(xiàn)ujian 361009；4.Sanming Food and Drug Inspection Center，Sanming，F(xiàn)ujian 365001）

Abstract：The active components from Ficus erecta were extracted by soLvent separation methods，and their Prevent Arthritis effects on AA rat modeL. Among the extracts from Ficus erecta，ethanoL and ethanoL-water extract has good Prevent arthritis effect，ethanoL-water extract better，the parts with medium poLarity from Ficus erecta have the best Prevent arthritis.

Key words:Fairy fruit；active site；prevent arthritis；Freund 's compLete adjuvant

中圖分類號：R284.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1674-2109（2016）03-0015-03

收稿日期：2015-09-10

基金項(xiàng)目：福建省衛(wèi)生廳青年課題（2013-2-97）。

作者簡介：張秋萍（1985-），女，漢族，藥師，主要從事中藥制劑學(xué)方向研究。