熱毒寧注射液對巨細(xì)胞病毒性心肌炎小鼠SOD活性及MDA含量的影響

范群雄 李崢嶸

湖北 十堰 442000）

摘要：目的 觀察熱毒寧注射液對病毒性心肌炎（VMC）小鼠血漿SOD活性及MDA含量的影響，探討熱毒寧注射液對病毒性心肌炎小鼠的抗炎保護(hù)作用。方法 40只雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分為四組：空白組（A組）、模型組（B組）、更昔洛韋注射液組（C組）、熱毒寧注射液組（D組），每組10只。A組腹腔注射0.5 ml生理鹽水，連續(xù)注射10 d；B、C、D各組首先腹腔注射巨細(xì)胞病毒（CMV）懸液0.1 ml，0.5 min后分別注射生理鹽水、更昔洛韋注射液、熱毒寧注射液各0.4 ml，連續(xù)治療10 d；10 d后采集血液，采用采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法檢測血清SOD活性及MDA含量。結(jié)果 與B組相比，C、D組小鼠的SOD活性顯著升高，MDA含量明顯降低（P<0.05），但C、D組相比無明顯差別。結(jié)論 熱毒寧注射液具有抗炎作用，對治療病毒性心肌炎小鼠具有一定的療效。

關(guān)鍵詞：病毒性心肌炎；熱毒寧注射液；SOD；MDA；小鼠

心肌炎主要是由病毒感染、化學(xué)物質(zhì)損傷或自身免疫引起的心肌局灶性或彌漫性炎性病變。心內(nèi)膜穿刺的病理檢查結(jié)果表明，大約60%心肌炎患者的心肌細(xì)胞病毒檢測為陽性[1]，這種因病毒感染心肌細(xì)胞而引起的心肌炎稱為病毒性心肌炎。大約有20%病毒性心肌炎患者逐漸演變?yōu)閿U(kuò)張型心肌病，其致殘致死率高[2]。能引發(fā)心肌炎的病毒較多，其中以柯薩奇病毒感染最為常見，CMV也是侵犯心肌的重要病毒之一。近年來，病毒性心肌炎患者發(fā)病率逐年上升，但具有明確療效的治療藥物卻為數(shù)不多。本課題研究了熱毒寧注射液對巨細(xì)胞病毒性心肌炎小鼠的抗炎保護(hù)作用。

1 資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)病毒、動(dòng)物 CMV由徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院急診實(shí)驗(yàn)室贈予，40只6～8w齡雄性BALB/c健康小鼠，體重25 g左右，購自湖北醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑、藥物SOD及MDA測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，更昔洛韋注射液購自湖北科益藥業(yè)有限公司，熱毒寧注射液由連云港康緣藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

1.3動(dòng)物分組、取材 將40只6w齡雄性BALB/c健康小鼠隨機(jī)分為四組：空白組（A組）、模型組（B組）、更昔洛韋注射液組（C組）、熱毒寧注射液組（D組），每組10只。A組腹腔注射0.5 ml生理鹽水，連續(xù)注射10 d；B、C、D各組首先腹腔注射10-4LogTCID50CMV懸液0.1 ml[3]，0.5 min后分別注射生理鹽水、更昔洛韋注射液、熱毒寧注射液各0.4 ml，連續(xù)治療10d； 10 d后眼球摘除取血法采集血液約1.0 ml，離心后，-20℃冰箱中保存，以檢測SOD活性及MDA含量。

1.4血清SOD及MDA含量檢測 按照SOD及MDA試劑盒說明書步驟進(jìn)行操作，檢測SOD及MDA含量。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS13.0軟件處理數(shù)據(jù)。多組定量資料間的比較進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，若方差齊采用單因素方差分析，若方差不齊采用Dunnett's T3（3）檢驗(yàn)。單因素方差分析中的兩兩比較采用SNK法檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與模型組相比，熱毒寧組、更昔洛韋組SOD活性顯著升高，MDA含量明顯降低（P<0.05），但熱毒寧組與更昔洛韋組相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

心肌炎是一種彌漫性或局限性的心肌炎性病變，其詳細(xì)發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與病毒本身對心肌的直接損傷及其引起的免疫反應(yīng)有關(guān)[4]，目前缺乏特效的病毒根治方法。熱毒寧注射液是復(fù)方中草藥注射劑，有效成分為青蒿、金銀花、梔子，具有解熱、抗病毒、抗細(xì)菌、增加免疫等藥理作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，青蒿含倍半萜內(nèi)酯、黃酮類、青蒿酮，具有抗病毒、解熱、抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)痛等作用。

VMC的發(fā)生與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān)，VMC時(shí)受損的心肌細(xì)胞產(chǎn)生的氧自由基破壞了原來的動(dòng)態(tài)平衡，引發(fā)了脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，而氧自由基的清除依賴抗氧化酶系的作用[5]。SOD是抗氧化酶系中的主要抗氧化酶，其活性高則抗氧化作用強(qiáng)。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的中間產(chǎn)物，其含量多少體現(xiàn)了氧化損傷的程度。

本研究結(jié)果顯示，熱毒寧注射液組小鼠SOD活性升高，MDA含量降低，但與更昔洛韋組無明顯差別，表明熱毒寧注射液具有抗氧化作用，其可使VMC小鼠的SOD活性升高，清除過表達(dá)的氧自由基，改善動(dòng)態(tài)失衡，減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而減少中間產(chǎn)物MDA含量抑制炎癥反應(yīng)。為臨床熱毒寧注射液治療病毒性心肌炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但熱毒寧注射液治療病毒性心肌炎的具體作用靶點(diǎn)尚有待于進(jìn)一步研究。

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編輯/金昊天