Dickkopf-1與骨髓瘤骨病的關(guān)系及其靶向治療的研究進展＊

袁忠濤 綜述，李惠民審校

（昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院血液科，云南昆明650032）

90%以上的多發(fā)性骨髓瘤（m u l t i p l e m y e l o m a，MM）患者在疾病進程中出現(xiàn)骨質(zhì)破壞，包括全身性骨質(zhì)疏松、溶骨性破壞和病理性骨折，即骨髓瘤骨?。╩ y e l o m a b o n e d i s e a s e，MB D），這是MM的標志之一。MB D的骨破壞以溶骨亢進同時不伴新骨形成為主要特點［1］。與其他腫瘤骨轉(zhuǎn)移引起的溶骨病變不同，當(dāng)骨髓瘤的腫瘤負荷超過50%，成骨細胞（o s t e o-b l a s t，O B）的活性將嚴重受抑或完全缺失；即使患者達到長期完全緩解，破骨細胞（o s t e o c l a s t，O C）的活性減弱，O B活性仍無恢復(fù)，溶骨性病變也無改善［2］。Wn t（W i n g l e s s-t y p e MMTV i n t e g r a t i o n s i t e）信號是O B中的一條重要信號通路，骨髓瘤細胞分泌的D i c k k o p f-1（D KK 1）蛋白可通過抑制Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，經(jīng)多種途徑抑制O B分化和功能以及間接激活O C，導(dǎo)致骨代謝失衡［3］。因此，隨著對MB D發(fā)病機制、Wn t信號通路抑制劑D KK 1與MB D關(guān)系的深入研究，D KK 1有望成為MB D治療的新靶點?，F(xiàn)就Wn t信號通路和D KK 1在MB D發(fā)病機制中的作用以及靶向D KK 1的干預(yù)治療作一綜述。

1 D KK 1與Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

1.1 D KK 1的生物學(xué)特性 D KK家族是一類含有255～350個氨基酸殘基的分泌型糖蛋白，在脊椎動物中由D KK 1、D KK 2、D KK 3和D KK 4四個家族成員組成。D KK 1于1998年被G l i n k a等在非洲爪蟾胚胎發(fā)育的研究中發(fā)現(xiàn)［4］。人類D KK 1位于染色體10q 11上，其相對分子質(zhì)量是35×103。D KK 1包括31個氨基酸殘基組成的N端（信號肽端）、糖基化的C端和2個富含半胱氨酸的保守區(qū)（C y s-1和C y s-2），其中C y s-2位于C端附近，含有10個保守的半胱氨酸殘基，呈高度保守狀態(tài)，在抑制經(jīng)典的Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路方面起決定作用。目前已發(fā)現(xiàn)兩類D KK 1受體：低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（L R P 5/6）和含環(huán)狀結(jié)構(gòu)域的單跨膜蛋白 K r e m e n 2（K r e m 2）［5］。

1.2 Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的概述 Wn t蛋白屬于一類富含半胱氨酸殘基的分泌性糖蛋白大家族，至今已在人和鼠類發(fā)現(xiàn)19個家庭成員。Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是一條高度保守的信號通路，不僅在細胞的分化、增殖及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，同時還參與了骨形成和重建的調(diào)節(jié)。

Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要分為3支：（1）Wn t/β－連環(huán)蛋白（β-c a t e n i n）通路，即經(jīng)典途徑，是最早被發(fā)現(xiàn)且研究較為透徹的Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。β-c a t e n i n是經(jīng)典Wn t信號通路的關(guān)鍵效應(yīng)蛋白，它在胞質(zhì)內(nèi)的積聚是該信號通路激活的重要標志。正常情況下，胞質(zhì)內(nèi)β-c a t e n i n穩(wěn)定在極低的水平。當(dāng)胞外的Wn t配體與胞膜表面7次跨膜受體卷曲蛋白（f r i z z l e d p r o t e i n，F(xiàn) z）和單跨膜受體L R P 5/6結(jié)合，Wn t信號被激活，繼而激活細胞內(nèi)下游信號分子散亂蛋白（d i s h e v e l l e d s，D v l）使其磷酸化，從而抑制大腸腺瘤息肉病基因（a d e n o m a t o u s p o l y p o s i s c o l i，A P C）、軸蛋白（a x i n）和糖原合成激酶-3β（g l y c o g e n s y n t h a s e k in a s e-3β，G S K-3β）形成的降解復(fù)合物磷酸化，導(dǎo)致β-c a t e n i n磷酸化受阻，在胞質(zhì)內(nèi)大量積聚，并進入到核內(nèi)與轉(zhuǎn)錄因子淋巴增強因子（l y m p h o i d e n h a n c i n g f a c t o r，L E F）1/T細胞因子（T c e l l f a c t o r，T C F）結(jié)合，解除L E F 1/T C F的抑制作用，特異性地啟動、激活下游靶基因的轉(zhuǎn)錄和表達，促進細胞增殖，減少細胞凋亡［6］。激活的Wn t通路使O B內(nèi)的β-c a t e n i n增加，轉(zhuǎn)移到細胞核，刺激O B靶基因的表達，促進O B分化，上調(diào)護骨素（o s t e o p r o t e g e r i n，O P G）的表達，間接抑制O C的功能，下調(diào)細胞核因子κ B（n u c l e a r f a c t o r k a p p a B，N F-κ B）受體激活蛋白配體（r e c e p t o r a c t i v a t o r o f N F-κ B l i g a n d，R ANK L）的表達，從而維持骨代謝的平衡［7］。另外Wn t 1、n t 3a和Wn t 10等參與了骨髓間充質(zhì)干細胞（b o n e m a r r o w m e s e n c h y m a l s t e m c e l l，BMC）向O B分化的過程［8］。（2）平面細胞極性（t h e p l a n a r c e l l p o l a r i t y，P C P）通路：目前這條通路的作用機制尚不完全清楚?，F(xiàn)認為P C P通路主要通過F z受體激活R h o和R a c，使J u n氨基末端激酶（J u n N-t e r m i n a l k i n a s e，J NK）活化，調(diào)節(jié)不同種類細胞的極性和骨架，同時參與細胞增殖、分化和凋亡［9］。（3）Wn t/C a2＋通路：主要通過G蛋白激活磷脂酶C（p h o s p h o l i p a s e C，P L C）、鈣調(diào)蛋白依賴的激酶Ⅱ（c a l m o d u l i n-d e p e n d e n t p r o t e i n k i n a s eⅡ，C a mKⅡ）和蛋白激酶C（p r o t e i n k i n a s e C，P K C）等調(diào)節(jié)細胞內(nèi)C a2＋的釋放。如Wn t 5a與F z受體結(jié)合，使G蛋白解離為ɑ和βγ亞基，ɑ亞基通過激活磷酸二酯酶抑制細胞內(nèi)c GMP的活化，βγ亞基激活P L C，通過信號級聯(lián)反應(yīng)，激活C a mKⅡ、鈣調(diào)磷酸酶和P K C，釋放C a2＋，影響基因表達［10］。近期有實驗表明內(nèi)源性和外源性的Wn t 5a能通過Wn t/C a2＋通路促進微結(jié)構(gòu)鈦表面O B的分化［11］。后兩條通路又稱非經(jīng)典途徑。

1.3 W n t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其抑制劑D KK 1 Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在細胞外受不同的抑制劑調(diào)節(jié)。根據(jù)作用機制分為兩類：第一類包括分泌型卷曲相關(guān)蛋白（s e c r e t e d F r i z z l e d-r e l a t e d p r o t e i n，s F R P）家族、Wn t信號抑制因子-1和C e r b e r u s，通過直接與Wn t結(jié)合，阻止配體與受體結(jié)合，從而抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，其中s F R P家族參與經(jīng)典和非經(jīng)典途徑；第二類是D KK家族，D KK 1能直接與L R P 5/6結(jié)合，促進L R P 5/6受體胞膜內(nèi)吞后從Wn t-F r i z z l e d復(fù)合物脫離，阻止下游信號的傳導(dǎo)；同時D KK 1能與L R P 6和K r e m 2形成復(fù)合物，使L R P 6從膜表面清除，進一步抑制Wn t/β-c a t e n i n通路。而且，D KK 1是β-c a t en i n/T C F下游的靶基因，并受其調(diào)控［12］。Wn t/β-c a t e n i n通路對調(diào)節(jié)地塞米松誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松起關(guān)鍵作用，D KK 1基因表達沉默能解除地塞米松對人原始O B分化的抑制［13］。另外，研究者還發(fā)現(xiàn)D KK 1不但參與了Wn t/β-c a t e n i n通路，在P C P通路中也發(fā)揮著重要作用，MM的瘤細胞可通過J NK信號通路激活氧化應(yīng)激反應(yīng)調(diào)節(jié)D KK 1的表達［14］。

2 MB D的發(fā)病機制

MB D的發(fā)生、發(fā)展是一個多因素、多系統(tǒng)綜合作用的結(jié)果，其關(guān)鍵在于MM細胞激活O C的同時抑制O B活性，最終導(dǎo)致骨代謝失衡。

一直以來人們認為，O C是MB D的主要效應(yīng)細胞，MM細胞以及基質(zhì)細胞分泌的破骨細胞激活因子，如R ANK L、I L-6和巨噬細胞炎性蛋白-1ɑ（m a c r o p h a g e i n f l a mm a t o r y p r o t e i n 1ɑ，M I P-1ɑ）等在MB D發(fā)病機制中起到至關(guān)重要的作用。已知骨代謝的動態(tài)平衡通過R ANK/R ANK L/O P G系統(tǒng)來維持，R ANK L與R ANK結(jié)合后促使O C前體細胞分化成O C而產(chǎn)生溶骨效應(yīng)，同時R ANK L通過細胞N F－κ B和J NK途徑直接活化成熟的O C，促進骨的重吸收。O P G的分泌受抑，導(dǎo)致R ANK L/O P G比值升高，促進O C的分化成熟和持續(xù)激活。還有I L-6和M I P-1ɑ等因子可通過不同的方式或作用環(huán)節(jié)促進溶骨和骨質(zhì)的重吸收［15］。

近年來，越來越多的證據(jù)顯示MM患者O B功能缺陷加劇MB D的病理過程。MM分泌的D KK 1和s F R P-2通過抑制Wn t信號途徑影響O B的分化。而且，外源性的s F R P-2能抑制骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（b o n e m o r p h o g e n e t i c p r o t e i n 2，BMP-2）介導(dǎo)的O B分化，相應(yīng)抗體中和s F R P-2后O B又恢復(fù)礦化結(jié)節(jié)的形成［2］。另外，MM細胞對O B的影響機制還包括：通過干擾早期O B和骨髓基質(zhì)細胞合成溶骨部位的新骨成分，使新骨形成所需的骨鈣蛋白和BMP-2嚴重缺乏，影響成骨；通過F a s配基和腫瘤壞死因子受體細胞凋亡誘導(dǎo)配體直接促進早期O B凋亡［16］。細胞間的接觸上調(diào)I L-6的分泌，下調(diào)O B的O P G mR NA的表達。MM細胞還可以通過與O B的祖細胞相互接觸直接抑制轉(zhuǎn)錄因子RUN X 2/C B F A 1的活性，影響骨生成［3］。

3 D KK 1與骨髓瘤骨病

大量臨床研究證實D KK 1與MM和MB D有一定的相關(guān)性。2003年T i a n等［17］描述了D KK 1基因和蛋白在有溶骨性病變的MM患者漿細胞內(nèi)高表達，循環(huán)中的D KK 1主要來源于MM細胞。MM患者血清和骨髓上清液D KK 1水平明顯高于意義未定的單克隆丙種球蛋白?。╩ o n o c l o n a l g a mm o p a t h y o f u n d e t e r m i n e d s i g n i f i c a n c e，MGU S）患者和對照者，而且D KK 1水平還與骨損害程度和范圍有關(guān)［18－20］。此外，H e i d e r等［21］研究也顯示不論選擇何種治療方式，對治療有反應(yīng)的MM患者血清D KK 1水平明顯低于治療前，而無反應(yīng)的患者治療前后D KK 1水平無明顯變化。近期的研究認為可將血清D KK 1作為診斷MM等多種腫瘤的生物學(xué)標志物［22］。

D KK 1作為Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的抑制劑，不僅使O B的分化和功能受抑，還間接增加O C形成，最終導(dǎo)致骨代謝失衡。Q i a n g等［23］研究發(fā)現(xiàn)重組D KK 1和高水平D KK 1MM患者的血漿能抑制O B Wn t 3a介導(dǎo)的β-c a t e n i n積聚，使β-c a t e n i n自分泌減少，并能抑制BMP-2介導(dǎo)的堿性磷酸酶活性，從而影響前O B的分化。另有實驗證實，重組D KK 1明顯抑制人和小鼠O B Wn t 3a介導(dǎo)的O P G mR NA和蛋白水平的表達；表達D KK 1的MM細胞株或原始MM細胞與O B共培養(yǎng)，也能抑制O B Wn t 3a介導(dǎo)的O P G的表達，從而上調(diào)R ANK L的表達；D KK 1可以通過干擾O B的Wn t信號調(diào)節(jié)和增加R ANK L/O P G的比值，間接增強O C的活性［24］。G u n n等［25］研究顯示M S C培養(yǎng)的條件培養(yǎng)液能促進MM細胞系分泌D KK 1，短期低水平D KK 1可促進M S C s增殖，而長期高水平D KK 1阻止M S C s向O B分化，同時未分化的M S C s產(chǎn)生的I L-6又刺激MM細胞的增殖，由此形成惡性循環(huán)。因此，D KK 1在MB D的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著不容忽視的作用。

P o l i t o u等［26］報道MM經(jīng)自體干細胞移植（a u t o l o g o u s s t e m c e l l t r a n s p l a n t a t i o n，A S C T）后，血清D KK 1持續(xù)下降；骨吸收標志物N T X和T R A C P-5b隨之下降，直至A S C T第3個月恢復(fù)正常；骨形成標志物骨鈣蛋白和骨堿性磷酸酶逐漸增加，到第8個月正常。這些提示D KK 1對O B的功能有抑制作用，A S C T后可恢復(fù)O B功能，借此推測A S C T后隨著O B功能的恢復(fù)，D KK 1的抑制作用也隨之瓦解。W a n g等［27］研究顯示去卵巢大鼠給予D KK 1反義寡核苷酸治療后可解除去卵巢雌激素缺失對股骨重量、礦物質(zhì)含量、骨密度及O C數(shù)量的影響，治療后骨組織中O B數(shù)量和骨小梁增加，O C數(shù)量顯著減少，因此調(diào)控D KK 1可改善雌激素缺乏所致骨量流失。另有實驗還證實重組人D KK 1和高濃度水平D KK 1患者的骨髓上清液在體外可抑制O B前體細胞的分化，這種抑制作用可被抗人D KK 1抗體解除［17］。上述這些研究表明抗D KK 1策略有望成為MB D靶向干預(yù)的新思路。

4 針對D KK 1的靶向治療

目前MB D的治療主要為全身化療、雙磷酸鹽類藥物治療和局部放療等。其中雙磷酸鹽類藥物能有效治療腫瘤細胞誘導(dǎo)的高鈣血癥以及骨質(zhì)疏松，但隨著使用人數(shù)的增加和時間的延長，雙磷酸鹽相關(guān)的頜骨壞死逐漸引起人們的重視，而且雙磷酸鹽也不能完全阻斷疾病進展，迫切需要不斷尋找更為安全有效的治療方法。針對D KK 1的靶向干預(yù)可作為一條潛在的治療策略。

4.1 硼替佐米 是第一個用于臨床的蛋白酶體抑制劑，目前廣泛用于治療初發(fā)、難治或復(fù)發(fā)的MM患者。近年來的研究顯示硼替佐米不僅能殺傷MM細胞，同時對O B具有一定的活化作用。多項臨床研究顯示，MM患者經(jīng)硼替佐米治療后，D KK 1水平較治療前降低，O B的活動標志物水平上升。目前認為硼替佐米可以通過多種作用機制促進新骨形成和抑制骨質(zhì)破壞，D KK 1為其中一個作用靶點。它能直接作用于D KK 1和抑制MM細胞以減少D KK 1和s F R P-2的分泌，恢復(fù)Wn t信號通路功能，促進O B分化，治療MB D［28］。

4.2 D KK 1的中和抗體 Y a c c o b y等［29］建立負載人MM的S C I D-r a b小鼠模型，給予D KK 1中和抗體治療4～6周，小鼠的骨礦物質(zhì)密度明顯提高，組織學(xué)檢查顯示表達骨鈣素的O B數(shù)量增多而表達抗酒石酸酸性磷酸酶的多核O C數(shù)量減少，更重要的是該模型中腫瘤負荷顯著降低。此外，D KK 1中和抗體M a b B 3以劑量依賴方式促進O B分化和鈣質(zhì)沉積，同時抑制O C的分化和陷窩形成功能［30］。

B HQ 880是一種新型的D KK 1單克隆抗體，具有高親和力，能中和人和鼠的D KK 1。H e a t h等［31］在C 57B L/K a L w R i j小鼠體內(nèi)建立MB D的模型，給予D KK 1的中和抗體B HQ 880治療后，骨表面礦化率和骨形成率增加，骨小梁缺失也明顯改善。F u l c i n i t i及同事評估了B HQ 880對MM骨代謝的作用。他們研究發(fā)現(xiàn)B HQ 880在體外促進O B的分化，消除MM細胞對成骨形成的不利影響，減少I L-6的分泌；負載I NA 6MM的S C I D-h u小鼠經(jīng)B HQ 880治療后，O B和骨小梁數(shù)量顯著增加，血清骨鈣素水平上升；該抗體通過干擾骨髓基質(zhì)細胞與MM細胞的黏附和減少I L-6的產(chǎn)生間接抑制MM細胞的生長；另外，B HQ 880能上調(diào)小鼠體內(nèi)的β-c a t e n i n，使骨髓基質(zhì)細胞內(nèi)的N F－κ B的活性降低。這些實驗結(jié)果表明D KK 1的中和抗體B HQ 880能改善骨病和抑制腫瘤生長［32］。

目前，B HQ 880聯(lián)合標準化療和唑來磷酸治療初發(fā)、難治或復(fù)發(fā)MM患者的Ⅰ期/Ⅱ期臨床試驗正在進行中，患者經(jīng)B HQ 880 40m g/k g，每28d靜脈給藥1次治療后，骨形成似乎有所增加，但有待Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗的進一步證實［33］。另有一項單劑量Ⅰ期臨床試驗研究顯示絕經(jīng)后婦女給予B HQ 880后尚無劑量限制毒性反應(yīng)事件的報告［34］。B HQ 880用于高風(fēng)險冒煙型MM以及并發(fā)腎功能不全未經(jīng)治療MM患者的臨床試驗即將開始。

4.3 D KK 1多肽疫苗 Q i a n等［35］針對D KK 1蛋白在大多數(shù)MM患者和細胞株均有表達，而在正常組織中極少表達的特點，合成D KK 1抗原肽-HL A-A＊0201四聚體，并證實其在HL A-A＊0201轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)具有免疫原性。研究者利用D KK 1多肽作用于HL A-A＊0201陽性的供血者和MM患者外周血細胞，產(chǎn)生負載D KK 1多肽的樹突狀細胞；D KK 1特異性T細胞反復(fù)接受負載D KK 1多肽的樹突狀細胞的刺激，可以產(chǎn)生和克隆針對MM的活化的特異性細胞毒T細胞，這些細胞能識別和溶解D KK 1陽性/HL A-A＊0201陽性的MM細胞株，以及來自MM患者HL A-A＊0201陽性的原始腫瘤細胞，而不殺傷其他細胞。這一研究結(jié)果為以D KK 1為基礎(chǔ)的免疫治療提供了直接有力的證據(jù)。

5 展望

MB D的發(fā)病機制復(fù)雜，O C和O B參與的不平衡骨重塑是其關(guān)鍵。既往認為O C是主要效應(yīng)細胞，近年O B在MB D中的作用日益受到重視。其中，D KK 1通過抑制Wn t信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路干擾O B的分化，針對其機制的治療手段可能具有良好前景。

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［14］C o l l a S，Z h a n F，X i o n g W，e t a l.T h e o x i d a t i v e s t r e s s r es p o n s e r e g u l a t e s D KK l e x p r e s s i o n t h r o u g h t h e J NK s i gn a l i n g c a s c a d e i n m u l t i p l e m y e l o m a p l a s m a c e l l s［J］.B l o o d，2007，109（10）：4470-4477.

［15］R a j e N，R o o d m a n G D.A d v a n c e s i n t h e b i o l o g y a n d t r e a tm e n t o f b o n e d i s e a s e i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.C l i n C a n c e r R e s，2011，17（6）：1278-1286.

［16］S i l v e s t r i s F，C i a v a r e l l a S，M a t t e o MD.B o n e-r e s o r b i n g c e l l s i n m u l t i p l e m y e l o m a：o s t e o c l a s t s，m y e l o m a c e l l p o l y k a r y o n s，o r b o t h［J］.O n c o l o g i s t，2009，14（3）：264-275.

［17］T i a n E，Z h a n F，W a l k e r R，e t a l.T h e r o l e o f t h e Wn t-s i gn a l i n g a n t a g o n i s t D KK 1i n t h e d e v e l o p m e n t o f o s t e o l y t i c l e s i o n s i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.N E n g l J M e d，2003，349（26）：2483-2494.

［18］D u n X Y，J i a n g H，H o u J.B o n e m a r r o w p l a s m a c o n c e n t r at i o n s o f D i c k k o p f-1i n p a t i e n t s w i t h m u l t i p l e m y e l o m a［J］.Z h e j i a n g D a X u e X u e B a o Y i X u e B a n，2009，38（5）：453-458.

［19］K a i s e r M，M i e t M，L i e b i s c h P，e t a l.S e r u m c o n c e n t r a t i o n s o f D KK-1c o r r e l a t e w i t h t h e e x t e n t o f b o n e d i s e a s e i n p a-t i e n t s w i t h m u l t i p l e m y e l o m a［J］.E u r J H a e m a t o l，2008，80（6）：490-494.

［20］H a a b e r J，A b i l d g a a r d N，K n u d s e n LM，e t a l.M y e l o m a c e l l e x p r e s s i o n o f 10c a n d i d a t e g e n e s f o r o s t e o l y t i c b o n e d i se a s e.O n l y o v e r e x p r e s s i o n o f D KK 1c o r r e l a t e s w i t h c l i n ic a l b o n e i n v o l v e m e n t a t d i a g n o s i s［J］.B r J H a e m a t o l，2008，140（1）：25-35.

［21］H e i d e r U，K a i s e r M，M i e t h M，e t a l.S e r u m c o n c e n t r a t i o n s o f D KK-1d e c r e a s e i n p a t i e n t s w i t h m u l t i p l e m y e l o m a r es p o n d i n g t o a n t i-m y e l o m a t r e a t m e n t［J］.E u r J H a e m a t o l，2009，82（1）：31-38.

［22］S a t o N，Y a m a b u k i T，T a k a n o A，e t a l.Wn t i n h i b i t o r D i c kk o p f-1a s a t a r g e t f o r p a s s i v e c a n c e r i mm u n o t h e r a p y［J］.C a n c e r R e s，2010，70（13）：5326-5336.

［23］Q i a n g YW，B a r l o g i e B，R u d i k o f f S，e t a l.D k k 1-i n d u c e d i nh i b i t i o n o f Wn t s i g n a l i n g i n o s t e o b l a s t d i f f e r e n t i a t i o n i s t h e u n d e r l y i n g m e c h a n i s m o f b o n e l o s s i n m u l t i p l e m y e l om a［J］.B o n e，2008，42（4）：669-680.

［24］Q i a n g YW，C h e n Y，S t e p h e n s O，e t a l.M y e l o m a-d e r i v e d D i c k k o p f-1d i s r u p t s Wn t-r e g u l a t e d o s t e o p r o t e g e r i n a n d R ANK L p r o d u c t i o n b y o s t e o b l a s t s：ap o t e n t i a l m e c h a n i s m u n d e r l y i n g o s t e o l y t i c b o n e l e s i o n s i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.B l o o d，2008，112（1）：196-207.

［25］G u n n WG，C o n l e y A，D e i n i n g e r L，e t a l.A c r o s s t a l k b et w e e n m y e l o m a c e l l s a n d m a r r o w s t r o m a l c e l l s s t i m u l a t e s p r o d u c t i o n o f D KK 1a n d i n t e r l e u k i n-6：ap o t e n t i a l r o l e i n t h e d e v e l o p m e n t o f l y t i c b o n e d i s e a s e a n d t u m o r p r o g r e ss i o n i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.S t e m C e l l s，2006，24（4）：986-991.

［26］P o l i t o u MC，H e a t h D J，R a h e m t u l l a A，e t a l.S e r u m c o nc e n t r a t i o n s o f D i c k k o p f-1p r o t e i n a r e i n c r e a s e d i n p a t i e n t s w i t h m u l t i p l e m y e l o m a a n d r e d u c e d a f t e r a u t o l o g o u s s t e m c e l l t r a n s p l a n t a t i o n［J］.I n t J C a n c e r，2006，119（7）：1728-1731.

［27］W a n g F S，K o J Y，L i n C L，e t a l.K n o c k i n g d o w n D i c k k o p f-1a l l e v i a t e s e s t r o g e n d e f i c i e n c y i n d u c t i o n o f b o n e l o s s：a h i s t o m o r p h o l o g i c a l s t u d y i n o v a r i e c t o m i z e d r a t s［J］.B o n e，2007，40（2）：485-492.

［28］T e r p o s E，S e z e r O，C r o u c h e r P.M y e l o m a b o n e d i s e a s e a n d p r o t e a s o m e i n h i b i t i o n t h e r a p i e s［J］.B l o o d，2007，110（4）：1098-1104.

［29］Y a c c o b y S，L i n g W，Z h a n F，e t a l.A n t i b o d y-b a s e d i n h i b it i o n o f D KK 1s u p p r e s s e s t u m o r-i n d u c e d b o n e r e s o r p t i o n a n d m u l t i p l e m y e l o m a g r o w t h i n v i v o［J］.B l o o d，2007，109（5）：2106-2111.

［30］P o z z i S，H u a Y，V a l l e t S，e t a l.P r o m o t i n g o s t e o b l a s t o g e ne s i s u s i n g a n o v e l D k k-1n e u t r a l i z i n g a n t i b o d y i n t h e t r e a t m e n t o f m u l t i p l e m y e l o m a r e l a t e d b o n e d i s e a s e［J］.B l o o d，2008，112（11）：2739-2741.

［31］H e a t h D J，C h a n t r y A D，B u c k l e CH，e t a l.I n h i b i t i n g D i c kk o p f-1（D k k 1）r e m o v e s s u p p r e s s i o n o f b o n e f o r m a t i o n a n d p r e v e n t s t h e d e v e l o p m e n t o f o s t e o l y t i c b o n e d i s e a s e i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.J B o n e M i n e r R e s，2009，24（3）：425-436.

［32］F u l c i n i t i M，T a s s o n e P，H i d e s h i m a T，e t a l.A n t i-D KK 1mA b（B HQ 880）a s a p o t e n t i a l t h e r a p e u t i c f o r m u l t i p l e m y e l o m a［J］.B l o o d，2009，114（2）：371-379.

［33］T e r p o s E，M o u l o p o u l o s L A，D i m o p o u l o s MA.A d v a n c e s i n i m a g i n g a n d t h e m a n a g e m e n t o f m y e l o m a b o n e d i s e a s e［J］.J C l i n O n c o l，2011，29（14）：1907-1915.

［34］G a v r i a t o p o u l o u M，D i m o p o u l o s MA，C h r i s t o u l a s D，e t a l.D i c k k o p f-1：a s u i t a b l e t a r g e t f o r t h e m a n a g e m e n t o f m y e-l o m a b o n e d i s e a s e［J］.E x p e r t O p i n T h e r T a r g e t，2009，13（7）：839-848.

［35］Q i a n J，X i e J，H o n g S，e t a l.D i c k k o p f-1（D KK 1）i s a w i d e l y e x p r e s s e d a n d p o t e n t t u m o r-a s s o c i a t e d a n t i g e n i n m u l t i p l e m y e l o m a［J］.B l o o d，2007，110（5）：1587-1594.