四川不同產(chǎn)地厚樸總生物堿的含量分析

董佳悅，劉美琳，任波，張梅

·品種品質(zhì)·

四川不同產(chǎn)地厚樸總生物堿的含量分析

董佳悅，劉美琳，任波，張梅

目的：測定四川不同產(chǎn)地厚樸中總生物堿的含量，為四川產(chǎn)區(qū)優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源篩選及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供參考。方法：采用非水滴定法分別測定16批四川不同產(chǎn)地二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸中總生物堿的含量，并對測定結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果：16批四川不同產(chǎn)地川厚樸中總生物堿含量為3.3978 mg·g-1～6.9111 mg·g-1，其中峨眉山市的茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村四個(gè)產(chǎn)地厚樸的總生物堿含量較其他產(chǎn)地高，分別為6.0625±0.1715 mg·g-1、6.2058±0.1850 mg·g-1、6.9111±0.0662 mg·g-1、6.0490±0.0809 mg·g-1，都江堰龍池鎮(zhèn)虹口景區(qū)觀風(fēng)溝和丫口產(chǎn)區(qū)川厚樸總生物堿含量則低于其他產(chǎn)區(qū)，分別為3.3978±0.0519mg·g-1、3.4380±0.0670mg·g-1。結(jié)論：四川境內(nèi)厚樸中總生物堿的含量存在明顯差異，其中尤以峨眉山市生物堿的含量較高。

厚樸;生物堿;含量測定；種質(zhì)資源

厚樸又名川樸、油樸、紫油厚樸等?！吨腥A人民共和國藥典》（2015年版）收載中藥厚樸為木蘭科植物厚樸Magnolia offcinalis Rehd.et Wils或凹葉厚樸Magnolia offcinalis Rehd.et Wils. var. bilobaRehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。其氣香，味辛辣、 微苦，具有燥濕消痰、下氣除滿的功效，用于濕滯傷中、脘痞吐瀉、痰飲喘咳等癥[1]。厚樸作為大宗常用中藥，其資源分布較廣。《本草經(jīng)集注》曾記載: 厚樸“今出建平、宜都。今四川東部、湖北西部等地[2]。隨著近年來厚樸資源調(diào)查發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)代厚樸資源主要分布在四川西南部、湖北西部、陜南及甘南等地[3]。化學(xué)研究方面發(fā)現(xiàn)厚樸藥材中主要包含三類化學(xué)物質(zhì)，分別為木脂素類、揮發(fā)油類及生物堿類成分，其中木脂素類成分中主要以厚樸酚、和厚樸酚兩種成分為主；其次揮發(fā)油中主要以桉葉醇含量最高；而生物堿類成分較其兩類成分含量較少，主要包括異啉類（木蘭箭毒堿、木蘭花堿）和有機(jī)胺類（柳葉木蘭堿）兩大類生物堿，其中異喹啉類生物堿廣泛存在于木蘭科植物中，具有較高藥用價(jià)值[4～6]。生物堿作為厚樸中主要化學(xué)成分之一，現(xiàn)代藥理藥效研究表明，生物堿有鎮(zhèn)痛、抗菌、降壓、松弛肌肉和抑制中樞等作用，其中一些生物堿有抑制氣管收縮作用，從而對哮喘有一定的治療作用[7]。但同時(shí)生物堿也是厚樸的主要毒性成分[8]。

四川自古至今作為厚樸的主要產(chǎn)區(qū)之一，因其出產(chǎn)的厚樸品質(zhì)優(yōu)良，療效佳，因此也是厚樸的道地產(chǎn)區(qū)之一。而四川境內(nèi)地域遼闊，厚樸種質(zhì)資源遍布了都江堰市、樂山市（沐川、馬邊等）、阿壩州（松潘、汶川、茂縣等)、峨眉山市等多個(gè)地區(qū)。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道不同品種、不同產(chǎn)地間化學(xué)成分組成及含量差異顯著[9～10]。因此我們采集了四川省內(nèi)16個(gè)不同產(chǎn)地的二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸，對其中總生物堿成分的含量進(jìn)行了研究與比較，現(xiàn)將分析結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料

1.1 藥材

厚樸藥材樣品分別從四川都江堰、峨眉山、樂山、眉山、阿壩州五個(gè)地區(qū)，16個(gè)厚樸產(chǎn)地集，由成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源與鑒定系裴瑾教授鑒定。均為木蘭科植物厚樸Magnolia offcinalis Rehd.Et Wils.的干燥干皮。厚樸來源見表1。

表1 厚樸藥材來源

1.2 儀器

BT 125D型電子天平（北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司），RE-5203旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）、2 mL半微量滴定管（天長市金橋分析儀器廠）。

1.3 試劑

試劑：甲醇、冰醋酸、醋酐、高氯酸、結(jié)晶紫均為分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定方法

2.1.1 供試品溶液的制備 取待測樣品粉末(通過四號(hào)篩)約1.5 g，精密稱定,置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，稱定重量,搖勻。室溫放置過夜(16小時(shí)以上)，再稱定重量。補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后放置,過濾得樣品溶液。

2.1.2 總生物堿含量測定 參考相關(guān)文獻(xiàn)[11～12]和《中華人民共和國藥典》（2015年版）四部“通則0702”非水溶液滴定法項(xiàng)下“第一法”測定[13]。精密量取供試品溶液10 mL，旋轉(zhuǎn)蒸干，殘?jiān)訜o水冰醋酸15 mL使溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.02mol·L-1)滴定至藍(lán)色，讀取體積，計(jì)算各樣品中總生物堿總含量。樣品含生物堿以木蘭箭毒堿(C19H24NO3)計(jì)算。

2.2 結(jié)果

16批不同產(chǎn)地川產(chǎn)厚樸的總生物堿含量比較結(jié)果見表2所示。

表2 各樣品中總生物堿含量測定結(jié)果（X±SD，n=3）

從表2可以看出，16批四川不同產(chǎn)地川厚樸中總生物堿含量為3.3978 mg·g-1～ 6.9111mg·g-1，其中峨眉山市茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村四個(gè)產(chǎn)地厚樸的總生物堿含量較其他產(chǎn)地高，分別為6.0625±0.1715mg·g-1，6.2058±0.1850 mg·g-1，6.9111±0.0662 mg·g-1，6.0490±0.0809 mg·g-1，而都江堰龍池鎮(zhèn)虹口景區(qū)觀風(fēng)溝和丫口兩個(gè)地點(diǎn)厚樸總生物堿含量相對較低，分別為3.3978±0.0519 mg· g-1，3.4380±0.0670 mg·g-1。綜合分析16批四川不同產(chǎn)地川厚樸大致劃分為峨眉山、眉山、樂山、都江堰及阿壩州五個(gè)區(qū)域，發(fā)現(xiàn)厚樸中總生物堿含量從高到低分別為峨眉山＞樂山＞阿壩州＞眉山＞都江堰，以峨眉山區(qū)域的厚樸中總生物堿的含量較高，都江堰產(chǎn)區(qū)厚樸中生物堿含量較低。

3 討論

厚樸作為我國珍貴中藥材，有著廣泛的藥效作用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。由于種質(zhì)資源的過度消耗，野生資源日益枯竭，大多數(shù)野生厚樸藥材質(zhì)量難以達(dá)到“安全、有效、可控、穩(wěn)定”的品質(zhì)要求。又因其栽培地區(qū)廣，采收年限差異大，且藥材來自不同部位，從而造成厚樸藥材品質(zhì)參差不齊。四川是厚樸的主要產(chǎn)區(qū)之一，也是資源高消耗地區(qū)，四川各地產(chǎn)厚樸藥材的品質(zhì)也存在一定的差異。已有的厚樸質(zhì)量控制指標(biāo)主要以其中所含木脂素類成分厚樸酚、和厚樸酚的含量作為標(biāo)準(zhǔn)，而未考慮其他兩類化學(xué)成分生物堿和揮發(fā)油。生物堿作為厚樸的主要成分之一，雖然其含量較木脂素類成分低，近年來研究發(fā)現(xiàn)其具有抑菌、抗腫瘤、抗炎、肌肉松弛、促進(jìn)胃腸蠕等作用[14]，同樣印證了厚樸對脘痞吐瀉、痰飲喘咳等癥治療作用。因此，有必要將生物堿作為厚樸質(zhì)量的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)之一。本試驗(yàn)通過對四川省內(nèi)16個(gè)產(chǎn)區(qū)二十年左右樹齡的木蘭科植物厚樸中總生物堿的含量進(jìn)行了測定與分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大部分產(chǎn)區(qū)厚樸中總生物堿的含量相近，但個(gè)別地區(qū)（眉山市的茶地村、豐收村、荷葉村、黑水村）所產(chǎn)厚樸中生物堿含量較高，與其他產(chǎn)地差異顯著，約為其他產(chǎn)地的1.5～2倍。因此，如將其作為評(píng)價(jià)指標(biāo)完善厚樸藥材質(zhì)量控制方法時(shí)，需進(jìn)一步開展其含量高低與藥效相關(guān)性研究。本文研究結(jié)果為完善厚樸質(zhì)量控制方法，篩選川產(chǎn)厚樸優(yōu)良種源及種源地，提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

[1] 吳錦玉,吳巖斌,易駿等.凹葉厚樸葉的化學(xué)成分研究[J].中草藥,2013,21:2965.

[2] 宋萬志,陳建民,季慶義.木蘭科藥用植物的研究——Ⅱ.厚樸的原植物和資源利用[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1984,03:213.

[3] 初敏,丁立文,劉 紅等.厚樸商品資源概述[J].中草藥,2003, 6:111.

[4] 李棣華. 厚樸研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012, 9:220.

[5] 張淑潔,鐘凌云.厚樸化學(xué)成分及其現(xiàn)代藥理研究進(jìn)展[J].中藥材,2013, 5:838.

[6] 郭健. 厚樸中生物堿成分及炮制地厚樸化學(xué)成分影響的研究[D].西南交通大學(xué),2012.

[7] 朱元元,封志平,徐長超等.厚樸總不能67生物堿對豚鼠離體氣管平滑肌的影響[J].中草藥,2009,S1:190.

[8] 楊熙東.厚樸的藥理作用及臨床應(yīng)用[J].中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)),2011,26:151.

[9] 黃文華,郭寶林,斯金平.不同種源厚樸酚性成分的HPLC圖譜研究[J]. 中國中藥雜志,2005,13:968.

[10] 婁方明,李群芳,邱維維.5種不同產(chǎn)地厚樸揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011, 7:3934.

[11] 曾 紅,宋明霞,梁兆昌等.井岡山產(chǎn)厚樸總生物堿含量分析[J]. 井岡山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2015, 1:1002.

[12] 楊紅兵,石 磊,詹亞華等.湖北恩施產(chǎn)厚樸的生物堿定量分析[J]. 湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007, 2:28.

[13] 中國藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S]:四部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:87.

[14] 郭強(qiáng). 厚樸與厚樸花現(xiàn)代藥理與臨床新用分析[J]. 中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理,2014,16:31.

（責(zé)任編輯：李蕓霞）

The analysis of total alkaloids content of Houpo from different habitats

/DONG Jia-yue, LIU Mei-lin, REN Bo, ZHANGMei //(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective: To analyze and evaluate the total alkaloid content of Houpo from different producing areas in Sichuan Province to provide a reference for selecting high-quality germplasm resources and study on quality standard. Method: 16 batches Houpo total alkaloid contents from different origins were determined using non-water titration and the results were compared. Result: The total alkaloid content of 16 batches Houpo were in the range of 3.3978 mg·g-1to 6.9111 mg·g-1. The total alkaloid contents of Houpo from Chadi village, Fengshou village, Heye village and Heishui village in Emeishan City were 6.0625±0.1715 mg·g-1, 6.2058±0.1850 mg·g-1, 6.9111±0.0662 mg·g-1, 6.0490±0.0809 mg·g-1, respectively, which were higher than that from other origins. But the contents of total alkaloids in the Guanfenggou and Yakou producing areas in Dujiangyan Longchi Hongkou Scenic spot were 3.3978±0.0519 mg·g-1and 3.4380±0.0670 mg·g-1, which were lower than that from other origins. Conclusion: There are obvious differences in the contents of Houpo total alkaloids, and Houpo from Emeishan City has the highest contents.

Houpo; alkaloids; content detection; germplasm Resources

R 284.2

A

1674-926X(2016)06-003-03

四川省科技計(jì)劃項(xiàng)目“中藥種質(zhì)資源庫建設(shè)關(guān)鍵技術(shù)研究及示范”，項(xiàng)目編號(hào)2014SZ0156

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

董佳悅（1991-），女，碩士在讀，研究方向?yàn)橹兴幱行С煞址治鲅芯? Tel:18280270918 Email:1070994058@qq.com

任波（1979-），男，副教授，從事中藥及復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究 Tel:(028)61800231 Email:bobofuly@163.com張梅（1963-），女，教授，博士生導(dǎo)師，從事中藥及其復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究工作

Tel:(028)61800231 Email:zhangmei63@126.com

2016-03-08