BA和KT對(duì)香樟莖段腋芽誘導(dǎo)的影響

李素華　韓浩章　張麗華

摘 要：該文以香樟的莖段為外植體，研究了兩種不同濃度的細(xì)胞分裂素6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）和激動(dòng)素（KT）對(duì)腋芽誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：在香樟不定芽的誘導(dǎo)和形成過程中，BA較KT具有較大的活性，相同濃度下BA處理不定芽的誘導(dǎo)率、長(zhǎng)度和芽上的葉數(shù)顯著高于KT處理，而KT處理有利于葉面積的增加；細(xì)胞分裂素濃度越高，不定芽的生長(zhǎng)速度越快，葉片數(shù)量也越多。綜合來看，MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L為香樟腋芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基配方。

關(guān)鍵詞：香樟；細(xì)胞分裂素；腋芽誘導(dǎo)

中圖分類號(hào) S792.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2016）17-0029-02

Abstract：Taking the Cinnamomum camphora stem segments as explants，the effects of two different concentrations of cytokinin 6-Benzylaminopurine （6-BA） and excited hormone （KT） on bud induction and growth are studied. The results show that 6-BA has greater activity than KT in the camphor adventitious bud induction and formation，the adventitious bud induction rate treatment，length and leaf number of 6-BA is significantly higher than KT treatment under the same concentration. KT is conducive to the increase in leaf area，and higher concentrations of cytokinin， adventitious bud growth was faster，leaf number more. Overall，the best medium for inducing axillary buds of Cinnamomum camphora is MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.1mg/L.

Key words：Camphor；Cytokinin；Axillary bud induction

香樟[Cinnamomum camphora（L.） Presl]，為樟科樟屬常綠喬木，全株具樟腦香氣，是提取純天然香料的重要原料，其枝葉茂密、樹形優(yōu)美，是城市綠化、園林景觀的良好樹種。香樟長(zhǎng)期以來以種子繁殖為主，但播種繁殖會(huì)導(dǎo)致實(shí)生苗后代性狀變異，苗木參差不齊，且育苗周期長(zhǎng)等[1-2]，而采用扦插繁育方法，又存在母株材料來源有限、生根難等問題。組織培養(yǎng)繁殖最大的優(yōu)勢(shì)是繁殖系數(shù)高，繁殖周期短，幼苗生長(zhǎng)整齊一致，而且能夠保持母本的優(yōu)良特性。近年來，為滿足香樟的良種選育和優(yōu)質(zhì)種苗供應(yīng)的需要，學(xué)者對(duì)香樟的組織培養(yǎng)已有不少研究，在不定芽誘導(dǎo)過程中普遍采用莖段作為外植體，以添加NAA與BA2種外源激素的MS培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，且結(jié)論都不一致[3-6]，在一定生長(zhǎng)素濃度下KT對(duì)不定芽形成的影響也少見報(bào)道。為此，筆者以香樟莖段為外植體，通過比較兩種不同的細(xì)胞分裂素6-BA和KT對(duì)不定芽誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的影響，以期找到適合香樟腋芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基配方，旨在為香樟新品種的快繁和遺傳育種奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 供試材料于2016年6月上旬采于宿遷學(xué)院園林技術(shù)實(shí)驗(yàn)中心香樟苗圃地，從7年生的健壯植株的中下部位剪取腋芽尚未萌動(dòng)的幼嫩枝條作為離體培養(yǎng)材料。

1.2 試驗(yàn)方法 選擇發(fā)育充實(shí)且無病蟲害的嫩枝，剪去葉片，切成2～3cm長(zhǎng)的莖段，先用毛刷在自來水下清洗表面的塵土，然后用流水沖洗2～3h，放入干凈燒杯中待用。外植體消毒時(shí)先用75%的酒精消毒30s，再用2%NaclO滅菌20min，無菌水沖洗3～4次，然后用無菌紙吸干材料表面的水分，切除莖段兩端，最后把長(zhǎng)為1～1.5cm帶2～3個(gè)腋芽的莖段接種在不同的培養(yǎng)基上。

1.3 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基共設(shè)4個(gè)處理，分別是處理1：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理2：MS+KT1.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理3：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.lmg/L；處理4：MS+KT2.0mg/L+NAA0.lmg/L。培養(yǎng)基均附加蔗糖30g/L，瓊脂7.5g/L，pH值為6.8，培養(yǎng)室溫度為25℃，光照強(qiáng)度為4 000Lx，光照時(shí)數(shù)為12h/d。每一處理接種30瓶，每瓶3個(gè)莖段。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 40d后，統(tǒng)計(jì)腋芽萌發(fā)率（腋芽分化的個(gè)數(shù)/外植體的腋芽數(shù)）、不定芽長(zhǎng)度、不定芽上的葉數(shù)和葉片長(zhǎng)度。采用Excel進(jìn)行制表，SPSS21.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

外植體接種7d后小葉柄開始脫落、腋芽膨大，40d后各處理生長(zhǎng)狀況的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表1，不同處理的不定芽的生長(zhǎng)情況見圖1。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析得出各處理間的誘導(dǎo)率、不定芽長(zhǎng)度、不定芽葉數(shù)、葉長(zhǎng)的F值分別為26.51、203.68、151.95、43.79，均大于F0.01（3，8）=13.90，說明各處理間的4個(gè)測(cè)定指標(biāo)均存在極顯著差異，故進(jìn)一步對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行多重比較。

從表1可以看出，當(dāng)NAA為0.1mg/L時(shí)，細(xì)胞分裂素濃度為2.0mg/L的兩個(gè)處理的萌芽率均高于濃度為1.0mg/L的處理。從細(xì)胞分裂素種類來看相同濃度下BA較KT對(duì)腋芽誘導(dǎo)率更高，其中萌芽率最高的為處理3，與其他3個(gè)處理間呈極顯著差異。此外，從試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)處理1、處理3的不定芽生長(zhǎng)勢(shì)比處理2和處理4旺盛，葉片更幼嫩。從表1、圖1不定芽的長(zhǎng)度和葉數(shù)來看，添加有BA的兩個(gè)處理明顯多于另外兩個(gè)處理，這與葉片長(zhǎng)度的測(cè)定結(jié)果相反，培養(yǎng)基中添加有KT的兩個(gè)處理的不定芽上的葉片平均長(zhǎng)度顯著高于含有BA的處理。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在1.0～2.0mg/L濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞分裂素濃度越高，越有利于香樟腋芽的誘導(dǎo)，這與王長(zhǎng)憲等的報(bào)道一致[7]。但不同激素對(duì)香樟腋芽誘導(dǎo)也有較大影響，BA與KT相比，相同濃度下前者的誘導(dǎo)率較高。此外，細(xì)胞分裂素對(duì)不定芽的生長(zhǎng)和葉片分化也有較大影響，培養(yǎng)中添加有BA的兩個(gè)處理的不定芽長(zhǎng)度和葉數(shù)顯著高于含有KT的兩個(gè)處理，周菊華等在研究外源激素對(duì)麝香石竹莖段外植體不定芽形成的影響時(shí)指出BA在高頻率誘導(dǎo)不定芽形成的同時(shí)，對(duì)所形成的不定芽伸長(zhǎng)生長(zhǎng)、鮮干重增長(zhǎng)、干重百分率提高有明顯的促進(jìn)作用，KT則不然[8]，本研究表明，在香樟不定芽誘導(dǎo)和形成過程中，BA較KT具有較大的活性，其在促進(jìn)不定芽分化的同時(shí)也促進(jìn)了不定芽的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。從激素水平來看濃度越高不定芽的伸長(zhǎng)速度越快、葉數(shù)越多，但2.0mg/LKT較1.0mg/LKT的兩個(gè)處理未呈現(xiàn)明顯差異，KT相對(duì)于BA有利于葉面積的增加。綜合來看，香樟腋芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.10mg/L，其腋芽誘導(dǎo)率最高、不定芽生長(zhǎng)速度最快、葉片較為幼嫩，這對(duì)獲得具有形成不定芽能力并可擴(kuò)繁的叢生芽非常重要。

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