蔬菜農(nóng)藥殘留速測酶制劑的比較

金 彬，沈群超，吳碧波，胡雅花

(1.寧波市農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全管理總站,浙江寧波 315012; 2.慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心,浙江寧波 315300; 3.寧?？h農(nóng)林科教信息中心,浙江寧波 315600)

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蔬菜農(nóng)藥殘留速測酶制劑的比較

金 彬1，沈群超2，吳碧波3，胡雅花1

(1.寧波市農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全管理總站,浙江寧波 315012; 2.慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心,浙江寧波 315300; 3.寧?？h農(nóng)林科教信息中心,浙江寧波 315600)

摘 要：以2種品牌酶制劑為樣本,使用小青菜、青瓜、韭菜3種蔬菜作為供試樣品,通過實驗室內(nèi)部、實驗室外部比較發(fā)現(xiàn),青菜、黃瓜樣品對酶抑制法檢測判定基本沒有干擾,但韭菜因汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),需整株提取。不同廠家研發(fā)的酶制劑對具體農(nóng)藥品種的特異性有差異,且普遍對毒死蜱的檢測靈敏度較低,采購儀器和酶制劑時需根據(jù)實際需要,選擇對重點監(jiān)控農(nóng)藥殘留指標(biāo)靈敏度高的產(chǎn)品,建議對同一樣品分別使用幾種品牌的酶制劑進(jìn)行檢測以滿足監(jiān)測需要。

關(guān)鍵詞：酶抑制法;農(nóng)藥殘留;比較

文獻(xiàn)著錄格式:金彬,沈群超,吳碧波,等.蔬菜農(nóng)藥殘留速測酶制劑的比較[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,57 (4):517-519.

農(nóng)藥殘留是影響蔬菜質(zhì)量安全的重要因素,直接關(guān)系到廣大消費者的身體健康,受到社會各界的廣泛關(guān)注[1]。酶抑制法農(nóng)藥殘留快速檢測方法因其操作簡單、快速、成本低、比較實用等優(yōu)點,成為目前基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機(jī)構(gòu)廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測方法[2]。2014年,全面開展農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全保障行動成為浙江省政府的十件實事之一,其中一項內(nèi)容就是所有縣(市、區(qū))都要建成農(nóng)產(chǎn)品安全快速檢測室,并對公眾免費開放[3]。酶抑制法速測對操作人員、場地條件的要求較低,更重要的是檢測時間短、能夠達(dá)到現(xiàn)場快速出結(jié)果的需求,對濫用高毒農(nóng)藥的不法商販有較大的威懾力[4-5]。酶抑制法利用農(nóng)藥對膽堿酯酶的抑制作用及膽堿酯酶催化水解物與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)的特性,用速測儀在410 nm等特定波長處測定吸收度隨時間的變化值,最終得出抑制率[6]。但酶抑制法農(nóng)殘檢測有其局限性[7],且現(xiàn)在市場上速測產(chǎn)品品牌、型號眾多,性能各有不同[6-7],選擇合適的速測產(chǎn)品是開展速測監(jiān)管必須考慮的事項。本項目通過實驗室內(nèi)部、實驗室外部比較,得出2種不同品牌農(nóng)殘速測試劑盒對幾種農(nóng)藥殘留檢測的靈敏度和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,以期為提高農(nóng)藥殘留速測工作的質(zhì)量提供參考依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

選擇市場上在售的2種酶制劑,儀器使用北京瑞利譜創(chuàng)儀器技術(shù)有限公司的RP410型速測儀,酶制劑均為乙酰膽堿酶,分別為上海捷門保林邁生物工程有限公司生產(chǎn)(T1)和北京瑞利譜創(chuàng)儀器技術(shù)有限公司生產(chǎn)(T2)。選擇小青菜(葉菜類)、青瓜(瓜類)、韭菜(蔥蒜類) 3種蔬菜作為供試樣品。

1.2樣品處理

小青菜取葉片部分。青瓜沿皮削下1片,各用天平準(zhǔn)確稱取1 g,用剪刀剪成1 cm見方的大小,加入5 mL緩沖溶液,震蕩2 min。韭菜的汁液中含有影響乙酰膽堿酶的物質(zhì),容易引起假陽性,因此直接將整枝浸入5 mL緩沖溶液中。分別添加9種農(nóng)藥殘留,每組做3個平行,加標(biāo)濃度和2個品牌酶制劑的理論檢出限見表1。

1.3方法

按廠家提供的儀器使用說明書和農(nóng)藥殘留快速檢測試劑盒使用說明書進(jìn)行空白測試和樣品測試。由寧波市種植業(yè)管理總站實驗室(B1)和慈溪市農(nóng)業(yè)監(jiān)測中心實驗室(B2)承擔(dān)比對試驗。

表1　樣品加標(biāo)濃度和試劑盒理論檢出限

2　結(jié)果與分析

2.1不同樣品的加標(biāo)檢測情況

在青瓜、青菜、韭菜樣品中加入一定濃度的農(nóng)藥,由B1實驗室承擔(dān)檢測。從表2得出,加入同樣濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液,對3種蔬菜抑制率判斷得出的結(jié)果不盡相同。添加比試劑盒理論檢出限高出5倍以上的農(nóng)藥,如敵敵畏、滅多威、甲萘威和克百威,3種蔬菜在2個實驗室的檢測結(jié)果均為陽性,無疑議。殺螟硫磷添加試劑盒理論檢出限濃度的量,3種蔬菜均顯示假陰性;氧化樂果、毒死蜱添加檢出限濃度的量,出現(xiàn)不同的判斷結(jié)果,但與具體樣品類型沒有絕對的關(guān)聯(lián);馬拉硫磷和甲胺磷添加了低于檢出限濃度的量,已有樣品出現(xiàn)陽性結(jié)果,但也有樣品出現(xiàn)陰性結(jié)果,陽性的判斷結(jié)果偶然性概率較高。因此,試驗所用的3種蔬菜對儀器檢測性能并無影響,檢測判定結(jié)果主要還是由儀器性能和酶制劑本身對農(nóng)藥的特異性決定,樣品所含農(nóng)藥濃度越高于試劑盒檢出限,得到陽性結(jié)果越穩(wěn)定(表2)。但很多文獻(xiàn)提出蔥蒜類、香菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等農(nóng)產(chǎn)品的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性[8]。因此,大多試劑盒說明書會建議處理這類樣品時,采取整株蔬菜(或大塊蔬菜)浸出提取液的方法。對葉綠素含量較高的蔬菜也可采取類似方法。但也有廠家研發(fā)了抗干擾的新型儀器和配套的固化酶制劑,如SN-V生物傳感器型農(nóng)藥殘留檢測儀[8],其具體性能還需進(jìn)一步考證。

表2　不同樣品的加標(biāo)速測判斷結(jié)果

將韭菜準(zhǔn)確稱取1 g,用剪刀剪成1 cm左右長度;另準(zhǔn)備1份韭菜按照試劑盒說明書,取整枝浸泡,比較2種處理方法的抑制率,每種處理方式做3個平行。結(jié)果顯示,切碎的韭菜3個平行樣品抑制率均＞50%,樣品判斷為陽性;整枝浸提則3個平行樣品的抑制率均＜50%,樣品判斷為陰性?？梢娋虏饲兴楹蟮囊种坡拭黠@高于整枝提取的抑制率,切碎后的韭菜樣品易檢測得出假陽性結(jié)果(表3)。

表3　韭菜不同樣品制備方法對檢測結(jié)果的影響

2.2不同品牌試劑盒的檢測準(zhǔn)確性

比較2個品牌試劑盒對5種農(nóng)藥殘留的檢測準(zhǔn)確性可知,T1對克百威、甲萘威的檢測靈敏度高于其他2種儀器,但對毒死蜱、甲胺磷靈敏度不高,易出現(xiàn)假陰性; T2對甲胺磷的檢測靈敏性高于其他2種儀器,但對克百威、毒死蜱、甲萘威靈敏度不高。

相比GB 2763—2014中規(guī)定的蔬菜中農(nóng)藥最大殘留限量值,T1對敵敵畏、克百威、甲萘威較為敏感,可對標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限量濃度做出準(zhǔn)確判斷,毒死蜱在理論檢測限加標(biāo)濃度下檢測結(jié)果顯示為假陰性,檢測能力并不如生產(chǎn)廠家所述靈敏度,對甲胺磷的檢測能力無法滿足GB 2763—2014的要求。T2對甲胺磷的敏感度略高于T2,但仍難以滿足國標(biāo)要求。其他4項農(nóng)藥的檢測情況同T1 (表4)。

表4　儀器靈敏度比較

毒死蜱是廣譜性農(nóng)藥,目前在蔬菜、水稻生產(chǎn)中使用廣泛,也是較多檢出的農(nóng)藥品種之一[10-11],但如T1,T2一般,大多數(shù)酶抑制法農(nóng)殘速測儀和配套的試劑盒對毒死蜱的檢測能力都比較低[7,12],假陰性率較高,無法實現(xiàn)有效的監(jiān)控。目前也有品牌對毒死蜱有較好的敏感性。戴慧峰等[13]驗證了博納CL-BIII型農(nóng)殘速測儀的性能,認(rèn)為該儀器對毒死蜱有較高的靈敏度。

3　小結(jié)與討論

本試驗以2種農(nóng)藥殘留速測試劑盒為樣本,通過實驗室內(nèi)部、實驗室外部比較,得出2個品牌試劑盒檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和對幾種農(nóng)藥殘留檢測的靈敏度。結(jié)果表明,青菜、黃瓜對檢測結(jié)果基本無干擾,檢測判定結(jié)果主要還是由儀器和酶制劑本身對農(nóng)藥的特異性決定,但韭菜汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),切碎后浸提檢測產(chǎn)生了假陽性,需整株提取,類似韭菜的香菜、番茄等也需采取同樣的處理方法。

本試驗所用酶抑制法根據(jù)乙酰膽堿酯酶被抑制的程度(抑制率)來檢測蔬菜上的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留,具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優(yōu)點,能對有農(nóng)藥殘留的蔬菜進(jìn)行粗篩,將一部分農(nóng)藥殘留含量較高的蔬菜控制在市場之外。但根據(jù)試驗的結(jié)果,不同廠家研發(fā)的酶制劑對具體農(nóng)藥品種的特異性有差異,有的對克百威、甲萘威的檢測靈敏度高,有的對甲胺磷的檢測靈敏性高。所以,采購酶制劑時需根據(jù)實際需要,選擇對重點監(jiān)控農(nóng)藥殘留指標(biāo)靈敏度高的產(chǎn)品。但若要擴(kuò)大檢測項目范圍,建議對同一樣品分別使用多個廠家的酶制劑進(jìn)行檢測。酶抑制劑普遍對毒死蜱的檢測靈敏度較低,需繼續(xù)開發(fā)特異性酶制劑。

除產(chǎn)品品牌、樣品種類等會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響外,操作時,培養(yǎng)溫度、酶的活性、樣品測試速度、比色皿潔凈度和儀器的維護(hù)等都會影響試驗結(jié)果[14-15],需操作人員注意。

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(責(zé)任編輯：張瑞麟)

中圖分類號：S481+.8

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：0528-9017(2016)04-0517-03

DOI10.16178/j.issn.0528-9017.20160421

收稿日期:2015-12-14

作者簡介:金 彬(1978—),浙江溫州人,農(nóng)藝師,本科,從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)控工作,E-mail:nbjinbin@126.com。