細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞治療晚期肺癌的臨床療效觀察

龍倩　周航　王家輝　馮源　黃玲　周星　陳珺

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞治療晚期肺癌的臨床療效觀察

龍倩①②周航①②王家輝②馮源②黃玲②周星②陳珺②

摘要目的：探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷（cytokine induced killer，CIK）細(xì)胞在晚期肺癌中的治療價(jià)值。方法：收集遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腹部腫瘤科2011年1月至2013年12月經(jīng)病理診斷的晚期肺癌患者90例，分為觀察組41例和對(duì)照組49例，觀察組進(jìn)行最佳支持治療的同時(shí)給予CIK治療；對(duì)照組僅給予最佳支持治療，并在入組前1個(gè)月內(nèi)未行放化療。對(duì)兩組患者進(jìn)行生存隨訪，比較兩組生存質(zhì)量（KPS評(píng)分）和生存期，并觀察不良反應(yīng)。結(jié)果：觀察組治療后KPS評(píng)分較對(duì)照組提高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P= 0.034）；觀察組的中位生存期為8個(gè)月，高于對(duì)照組的7個(gè)月，中位生存期差為1個(gè)月（P=0.044）；主要不良反應(yīng)為發(fā)熱（51.22%）、關(guān)節(jié)酸痛（36.58%）和失眠（29.27%）。結(jié)論：CIK細(xì)胞治療晚期肺癌患者可提高生存質(zhì)量和延長(zhǎng)生存期，不良反應(yīng)可耐受。

關(guān)鍵詞細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞肺癌臨床療效不良反應(yīng)

據(jù)報(bào)道，2012年全球范圍內(nèi)有180萬例肺癌新發(fā)患者，占所有癌癥發(fā)病率的13%，肺癌在男性中發(fā)病率和死亡率均居首位，居女性發(fā)病率第三位，死亡率居第二位［1］。在中國(guó)，肺癌居惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率的第一位，每年新發(fā)病例約60萬例，死亡病例約49萬例［2］。早期肺癌的治療以手術(shù)為主，但大部分肺癌患者診斷時(shí)已屬晚期或出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，綜合治療后效果不佳的晚期肺癌患者，身體機(jī)能下降，免疫功能受損，不宜再進(jìn)行放化療。近年來，生物治療成為一種全新治療方式，是繼手術(shù)、放療、化療后的第四種治療手段。細(xì)胞免疫治療是腫瘤生物治療的一種，其在多種腫瘤治療中顯示了較好的臨床療效和較小的不良反應(yīng)［3-7］。遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腹部腫瘤科自2011年開展了細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（CIK）免疫治療技術(shù)，對(duì)部分不宜進(jìn)行放化療的晚期肺癌患者行CIK治療，經(jīng)隨訪觀察后報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1一般資料

收集2011年1月至2013年12月遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腹部腫瘤科收治的晚期肺癌患者90例，根據(jù)治療方式分為對(duì)照組49例和觀察組41例。觀察組抽取自體外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mono?nuclear cells，PBMCs）進(jìn)行CIK細(xì)胞培養(yǎng)后回輸，同時(shí)行最佳支持治療，對(duì)照組僅給予最佳支持治療，并在入組前1個(gè)月內(nèi)未行放化療。所有患者均經(jīng)病理學(xué)、細(xì)胞學(xué)和影像學(xué)檢查確診為晚期肺癌，不宜或不愿再進(jìn)行放化療。其中男性70例，女性20例；年齡30～83歲；腫瘤直徑>7 cm者26例，≤7 cm者64例。Ⅲ期20例，Ⅳ期70例；鱗癌48例，腺癌42例；伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者79例，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者11例。

1.2方法

1.2.1治療前評(píng)估所有患者在治療前均行常規(guī)檢查：血常規(guī)、肝腎功能、電解質(zhì)、大小便常規(guī)、HIV、RPR、乙肝五項(xiàng)、凝血功能、心電圖、胸部X線片等，并進(jìn)行Karnofskey功能狀態(tài)（KPS）評(píng)分≥60分，預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月，經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

1.2.2CIK細(xì)胞制備及回輸PBMCs采集和CIK細(xì)胞培養(yǎng)均由本院干細(xì)胞移植中心負(fù)責(zé)，制備的CIK細(xì)胞經(jīng)檢測(cè)、評(píng)價(jià)質(zhì)量達(dá)標(biāo)后送至病房回輸。具體如下：首先采集外周血單個(gè)核細(xì)胞4～8×109（COM.TEC型血細(xì)胞分離機(jī)），其次加入IFN-γ、IL-2和anti-CD3McAb共培養(yǎng)，最后多次測(cè)定一系列指標(biāo)（計(jì)數(shù)，活細(xì)胞比例，流式細(xì)胞儀測(cè)定CD3、CD8、CD56），達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后，于第11天開始回輸，每次回輸CIK細(xì)胞>1× 109/500 mL生理鹽水，連輸5天（表1）。

1.2.3隨訪所有患者在治療前和治療后進(jìn)行KPS評(píng)分，并進(jìn)行前后參考比對(duì)。不良反應(yīng)：觀察組41例患者在CIK治療期間詳細(xì)觀察不良反應(yīng)，記錄患者的發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛、失眠、厭食和皮疹。生存期：治療后的患者于門診或電話隨訪，隨訪時(shí)間至2013年12月31日，記錄患者確診時(shí)間、治療時(shí)間和死亡病例的死亡時(shí)間，繪制生存曲線，計(jì)算中位生存期。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2　結(jié)果

2.1患者的臨床特征

兩組患者在性別、年齡、腫瘤大小、臨床分期、病理分型和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P> 0.05），具有可比性（表2）。

2.2KPS評(píng)分

治療前觀察組和對(duì)照組的KPS評(píng)分分別為（74.29±5.01）、（74.69±5.00），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P= 0.700）；治療后觀察組和對(duì)照組的KPS評(píng)分分別為（84.87±5.06）、（82.24±6.54），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.034，表3）。

2.3不良反應(yīng)

在觀察組41例晚期肺癌患者中，主要不良反應(yīng)為免疫性發(fā)熱，發(fā)生率為51.22%，是CIK治療的主要不良反應(yīng)，一般無需處理，可自行緩解，遇有持續(xù)性高熱的患者，可肌肉注射地塞米松5mg，使體溫降至正常；其他非特異性不良反應(yīng)為關(guān)節(jié)酸痛（36.58%），失眠（29.27%），厭食（12.19%）；偶見皮疹（4.87%，表4）。

2.4生存期

兩組患者治療后進(jìn)行隨訪，隨訪3～17個(gè)月。觀察組中位生存期為8個(gè)月；對(duì)照組中位生存期為7個(gè)月，對(duì)兩組中位生存期進(jìn)行Log-rank檢驗(yàn)，P=0.044。兩組生存曲線見圖1。

表1　CIK細(xì)胞的質(zhì)量控制Table 1　Quality control of CIK cells

表2　觀察組與對(duì)照組臨床特征比較Table 2 Comparison of the clinical features between the observation and control groups

表2　觀察組與對(duì)照組臨床特征比較（續(xù)表2）Table 2 Comparison of the clinical features between the observation and control group

表3　觀察組與對(duì)照組KPS評(píng)分比較（±s）Table 3 Comparison between the KPS scores of the two groups of patients（±s）

表3　觀察組與對(duì)照組KPS評(píng)分比較（±s）Table 3 Comparison between the KPS scores of the two groups of patients（±s）

Clinical feature Before treatment After treatment Observation group 74.29±5.01 84.87±5.06 Control group 74.69±5.00 82.24±6.54 P 0.700 0.034

表4　觀察組41例晚期肺癌CIK治療不良反應(yīng)Table 4 Adverse reactions in 41 cases of lung cancer CIK treatment

圖1　兩組患者生存曲線比較Figure 1 Lung cancer survival curves of patients in the two groups

3　討論

CIK細(xì)胞由Schmidt-Wolf等［8］在1991年首次報(bào)道，其具有增殖能力強(qiáng)、細(xì)胞毒性高的特點(diǎn)，有較強(qiáng)的腫瘤殺傷活性。CIK是將PBMCs中加入抗IL-2、 CD3McAb、IFN-γ等多種細(xì)胞因子共培養(yǎng)之后得到的一群異質(zhì)細(xì)胞［9］，細(xì)胞表面主要表達(dá)CD3、CD56，具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體（major histocompability complex，MHC）限制性殺瘤的特點(diǎn)［10］。在此基礎(chǔ)上，本研究將不宜進(jìn)行放化療的晚期肺癌患者給予CIK治療，觀察臨床療效，得到了較好的效果。

本臨床治療病例的回顧性分析，按照有無接受生物治療分為觀察組和對(duì)照組，兩組的分組具有一定程度的隨機(jī)成分，至少在一定程度上保證了兩組背景治療的均衡，并對(duì)背景治療的幾個(gè)主要參數(shù)，尤其是對(duì)于生存期有重要影響的病理類型和臨床分期這兩個(gè)關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行了兩組間的比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

本研究顯示，兩組患者KPS評(píng)分存在顯著性差異，CIK治療組患者KPS評(píng)分明顯高于對(duì)照組。其原因是腫瘤患者的免疫系統(tǒng)被破壞后，淋巴細(xì)胞比例失調(diào)，自身免疫功能低下，輸注CIK（含大量活化的淋巴細(xì)胞）后，淋巴細(xì)胞比例得到最大化糾正，從而增強(qiáng)了患者的細(xì)胞免疫功能，改善患者的生存質(zhì)量，這與曾金武等［11］報(bào)道一致。

另外，本研究結(jié)果還觀察到兩組患者的中位生存期也存在顯著性差異，CIK治療組患者的中位生存期較對(duì)照組延長(zhǎng)1個(gè)月，與馬英恒等［12］報(bào)道相符。其原因是CIK細(xì)胞兼具T細(xì)胞和NK細(xì)胞的功能，通過在體內(nèi)外調(diào)節(jié)增加細(xì)胞免疫功能展現(xiàn)出抗腫瘤活性［13-14］，從而延長(zhǎng)患者的生存期，提高OS。其殺瘤途徑［15］可能有以下3種：1）通過黏附分子LFA-1/ICAM-1結(jié)合腫瘤細(xì)胞，分泌大量BLT酯酶顆粒直接穿透靶細(xì)胞膜，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解；2）分泌IL-2、IL-6等細(xì)胞因子促使特異性T細(xì)胞增殖活化間接殺傷瘤細(xì)胞；3）誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

本結(jié)果表明CIK免疫治療對(duì)不宜繼續(xù)治療的晚期肺癌患者具有治療價(jià)值，可以提高患者的生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，并且患者能夠耐受CIK治療的不良反應(yīng)，CIK免疫治療可以作為晚期肺癌的一種治療手段，使患者在生存質(zhì)量和生存期方面獲益。

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（2016-01-28收稿）

（2016-03-03修回）

（編輯：楊紅欣校對(duì)：邢穎）

Efficacy of cytokine-induced killer cells on patients with advanced lung cancer

Qian LONG1,2, Hang ZHOU1,2, Jiahui WANG2, Yuan FENG2, Ling HUANG2, Xing ZHOU2, Jun CHEN2

Correspondence to: Hang ZHOU; E-mail: zhouhangcno55@126.com
1Zunyi Medical University, Zunyi 563003, China; Department Oncology, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi 563003, China

AbstractObjective: To observe the efficacy of cytokine-induced killer (CIK) cells on patients with advanced lung cancer. Methods: A total of 90 patients with advanced lung cancer were identified from January 2011 to December 2013. CIK therapy was given to 41 patients in the observation group, whereas the other 49 patients in the control group received the best support treatments without chemotherapy or radiotherapy within one month of inclusion. Following up was conducted for the patients in the two groups, and KPS scores, median survival, and adverse reactions compared. Results: The KPS score in the observation group was higher than that of the control group after treatment (P=0.034). The median survival period of the observation group was eight months, which was one month longer than that of the control group (P=0.044). Major adverse reactions included fever, joint pain, and insomnia, which were recorded 51.22%, 36.58%, and 29.27% of occurrence, respectively. Conclusion: CIK cell therapy improved the quality of life and prolonged the survival of advanced lung cancer patients with tolerable adverse reactions.

Keywords:cytokine-induced killer cells, lung cancer, efficiency, adverse reaction

doi:10.3969/j.issn.1000-8179.2016.07.118

作者單位：①遵義醫(yī)學(xué)院（貴州省遵義市563003）；②遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腹部腫瘤科

通信作者：周航zhouhangcno55@126.com

作者簡(jiǎn)介

龍倩專業(yè)方向?yàn)楦共磕[瘤的綜合治療。

E-mail：517677403@qq.com