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    中藥冬蟲夏草和所含多種冬蟲夏草菌拉丁名混用的歷史和現(xiàn)狀

    2016-05-26 19:40姚藝桑朱佳石
    中國中藥雜志 2016年7期
    關(guān)鍵詞:菌物混用冬蟲夏草

    姚藝?!≈旒咽?/p>

    [摘要]中藥冬蟲夏草是冬蟲夏草菌和蝠蛾科幼蟲尸體的物種混合體。但冬蟲夏草和冬蟲夏草菌使用同一拉丁名Ophiocordyceps sinensis (≡Cordyceps sinensis),導(dǎo)致特指概念不清和爭議,甚至影響政府的政策法規(guī)的制訂和大眾的市場消費(fèi)心理。該文綜述了冬蟲夏草(蟲菌復(fù)合體)和冬蟲夏草菌拉丁名混用的歷史考證和現(xiàn)狀,以及文獻(xiàn)中有關(guān)天然冬蟲夏草更名的建議。有學(xué)者建議O sinensis用于多種冬蟲夏草菌,而中藥冬蟲夏草改用Chinese cordyceps,不設(shè)拉丁名。另有學(xué)者建議中藥冬蟲夏草更名為Ophiocordyceps & Hepialidae。這些建議有待學(xué)界達(dá)成共識。該文也分析2011年世界菌物學(xué)會IMA頒布《阿姆斯特丹宣言》以來學(xué)界在爭議中實(shí)施“One Fungus=One Name”,進(jìn)一步加劇了拉丁名特指概念的混亂。IMA為解決爭議設(shè)立了爭議解決機(jī)制。解決這一拉丁名的混用和爭議需要菌物、動物和中藥分類學(xué)家通力合作,共同努力。

    [關(guān)鍵詞]冬蟲夏草蟲菌物種復(fù)合體;冬蟲夏草菌有性型和無性型;《阿姆斯特丹宣言》

    [Abstract]Natural Cordyceps sinensis(Dongchongxiacao) is an insectfungi complex containing multiple Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis) fungi and dead body of larva of the family of Hepialidae But natural C sinensis and O sinensis fungi use the same Latin name, resulting in uncertainty of the specific meaning, even disturbing the formulation and implementation of governmental policies and regulations, and influencing consumer psychology onthe market This paper reviews the history and current status of the indiscriminate use of the Latin name O sinensis for both the natural insectfungi complex C sinensis and O sinensis fungi and lists the rename suggetions Some scholars suggested using the term O sinensis for the fungi and renaming the natural C sinensis “Chinese cordyceps” Others suggested renaming the natural C sinensis “Ophiocordyceps & Hepialidae” Both suggestions have not reached general consensus due to various academic concerns This paper also reviews the exacerbation of the academic uncertainties when forcing implementing the 2011 Amsterdam Declaration “One Fungus=One Name” under the academic debate Joint efforts of mycological, zoological and botanyTCM taxonomists and properly initiating the dispute systems offered by International Mycology Association may solve the debate on the indiscriminate use of the Latin name Osinensis for the natural insectfungi complex,the teleomorph and anamorph(s) of O sinensis fungi

    [Key words]natural Cordyceps sinensisinsectfungi (species) complex; the teleomorph and anamorph of Ophiocordyceps sinensis; The Amsterdam Declaration

    doi:10.4268/cjcmm20160733

    《中國藥典》定義冬蟲夏草為“麥角菌科真菌冬蟲夏草菌Cordyceps sinensis (Berkeley) Saccardo寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座和幼蟲尸體的干燥復(fù)合體”。該定義明確冬蟲夏草是蟲菌復(fù)合體,不等于冬蟲夏草菌。該定義也出現(xiàn)在菌物學(xué)及現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)巨著中[13]。然而天然冬蟲夏草和冬蟲夏草菌卻使用同一拉丁名C sinensis[1,4],導(dǎo)致特指概念混亂,甚至給政府制定和實(shí)施政策法規(guī)帶來困難。

    冬蟲夏草,別名冬蟲草、夏草冬蟲、蟲草、雅扎貢布(藏語,即長角的蟲子),是一味中藥,因其與季節(jié)成熟狀態(tài)相關(guān)的、獨(dú)特的形態(tài)特征和臨床療效而得名。英文譯為“Hia Tsao Tong Tchong”,“Hea Tsaon Tsong Chung”等;日文譯為“Tochukaso”[1,56]。據(jù)蘆笛[5]考證,冬蟲夏草的藏文記載最早出自藏醫(yī)學(xué)家宿喀年姆尼多吉(1439—1475年)的《千萬舍利》,遠(yuǎn)早于漢文典籍記載[《青藜馀照》(1712—1722年),《四川通志》(1736年),《本草從新》(1757年),《本草綱目拾遺》(1765年)等]。

    冬蟲夏草于1723年由歐洲傳教士帶到法國。據(jù)蘆笛[5]考證,1841年John Obadiah Westwood首次鑒定夏草冬蟲中的真菌為珊瑚菌屬的Clavaria Entomorhiza[78]。1843年Jonathan Pereira[9]鑒定夏草冬蟲中的真菌屬于Sphaeria球果菌屬,并提及Edward Doubleday鑒定昆蟲屬于Agrotis地老虎屬。同年,Miles Joseph Berkeley鑒定冬蟲夏草的真菌部分為Sphaeria sinensis Berkeley;14年后更名為Cordyceps sinensis Berkeley[5,1012]。1878年P(guān)ier Andrea Saccardo鑒定冬蟲夏草菌為C sinensis;1883年修正為C sinensis (Berkeley) Saccardo[5,1314]。2007年Sung等[15]根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察和核糖體DNA大、小亞基等序列,變更真菌分類地位,將C sinensis更名為Ophiocordyceps sinensis (Berkeley) GH Sung et al[16];但這一更名僅涉及冬蟲夏草菌,未涉及一直混用的天然冬蟲夏草的拉丁名C sinensis。

    冬蟲夏草的發(fā)現(xiàn)和中文命名比冬蟲夏草菌的鑒定早數(shù)百年。中藥學(xué)家依據(jù)《中國藥典》和中藥分類學(xué)的基本理論指出,具有明確特指含義的一味中藥,冬蟲夏草及其別名,冬蟲草、夏草冬蟲、蟲草等,和菌物分類學(xué)的蟲草菌屬是完全不同的2個(gè)概念。

    1冬蟲夏草和冬蟲夏草菌拉丁名的混用和特指概念的混亂

    11混用Cordyceps sinensis的歷史考證蘆笛[5]記述了19世紀(jì)“西方學(xué)者開始把冬蟲夏草和真菌聯(lián)系起來,著手對其進(jìn)行物種鑒定”。而真菌學(xué)的發(fā)展也導(dǎo)致拉丁名不斷更名[Clavaria entomorhiza—Sphaeria Sinensis Berkeley—Cordyceps sinensis Berkeley—Cordyceps sinensis (Berkeley) Saccardo—Ophiocordyceps sinensis (Berkeley) GH Sung et al]。雖然西方學(xué)者“把冬蟲夏草和真菌聯(lián)系起來”的本意是對冬蟲夏草中的真菌“進(jìn)行物種鑒定”,但卻在表述上忽略了天然冬蟲夏草與所含的冬蟲夏草菌的區(qū)別。諸如蘆笛[5]的表述:①中國的夏草冬蟲的學(xué)名……從之前的“Sphaeria sinensis”更為“Cordyceps sinensis”……注明夏草冬蟲在中國是一種藥物[11]。②George Massee[17]描述“Cordyceps sinensis”的形態(tài)特征。③Antwerp Edgar Pratt[18]記敘了四川和西藏的藥材出口……他還給蟲草附上了學(xué)名“Sphaeria sinensis”,并解釋其為一種根似毛蟲的植物,具有滋補(bǔ)作用。④Curtis Gates Lloyd撰文《來自齊天錫的中國的夏草冬蟲(Cordyceps sinensis)》[19]……附有一幅一束夏草冬蟲的照片。⑤John Lindley[20]提到了用作藥材的夏草冬蟲……采用了Berkeley的定名“Sphaeria sinensis”,同時(shí)還附有夏草冬蟲的兩幅插圖。蘆笛[5]論文中的多處記述表明,早年的西方學(xué)者也用拉丁名“Sphaeria sinensis”或“Cordyceps sinensis”描述冬蟲夏草中藥材。

    由此可見,冬蟲夏草與冬蟲夏草菌的拉丁名的混用始于早年西方學(xué)者的菌物學(xué)物種鑒定,迄今延續(xù)了170多年[1,45,16]。近幾十年來科學(xué)家從冬蟲夏草中分離和鑒定出一系列真菌[2125],形成多種冬蟲夏草菌無性型的學(xué)說。但這一約定俗成的拉丁名混用導(dǎo)致科學(xué)邏輯的混亂。

    12Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis)用于描述冬蟲夏草菌蘆笛[5]考證早年西方學(xué)者定名的“Sphaeria sinensis”或“Cordyceps sinensis”特指冬蟲夏草菌?,F(xiàn)代學(xué)術(shù)論文多以C sinensis特指冬蟲夏草菌,即冬蟲夏草的真菌部分,不含寄主蝙蝠蛾幼蟲尸體的固有化學(xué)成分和其他冬蟲夏草內(nèi)生相關(guān)菌及其代謝產(chǎn)物,也不包括這些化學(xué)成分所支持的藥理功能。2007年Sung等[15]將冬蟲夏草菌的分類地位從Cordyceps蟲草屬變更到Ophiocordyceps線形蟲草屬[26](亦稱暗蟲草屬[16]),C sinensis因此更名為O sinensis。

    13Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis)也用于描述天然冬蟲夏草西方學(xué)者也用“Sphaeria sinensis”或“Cordyceps sinensis”,以及2007年更名后的“Ophiocordyceps sinensis”描述中藥冬蟲夏草[5,11,1720]。這樣的描述在現(xiàn)代學(xué)術(shù)論著中比比皆是[22,2729]。

    14拉丁名Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis)的混用造成混亂真菌分類學(xué)命名冬蟲夏草菌為O sinensis(≡C sinensis)[15]。而《中國藥典》和中藥分類學(xué)定義冬蟲夏草C sinensis是一味帶有寄主的完整中藥,是蟲菌物種復(fù)合體,不等于冬蟲夏草菌;并認(rèn)為冬蟲夏草及其別名(冬蟲草、夏草冬蟲、蟲草、雅扎貢布等)都是專有名詞,具有專屬性。19世紀(jì)以來,西方學(xué)者未能區(qū)分冬蟲夏草和冬蟲夏草菌[5],導(dǎo)致人們常以自己的理解撰寫和解釋論文。

    如魏等[4]寫道:“所謂冬蟲夏草……是蟲與菌,即生長在我國高寒山地特有的昆蟲,蝙蝠蛾幼蟲軀體上的一種子囊真菌”,描述了冬蟲夏草為蟲菌復(fù)合體,但又將其解釋為一種真菌。該研究中包括2個(gè)冬蟲夏草有性型(teleomorph)樣本,注明產(chǎn)地,猜測是兩支天然冬蟲夏草樣本。但該文多處稱其為冬蟲夏草菌,忽略了蟲的部分,顯然是試圖定義天然冬蟲夏草=有性型冬蟲夏草菌,有別于《中國藥典》的定義。類似的例子不勝枚舉[16,24,3033]。

    論文中描述實(shí)驗(yàn)樣本為“Ophiocordyceps sinensis”時(shí)難以判定樣本到底是天然冬蟲夏草,還是冬蟲夏草菌。如2013年Wang C S(http://enemushroomnet/news/201308/27/308html)在世界藥用真菌學(xué)大會答問時(shí)闡明,所研究的O sinensis是經(jīng)單孢分離的無性型H sinensis Co18菌株[34],不是天然冬蟲夏草,也不是Bushley和Li等[30,35]報(bào)道的、混有單核細(xì)胞/雙核細(xì)胞/三核細(xì)胞、呈現(xiàn)異核現(xiàn)象(heterokaryosis)的多細(xì)胞有性型冬蟲夏草菌(子囊孢子)。而學(xué)術(shù)會議上答問只面對少數(shù)受眾,無法避免文獻(xiàn)[34]的傳播引起的誤解。如張姝等[36]引用文獻(xiàn)[34],寫道“冬蟲夏草菌的基因組已經(jīng)完成測序”,這里的“冬蟲夏草菌”是指無性型單核體H sinensis Co18菌株,有別于冬蟲夏草有性子囊孢子多細(xì)胞、單核/多核結(jié)構(gòu)的異核體[30,35]。綜合分析H sinensis基因組序列和2項(xiàng)轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)[3738],經(jīng)單孢分離的單核體H sinensis[34]完全不同于野生型、多核多倍體的冬蟲夏草菌L0106菌株[39],更不同于多菌多種突變基因型菌共存的天然冬蟲夏草[33]。

    這一約定俗成的拉丁名的混用始于19世紀(jì)西方學(xué)者鑒定冬蟲夏草中的真菌時(shí)的模糊表述[1,5,1720],而這些鑒定和拉丁命名出現(xiàn)在中藥冬蟲夏草的發(fā)現(xiàn)和中文命名數(shù)百年之后。冬蟲夏草的藥理功能來源于其子座和僵蟲體的全部化學(xué)成分,不僅僅來源于其中的冬蟲夏草菌。雖有文章稱冬蟲夏草僵蟲體為菌核Sclerotium或Sclerotia,但任艷等[26]認(rèn)為:冬蟲夏草僵蟲體部位是蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲的尸體、昆蟲體壁組織碎片、及大量的菌絲體形成的堅(jiān)硬的“假菌核復(fù)合體”。無論這一名詞爭議的結(jié)果如何,在科學(xué)上絕不能忽略蝙蝠蛾幼蟲尸體是中藥冬蟲夏草的重要組成部分。蝙蝠蛾幼蟲不僅是冬蟲夏草菌和其他相關(guān)共生、伴生真菌的培養(yǎng)基,冬蟲夏草僵蟲體的體壁和內(nèi)含的昆蟲組織碎片固有的眾多生物活性物質(zhì)均參與冬蟲夏草的藥理功能。冬蟲夏草僵蟲體和子座的化學(xué)成分存在巨大差異,其中除了形成子實(shí)體的一組冬蟲夏草菌和共生/伴生真菌的全部化學(xué)成分以外,蝙蝠蛾幼蟲尸體固有化學(xué)成分,以及這些成分與真菌之間相互作用所衍生的全部代謝產(chǎn)物,構(gòu)成了僵蟲體和子座獨(dú)有的基因組學(xué)成分譜、轉(zhuǎn)錄組學(xué)成分譜、蛋白組學(xué)成分譜、代謝組學(xué)成分譜和化學(xué)成分指紋譜,支持中藥冬蟲夏草的全部藥理功能譜[12,2226,2948]。

    2對天然冬蟲夏草拉丁名的更名建議

    冬蟲夏草和冬蟲夏草菌拉丁名的混用已延續(xù)170多年,不符合拉丁名的命名原則[26,37,44,4954]。2012年Zhang等[49]建議冬蟲夏草菌沿用拉丁名Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis),而中藥材冬蟲夏草不設(shè)拉丁名,以Chinese cordyceps表示,也不用《中國藥典》中使用的Cordyceps。由于所有中藥材都必須有排他性的拉丁名,這一建議未獲得中藥學(xué)界的認(rèn)可。這些作者在其后的文章[34]中并未使用Chinese cordyceps描述天然冬蟲夏草;而在文獻(xiàn)[54]中雖然使用Chinese cordyceps描述天然冬蟲夏草,但文章結(jié)尾句又回歸了拉丁名混用。

    不同于Zhang等[49]的更名建議,任艷等[26]建議中藥冬蟲夏草更名為Ophiocordyceps & Hepialidae,兼顧物種復(fù)合體的寄主蝙蝠蛾幼蟲尸體和寄生菌。然而天然冬蟲夏草所含的多種真菌和多種突變基因型菌,其中哪個(gè)或哪些是正確的冬蟲夏草菌?它或它們是否同屬Ophiocordyceps線形蟲草屬(或稱暗蟲草屬)[16,26]?目前大量文獻(xiàn)和GenBank數(shù)據(jù)庫使用O sinensis描述至少12種突變基因型菌,它們的DNA序列變異超出種內(nèi)或種間的正常變異,達(dá)到分類學(xué)的科、屬水平的變異[30,3738,5157]。因此學(xué)界只好擱置針對任艷等[26]更名建議的討論。出于無奈,許多論文棄用拉丁名描述天然冬蟲夏草,直接使用它的漢語拼音DongChongXiaCao或其縮寫DCXC[44,50,58]。

    天然冬蟲夏草的拉丁名命名極具學(xué)術(shù)性,必須符合真菌寄生昆蟲的物種復(fù)合體的命名原則[26],需要菌物、動物和中藥分類學(xué)家就此達(dá)成共識。

    3冬蟲夏草菌O sinensis是單一真菌種,還是一組真菌的總稱

    張姝等[59]根據(jù)2011年世界菌物學(xué)會IMA《阿姆斯特丹宣言》“One Fungus=One Name”(簡稱1F1N)[6062]宣稱:根據(jù)“一種真菌一個(gè)名稱”的發(fā)展趨勢,今后一種真菌將不再同時(shí)擁有有性型和無性型兩個(gè)合法名稱。由此,O sinensis不僅用描述天然冬蟲夏草和有性型冬蟲夏草菌,還替代中國被毛孢H sinensis描述冬蟲夏草菌的無性型。

    實(shí)施1F1N有2個(gè)前提[6062]:①冬蟲夏草菌O sinensis必須是單一真菌種;②中國被毛孢H sinensis是有性型冬蟲夏草菌的唯一正確無性型。而冬蟲夏草菌是單一真菌種還是一組真菌的總稱成為學(xué)術(shù)爭議的一個(gè)焦點(diǎn)。文獻(xiàn)中存在3種學(xué)說[3738]。

    31冬蟲夏草菌O sinensis是單一真菌種[4,16,59]郭英蘭等[16]寫道“冬蟲夏草是一種真菌”,“該種的無性型為中國被毛孢Hirsutella sinensis”;文中還批評有些論文的提法“似有將冬蟲夏草這個(gè)單一真菌種誤解為3種不同真菌之嫌”。

    32冬蟲夏草菌是多種真菌的總稱[2225,28,41,47,57,6365]Barseghyan等[65]確定中國被毛孢Hirsutella hepiali和中國彎頸霉Tolypocladium sinensis同為冬蟲夏草菌的無性型anamorphs。學(xué)者們從冬蟲夏草中反復(fù)多次分離、鑒定出涉及13個(gè)屬的22種真菌[2122]。通用引物擴(kuò)增子分子克隆研究從冬蟲夏草中鑒定出更多真菌種,但從冬蟲夏草子座和僵蟲體中均未檢出中國被毛孢序列,其中的優(yōu)勢菌是其他菌[2325]。

    33冬蟲夏草菌是多種突變基因型菌的總稱[30,3738,41,5153,5557,6667]分子生物學(xué)研究從天然冬蟲夏草中陸續(xù)檢出至少12種突變基因型冬蟲夏草菌O sinensis,其序列中存在大量、散在的轉(zhuǎn)換點(diǎn)突變、顛換點(diǎn)突變、和/或插入/缺失點(diǎn)突變。生物芯片SNP質(zhì)譜基因分型研究表明[3738,5152,67],隨著研究的深入,還會檢出更多突變基因型冬蟲夏草菌序列。

    中國被毛孢全基因組序列ANOV00000000[34]中僅有1個(gè)片段KE659721與GC偏倚型冬蟲夏草菌ITS序列(AB067721型)呈現(xiàn)99%同源性,而與2個(gè)AT偏倚型冬蟲夏草菌ITS序列(AB067740和AB067744型)的相似度僅有86%~89%,證明突變基因型冬蟲夏草菌獨(dú)立于中國被毛孢全基因組之外,是獨(dú)立真菌序列[3738]。突變基因型序列的變異達(dá)到了分子分類學(xué)的科、屬水平的變異[3738,5556]。隨著天然冬蟲夏草的成熟,這些突變基因型冬蟲夏草菌在子座和僵蟲體中的生物量出現(xiàn)非同步的動態(tài)變化[3738,5153]。這些研究結(jié)果不支持O sinensis是單一真菌種的學(xué)說[4,16,36],也不支持這些突變基因型O sinensis序列是中國被毛孢基因組的偽基因的學(xué)說[30],但支持多種突變基因型冬蟲夏草菌屬于獨(dú)立真菌種的學(xué)說[3738,5153,5556,67]。

    4《阿姆斯特丹宣言》1F1N在冬蟲夏草研究中的實(shí)施

    根據(jù)1F1N《阿姆斯特丹宣言》[6062]和31中第1種學(xué)說,張姝等[59]提議冬蟲夏草菌的有性型和無性型都使用同一拉丁名O sinensis。隨之,其他論文也棄用無性型學(xué)名中國被毛孢H sinensisi,代之以有性型學(xué)名O sinensis[30,34,54,59]。至此,O sinensis不僅用于描述冬蟲夏草中藥材和有性型冬蟲夏草菌,也用于無性型中國被毛孢。拉丁名特指概念的混亂致使1F1N在冬蟲夏草領(lǐng)域的實(shí)施困難重重。

    例如文獻(xiàn)[39]標(biāo)題:“Transcriptome sequencing and analysis of the entomopathogenic fungus Hirsutella sinensis isolated from Ophiocordyceps sinensis”,其中Hirsutella sinensis無法用Ophiocordyceps sinensis替代,以避免“O sinensis isolated from Osinensis”的科學(xué)邏輯混亂。

    又如文獻(xiàn)[65]確定中國被毛孢和中國彎頸霉同為冬蟲夏草菌的無性型:“the investigated strains were identified as Hirsutella sinensis and Tolypocladium sinensis species, which were identified as the anamorphs of Ophiocordyceps sinensis”。其中Hirsutella sinensis和Tolypocladium sinensis均無法用Ophiocordyceps sinensis替代,更不用說上述32節(jié)第2種學(xué)說涉及的多種無性型真菌[2125]。

    “One Fungus=One Name”等式[6062]清楚表明,只有單一真菌種(one fungus)才可使用同一個(gè)名字(one name)。上文所列3種學(xué)說,至今尚無具有說服力的試驗(yàn)數(shù)據(jù)確證其中某一學(xué)說。天然冬蟲夏草的菌物學(xué)研究和分子系統(tǒng)學(xué)研究、天然冬蟲夏草和中國被毛孢的全基因組測序、冬蟲夏草子囊孢子的基因分型研究、宏基因組測序、轉(zhuǎn)錄組測序和蛋白組學(xué)研究等一系列研究,均提示冬蟲夏草菌O sinensis不是單一真菌種。因此在冬蟲夏草研究中實(shí)施1F1N有待商榷。正確理解1F1N,啟用IMA為實(shí)施1F1N所建立的爭議解決機(jī)制[6062],直面學(xué)術(shù)爭議,經(jīng)多學(xué)科充分討論后獲取共識,是實(shí)施1F1N的前提。在嚴(yán)格按照柯赫氏法則Koch′s postulates獲取確鑿的試驗(yàn)數(shù)據(jù),證明冬蟲夏草菌確為單一真菌種One Fungus之前強(qiáng)行推行1F1N,客觀上支持31第1種學(xué)說,而否定32,33另外2種學(xué)說。這一做法有悖于學(xué)術(shù)公平原則和《阿姆斯特丹宣言》的基本精神,必然加劇學(xué)術(shù)爭議。

    5結(jié)語

    天然冬蟲夏草、有性型和無性型冬蟲夏草菌拉丁名的混用始于19世紀(jì)西方學(xué)者開始鑒定冬蟲夏草之時(shí)。這一混用形成約定俗成的共識,一直困擾著學(xué)界,并通過學(xué)界困擾著政府的政策法規(guī)的制訂和實(shí)施,也極大地影響著、甚至可能誤導(dǎo)大眾的消費(fèi)心理。這一學(xué)術(shù)課題亟待菌物、動物和中藥分類學(xué)家共同研究和解決,以避免對冬蟲夏草科學(xué)認(rèn)識的偏差。

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    [責(zé)任編輯呂冬梅]

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