自身免疫性肝病患者自身抗體檢測及臨床意義

高紅梅

【摘要】 目的：探討自身免疫性肝病患者自身抗體檢測的臨床意義。方法：選取筆者所在醫(yī)院2013年10月-2014年9月收治的自身免疫性肝?。ˋILD）患者185例，選擇同期內病毒性肝炎患者170例和健康體檢者80例（對照組），分別檢測ANA（抗核抗體）、AMA（抗線粒體抗體）、SMA（抗平滑肌抗體）、ANCA（抗中性粒細胞胞漿抗體）和抗MPO（抗髓過氧化物酶抗體），統(tǒng)計并比較三組檢測結果差異。結果：在自身抗體檢出率上，AILD組為97.3%（180/185），病毒性肝炎組為40.6%（69/170），對照組為7.5%（6/80），AILD組遠遠高于病毒性肝炎組和對照組，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測陽性率上，AILD組顯著高于病毒性肝炎組和對照組，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論：利用自身抗體檢測的方法，可有效提高自身免疫性肝病的診斷準確率，對患者的預后和生存質量有著重要意義，值得臨床推廣使用。

【關鍵詞】 自身免疫性肝??； 自身抗體檢測； 臨床意義

中圖分類號 R575 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）7-0054-02

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.7.029

自身免疫性肝?。ˋILD）包括自身免疫性肝炎（AIH）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）三種[1]，其發(fā)病原因是患者肝臟被自身免疫系統(tǒng)攻擊后發(fā)生炎癥、肝細胞或膽管壞死引起的，在組織學變化和臨床表現(xiàn)上有相互交叉、各不相同的特點，增加了診斷難度[2-3]。近年來，自身抗體檢測成為自身免疫性肝病臨床診斷的重要手段，筆者選取同期的自身免疫性肝病患者185例、病毒性肝炎患者170例、健康體檢者80例為研究對象，探討自身免疫性肝病診斷中自身抗體檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取筆者所在醫(yī)院2013年10月-2014年9月收治的自身免疫性肝病患者185例，選擇同期內病毒性肝炎患者170和健康體檢者80例（對照組）。所有患者均簽署知情同意書。其中，自身免疫性肝炎（AIH）75例，男29例，女46例，年齡19～63歲，平均（45.3±2.4）歲；原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）53例，

男22例，女31例，年齡27～61歲，平均（47.5±3.2）歲；原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）57例，男23例，女34例，年齡16～65歲，

平均（43.6±4.4）歲，所有自身免疫性肝病患者檢查均無病毒感染指標，肝功能出現(xiàn)異常。病毒性肝炎患者中，HAV（甲型肝炎）

44例，男19例，女25例，年齡18～62歲，平均（44.1±3.4）歲；

HBV（乙型肝炎）62例，男28例，女34例，年齡20～66歲，平均（46.3±4.5）歲；HCV（丙型肝炎）36例，男15例，女

21例，年齡19～64歲，平均（43.5±2.9）歲；HEV（戊型肝炎）

28例，男11例，女17例，年齡22～61歲，平均（43.9±5.1）歲。健康體檢者確診無任何肝病，男38例，女42例，年齡21～64歲，

平均（44.3±3.5）歲。所有自身免疫性肝病患者檢查均無病毒感染指標，肝功能出現(xiàn)異常。不同組人員性別、年齡等一般資料上比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

（1）由專業(yè)護士人員對試驗者進行靜脈采血，患者保持空腹，采血量為5 ml，靜置1 h后用離心機以3000 r/min轉速離心5 min，留取血清，在-20 ℃下保存，得到檢驗標本。（2）在自身抗體檢測中，ANA、AMA、SMA和ANCA采取的是間接免疫熒光法，試劑盒來自德國歐蒙醫(yī)學診斷有限公司，采用的抗原依次為Hep-2細胞和猴肝、大鼠的冰凍腎組織切片、大鼠的胃冰凍組織切片、覆有中性粒細胞生物薄片復合片。在具體檢測過程中，要先將生物載片恢復室溫，將檢測樣本進行1∶100倍稀釋，在檢測加樣板上設置陰、陽性對照，加樣板每一反應區(qū)加入

25 μl稀釋后的血清，然后覆蓋生物薄片，在室溫下放置30 min，用PBS緩沖液沖洗后加入25 μl熒光素標記二抗，再在室溫下放置30 min后再次用PBS緩沖液沖洗，最后封片用熒光顯微鏡觀察結果。參考值選取間接免疫熒光試劑診斷標準，ANA、AMA、SMA和ANCA的陽性標準為>1∶100。（3）抗MPO抗體檢測采用的是酶聯(lián)免疫吸附法，其試劑盒也是德國歐蒙醫(yī)學診斷有限公司生產，在檢測操作中，需要先將樣本進行1∶100倍稀釋，然后將100 μl的稀釋血清、陰性、陽性對照加入相應微孔中，在室溫條件下孵育30 min后進行3次洗板；加入100 μl酶標抗體后，再在室溫條件下孵育30 min并洗板3次，然后加入100 μl底物顯色，最后加入終止液終止反應，以450 nm波長進行比色，得到結果。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組自身抗體檢出率及檢測陽性率比較

在自身抗體檢出率上，AILD組為97.3%（180/185），病毒性肝炎組為40.6%（69/170），對照組為7.5%（6/80），AILD組遠遠高于病毒性肝炎組和對照組（P<0.05）。在AILD組中，ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測陽性率分別為45.4%、46.5%、29.7%、49.7%、35.7%，均顯著高于病毒性肝炎組和對照組，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。而PSC的SMA檢測陽性率與非自身免疫性肝病、對照組差別均不顯著，無法作為PSC檢測標準，不同類型肝病自身抗體檢測陽性率見表2。

3 討論

自身免疫性肝病是一種常見的臨床肝臟疾病，其病因、組織學變化等存在相互交叉的特點，在臨床上經常發(fā)生誤診，如果采取抗病毒和增強免疫方法進行治療，反而會加重患者的病情，給患者的預后和生存質量造成嚴重威脅。近些年來，隨著醫(yī)療水平的不斷提升，對自身免疫性肝病的認識逐步加深，自身抗體檢測成為自身免疫性肝病臨床診斷的重要措施[4-6]。

自身免疫性肝病是由于肝臟受機體免疫系統(tǒng)攻擊引起的，表現(xiàn)為肝功能異常，與病毒性肝炎在臨床癥狀上有一定的相似性，部分自身抗體在病毒性肝炎血清中也存在，僅通過常規(guī)的檢查容易被誤診為普通肝炎或肝硬化[7]。

自身免疫性肝病是一個慢性發(fā)展的過程，AIH、PBC和PSC會表現(xiàn)出不同的特點，其自身抗體的種類、含量也會隨著病情的進展發(fā)生改變，根據(jù)這一特點，通過自身抗體檢測的方式，能夠準確區(qū)分自身性免疫肝病和病毒性肝炎，并確診患者自身性免疫肝病的具體類型[8]。

在本組研究中，自身免疫性肝病組的ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測陽性率顯著高于非自身免疫性肝病組和對照組，而PSC的SMA檢測陽性率與非自身免疫性肝病、對照組差別均不顯著，無法作為PSC檢測標準。

綜上所述，利用自身抗體檢測的方法，可以有效提高自身免疫性肝病的診斷準確率，對于患者的預后和生存質量有著重要意義，值得臨床推廣使用。

參考文獻

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（收稿日期：2015-11-18）