DC—CIK在前列腺癌治療中耐受性的臨床研究

姜濤 胡志林 王國(guó)良 葉劍飛 畢海 馬潞林

[摘要] 目的 探討（DC-CIK）免疫細(xì)胞治療前列腺癌的耐受性、生活質(zhì)量及不良反應(yīng)。 方法 2014 年 11 月～2015年12月前列腺癌患者 36例 ，行手術(shù)包括開放的（2例）或腹腔鏡（22例）前列腺癌根治術(shù)和放射性粒子植入術(shù)（12例）（經(jīng)會(huì)陰），術(shù)后應(yīng)用DC-CIK免疫細(xì)胞治療3個(gè)周期。對(duì)照組36例，術(shù)后未應(yīng)用（DC-CIK）免疫細(xì)胞治療。3個(gè)周期后評(píng)價(jià)肝腎功能、耐受性、不良反應(yīng)、生活質(zhì)量。 結(jié)果 36例前列腺癌患者在完成DC-CIK免疫細(xì)胞治療3個(gè)周期后肝功、腎功毒性反應(yīng)均為 0 度?；颊呖傮w生活狀況治療后明顯提高，評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；3個(gè)癥狀領(lǐng)域的疲乏、疼痛、惡心嘔吐明顯改善，評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療3周期后卡氏評(píng)分（Karnofsky）評(píng)分明顯提高，與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 36例患者中2例在輸注后體溫升高，最高達(dá)39.0℃；1例體溫達(dá)41℃；1例出現(xiàn)下肢輕微水腫，2d后消失；1例出現(xiàn)困乏，5h后緩解。 結(jié)論 腹腔鏡或開放的根治性前列腺切除術(shù)和放射性粒子植入術(shù)后，聯(lián)合DC-CIK免疫細(xì)胞治療3周期后與對(duì)照組相比患者肝腎功能無明顯變化、耐受性良好、不良反應(yīng)輕微、生活質(zhì)量改善明顯。但是遠(yuǎn)期療效及影響缺乏確切資料，需進(jìn)一步觀察與研究。治療過程中個(gè)別患者出現(xiàn)發(fā)熱、困乏、雙下肢水腫，但需高度重視、早期發(fā)現(xiàn)、早期處理。

[關(guān)鍵詞] 前列腺癌；樹突狀細(xì)胞；CIK細(xì)胞；預(yù)后

[中圖分類號(hào)] R737.25 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）08-0011-04

在歐美，前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤之一，美國(guó)前列腺癌發(fā)病率占第一位，中國(guó)前列腺癌發(fā)病率遠(yuǎn)低于歐美，但近年來逐漸增長(zhǎng)。早期大多數(shù)前列腺癌患者無明顯癥狀，常體檢發(fā)現(xiàn)，也可在良性前列腺增生手術(shù)標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)[1]。前列腺癌一旦轉(zhuǎn)移放、化療等方法效果均不理想。近年研究表明以樹突狀細(xì)胞（DC）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）混合培養(yǎng)后回輸體內(nèi)的細(xì)胞免疫腫瘤技術(shù)治療方式，取得了較好的臨床效果[1-2]，DC-CIK免疫細(xì)胞治療前列腺癌是一種新型的治療方法，有效率54%[3]。DC 細(xì)胞是專職抗原呈遞細(xì)胞，功能最強(qiáng)；CIK細(xì)胞具有非主要組織相容性復(fù)合體限制性，可以殺傷腫瘤活性。DC-CIK免疫細(xì)胞治療腫瘤技術(shù)的兩個(gè)重要部分包括DC細(xì)胞與CIK 細(xì)胞，前者負(fù)責(zé)識(shí)別病原，激活獲得性免疫系統(tǒng)；后者發(fā)揮自身細(xì)胞毒性和分泌細(xì)胞因子可以殺傷腫瘤細(xì)胞[2-4]。本文研究36 例前列腺癌患者在接受手術(shù)或放射性粒子植入治療后，均完成3 個(gè)周期DC-CIK免疫細(xì)胞治療腫瘤技術(shù)后患者的肝腎功能資料，評(píng)估其安全性及耐受性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2014 年 11 月～2015年12月收治的前列腺癌患者36例，均行手術(shù)包括開放的（2例）或腹腔鏡（22例）前列腺癌根治術(shù)和放射性粒子植入術(shù)（12例）（經(jīng)會(huì)陰），男36例，年齡45～86歲，平均（67.3±11.9）歲。美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)（AJCC）2002-TNM分期，T1N0M0者2例，T2N0M0者10例，T3N0M0者10例，T4N0M0者6例，T4N0M1b者4例，T4N1M1b者4例。術(shù)后應(yīng)用DC-CIK免疫細(xì)胞治療3 個(gè)周期。

2014 年 11 月～2015年12月前列腺癌患者36例，行手術(shù)包括開放的（2例）或腹腔鏡（22例）前列腺癌根治術(shù)和放射性粒子植入術(shù)（12例）（經(jīng)會(huì)陰），術(shù)后應(yīng)用DC-CIK免疫細(xì)胞治療3周期。對(duì)照組36例，術(shù)后沒有應(yīng)用（DC-CIK）免疫細(xì)胞治療。3周期后評(píng)價(jià)肝腎功能、耐受性、不良反應(yīng)、生活質(zhì)量。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

①腹腔鏡或開放的根治性前列腺癌切除術(shù)和放射性粒子植入術(shù)；②術(shù)后1周以上外科情況解除；③病理證實(shí)為前列腺癌，除外合并身體其他惡性腫瘤者；④除外有嚴(yán)重食物或藥物過敏史者；⑤Karnofsky評(píng)分≥70，PS評(píng)分≤2；⑥預(yù)期壽命>6個(gè)月；⑦要求治療前為正常血常規(guī)、肝腎功能化驗(yàn)指標(biāo)不能超過正常值的1.5倍，心電圖檢查正常；⑧本人及家屬簽署《生物細(xì)胞免疫腫瘤治療技術(shù)知情同意書》和《免疫細(xì)胞治療申請(qǐng)單》。按此標(biāo)準(zhǔn)，共36例納入研究。

1.3 DC-CIK免疫細(xì)胞治療

治療前取外周靜脈血（50～120 mL、細(xì)胞中心實(shí)驗(yàn)室提供的采血袋）。采血前1 d和采血當(dāng)天少食油膩、清淡為主飲。

1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng) 于中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理、培養(yǎng)、誘導(dǎo)。第1周培養(yǎng)DC細(xì)胞。后按比例一將成熟的DC細(xì)胞和CIK混合培養(yǎng)，培養(yǎng)2周后平均分3份。提前一天通知主治醫(yī)生，連續(xù)3 d回輸患者。

1.3.2 運(yùn)輸條件 路程預(yù)計(jì)超過1 h的，溫度≥37.0℃或溫度≤2℃時(shí)，保存和運(yùn)輸須保溫箱低溫（2℃～8℃）。細(xì)胞在常溫下，1 h內(nèi)到達(dá)不用特殊處理。劇烈震蕩在運(yùn)輸過程中盡量避免。經(jīng)靜脈輸給患者。

1.3.3 細(xì)胞的輸注 特別強(qiáng)調(diào)的是在細(xì)胞輸注過程中，慢速，滴數(shù)維持在（35～45）滴/min。每次需予地塞米松2 mg。療程之間間隔1個(gè)月，如有特殊情況具體輸注時(shí)間可以調(diào)整。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

1.4.1 生活質(zhì)量評(píng)估 參照國(guó)際通用的卡氏評(píng)分[4，5]，將生活質(zhì)量及體力改善狀況（Karnofsky）評(píng)價(jià)，提高>20 分有效。

1.4.2 毒副反應(yīng) 不良反應(yīng)、耐受性、毒副反應(yīng)的評(píng)價(jià)按抗癌藥物急性及亞急性毒性反應(yīng)分度標(biāo)準(zhǔn)（WHO）進(jìn)行[4]。毒副反應(yīng)包括肝腎毒性、血液毒性、消化道反應(yīng)、神經(jīng)毒性及發(fā)熱、心臟毒性，均分為 0～Ⅳ度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Excel 建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。比較樣本采用均數(shù)檢驗(yàn)；生存資料分析采用Logrank檢驗(yàn)及Kaplan-Meier法。計(jì)量資料以（x±s）表示；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝腎毒性反應(yīng)

患者肝腎功能在治療前均為正常，在完成DC-CIK免疫細(xì)胞治療3個(gè)周期后，36例均未出現(xiàn)肝腎功能異常，發(fā)生率0。按抗癌藥物急性及亞急性毒性反應(yīng)分度標(biāo)準(zhǔn)（WHO），36例前列腺癌患者的肝腎功能損害毒性反應(yīng)均為 0 度。見表1。

2.2 總體生活質(zhì)量的評(píng)估

患者的總體生活狀況評(píng)分治療后明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3個(gè)癥狀領(lǐng)域的疲乏、疼痛、惡心嘔吐明顯改善，評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 癥狀改善情況

研究組的總體健康狀況明顯提高，治療3周期后卡氏評(píng)分（Karnofsky）評(píng)分總提高率分別為90%。與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2.4 36例前列腺癌患者DC-CIK 免疫細(xì)胞治療3個(gè)周期后毒副反應(yīng)

DC-CIK 免疫細(xì)胞治療前列腺癌患者的毒副反應(yīng)其中2例在輸注后體溫高逐漸，最高達(dá)39.0℃，給予物理降溫，臨床檢查未發(fā)現(xiàn)特殊原因，暫停輸注，待體溫正常后，繼續(xù)輸注，順利完成治療；1例患者因當(dāng)天輸注DC-CIK 免疫細(xì)胞治療前30 min，皮下注射IL-2，即注射用重組人白介素-2（欣吉爾）200 U，體溫達(dá)41℃，臨床給予解熱鎮(zhèn)痛、物理降溫、對(duì)癥支持治療，6 h后緩解；1例出現(xiàn)下肢輕微水腫，2 d后消失；1例出現(xiàn)困乏，5 h后緩解。肝腎功能均未見異常。見表4。

3 討論

前列腺癌在中國(guó)發(fā)病率遠(yuǎn)低于歐美，但近年來逐漸增長(zhǎng)，易骨轉(zhuǎn)移。對(duì)內(nèi)分泌治療初始敏感的前列腺癌患者多數(shù)最終產(chǎn)生激素抵抗，并最終導(dǎo)致死亡[6，7]。腫瘤患者體內(nèi)免疫功能減弱、進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。通過患者自身的DC-CIK 免疫細(xì)胞回輸?shù)霓k法不僅能殺傷腫瘤細(xì)胞，而且能起到正向提升機(jī)體免疫功能的作用。樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）是目前已知功能最強(qiáng)的專職抗原呈遞細(xì)胞，它在誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外多種因子共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞，兼有T細(xì)胞抗腫瘤活性和NK細(xì)胞的非MHC限制性細(xì)胞毒活性，我們既往的研究表明，DC和CIK共培養(yǎng)，可促進(jìn)CIK的增殖并增強(qiáng)其功能[8，9]。而DC-CIK細(xì)胞治療在實(shí)體瘤治療中的療效也得到廣泛認(rèn)可。

近年來，生物醫(yī)學(xué)發(fā)展迅速，相應(yīng)的生物治療也隨之成為治療腫瘤的一種新的方法，受到研究人員與臨床醫(yī)生的廣泛關(guān)注，為腫瘤患者帶來了治療的新希望[10-11]。目前臨床上采用DC-CIK免疫細(xì)胞治療腫瘤的技術(shù)一般應(yīng)用于術(shù)后或者晚期保守治療的患者，取得一定臨床效果，逐漸被臨床醫(yī)師和患者接受，國(guó)內(nèi)外大量研究證實(shí)其具有抗腫瘤作用。CIK細(xì) 胞是腫瘤殺傷細(xì)胞，CIK細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷腫瘤作用，且副作用小，是因?yàn)镃D3+、CD56+為雙陽性細(xì)胞，它的腫瘤殺傷作用同時(shí)對(duì)自體及異基因的腫瘤細(xì)胞，回輸時(shí)無IL-2，因此可減少寒戰(zhàn)、發(fā)熱等副作用的產(chǎn)生[12-13]。本文1例發(fā)熱患者即是因?yàn)榛剌斍拜斪L-2引起，給今后臨床使用DC-CIK免疫細(xì)胞治療腫瘤技術(shù)，提供了很好的避免副作用的提醒。

本文采用卡氏評(píng)分（Karnofsky）評(píng)分表評(píng)估前列腺癌患者的生活質(zhì)量，該評(píng)估反映了患者治療和生活過程中多個(gè)領(lǐng)域的情況，全面地評(píng)價(jià)了前列腺癌患者經(jīng)DC-CIK治療3周期后的生命質(zhì)量[13-15]。本研究認(rèn)為，經(jīng)DC-CIK治療3個(gè)周期后能夠改善患者的生活質(zhì)量，主要表現(xiàn)為以下的幾個(gè)方面：①DC-CIK治療3周期后臨床癥狀明顯改善，其中包括疼痛、疲乏和惡心嘔吐，癥狀的改善會(huì)減少患者對(duì)未來的擔(dān)憂和焦慮，獲得較好的心理體驗(yàn)。②DC-CIK細(xì)胞治療3周期后能夠不同程度地提高患者的情緒功能、軀體功能、認(rèn)知功能、社會(huì)功能和角色功能；③DC-CIK治療后患者的總體健康狀況明顯提高。

分析本項(xiàng)研究，先后出現(xiàn)3例發(fā)熱的患者，分析患者發(fā)熱原因可能與回輸?shù)募?xì)胞中含有IL-2的細(xì)胞因子有關(guān)，多數(shù)患者的發(fā)熱可控，可自然減退，其中有1例患者的因?yàn)樵谳斪⑶?0 min肌注過白介素-2，導(dǎo)致體溫41.0℃，給予相應(yīng)處理好轉(zhuǎn)，說明機(jī)體免疫系統(tǒng)活躍，通過積極回輸DC-CIK細(xì)胞，應(yīng)該有效。臨床上如果體溫高于39.0℃，可口服泰諾林配合物理降溫，多數(shù)患者的體溫可以控制，說明大多數(shù)患者對(duì)DC-CIK細(xì)胞免疫腫瘤治療3個(gè)周期能耐受，治療方法安全。在治療過程中要注意在回輸前48 h內(nèi)不用IL-2及其相關(guān)制品，可有效減少寒戰(zhàn)、發(fā)熱等副作用的產(chǎn)生。1例出現(xiàn)困乏，給予密切觀察病情并積極心理疏導(dǎo)，未給予任何治療，6 h后緩解，1例出現(xiàn)下肢輕微水腫，2 d后消失，原因不明，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

本研究我們采用DC-CIK細(xì)胞治療聯(lián)合手術(shù)或放射性粒子植入治療前列腺癌36例患者，均改善了患者因前列腺癌引起的臨床等癥狀，提高了生活質(zhì)量，未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的臨床副作用，取得了較好療效，提示DC-CIK細(xì)胞聯(lián)合手術(shù)或放射性粒子植入治療前列腺癌是安全有效的。我們目前病例較少，觀察隨訪時(shí)間短，遠(yuǎn)期療效及影響缺乏確切資料，需進(jìn)一步觀察與研究。

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（收稿日期：2016-01-03）