腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合TCT與HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變中的臨床意義

李　瑛

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西 咸陽(yáng) 712000)

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臨床檢驗(yàn)

腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合TCT與HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變中的臨床意義

李瑛

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西 咸陽(yáng) 712000)

[摘要]目的探討腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)及聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)(TCT)與HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變?cè)\斷中的臨床價(jià)值。方法化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)50例子宮頸上皮內(nèi)瘤變患者(A組)、30例子宮頸癌患者(B組)及50例健康體檢者(C組)血清中SCCA、CA15-3、CA125與細(xì)胞角質(zhì)19片段(CYFRA21-1)水平，HPV PCR反向點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)各組HPV基因亞型，同時(shí)對(duì)各組患者行TCT檢查，以病理活檢診斷為金標(biāo)準(zhǔn)。用受試者工作特征(ROC)曲線分析各腫瘤標(biāo)志物對(duì)宮頸癌診斷價(jià)值，并分析聯(lián)合TCT與HPV DNA檢測(cè)的臨床價(jià)值。結(jié)果與C組相比，B組血清中SCCA、CA15-3、CA125及CYFRA21-1含量均顯著升高(P均<0.05)。與其他各單項(xiàng)檢測(cè)相比，HPV單獨(dú)檢測(cè)陽(yáng)性率最高(P<0.05)，聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率較各項(xiàng)檢測(cè)明顯提高(P<0.01)。聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積為0.935，敏感性為90.00%，與各單項(xiàng)檢測(cè)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。結(jié)論腫瘤標(biāo)志物SCCA、CA15-3、CA125、CYFRA21-1對(duì)宮頸癌的早期診斷有重要價(jià)值，聯(lián)合TCT與HPV DNA檢測(cè)能有效提高檢出率。

[關(guān)鍵詞]宮頸癌；腫瘤標(biāo)志物；薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)；HPV DNA；聯(lián)合檢測(cè)

宮頸癌是發(fā)病率僅次于乳腺癌的婦科惡性腫瘤，該病早期臨床癥狀并不典型，臨床易發(fā)生漏誤診，且近年來(lái)該病發(fā)病率不斷上升，嚴(yán)重威脅著患者健康[1]。早期病變的發(fā)現(xiàn)與及時(shí)治療可有效預(yù)防宮頸癌[2]。目前，血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)輔助診斷宮頸癌的應(yīng)用日益增多[3-4]，但其對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值少有研究。本文探討了血清腫瘤標(biāo)志物及聯(lián)合TCT與HPV-DNA檢測(cè)對(duì)提高篩查準(zhǔn)確性的價(jià)值，探討其在宮頸癌及癌前病變?cè)\斷中的臨床價(jià)值。

1臨床資料

1.1一般資料本研究所有研究對(duì)象來(lái)自2013年1月—2014年7月在本院婦科就診患者，A組為經(jīng)病理活檢確診的子宮頸上皮內(nèi)瘤變患者50例，年齡(38.86±7.58)歲。B組為同期收治的子宮頸癌患者30例，年齡(39.56±9.78)歲。C組為同期體檢并被證實(shí)為健康的女性50例，年齡(35.42±6.35)歲。3組的基準(zhǔn)資料相似，具有可比性。

1.2主要儀器與試劑雅培全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀、MCT-Ⅱ型液基薄層細(xì)胞制片分析系統(tǒng)(陜西高源)、HPV基因分型檢測(cè)試劑盒(中山達(dá)安)、德國(guó)Biometra系列定性PCR基因擴(kuò)增儀、DA24-2型電熱恒溫水浴槽(上海精宏)、K30B型干式恒溫器(杭州奧盛)、Bioaer AG0410062型生物安全柜(廣州達(dá)安)、TG16-WS型臺(tái)式離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀)。

1.3研究方法

1.3.1SCCA、CA15-3與CA125水平檢測(cè)3組均空腹抽取靜脈血3 mL，4 000 r/min離心3 min分離血清，嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為: SCCA≥1.50 ng/mL，CA15-3≥ 31.30 IU/mL，CA125≥35.00 IU/mL，CYFRA21-1≥2.08 ng/mL。

1.3.2HPV DNA基因分型檢測(cè)HPV DNA的提取、擴(kuò)增、雜交、洗膜及顯色等各過(guò)程嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)和儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。每批實(shí)驗(yàn)均同時(shí)設(shè)HPV16陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效條件為結(jié)果在控且“顯色探針”與“Globin”位點(diǎn)均顯色。

1.3.3TCT檢測(cè)使用專用取樣刷于宮頸管鱗柱交界部位可疑病變區(qū)域采集標(biāo)本，將標(biāo)本置于專用保存液中并及時(shí)檢測(cè)，巴氏染色后結(jié)果判讀參考國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)推薦的TBS分級(jí)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.4宮頸病理活檢由婦科醫(yī)師進(jìn)行陰道鏡檢測(cè)，對(duì)宮頸可疑部位進(jìn)行多點(diǎn)取材，如無(wú)異常則取3，6，9，12點(diǎn)處，將標(biāo)本用甲醛固定并及時(shí)送檢，所有閱片診斷結(jié)果均由2位高年資病理醫(yī)師共同審議。活檢異常結(jié)果分為輕度子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ)、中度子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅡ)、重度子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅢ)和宮頸癌。

2結(jié)果

2.1各組血清腫瘤標(biāo)志物含量比較B組血清中SCCA、CA15-3、CA125與CYFRA21-1水平均較C組顯著升高(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　各組血清中腫瘤標(biāo)志物水平比較±s)

注：①與C組比較,P<0.05。

2.2各項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性率比較HPV檢測(cè)較其他各單項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性率顯著提高(P均<0.05)，聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率較各單項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性率顯著提高(P均<0.01)。見(jiàn)表2。

2.3各項(xiàng)檢測(cè)方法學(xué)評(píng)價(jià)聯(lián)合檢測(cè)診斷宮頸癌的曲線下面積為0.935，敏感性為90.00%，較各單項(xiàng)檢測(cè)明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。見(jiàn)表3。

3討論

宮頸癌是婦科的常見(jiàn)惡性腫瘤，是導(dǎo)致婦女死亡的主要癌癥之一，及早正確診斷和采取治療措施，能有效控制疾病進(jìn)展，提高患者生存率[5]。目前宮頸癌診斷方法有TCT和陰道鏡檢查等，為了進(jìn)一步提高早期篩查準(zhǔn)確性，本研究探討了血清中腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物與TCT、HPV DNA聯(lián)合檢測(cè)在宮頸癌輔助診斷中的應(yīng)用價(jià)值。SCCA是鱗狀細(xì)胞癌的較特異腫瘤標(biāo)志物，正常表達(dá)時(shí)含量不受月經(jīng)周期、妊娠和年齡等的影響，而發(fā)生鱗癌時(shí)因SCCA2編碼酸性產(chǎn)物合成亢進(jìn)而使其濃度升高[6]。CA125正常情況下在出生后檢測(cè)不到，它是胚胎發(fā)育過(guò)程中產(chǎn)生的抗原物質(zhì)，但當(dāng)發(fā)生宮頸癌變時(shí)，它可以被有效地檢測(cè)到，是宮頸癌的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，與卵巢癌和其他相關(guān)癌癥也有一定的相關(guān)性[7-8]。CA15-3屬于糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物，宮頸癌患者會(huì)有不同程度的表達(dá)。CYFRA21-1是角蛋白家族中最小的成員，廣泛分布于正常組織表面，在惡性上皮病變時(shí)，激活的蛋白酶加速了細(xì)胞的降解，使大量細(xì)胞角蛋白片段釋放入血，在宮頸癌中有一定的表達(dá)[9]。本研究選取的上述4種腫瘤標(biāo)志物在宮頸癌患者血清中的水平均顯著高于正常人，但與癌前病變患者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明上述標(biāo)志物可以用來(lái)監(jiān)測(cè)宮頸癌的發(fā)生與否，在輔助診斷中可能有一定的臨床價(jià)值。

表2　各項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果比較　例(%)

注：①與HPV比較,P<0.05;②與聯(lián)合比較，P<0.05。

表3　各項(xiàng)檢測(cè)檢測(cè)診斷宮頸癌價(jià)值比較　　　%

注：①與聯(lián)合比較，P<0.05。

目前的流行病學(xué)調(diào)查研究與生物學(xué)資料均發(fā)現(xiàn)，宮頸癌及其癌前病變的必要條件是高危型HPV的感染，并且HPV的感染要比細(xì)胞學(xué)異常發(fā)生的早，因此對(duì)HPV DNA的檢測(cè)對(duì)宮頸癌的篩查具有重要意義[10]。TCT檢查是采用薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)宮頸細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類診斷，它比傳統(tǒng)的宮頸刮片后行巴氏染色檢查的檢出率高一些[11]，可為宮頸癌早期診斷和治療提供病理學(xué)依據(jù)，它的應(yīng)用也可降低宮頸癌死亡率，但巴氏涂片必須由擁有豐富經(jīng)驗(yàn)及高技術(shù)水平的實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行，才能保證其準(zhǔn)確性。上述各方法已被廣泛用于臨床上對(duì)宮頸癌的篩查，但各方法單獨(dú)應(yīng)用時(shí)的檢出率仍有待提高。本研究探討了聯(lián)合應(yīng)用各指標(biāo)檢測(cè)的方法對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值，結(jié)果表明聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值遠(yuǎn)優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)，其中HPV DNA的檢測(cè)價(jià)值較其他要高，因此對(duì)于有經(jīng)濟(jì)能力的個(gè)體篩查，聯(lián)合檢測(cè)仍是最佳選擇。

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[收稿日期]2015-02-01

[中圖分類號(hào)]R737.33

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)01-0092-03

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.01.035