金蠶膠囊質量標準的研究

李春花　張新宏　孫　琛

(河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心業(yè)辦室，河北　衡水　053000)

制劑與質量控制

金蠶膠囊質量標準的研究

李春花張新宏1孫琛1

(河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心業(yè)辦室，河北衡水053000)

【摘要】目的建立金蠶膠囊的質量標準。方法采用薄層色譜法對金蠶膠囊中僵蠶、薏苡仁、柴胡、太子參進行鑒別；采用高效液相色譜法對金蠶膠囊中黃芪的有效成分黃芪甲苷的含量進行測定。結果薄層色譜中斑點清晰,易于觀察。黃芪甲苷的進樣量在60～900 ng范圍內呈良好的線性關系(r=0.999 7)，平均回收率為98.42%，標準編差(RSD)=0.7%。結論薄層色譜法操作簡便，分離效果好，專一性強；高效液相法色譜重復性好，穩(wěn)定性高，準確可行，能有效地控制金蠶膠囊的質量。

【關鍵詞】質量控制；中成藥；膠囊；色譜法，薄層；色譜法，高壓液相

金蠶膠囊是河北省衡水市中醫(yī)院院內制劑，主要由黃芪、僵蠶、黃連、薏苡仁、太子參、柴胡、丹參等中藥組成，該制劑應用廣泛，具有益氣養(yǎng)陰、活血祛痰的功效，主要用于氣血兩虛、痰瘀互結所致的口干、口渴、尿頻、尿多、消瘦等癥狀，以及2型糖尿病的治療。現(xiàn)行標準只是對黃芪、黃連、丹參進行了薄層鑒別，不能全面控制該制劑的質量。為了更好地控制藥品質量，使臨床用藥安全有效，本試驗采用薄層色譜法[1]及高效液相色譜法[1]進行質量標準的研究，結果如下。

1儀器與試藥

1.1儀器E2695高效液相色譜儀，美國Waters公司；ELSD 2000ES型蒸發(fā)光散射檢測器，美國Alltech公司；AG135型電子天平，瑞士梅特勒-托利多公司；硅膠G薄層析，青島海洋化工有限公司；乙腈為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。1.2試藥僵蠶對照藥材，河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心標本室；薏苡仁對照藥材(批號：121254-200301)、柴胡對照藥材(批號：120992-201108)、太子參對照藥材(批號：121004-200604)、黃芪甲苷對照品(批號：110781-200613)，中國藥品生物制品檢定所；金蠶膠囊(冀藥制字Z20051525，批號：20130108、20130312、20130520)，河北省衡水市中醫(yī)院制劑室。

2方法與結果

2.1薄層鑒別

2.1.1僵蠶取本品3 g，研細，加甲醇10 mL，超聲處理10 min，濾過，濾液作為供試品溶液。另取僵蠶對照藥材粉末0.5 g，加甲醇5 mL超聲處理5 min，上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取上述溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365 nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。結果見封3，圖1。

2.1.2薏苡仁取本品3 g，加石油醚(60～90 ℃)10 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加石油醚(60～90℃)1 mL使其溶解，作為供試品溶液。另取薏苡仁對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取上述溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯-醋酸(10∶3∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365 nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。結果見封3，圖2。

2.1.3柴胡取本品3 g，加甲醇20 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次(20 mL，10 mL)，洗液棄去，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20 mL，棄去洗液，分取正丁醇液，濃縮至干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.5 g，加甲醇10 mL同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取上述溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以50%香草醛硫酸溶液-甲醇-冰醋酸(1∶25∶25)的混合溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。結果見封3，圖3。

2.1.4太子參取本品2 g，加70%乙醇15 mL，溫浸30 min，濾過，濾液濃縮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取太子參對照藥材0.2 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法吸取上述溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-17%氫氧化銨(4∶4∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮丙酮試液，加熱3 min。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。結果見封3，圖4

2.2含量測定

2.2.1色譜條件色譜柱：Shim-pack VP-ODS C18(4.6×250 mm，5 μm)；流動相：乙腈-水(32∶68)；檢測器：蒸發(fā)光散射檢測器；流速：1.0 mL/min；理論板數(shù)按黃芪甲苷計算不低于4 000。

2.2.2對照品溶液的配制精密稱定黃芪甲苷對照品，加甲醇制成60 μg/mL的溶液，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.3供試品溶液的配制取裝量差異項下的本品，混勻，研細，取約3 g，精密稱定，精密加甲醇50 mL，稱定質量，超聲處理(功率250 W，頻率45 kHz)30 min，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，精取續(xù)濾過25 mL，蒸干，殘渣加水20 mL，微熱溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次40 mL，棄去氨液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至5 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.2.4陰性對照試驗按處方及制備工藝制備不含黃芪的陰性樣品，按2.2.3項下方法制備陰性對照溶液。按照2.2.1項下色譜條件，吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀。結果供試品溶液色譜中，在與對照品色譜峰相應的保留時間處有吸收峰，而陰性溶液則在相應的保留時間處無吸收峰。對照品、供試品和陰性對照溶液高效液相色譜圖見圖5-7。

圖5　黃芪甲苷對照品溶液高效液相色譜圖

圖6　供試品溶液高效液相色譜圖

圖7　陰性(缺黃芪)溶液高效液相色譜圖

2.2.5線性關系精密吸取2.2.2項下對照品溶液1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0 μL，分別注入液相色譜儀，按2.2.1項下色譜條件測定黃芪甲苷的吸收峰峰面積，以對照品進樣量對數(shù)值為橫坐標(X)，以峰面積對數(shù)值為縱坐標(Y)，繪制標準曲線。結果表明，黃芪甲苷進樣量在60～900 ng范圍內線性關系良好，回歸方程為Y=1.192X+5.826，r=0.999 7。

2.2.6精密度試驗精密吸取同一濃度對照品溶液10 μL，重復進樣6 次，測定黃芪甲苷的峰面積，結果黃芪甲苷峰面積相對標準偏差(RSD)=0.5%，表明精密度良好。

2.2.7穩(wěn)定性試驗取2.2.2項下對照品溶液，于室溫放置0、3、6、9、12、24 h,按2.2.1項下色譜條件進行分析，黃芪甲苷峰面積RSD=1.0%。結果表明，供試品溶液在0～24 h內基本穩(wěn)定。

2.2.8重復性試驗取金蠶膠囊內容物(批號20130520)3 g，精密稱定，共6份，按2.2.3項下方法制備供試品溶液，按2.2.2項下方法制備對照品溶液，按2.2.1項下色譜條件測定黃芪甲苷的含量，測得黃芪甲苷含量平均值為每粒含0.064 mg，RSD=0.8%。

2.2.9加樣回收實驗稱取已知黃芪甲苷含量的金蠶膠囊(0.064 mg/粒，裝量差異為0.300 5，批號20130520)1.5 g，共6份，精密稱定，分別精密加入2.2.2項下對照品溶液(60 μg/mL)2.0、3.0、5.0 mL，按2.2.3項下供試品溶液的制備方法配制加樣供試品溶液，吸取加樣供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，按2.2.1項下色譜條件測定加樣供試品溶液中黃芪甲苷的含量，計算回收率。結果黃芪甲苷平均回收率為98.42%，RSD=0.7%，計算回收率見表1。

表1　黃芪甲苷加樣回收率試驗結果

2.2.10樣品的含量測定取3批樣品，按2.2.2項和2.2.3項方法分別制備對照品溶液和供試品溶液，按2.2.1項下色譜條件，精密吸取10 μL，注入液相色譜儀測定，按外標法計算。結果見表2。

表2　3批樣品中黃芪甲苷含量測定結果

3討論

金蠶膠囊為復方制劑，成分復雜，采用薄層色譜法對制劑中的僵蠶、薏苡仁、柴胡、太子參進行鑒別，操作簡便，分離效果好，專一性強。采用高效液相法測定制劑中黃芪的有效成分黃芪甲苷的含量，方法重復性好，穩(wěn)定性高，準確可行，能有效地控制金蠶膠囊的質量，確保臨床療效。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄34-35，36-37.

(本文編輯：石康)

doi:10.3969/j.issn.1002-2619.2016.03.035

作者簡介：李春花(1967—)，女，副主任藥師，學士。從事中藥、化學藥品的檢驗工作。

【中圖分類號】R283.65；R917.4

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-2619(2016)03-0433-03

(收稿日期：2014-05-13)

1河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心化學室，河北衡水053000