結(jié)核性與惡性胸腔積液中IL—6、IL—8、IL—18的表達(dá)水平及其意義

武忠長(zhǎng)

[摘要] 目的 探討白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-8（interleukin-8， IL-8）、白細(xì)胞介素-18（interleukin-18，IL-18）在結(jié)核性與惡性胸腔積液中的表達(dá)水平及其臨床意義。 方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)本院2014年10月～2015年10月收治的56例結(jié)核性胸膜炎患者、42例惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6、IL-8、IL-18的表達(dá)水平。 結(jié)果 結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達(dá)水平為（1131.2±21.4）pg/mL，IL-18表達(dá)水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達(dá)水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達(dá)水平為（367.3±22.4）pg/mL。結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達(dá)水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達(dá)水平顯著高于惡性腫瘤患者，可作為臨床鑒別診斷的參考指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 結(jié)核；胸腔積液；IL-6；IL-18；IL-8

[中圖分類號(hào)] R521.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）07-0094-03

[Abstract] Objective To determine the levels and diagnose value of IL-6， IL-8， IL-18 in tuberculosis and malignant pleural effusion. Methods Enzyme-linked immtmosorbent assay（ELISA） was used to evaluate the levels of IL-6， IL-8， IL-18 in 56 cases of tuberculosis pleural effusion， 42 cases of malignant pleural effusion who were hospitalized from Oct 2014 to Oct 2015. Results The levels of IL-6， IL-8， IL-18 in tuberculosis pleural effusion patients were （510.3±42.1 pg/mL， 1131.2±21.4 pg/mL and 795.6±30.2 pg/mL）. Whereas the levels of IL-6， IL-8， IL-18 in malignant pleural effusion patients were （212.4±40.9 pg/mL， 1084.8±11.0 pg/mL， 367.3±22.4 pg/mL）. The levels of IL-6 and IL-18 in tuberculosis pleural effusion were significantly higher than that in malignant pleural effusion（P<0.05）， while the level of IL-8 in two groups showed no significantly difference（P>0.05）. Conclusion The levels of IL-6， IL-18 in tuberculosis and malignant pleural effusion are different， which could be used as a reference indicator.

[Key words] Tuberculosis； Pleural effusion； IL-6； IL-18； IL-8

胸腔積液是臨床常見病理現(xiàn)象，由全身疾病或胸膜疾病引起液體過多滲出或漏出于胸膜腔中而產(chǎn)生。流行病學(xué)調(diào)查顯示，全球每年有超過30億人患胸腔積液疾病[1]。其中結(jié)核性與惡性胸腔積液是臨床常見的滲出性胸腔積液，分別占胸膜疾病的49.6%和29.6%[2]。胸腔積液是肺結(jié)核病變的常見表現(xiàn)形式，結(jié)核病患者出現(xiàn)胸腔積液的比例大約為14.3%～19.3%[3]。肺癌是引起惡性胸腔積液最常見的腫瘤之一，約有25%的肺癌患者有胸腔積液，其次為乳腺癌[4，5]。結(jié)核性與惡性胸腔積液的治療方法、預(yù)后迥異，因此對(duì)于兩種不同的胸腔積液的鑒別診斷對(duì)臨床醫(yī)生十分重要。研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)核性、惡性胸腔積液中含有大量蛋白質(zhì)、炎癥細(xì)胞以及多種細(xì)胞因子等[6，7]。隨著分子免疫學(xué)的逐步進(jìn)展，近年來胸腔積液的免疫學(xué)檢查逐漸受到重視，尤其是細(xì)胞因子在胸腔積液中的作用研究。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)結(jié)核性與惡性胸腔積液中的IL-6、IL-8、IL-18的表達(dá)水平，初步探討其在結(jié)核性、惡性胸腔積液中的變化以及臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 結(jié)核性胸腔積液組 以回顧性研究方式選擇本院2014年10月～2015年10月呼吸內(nèi)科收治的胸腔積液患者56例，男29例，女27例，年齡17～70歲，平均（37.6±9.3）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均有結(jié)核中毒癥狀；②胸膜活檢均有典型結(jié)核性肉芽腫改變；③胸腔積液經(jīng)常規(guī)生化檢查確定為滲出性；④經(jīng)正規(guī)抗結(jié)核治療2～4周后癥狀消失并且胸腔積液吸收快。

1.1.2 惡性胸腔積液組 選擇本院2014年10月～2015年10月呼吸內(nèi)科、胸外科等收治的胸腔積液患者42例，男23例，女19例，年齡25～78歲，平均（42.4±8.9）歲。所有患者均經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)且未經(jīng)治療，其中肺癌胸膜轉(zhuǎn)移30例，惡性胸膜間皮瘤5例，肝癌胸膜轉(zhuǎn)移3例，乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移2例，淋巴瘤2例。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 所有患者于治療前經(jīng)胸腔穿刺術(shù)抽取新鮮胸腔積液5 mL后置于肝素處理過的試管中，經(jīng)2000 r/min離心10 min，取上清液保存于-80℃冰箱中待用。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。人IL-6、IL-8、IL-18定量ELISA試劑盒均購自美國Biolegend公司，應(yīng)用美國Bio-Rad酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值。

1.3 觀察指標(biāo)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與450 nm吸光度值獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，讀取所測(cè)樣品吸光度值對(duì)應(yīng)濃度即為待測(cè)樣品濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

計(jì)量資料以（x±s）表示，所有數(shù)據(jù)使用SPSS16.0軟件進(jìn)行分析，組間比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)核性與惡性胸腔積液中IL-6、IL-8、IL-18的表達(dá)水平

ELISA檢測(cè)結(jié)果如表1所示，結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達(dá)水平為（1131.2±21.4）pg/mL，IL-18表達(dá)水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達(dá)水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達(dá)水平為（367.3±22.4）pg/mL。結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達(dá)水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 IL-6、IL-18對(duì)結(jié)核性與惡性胸腔積液的臨床意義

ROC曲線顯示（封三圖3），以結(jié)核性胸腔積液組為陽性，惡性胸腔積液組為陰性，IL-6、IL-18的曲線下面積分別為75.3、98.3（表2），聯(lián)合檢測(cè)IL-6、IL-18能提高結(jié)核性胸腔積液的診斷效能至96.85%。靈敏度=真陽性人數(shù)/（真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)）×100%；特異度=真陰性人數(shù)/（真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù)）×100%。

3 討論

目前臨床對(duì)于結(jié)核性、癌性胸腔積液的診斷主要依賴于細(xì)胞學(xué)檢查、結(jié)核菌檢測(cè)、胸膜活檢病理診斷等，但敏感度、靈敏度等難以滿足臨床需要。研究表明，不同原因?qū)е碌男啬ぜ膊【杉せ蠲庖呒?xì)胞病聚集于局部病變部位、刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，細(xì)胞因子的免疫調(diào)節(jié)作用與胸膜病變的病理過程密切相關(guān)。IL-6由T淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、造血等作用，與炎癥、自身免疫性疾病、惡性腫瘤密切相關(guān)[8，9]。IL-8可由單核細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生，是炎癥反應(yīng)重要介質(zhì)之一。據(jù)報(bào)道，IL-8與呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制有關(guān)，并且能促進(jìn)腫瘤血管生長(zhǎng)[10，11]。IL-18是由1995年Okamura首次發(fā)現(xiàn)的Th1型細(xì)胞因子，具有多種生物學(xué)活性。結(jié)核菌的感染控制主要依賴于Th1型免疫應(yīng)答，IL-18在機(jī)體抗結(jié)核免疫中具有重要作用[12，13]。盡管細(xì)胞因子的基因多態(tài)性較為少見，但越來越多的研究表明血漿中細(xì)胞因子含量以及啟動(dòng)子、編碼區(qū)的突變與結(jié)核的易感性相關(guān)[14，15]。因此，探討IL-6、IL-8、IL-18在結(jié)核性與惡性胸腔積液中的不同表達(dá)水平對(duì)兩者臨床鑒別診斷具有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（510.3±42.1）pg/mL，IL-8表達(dá)水平為（1131.2±21.4 pg/mL），IL-18表達(dá)水平為（795.6±30.2）pg/mL；惡性腫瘤患者的胸腔積液中IL-6表達(dá)水平為（212.4±40.9）pg/mL；IL-8表達(dá)水平為（1084.8±11.0）pg/mL，IL-18表達(dá)水平為（367.3±22.4）pg/mL。結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達(dá)水平顯著高于惡性腫瘤患者（P<0.05），IL-8表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。ROC曲線顯示，以結(jié)核性胸腔積液組為陽性，惡性胸腔積液組為陰性，IL-6、IL-18的曲線下面積分別為75.3、98.3，聯(lián)合檢測(cè)IL-6、IL-18能提高結(jié)核性胸腔積液的診斷效能至96.85%。由此可見，IL-6、IL-18兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)能明顯提高敏感度和特異度，對(duì)于結(jié)核性和惡性胸腔積液的鑒別診斷具有重要價(jià)值。

綜上所述，本研究結(jié)果提示，結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中IL-6、IL-18表達(dá)水平顯著高于惡性腫瘤患者，聯(lián)合檢測(cè)IL-6、IL-18可作為臨床鑒別診斷的有效參考指標(biāo)。

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（收稿日期：2015-12-18）