不同品種獼猴桃總酚含量與清除自由基能力相關(guān)性研究

任曉婷，張生萬，李美萍，郭彩霞

(山西大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山西 太原 030006)

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不同品種獼猴桃總酚含量與清除自由基能力相關(guān)性研究

任曉婷，張生萬，李美萍，郭彩霞*

(山西大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山西 太原 030006)

摘要：比較10個不同品種獼猴桃總酚含量及其清除自由基能力的差異，分別對其獼猴桃皮和果肉中的總酚含量及DPPH自由基清除能力進(jìn)行測定,旨在分析得到總酚含量與清除自由基能力之間的相關(guān)性。結(jié)果顯示：10個品種獼猴桃皮總酚含量約是果肉總酚含量的8～16倍,而獼猴桃皮總酚提取液清除自由基能力高于果肉，獼猴桃皮DPPH自由基清除最強(qiáng)的是黃金果，最弱的是海沃德，并且總酚含量與其抗氧化能力相關(guān)系數(shù)為r=0.78，獼猴桃果肉DPPH自由基清除能力最強(qiáng)的是金魁，最弱的是海沃德，并且總酚含量與其抗氧化能力相關(guān)系數(shù)為r=0.85。獼猴桃的抗氧化活性與所含酚類物質(zhì)關(guān)系密切。

關(guān)鍵詞：獼猴桃；總酚；清除自由基能力

獼猴桃(Kiwi fruit)，又名羊桃、毛梨、藤梨等，屬于獼猴桃科(Actinidiaceae) 獼猴桃屬(ActinidiaLindl)多年生藤本植物[1]。獼猴桃富含維生素C、糖、酸和多酚類物質(zhì)，此外還含有多種礦物質(zhì)、有機(jī)酸、氨基酸等[2，3]。獼猴桃具有抗氧化、抗疲勞、降血脂、降血壓等保健功能，深受廣大消費(fèi)者的喜愛[4～6]。

目前，對獼猴桃中多酚及其抗氧化的研究，大多集中于對單一品種或單一部位的研究。楊丹等[7]研究了紅陽獼猴桃酚類抗氧化活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)紅陽獼猴桃果肉中酚類物質(zhì)具有抗氧化、清除自由基的作用，并且多酚物質(zhì)對DPPH清除率與含量呈正相關(guān)。王華等[8]研究了美味獼猴桃果肉中的多酚，同時測定了抗氧化活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)獼猴桃提取物中多酚與清除DPPH自由基呈現(xiàn)出極顯著的相關(guān)性。趙金梅等[9]研究了不同品種獼猴桃中總酚含量及其抗氧化活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)獼猴桃總酚與清除DPPH自由基能力顯著相關(guān)。杜國榮等[10]研究了不同品種獼猴桃果實的抗氧化能力并且對影響其主要抗氧化物質(zhì)成份進(jìn)行分析比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)總酚含量與其抗氧化能力之間呈顯著相關(guān)性。大量研究表明獼猴桃多酚含量與抗氧化活性具有一定的相關(guān)性，并且多酚含量及其抗氧化活性與獼猴桃品種有關(guān)，但是關(guān)于獼猴桃的不同部位中總酚含量及其抗氧化活性比較鮮有報道。因此，本試驗通過比較不同品種獼猴桃皮和果肉總酚含量，考察其DPPH自由基清除能力，分析獼猴桃皮和果肉DPPH自由基清除能力與總酚之間的相關(guān)性，為不同品種獼猴桃進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

10個品種獼猴桃，分別為：華優(yōu)、黃金果、金艷、海沃德、紅陽、秦美、徐香、啞特、翠玉、金魁，采自陜西省周至縣、眉縣等獼猴桃生產(chǎn)基地，均為10月果實成熟時。其中，徐香、秦美、啞特、金魁、海沃德所屬種為美味獼猴桃，其余的所屬種為中華獼猴桃。

沒食子酸，天津市光復(fù)精細(xì)研究所; 福林酚，北京索萊寶科技有限公司; 無水乙醇; 無水碳酸鈉;DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)，美國Sigma公司; Trolox (6-hydroxyl-2,5,7,8-tetramethy lcroman-2-carboxylic acid)，美國Sigma公司。

1.2儀器設(shè)備

JYL-C012九陽多功能榨汁機(jī)，九陽股份有限公司；SB25-12DTDN超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵，鄭州予華儀器制造有限公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；UV-2550紫外分光光度計，日本島津。

1.3實驗方法

1.3.1總酚的提取

將獼猴桃皮、果肉各稱重5.0 g放在燒杯中，加入80 mL 60%乙醇，超聲時間25 min，超聲功率360 W，溫度50 ℃。重復(fù)3次，合并提取液，抽濾，用5 mL 60%乙醇淋洗濾紙。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)到15 mL時，用蒸餾水定容至25 mL。獼猴桃皮、果肉按上述操作提取3次得總酚提取液。

1.3.2總酚含量的測定

總酚含量的測定采用福林酚法[11]。配制20%飽和碳酸鈉溶液和5 g·L-1的沒食子酸溶液，稱取0.250 0 g 沒食子酸，用無水乙醇溶解定容至50 mL。分別移取0，0.5，1.5，2.5，5.0，8.0 mL至50 mL 容量瓶中，用蒸餾水定容。這些溶液可以分別表示為質(zhì)量濃度為0，50，150，250，500，800 mg·L-1的沒食子酸溶液。從上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別移取50 μL加入到10mL具塞試管中，加入稀釋2倍的2.5 mL福林酚試劑，混合；再分別加入3.95 mL去離子水，混合；在0.5～8 min內(nèi)，加上0.75 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的碳酸鈉溶液，混合，定容。將上述標(biāo)準(zhǔn)溶液在20 ℃下放置2 h后，在765 nm波長下測定吸光值，平行測定3組，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣液同樣以上述方法測定依據(jù)方程得出樣液中沒食子酸的濃度。結(jié)果以每100 g沒食子酸含有的總酚表示。

其中，C為沒食子酸質(zhì)量濃度/mg·L-1；V為提取液體積/mL；N為稀釋倍數(shù)；M為取樣量/mL。

1.3.3DPPH自由基的清除率測定

吸取待測樣品、標(biāo)品各50 μL，加入稀釋后的25 mg·L-1DPPH 工作液4.0 mL，漩渦振蕩混勻，避光反應(yīng)20 min，以無水乙醇做空白對照，在517 nm 下測吸光度。以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線[12]。

其中，A1為50 μL待測液、標(biāo)品+4.0 mLDPPH工作液時的吸光度，A2為50 μL待測液、標(biāo)品+4.0 mL無水乙醇時的吸光度，A3為50 μL無水乙醇+4.0 mL DPPH工作液時的吸光度。

1.4統(tǒng)計分析

所得數(shù)據(jù)用Excel和SPSS 15.0統(tǒng)計軟件處理，并進(jìn)行相關(guān)性分析。

2結(jié)果與分析

2.1不同品種獼猴桃皮和果肉總酚含量

從圖1可以看出，10個品種獼猴桃皮中總酚含量變化范圍為866.87～1 297.53 mg·100g-1,含量由大到小依次為華優(yōu)>金魁>徐香>黃金果>金艷>紅陽>秦美>啞特>翠玉>海沃德。10個品種獼猴桃皮總酚含量差異顯著(P<0.05)，其中，華優(yōu)極顯著高于黃金果、紅陽、秦美、翠玉、金艷、海沃德，啞特，海沃德極顯著低于華優(yōu)、金魁、黃金果、紅陽、金艷、秦美、徐香，顯著高于啞特。

圖1　不同品種獼猴桃皮中總酚含量Fig.1　Different varieties of kiwi fruit peel total phenol content

從圖2可以看出，10個品種獼猴桃果肉中總酚含量變化范圍為52.88～161.38 mg·100g-1，含量由大到小依次為華優(yōu)>啞特>金魁>秦美>翠玉>黃金果>紅陽>徐香>金艷>海沃德。10個品種獼猴桃果肉總酚含量差異顯著(P<0.05)，其中，華優(yōu)極顯著高于其余9個品種，海沃德極顯著低于金魁、啞特、華優(yōu)、黃金果、秦美、翠玉、紅陽。

圖2　不同品種獼猴桃果肉中總酚含量Fig.2　Different varieties of kiwi fruit flesh total phenol content

2.2獼猴桃皮和果肉總酚提取液清除DPPH自由基能力

由表1可知，10個品種獼猴桃皮DPPH自由基清除能力之間差異顯著(P<0.05)。設(shè)定獼猴桃皮濃度為40 g·L-1,則獼猴桃皮DPPH自由基清除率變化范圍為47.13%～75.04%，根據(jù)DPPH自由基清除率的標(biāo)準(zhǔn)曲線得出抗氧化能力，DPPH自由基清除率抗氧化能力變化范圍2 403.12～4 560.52 μmol·100 g-1，其中DPPH自由基清除最強(qiáng)的是黃金果，最弱的是海沃德，獼猴桃皮DPPH自由基清除能力和抗氧化能力由大到小為黃金果>華優(yōu)>金艷>紅陽>金魁>秦美>徐香>啞特>翠玉>海沃德。

表1　不同品種獼猴桃皮和果肉總酚提取液清除DPPH自由基能力

注：同列不同小寫字母表示在0.05 水平上存在顯著差異。

Note: Values with different letters in common in each column are significantly different (P<0.05).

由表1可知，10個品種獼猴桃果肉DPPH自由基清除能力之間差異顯著(P<0.05)。獼猴桃果肉中DPPH自由基清除率變化范圍為16.44%～59.02%，DPPH自由基的抗氧化能力變化范圍為35.47～566.96 μmol·100 g-1，其中DPPH自由基清除能力最強(qiáng)的是金魁和華優(yōu)，最弱的是海沃德，獼猴桃果肉DPPH自由基清除能力由大到小為金魁>華優(yōu)>啞特>黃金果>秦美>金艷>翠玉>紅陽>徐香>海沃德。

2.3總酚含量與清除自由基能力相關(guān)性分析

獼猴桃皮和果肉的總酚含量與各自的DPPH自由基清除率呈一定相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為0.78、0.85。說明獼猴桃不同部位的總酚含量與清除自由基能力有極顯著的相關(guān)性。

3討論與結(jié)論

多酚類物質(zhì)是水果、蔬菜和谷物中含有的一類重要抗氧化活性成分，而其抗氧化活性成分大部分來自于酚酸和黃酮類物質(zhì)[13]，并且由于它們的基因和生長環(huán)境差異都會使所含有的酚類物質(zhì)的組成、含量和活性成分不盡相同[14]。本研究結(jié)果表明，不同品種獼猴桃皮之間的總酚含量變化范圍介于866.87～1 297.53 mg·100g-1，平均含量為1 086.80 mg·100g-1，獼猴桃果肉總酚含量變化范圍介于52.88～161.38 mg·100 g-1，平均含量為92.08 mg·100 g-1，高于趙金梅等[9]測定不同品種獼猴桃果實的總酚含量總多酚含量的變化范圍(63.71～152.46 mg·100 g-1)，這可能與地域、基因型和農(nóng)藝條件有關(guān)。

不同品種獼猴桃皮和果肉之間的抗氧化活性存在差異，這可能與獼猴桃皮和果肉中酚類物質(zhì)的成份結(jié)構(gòu)及其含量有著重大的關(guān)系，當(dāng)酚類化合物的羥基數(shù)目增多，其抗氧化活性就越強(qiáng)[15]。Kalt等[16]研究了4種莓類水果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)花色苷含量和總酚與其總抗氧化能力呈顯著相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.83和0.90，同時認(rèn)為不同品種水果的總抗氧化能力不同。Meyer等[17]研究發(fā)現(xiàn)了葡萄的總酚含量與其抗氧化活性之間的相關(guān)系數(shù)為0.89。陳玉霞等[18]分析比較了天津地區(qū)常見25種蔬菜的抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)抗氧化活性與總多酚含量之間相關(guān)性較大。本研究采用清除DPPH自由基能力說明研究獼猴桃皮和果肉的抗氧化活性。發(fā)現(xiàn)獼猴桃皮總酚含量與DPPH清除率相關(guān)性顯著(r=0.78,P<0.05)，獼猴桃果肉總酚含量與DPPH 清除率相關(guān)性顯著(r=0.85,P<0.05)，表明獼猴桃皮和果肉中多酚類物質(zhì)與其抗氧化活性之間的關(guān)系密切，說明總酚是獼猴桃抗氧化過程中的一個非常重要的物質(zhì)。

綜上，獼猴桃皮中總酚含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于果肉，獼猴桃皮總酚提取液清除DPPH自由基的能力高于果肉總酚提取液，且總酚含量與清除自由基能力呈顯著正相關(guān)。

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(編輯：馬榮博)

The correlation study between total phenolic content of different varieties kiwi fruit and the ability of scavenging free radical

Ren Xiaoting, Zhang Shengwan, Li Meiping, Guo Caixia*

(CollegeofLifeScience,ShanxiUniversity,Taiyuan030006,China)

Abstract:Comparing the total phenol content and ability of scavenging free radical of 10 different varieties of kiwi fruit, the kiwi fruit peel and flesh total phenolic content and DPPH free radical scavenging ability was measured, analysed the correlation between the total phenol content and scavenging free radical capacity. . Results showed: 10 varieties of kiwi fruit peel total phenol content was about 8～16 times to kiwi flesh total phenol content, while the scavenging free radical ability of kiwi fruit peel total phenol extract solution was higher than the flesh, the strongest radical scavenging of kiwi fruit peel DPPH was Huangjinguo, Hayward was the weakest, total phenolic content and its antioxidant capacity correlation coefficient was r=0.78.The strongest radical scavenging of kiwi fruit flesh DPPH was Jinkui, Hayward was the weakest, total phenolic content and its antioxidant capacity correlation coefficient was r=0.85.Finally, the antioxidant activity of the kiwi fruit was closely related to the phenolic compounds.

Key words:Kiwi fruit; Total phenols;The ability of scavenging free radical

中圖分類號：TS201.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1671-8151(2016)05-0341-04

作者簡介：任曉婷(1990-)，女(漢)，山西孝義人，碩士研究生，研究方向：食品化學(xué)與分析*通訊作者：郭彩霞，講師，博士，Tel：0351-7010599 ；E-mail：guocx@sxu.edu.cn

收稿日期：2016-01-13 修回日期：2016-03-01

基金項目：山西省自然科學(xué)基金(2015021139)