XE-2100血細(xì)胞分析儀顯微鏡復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用評(píng)價(jià)

宋軍　王麗芳　何旭　高羽高　劉曉　汪冉

050000　石家莊市，河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科

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·論著·

XE-2100血細(xì)胞分析儀顯微鏡復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用評(píng)價(jià)

宋軍王麗芳何旭高羽高劉曉汪冉

050000石家莊市，河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科

【摘要】目的建立適合本實(shí)驗(yàn)室Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的復(fù)檢規(guī)則，并進(jìn)行驗(yàn)證評(píng)價(jià)。方法參照國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)推薦的41條血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則和國(guó)內(nèi)XE-2100血液分析儀復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)制定協(xié)作組推薦的23條復(fù)檢規(guī)則，制定適用于本實(shí)驗(yàn)室的復(fù)檢規(guī)則，并在規(guī)則指導(dǎo)下通過(guò)對(duì)1 531份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果和顯微鏡復(fù)檢結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，即收集儀器無(wú)報(bào)警信息和有報(bào)警信息的標(biāo)本1 531例，進(jìn)行涂片、瑞吉氏染色并顯微鏡檢，分析儀器與鏡檢一致性、準(zhǔn)確度、特異性。評(píng)價(jià)應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則的假陰性率。結(jié)果陽(yáng)性符合率為98.7%，陰性符合率為99.5%，敏感度為98.0%，特異度為99.7%，準(zhǔn)確度為97.7%。假陰性率為2.0%。該規(guī)則的復(fù)檢率為19.8%。結(jié)論建立的復(fù)檢規(guī)則敏感度高、特異性強(qiáng)，假陰性率<5%，能有效地篩選異常標(biāo)本，提高工作效率，為臨床醫(yī)生的診斷治療提供有價(jià)值的信息。

【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀;復(fù)檢規(guī)則;鏡檢

目前，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀在醫(yī)院中廣泛應(yīng)用，但血常規(guī)的儀器檢測(cè)不能完全取代顯微鏡檢測(cè)，只能作為臨床中的篩選工具。國(guó)際血液學(xué)復(fù)檢專(zhuān)家組推薦了41條自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)則，但在臨床實(shí)際應(yīng)用中復(fù)檢率太高。各實(shí)驗(yàn)室需制定適合本實(shí)驗(yàn)室的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則，既保證血常規(guī)檢測(cè)的準(zhǔn)確性，又能提高檢測(cè)速率。為此，根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的具體情況和XE-2100的性能特點(diǎn)及該儀器異常細(xì)胞報(bào)警的情況，參考國(guó)內(nèi)外血常規(guī)復(fù)檢規(guī)則[1-3]，制定適合本實(shí)驗(yàn)室的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則，并對(duì)血細(xì)胞分析儀提供的數(shù)據(jù)與顯微鏡鏡檢結(jié)果的一致性進(jìn)行評(píng)估，評(píng)價(jià)制定的復(fù)檢規(guī)則。

1材料與方法

1.1材料2015年4月5日～6月29日共收集1 531例標(biāo)本，均來(lái)自我院住院患者，用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的一次性使用真空采血管(抗凝劑為乙二胺四乙酸二鉀，EDTA-K2)采集患者靜脈血抗凝標(biāo)本。每例標(biāo)本在測(cè)定時(shí)應(yīng)首先觀察標(biāo)本情況，標(biāo)本如果出現(xiàn)凝集、溶血、黃疸、乳糜，必要時(shí)應(yīng)重新采集。

1.2儀器XE-2100五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀及其原裝配套試劑，由日本Sysmex公司提供。該儀器采用Sysmex公司提供的高、中2種配套e-CHECK質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，并參加衛(wèi)生部、河北省臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)。血涂片顯微鏡分析應(yīng)用Olympus光學(xué)顯微鏡，血涂片用瑞氏-吉姆薩復(fù)合染液染色，染液按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]第3版的要求進(jìn)行配制。

1.3實(shí)驗(yàn)方法每日開(kāi)機(jī)后，首先用日本Sysmex公司提供的全血質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)，保證儀器在最佳檢測(cè)狀態(tài)。從每天的臨床標(biāo)本中隨機(jī)抽取20～25份用EDTA-K2抗凝的新鮮靜脈血2 ml，標(biāo)本經(jīng)XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后，2 h內(nèi)進(jìn)行推片，每份標(biāo)本制備 2 張血涂片，并進(jìn)行編號(hào)及瑞氏-姬姆薩染色。由 2 名具有細(xì)胞形態(tài)學(xué)經(jīng)驗(yàn)的工作人員，按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程操作》規(guī)定(第3版)，用雙盲法，在油鏡下將200個(gè)白細(xì)胞分類(lèi)，同時(shí)觀察各類(lèi)細(xì)胞形態(tài)并進(jìn)行白細(xì)胞、血小板數(shù)量的估計(jì)，取 2 人的平均值為最終結(jié)果。血涂片陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)參照全國(guó)血液學(xué)復(fù)檢專(zhuān)家小組提出的 12 條血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行[5]：(1)紅細(xì)胞明顯大小不等(細(xì)胞大小相差1倍以上)； 中空淡染(>1/2淡染區(qū)的紅細(xì)胞>30%)；(2)巨大血小板>15%；(3)可見(jiàn)血小板聚集；(4)Dohle小體粒細(xì)胞>10%；(5)含中毒顆粒的中性粒細(xì)胞>10%；(6)空泡變性粒細(xì)胞>10%；(7)原始和幼稚細(xì)胞≥ 1%； (8)早幼粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞≥ 1%；(9)晚幼粒細(xì)胞>2%；(10) 異型淋巴細(xì)胞>5%；(11)NRBC≥1%；(12)漿細(xì)胞≥1%。

1.4復(fù)檢規(guī)則制定參照國(guó)際血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則，針對(duì)本實(shí)驗(yàn)室情況，結(jié)合Sysmex XE-2100五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀的性能制定出的血涂片復(fù)檢規(guī)則(對(duì)于血液病患者只適合于初次檢驗(yàn))。見(jiàn)表1。

1.5復(fù)檢規(guī)則評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本經(jīng)XE-2100血細(xì)胞分析儀檢查后，符合其中任一項(xiàng)復(fù)檢規(guī)則即為復(fù)檢規(guī)則

表1　自定復(fù)檢規(guī)則

的陽(yáng)性標(biāo)本；血涂片鏡檢陽(yáng)性標(biāo)本即為人工鏡檢陽(yáng)性標(biāo)本。以人工鏡檢為金標(biāo)準(zhǔn)，真陽(yáng)性為儀器及鏡檢結(jié)果均陽(yáng)性；假陽(yáng)性為儀器結(jié)果陽(yáng)性, 鏡檢結(jié)果陰性；真陰性為儀器及鏡檢結(jié)果均陰性；假陰性為儀器結(jié)果陰性,鏡檢結(jié)果為陽(yáng)性。計(jì)算真陽(yáng)性、假陽(yáng)性、真陰性、假陰性例數(shù)，進(jìn)而分析儀器與鏡檢一致性、準(zhǔn)確度、特異性。評(píng)價(jià)應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則的假陰性率。假陰性率=假陰性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%。

2結(jié)果

2.1儀器檢測(cè)與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較1 531份標(biāo)本經(jīng)XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢查后符合復(fù)檢規(guī)則陽(yáng)性標(biāo)本303份，復(fù)檢率為19.8%(303/1 531)。根據(jù)本室自定的復(fù)檢規(guī)則復(fù)檢后真陽(yáng)性率為98.0%，假陽(yáng)性率為0.33%，真陰性率為99.7%，假陰性率為2.0%。XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)異常的血液標(biāo)符本檢出能力的有關(guān)合率分別為，敏感度98.0%，特異度99.7%，準(zhǔn)確度97.7%。見(jiàn)表2。

2.2符合復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本顯微鏡復(fù)查分析在303份符合復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本中，血小板計(jì)數(shù)減少?gòu)?fù)檢陽(yáng)性率最高52.1%，其次為白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常復(fù)檢陽(yáng)性率為 41.6%。見(jiàn)表3。

表2　1 531份標(biāo)本儀器檢測(cè)結(jié)果與血涂片顯微鏡鏡檢結(jié)果比較　例

表3　303份符合復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本顯微鏡復(fù)查分析

3討論

血細(xì)胞分析儀應(yīng)用至今，分析過(guò)程已完全自動(dòng)化，但由于細(xì)胞形態(tài)的多變性，儀器仍然不能完全識(shí)別，在形態(tài)學(xué)檢查時(shí)還只能作為一種篩查手段， 正因如此國(guó)內(nèi)外許多組織機(jī)構(gòu)都反復(fù)強(qiáng)調(diào)復(fù)檢的重要性[6-8]。但同時(shí)復(fù)檢規(guī)則的制定又要考慮臨床標(biāo)本量，不能過(guò)度增大工作人員的工作量，這就對(duì)儀器復(fù)檢規(guī)則制定的合理性提出較高要求。復(fù)檢規(guī)則的制定需基于如下原則：(1)復(fù)檢盡可能包含儀器的所有參數(shù)及形態(tài)學(xué)特征。(2)保證篩選質(zhì)量，病理細(xì)胞不漏檢的同時(shí)盡量降低復(fù)檢率。(3)假陰性作為重要指標(biāo)，要求具有診斷意義的參數(shù)不能出現(xiàn)假陰性，其他參數(shù)的假陰性率不大于5．0%(國(guó)際血液學(xué)復(fù)審協(xié)作組的規(guī)定)[9]。(4)在假陰性率低的前提下降低假陽(yáng)性率。

本研究結(jié)果表明，Sysmex XE-2100 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀雖然能對(duì)異常血液標(biāo)本進(jìn)行報(bào)警，但是存在一定的假陰性和假陽(yáng)性。本科室制定的復(fù)檢規(guī)則，通過(guò)對(duì)1 531份標(biāo)本的分析比對(duì)，假陰性率為2.0%，符合國(guó)際血液學(xué)復(fù)審組專(zhuān)家組規(guī)定。復(fù)檢率為19.8%，符合中國(guó)血細(xì)胞復(fù)檢協(xié)作組規(guī)定復(fù)檢率[9]，略低于其他文獻(xiàn)報(bào)道[10-12]，這就保證了工作人員的工作量適中。進(jìn)一步分析可見(jiàn)，在觸發(fā)復(fù)檢規(guī)則的各種異常提示中，血小板計(jì)數(shù)減少陽(yáng)性率最高(52.1%)。分析原因可能是血液中如果存在巨大血小板造成假性降低，或者由于部分患者血液因?yàn)閼?yīng)用EDTA-K2抗凝劑造成的血小板假性凝聚等都會(huì)造成血小板計(jì)數(shù)減少，因此血涂片復(fù)檢對(duì)于血小板顯得尤為重要。

本結(jié)果顯示，本室制定的復(fù)檢規(guī)則在保證一定復(fù)檢率的基礎(chǔ)上，假陰性率低及假陽(yáng)性率均較低，符合國(guó)家相關(guān)規(guī)定，可以應(yīng)用于臨床?？紤]到本科室門(mén)診及病房血液分析儀機(jī)型不同，我們也采用門(mén)診標(biāo)本在相應(yīng)機(jī)型上檢測(cè)后應(yīng)用本規(guī)則驗(yàn)證復(fù)檢率及假陰性率，均符合相應(yīng)規(guī)定(數(shù)據(jù)未顯示)。

規(guī)則的制定并非一勞永逸，為保證血液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性[13-15]，隨著日常標(biāo)本檢測(cè)量的增多，必然要?jiǎng)討B(tài)進(jìn)行規(guī)則的調(diào)整和優(yōu)化，以便為臨床提供真實(shí)、客觀的檢驗(yàn)報(bào)告。

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(收稿日期：2015-12-18)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R 115

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1002-7386(2016)09-1372-03

通訊作者：王麗芳,050000石家莊市，河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科;

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.09.029

E-mail:wanglf2h@163.com