MUC1與E-cadherin在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義

王　靜，楊永秀，畢學(xué)漢（蘭州大學(xué)第一醫(yī)院，甘肅蘭州730000）

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MUC1與E-cadherin在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義

王靜，楊永秀，畢學(xué)漢
（蘭州大學(xué)第一醫(yī)院，甘肅蘭州730000）

摘要：目的檢測黏蛋白1（MUC1）與E-鈣黏素（E-cadherin）在子宮內(nèi)膜癌及其癌前病變中的表達(dá)，探討它們與子宮內(nèi)膜癌臨床特征的關(guān)系及MUC1與E-cadherin的相關(guān)性。方法用免疫組化SP法檢測10例正常子宮內(nèi)膜組織、15例非典型增生子宮內(nèi)膜組織和35例子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1及E-cadherin的表達(dá)情況，并分析其與臨床特征的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。結(jié)果在NE、AHE及CE中，MUC1、E-cadherin的異常表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1的異常表達(dá)在G1期顯著低于G2/G3期（P＜0．05），在臨床分期、肌層浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上各組間呈上升趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）；E-cadherin異常表達(dá)與組織分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。MUC1 與E-cadherin在子宮內(nèi)膜癌中的異常表達(dá)有相關(guān)性（P＜0．05）。結(jié)論MUC1、E-cadherin在NE、AHE及CE中均有異常表達(dá)，MUC1異常表達(dá)與組織學(xué)分級有關(guān)，E-cadherin的異常表達(dá)與組織學(xué)分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，兩者在子宮內(nèi)膜組織中的異常表達(dá)呈正相關(guān)。

關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜癌；MUC1；E-cadherin

子宮內(nèi)膜癌（CE）是女性生殖器官常見的惡性腫瘤，占女性生殖道腫瘤的20%～30%。早期子宮內(nèi)膜癌患者的5年存活率可達(dá)93%，5年總生存率可達(dá)98%［1-2］。黏蛋白（MUC1）在腫瘤組織中多出現(xiàn)異常表達(dá)，與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。上皮細(xì)胞鈣黏素（E-cadherin）在腫瘤形成、侵襲、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)過程中起著至關(guān)重要的作用。本研究檢測正常子宮內(nèi)膜組織、非典型增生子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1及E-cadherin的表達(dá)，探討二者的關(guān)系及機(jī)制，現(xiàn)介紹如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2004—2007年在蘭州大學(xué)第一醫(yī)院門診或住院部接受檢查、治療的患者60例。其中正常子宮內(nèi)膜（NE）組織10例，取自非子宮內(nèi)膜病變行全子宮切除術(shù)者（多數(shù)為子宮肌瘤患者），年齡33～49歲，平均年齡42．35歲；非典型增生子宮內(nèi)膜（AHE）組織15例，取自診斷性刮宮術(shù)者，年齡38～51歲，平均年齡44．00歲；子宮內(nèi)膜癌（CE）組織35例，取自子宮內(nèi)膜癌患者，年齡33～68歲，平均年齡53．47歲。

35例子宮內(nèi)膜癌患者根據(jù)1988年的國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期：Ⅰ期26例，Ⅱ期6例，Ⅲ期2例，Ⅳ期1例；按細(xì)胞分化程度分為G1期21例，G2期11例，G3期3例；肌層浸潤≤50% 23例，＞50% 12例；25例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，10例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

取新鮮組織用10%甲醛固定，石蠟包埋，以備免疫組化檢測。應(yīng)用免疫組化SP法檢測10例正常子宮內(nèi)膜組織、15例非典型增生子宮內(nèi)膜組織和35例子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1及E-cadherin的表達(dá)。

1.2.1試劑鼠抗人MUC1單克隆抗體（購自北京中杉金橋生物工程有限公司）；鼠抗人E-cadherin單克隆抗體、SP免疫組化染色試劑盒（購自福州邁新生物工程有限公司）。10 mM檸檬酸緩沖液、二甲苯、梯度酒精、蘇木素由蘭州大學(xué)第一醫(yī)院病理科提供。

1.2.2結(jié)果判定MUC1結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：MUC1陽性表達(dá)為深棕色及棕黃色連續(xù)線樣或片狀，主要位于腺上皮細(xì)胞的近管腔側(cè)、胞膜或胞質(zhì)內(nèi)。子宮內(nèi)膜組織中MUC1表達(dá)強(qiáng)度分級：陽性細(xì)胞數(shù)＜10%（-），10%～30%為陽性表達(dá)（+），31%～50%為中度表達(dá)（++），＞50%為強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）。本實(shí)驗(yàn)中異常表達(dá)為中度表達(dá)及以上者，即（++）至（+++）為異常表達(dá)。

E-cadherin結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：陽性：呈保留細(xì)胞膜表達(dá)，組織細(xì)胞染色強(qiáng)度均與正常組織相同；異質(zhì)性表達(dá)：細(xì)胞染色強(qiáng)度不一，陽性細(xì)胞和陰性細(xì)胞反應(yīng)混雜存在，細(xì)胞漿和/或細(xì)胞核染色；陰性：細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。陽性為正常表達(dá)，陰性及異質(zhì)性表達(dá)均視為異常表達(dá)。

1.3數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS11．0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用χ2檢驗(yàn)和Fisher確切概率法估計(jì)MUC1及E-cadherin在不同組織標(biāo)本之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，用Spearman等級相關(guān)分析方法進(jìn)行兩者的相關(guān)性研究。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1MUC1在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

MUC1在子宮內(nèi)膜組織中主要表達(dá)于腺上皮的頂端及細(xì)胞膜和/或胞漿中。在正常子宮內(nèi)膜、非典型增生子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1的異常表達(dá)率比較，存在顯著性差異（P＜0．05），見表1、圖1～3。

表1　MUC1在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

圖1　MUC1在正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)（SP法×200）

圖2　MUC1在非典型增生子宮內(nèi)膜中的表達(dá)（SP法×400）

圖3　MUC1在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)（SP法×400）

2.2MUC1的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1的異常表達(dá)在臨床分期、肌層浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上各組間均呈上升趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），在組織分級中的異常表達(dá)率G1期為57．14%，顯著低于G2/G3期的92．86%（P＜0．05），見表2。

表2　MUC1的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

2.3E-cadherin在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

E-cadherin在10例正常子宮內(nèi)膜組織中，90%的內(nèi)膜組織可見細(xì)胞膜呈棕黃色染色，無胞漿及胞核染色；在非典型增生子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌組織中表現(xiàn)為細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞漿均為陰性表達(dá)，細(xì)胞漿呈陽性染色，異質(zhì)性表達(dá)，或部分細(xì)胞染色的同時有部分保留了細(xì)胞膜的表達(dá)。在NE、AHE及CE中，E-cadherin的異常表達(dá)率比較，存在顯著性差異（P=0．003），見表3、圖4～6。

表3　E-cadherin在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

圖4　E-cadherin在正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)（SP法×400）

圖5　E-cadherin在非典型增生子宮內(nèi)膜中的表達(dá)（SP法×400）

圖6　E-cadherin在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)（SP法×400）

2.4E-cadherin的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

子宮內(nèi)膜癌組織中E-cadherin的異常表達(dá)在組織分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上各組間均呈上升趨勢（P＜0．05），而肌層浸潤兩組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），見表4。

表4　E-cadherin的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

2.5MUC1與E-cadherin在子宮內(nèi)膜組織中異常表達(dá)的相關(guān)性

調(diào)查顯示：在32例E-cadherin表達(dá)異常的子宮內(nèi)膜組織中，有22例MUC1的表達(dá)異常，占68．75%（22/32）；28例E-cadherin表達(dá)正常的子宮內(nèi)膜組織中，有9例MUC1的表達(dá)異常，占32．14%（9/28），兩者在子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)有相關(guān)性（P＜0．05），見表5。

表5　MUC1與E-cadherin在子宮內(nèi)膜組織中異常表達(dá)的關(guān)系

3　討論

黏蛋白在上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化中，表達(dá)水平發(fā)生上調(diào)，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與預(yù)后相關(guān)［3］。MUC1是一種人類腫瘤相關(guān)黏蛋白，廣泛分布于機(jī)體各種正常黏膜表面。在多種腫瘤中，MUC1多為異常表達(dá)［4］，已證實(shí)MUC1的表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤的惡性程度呈正相關(guān)。MUC1可誘導(dǎo)活化T細(xì)胞的凋亡，削弱宿主對腫瘤細(xì)胞的免疫抑制。在腫瘤中，胞漿尾恒定序列發(fā)生磷酸化改變，通過影響信號轉(zhuǎn)導(dǎo)影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展，MUC1充當(dāng)抗黏附分子，促進(jìn)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在正常子宮內(nèi)膜、非典型增生子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌組織中，MUC1的異常表達(dá)呈上升趨勢，其中前兩者與第三者之間比較，存在顯著性差異（P＜0．05），提示子宮內(nèi)膜癌組織中MUC1為異常表達(dá)，細(xì)胞膜表達(dá)增強(qiáng)、細(xì)胞漿表達(dá)及部分表達(dá)缺失，而在癌前病變組中這種變化不顯著。高分化子宮內(nèi)膜癌中，MUC1的異常表達(dá)與中/低分化相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），說明MUC1的異常表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的分化程度有關(guān)，隨著細(xì)胞分化程度的降低，MUC1的表達(dá)逐漸增強(qiáng)。MUC1的異常表達(dá)在臨床分期、肌層浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上各組間呈上升趨勢，但無顯著性差異（P＞0．05）。

E-cadherin是鈣依賴型細(xì)胞黏附分子，屬于上皮細(xì)胞間黏合及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能單元的重要組成分子，主要介導(dǎo)同型細(xì)胞間的黏附，并維持上皮細(xì)胞的形態(tài)，低表達(dá)或缺失使腫瘤細(xì)胞喪失接觸抑制，可導(dǎo)致細(xì)胞無限制增殖，失去分化，細(xì)胞黏附作用減弱，使腫瘤細(xì)胞發(fā)生浸潤及轉(zhuǎn)移。在胃癌［5］、非小細(xì)胞肺癌［6］、泌尿系移行上皮癌［7］、腎癌［8］、前列腺癌［9-10］等惡性腫瘤的研究中均顯示E-cadherin與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，從正常子宮內(nèi)膜、非典型增生子宮內(nèi)膜到子宮內(nèi)膜癌組織，E-cadherin的異常表達(dá)率逐漸增高（P＜0．05），且子宮內(nèi)膜癌組織中E-cadherin的異常表達(dá)在組織分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上各組間均呈上升趨勢（P＜0．05），說明隨著FIGO分期的進(jìn)展、細(xì)胞分化程度的降低以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生，E-cadherin的異常表達(dá)增高。

對兩者相關(guān)性分析顯示：在32例E-cadherin表達(dá)異常的子宮內(nèi)膜組織中，有22例MUC1的表達(dá)異常，占68．75%（22/ 32），28例E-cadherin表達(dá)正常的子宮內(nèi)膜組織中有9例MUC1的表達(dá)異常，占32．14%（9/28）。說明MUC1在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)的上調(diào)，可能通過伸展結(jié)構(gòu)干擾細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用，也可能阻礙膜表面固定的配體與受體的相互作用，降低胞外基質(zhì)內(nèi)整合素介導(dǎo)的細(xì)胞間相互作用，使腫瘤細(xì)胞易于侵襲；MUC1可能導(dǎo)致E-cadherin在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)下調(diào)，使其不能與細(xì)胞漿內(nèi)的catenin形成完整復(fù)合物，導(dǎo)致細(xì)胞間連接松散，發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移。

綜上所述，MUC1、E-cadherin與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，是能夠較好反映子宮內(nèi)膜惡性程度的腫瘤生物學(xué)標(biāo)志物，聯(lián)合檢測兩者，對評價子宮內(nèi)膜癌惡性程度及預(yù)后有重要意義。

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基金項(xiàng)目：“中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金”自由探索項(xiàng)目（lzujbky-2012-195）

中圖分類號：R195

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1671-1246（2016）08-0085-04