酶聯(lián)免疫吸附試驗法在孕前TORCH 3項病原體感染檢測中的效果及意義

張雷

620500　四川省仁壽縣計劃生育服務站檢驗科

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·論著·

酶聯(lián)免疫吸附試驗法在孕前TORCH 3項病原體感染檢測中的效果及意義

張雷

620500四川省仁壽縣計劃生育服務站檢驗科

【摘要】目的研究酶聯(lián)免疫吸附試驗法在孕前TORCH 3項病原體感染檢測中的效果及意義。方法選取2014年1月至2015年2月進行孕期檢測的孕婦1 178例，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測TORCH-IgM 抗體及TORCH-IgG 抗體。若篩查出感染患者，根據(jù)具體癥狀進行治療。觀察孕婦TORCH 感染狀況、孕婦TORCH 病原體同時感染情況、孕婦妊娠結(jié)局及治療效果。結(jié)果1 178例孕婦中，52例TORCH 特異性抗體IgM 感染，其中T-IgM 感染(1.27%)15例，R-IgM 感染(0.76%)9例，C-IgM 感染(2.38%)28例，其中R-IgM 抗體陽性率較低，C-IgM 抗體陽性率相對較高。T-IgG 感染(4.16%)49例，R-IgG 感染(88.28%)1 040例，C-IgG 感染(92.95%)1 095例，其中R-IgG 抗體陽性率較低，C-IgG 抗體陽性率相對較高。1 178例孕婦，未見血清多重抗體IgM 陽性。TORCH 特異性抗體IgG 陽性主要為RV、CMV 陽性，共61例，陽性率5.18%。52例TORCH 感染孕婦中，終止妊娠8例，繼續(xù)妊娠44例。不良妊娠結(jié)果19例，發(fā)生率43.18%，其中以流產(chǎn)發(fā)生率最高，為34.09%(15/44)。對TORCH 感染患者的治療效果進行分析，其中TOX患者中，第1療程治愈3例，RV患者中，第1療程治愈7例，CMV患者中，第1療程治愈6例。結(jié)論酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測孕前TORCH 3項病原體感染可早期發(fā)現(xiàn)，早期治療，必要時終止妊娠，避免有缺陷的兒童的降生，減輕家庭負擔，提高人口素質(zhì)，值得臨床推廣應用。

【關鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗法；孕前；TORCH 3項病原體；檢測

TORCH為病原微生物的英文縮寫詞組，T表示弓形蟲(Toxopasma，TOX)，O 表示包括梅毒螺旋體在內(nèi)的其他病原體，R表示風疹病毒(Rubella.Virus,RV)，C表示巨細胞病毒(Cytomegalo.Virus,CMV)，H表示單純皰疹病毒(Herpes.Virus)；TORCH微生物的主要特征為母嬰感染[1]。研究表明，在TORCH病原體中，四種為產(chǎn)生畸形胎兒的主要因素[2]。妊娠前3個月為胚胎形成期，若母體受到TORCH 感染，可使細胞分裂受到影響，出現(xiàn)流產(chǎn)、畸胎等；若妊娠3個月后受到感染，可使胎兒器官結(jié)構(gòu)受到影響，產(chǎn)生病變，導致智障等疾病，不利于胎兒的生長發(fā)育及家庭和諧[3]。因此，為了確保優(yōu)生優(yōu)育，減少智障等兒童的出現(xiàn)，TORCH 感染病原體的篩查具有十分重要的意義。應在妊娠早期對確認TORCH 感染的孕婦進行停止妊娠的工作，保證胎兒的健康[4]。近年來，上級衛(wèi)生部門要求轄區(qū)篩查育齡女性一系列免費孕前優(yōu)生項目，同時將孕前保健檔案建立起來，其中TORCH3項就包含其中。為了將有效方法提供給臨床對孕前TORCH 3項病原體感染的檢測，盡可能早地將孕前TORCH 3項病原體感染尋找出來，為提升人口素質(zhì)提供良好的前提條件，2014年1月至2015年2 月，我們使用酶聯(lián)免疫吸附試驗法對前來就診的孕婦進行檢測，報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年1月至2015年2月收入我站進行孕期檢測的孕婦1 178例，孕周5～18周，年齡19～40 歲，初產(chǎn)婦866例，經(jīng)產(chǎn)婦312例。

1.2標本收集清晨空腹收集孕婦3 ml肘靜脈血，離心，1 h內(nèi)收集血清，4℃冰箱保存，并于當天進行TORCH特異性抗體檢測。

1.3檢測方法使用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測TORCH-IgM 抗體及TORCH-IgG 抗體。試劑盒由北京科瑞美科技有限公司提供。由專業(yè)人員嚴格按說明書進行實驗操作。使用MK3 酶標儀比色，450 nm 測定各孔吸光度值(OD)。

1.4結(jié)果判斷以Cut off 值作為臨界值(cut off值= 陰性對照OD 平均值+0.1)[5]，若臨界值大于測定標本OD 值則為陰性，若臨界值小于測定標本OD 值則為陽性。若檢測為陽性，則1周后使用同樣方法復查，若結(jié)果仍為陽性，則確定為陽性。

1.5測定質(zhì)量控制測定樣品時需進行質(zhì)控評判，設空白對照、陰性對照及陽性對照各3孔，測定質(zhì)控品和血清。TORCH-IgM、IgG 質(zhì)控品CV在15%～25%。

1.6治療方法若篩查出感染患者，根據(jù)具體癥狀進行治療。(1)若感染者無流產(chǎn)征象，則可使用優(yōu)生教育，同時行負壓吸宮術(shù)治療。(2)若感染者有先兆流產(chǎn)征象，則行清宮術(shù)治療。(3)藥物治療：術(shù)后使用螺旋霉素治療T-IgM陽性者，每次0.2 g，3次/d，2周為1個療程，間隔2周再服用1個療程后復查；使用抗感染藥物進行對癥治療，R-IgG 陰性者及時注射風疹疫苗。C-IgM陽性者使用細胞增殖免疫療法，加轉(zhuǎn)移因子治療，5 周后復查。

2結(jié)果

2.1TORCH感染狀況分析1 178例孕婦中，52例TORCH 特異性抗體IgM 感染，其中T-IgM 感染15例(1.27%)，R-IgM 感染9例(0.76%)，C-IgM 感染28例(2.38%)，其中R-IgM 抗體陽性率較低，C-IgM 抗體陽性率相對較高。T-IgG 感染49例(4.16%)，R-IgG 感染1 040例(88.28%)，C-IgG 感染1 095例(92.95%)，其中R-IgG 抗體陽性率較低，C-IgG 抗體陽性率相對較高。見表1 。

表1　育齡女性血清TORCH 3 項特異性IgM、IgG抗體檢測結(jié)果

2.2孕婦TORCH 病原體同時感染情況分析1 178例孕婦，未見血清多重抗體IgM陽性。TORCH 特異性抗體IgG 陽性主要為RV、CMV 陽性，共61例，陽性率5.18%。

2.3TORCH感染孕婦妊娠結(jié)局52例TORCH 感染孕婦中，終止妊娠8例，繼續(xù)妊娠44例。不良妊娠結(jié)果19例，發(fā)生率43.18%，其中以流產(chǎn)發(fā)生率最高，為34.09%(15/44)。見表2 。

表2　44例TORCH 感染繼續(xù)妊娠的妊娠結(jié)局　例

2.4TORCH 治療效果分析對TORCH 感染患者的治療效果進行分析，其中TOX患者中，第1療程治愈3例，RV患者中，第1療程 治愈7例，CMV患者中，第1療程治愈6例。見表3 。

表3　TORCH 治療效果分析　例

3討論

TORCH為一類病原微生物的簡稱，可通過母體胎盤或產(chǎn)道傳播給嬰兒，引起胎兒流產(chǎn)、畸形、死亡等。TOX為弓形蟲，人畜共患，宮內(nèi)感染后可引起胎兒腦積水、畸形、鈣化、腦癱、發(fā)育遲緩等癥狀[6]；RV 為風疹病毒，主要經(jīng)呼吸道傳染，宮內(nèi)感染后可引起病毒血癥，使孕婦早產(chǎn)、流產(chǎn)，胎兒畸形甚至死亡等[7]；CMV 為巨細胞病毒，是最常見的宮內(nèi)感染病原體，感染后易產(chǎn)生器官發(fā)育缺陷[8]。TORCH 病原微生物感染后，長期潛伏在人體內(nèi)，懷孕期間，孕婦體內(nèi)T細胞介導的細胞免疫受到影響，使孕婦抵御感染的能力降低，因此，感染TORCH后可能會引起孕婦宮內(nèi)感染。TORCH中任意病原體感染孕婦后，大多孕婦自身癥狀不明顯，但會對胎兒產(chǎn)生嚴重的不良后果。因此，為降低母嬰傳播TORCH的概率，多對孕早期孕婦進行TORCH病原體篩查。

病原體篩查中，主要以實驗室診斷為標準，主要診斷方法包括：(1)病原體的分離篩查法：該方法準確性好，但該法用時較久，所需條件較苛刻，易受各種因素影響，一般的實驗室較難開展[9]。(2)PCR 法：PCR法靈敏度較高，用時較短，可直接對病原體進行檢測，但試劑及操作條件要求較高，限制了其廣泛應用。(3) 酶聯(lián)免疫吸附法：即ELISA 酶免診斷法，具有穩(wěn)定性好，靈敏度高，特異性好的特點，加之成本較低，因此在基層醫(yī)院得到了廣泛使用，為國際公認的方便、可靠的早期篩查TORCH 感染的方法。一般主要使用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測TORCH病原體特異性IgG 和IgM，以此確診孕婦和胎兒是否受到感染。血清IgM 主要存在于感染后3～7 d，一般在血清內(nèi)保持3個月左右，陽性IgM為急性感染及復發(fā)的重要指標；血清IgG抗體主要在感染后15 d左右出現(xiàn)，血清內(nèi)保持時間較長，陽性IgM為機體層受過感染的重要指標；若IgM、IgG 同時陽性，則為近期感染的重要指標[10]。

本研究使用酶聯(lián)免疫吸附試驗法對收入我院的孕婦進行TORCH 特異性抗體IgM、IgG 檢測，篩查出52 例3種病原體特異性IgM 抗體陽性孕婦，從感染情況看，CMV(2.38%)>TOX(1.27%)>RV(0.76%)，與陶洪群等[11]報道相似。特異性IgG 抗體的陽性檢出率CMV(92.95%)、RV(88.28%)、TOX(4.16%)，CMV、RV IgG抗體檢出率較高，但TOX檢出率較低。IgG 檢出率表明孕婦存在既往感染史，一般情況下TOX、RV IgG 陽性表明機體免疫力較好，但CMV抗體潛伏時間長，一旦感染則會終身攜帶[12]。本研究中孕婦中TORCH IgG 多重陽性較高，尤其是RV、CMV，表明本院所在區(qū)域人群易受上述兩種病原微生物的感染，血清IgG 抗體較多，但妊娠引起的免疫抑制會增加病毒復發(fā)的機會，引起孕婦血清IgM 陽性率增加。因此，可通過孕前篩查，了解女性免疫情況，對易感女性接種相應疫苗，從而有效預防TORCH 感染。

隨訪妊娠結(jié)局表明，52例TORCH 感染孕婦中，終止妊娠8例，繼續(xù)妊娠44例。不良妊娠結(jié)果19例，發(fā)生率為43.18%，其中以流產(chǎn)發(fā)生率最高，為34.09%(15/44)?；仡櫺苑治鯰OX 孕婦表明，7例TOX陽性孕婦中，5例與動物曾有過異常接觸，因此對該類人群的篩查對預防TORCH疾病十分重要。本研究還對TORCH 感染孕婦進行系統(tǒng)治療，對TORCH 感染患者的治療效果進行分析，其中TOX患者中，第1療程治愈3例，RV患者中，第1療程治愈7例，CMV患者中，第1療程治愈6例。

TORCH病原體引發(fā)宮內(nèi)感染的途徑可以是通過胎盤，一方面對母體造成危害，另一方面還會嚴重危害胎兒，引發(fā)不良妊娠，會導致胎兒一系列后遺癥，如一定程度畸形、智力障礙等[13]。計劃生育、優(yōu)生優(yōu)育是我國的基本國策，對我國提升人口素質(zhì)及實現(xiàn)民族興旺產(chǎn)生直接而深刻的影響。由于我國具有較大的人口基礎、較高的人口出生率，相關調(diào)查結(jié)果表明，現(xiàn)階段，在我國，先天性感染TORCH疾病的存活患兒達到了26 000 例左右[14]?；蝺?、低智兒將極為沉重的精神及經(jīng)濟負擔帶給了家庭及社會，同時也折磨著患兒及其家屬的身心。在促進人口素質(zhì)提升的過程中，促進畸形兒、低智兒出生率的降低具有極為重要的臨床意義，因此，臨床很有必要篩查育齡女性孕前TORCH感染。妊娠前接受優(yōu)生咨詢指導、特異性治療感染者、懷孕前保證感染指標轉(zhuǎn)陰一方面能夠?qū)Σ《靖腥咎旱默F(xiàn)象進行有效的避免，另一方面也能夠?qū)τg女性的身心健康進行切實有效的保護[15]。對存在TORCH 感染史、動物接觸史的女性應進行早期TORCH 篩查，應以預防為主、做好優(yōu)生教育，向民眾普及TORCH 感染的意義及危險性。目前主要預防措施包括：(1)備孕期間避免與貓、犬等寵物異常接觸，不適用未完全煮熟的肉類，注意衛(wèi)生情況，盡量避免TOX感染；(2)鼓勵孕前3～6 周進行TORCH 篩查，孕前接種疫苗，預防風疹；(3)鼓勵育齡女性自覺進行TORCH 感染篩查，早期發(fā)現(xiàn)，早期治療，必要時終止妊娠，避免有缺陷的兒童的降生，減輕家庭負擔，提高人口素質(zhì)。

綜上所述，酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測孕前TORCH 3項病原體感染可早期發(fā)現(xiàn)，早期治療，必要時終止妊娠，避免有缺陷的兒童降生，減輕家庭負擔，提高人口素質(zhì)，值得臨床推廣應用。但本研究納入病例較少，未能完全排除其他因素，酶聯(lián)免疫吸附試驗法在孕前TORCH 3項病原體感染檢測中的效果及意義仍需大量病例數(shù)目，多種研究方法證實。

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doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.11.026

【中圖分類號】R 715

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-7386(2016)11-1685-03

(收稿日期：2015-12-09)