羊鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗*

王新民，晁旭東，韓猛立*，蒲新竹，趙萬軍，張 賓

（1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十師一八一團(tuán)，新疆 阿勒泰836001；2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所）

羊鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗*

王新民1，晁旭東1，韓猛立2*，蒲新竹1，趙萬軍1，張 賓2

（1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十師一八一團(tuán)，新疆 阿勒泰836001；2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所）

對開春以來一八一團(tuán)部分養(yǎng)殖合作社出現(xiàn)的以咳嗽、流鼻涕等為主要癥狀的羔羊進(jìn)行診斷，經(jīng)過病原學(xué)、致病性、藥敏試驗等確定為鏈球菌感染，采用敏感藥物進(jìn)行針對性治療后，有效控制了該病的發(fā)生和蔓延，效果明顯。

羔羊腹瀉；病原分離；鏈球菌

兵團(tuán)第十師北屯市結(jié)合兵團(tuán)農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展的布局與思路，及時調(diào)整農(nóng)牧業(yè)發(fā)展方向，突出了“穩(wěn)定強(qiáng)化農(nóng)業(yè)，重點(diǎn)發(fā)展牧業(yè)，調(diào)整改革漁業(yè)”的發(fā)展思路，大力發(fā)展農(nóng)場農(nóng)區(qū)畜牧業(yè)，優(yōu)化產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和資源配置，使大農(nóng)業(yè)向種植業(yè)、畜牧業(yè)、漁業(yè)三業(yè)并舉的格局發(fā)展。大力實施小畜換大畜工程，從而有效地帶動了團(tuán)場良種羊飼養(yǎng)的發(fā)展。

一八一團(tuán)擁有山區(qū)草場面積4.47萬hm2，主要分布：墾區(qū)內(nèi)0.47萬hm2，阿勒泰山區(qū)的齊背嶺、干海子、別克多克夏草場2.17萬hm2，沙吾爾山冬草場

0.40萬hm2，牧場北戈壁0.99萬hm2，夾山子春秋草場0.94萬hm2。優(yōu)良豐富的草地資源為一八一團(tuán)大力發(fā)展畜牧業(yè)提供了得天獨(dú)厚的自然資源和重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。2014年一八一團(tuán)提出畜牧業(yè)發(fā)展的總體思路和布局，通過積極推進(jìn)人畜分離，大力發(fā)展家庭牧場和培育養(yǎng)殖大戶，形成養(yǎng)殖大戶-養(yǎng)殖小區(qū)-養(yǎng)殖基地相連的產(chǎn)業(yè)發(fā)展格局。通過能人牽頭，大戶帶動，職工以入股、托養(yǎng)、寄養(yǎng)等多種方式參與，以點(diǎn)帶面，示范帶動，加快畜牧業(yè)向規(guī)?；?、集約化方向發(fā)展。截至2015年底，一八一團(tuán)從事畜牧養(yǎng)殖的共有436戶，全團(tuán)現(xiàn)有各類牲畜存欄7.7萬頭（只）。其中，羊存欄6.50萬只，牛存欄0.45萬頭，生豬存欄0.75萬頭。

近年來羊肉市場呈現(xiàn)波動式發(fā)展，由前幾年的持續(xù)高位到2015年的低谷，給從事養(yǎng)羊的養(yǎng)殖戶帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失和心里壓力。但是市場上優(yōu)質(zhì)羊肉價格依然處于高位且暢銷，許多養(yǎng)殖戶看到了機(jī)遇，隨即對自己的羊群進(jìn)行雜交改良，通過降低養(yǎng)殖數(shù)量，提高養(yǎng)殖品質(zhì)，來確保養(yǎng)殖效益，間接的減輕了草場壓力，有利于環(huán)境保護(hù)和草場資源的循環(huán)利用。

2016年3～6月，阿勒泰地區(qū)持續(xù)低溫，且雨水較多，草原沒有恢復(fù)，難以放牧，使得原本每年4月份開始的轉(zhuǎn)場難以進(jìn)行，羊群大多集中在連隊周圍的開闊地或戈壁灘上，部分養(yǎng)殖戶的羊群出現(xiàn)疫病，且發(fā)病率和死亡率均較高，給養(yǎng)殖戶造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。

經(jīng)團(tuán)獸醫(yī)站與在一八一團(tuán)開展科技服務(wù)的專家聯(lián)合診斷，確診為羊鏈球菌病，現(xiàn)將情況報告如下。

1 基本情況

一八一團(tuán)某養(yǎng)殖大戶共計飼羊600余只，其中小尾寒羊100余只，當(dāng)?shù)匕⒗仗┭?00余只，肉用細(xì)毛羊50余只，阿寒雜交羊150余只混群放牧，白天主要在連隊周圍放牧，夜晚趕回圈舍，2016年4月下旬羊群突然發(fā)病，并逐漸增多，到筆者受邀前往診治時，已發(fā)病118只，約占全群的20.00%左右，死亡23只，死亡率為19.00%。

2 臨床癥狀

隨機(jī)選擇10只發(fā)病羊測量體溫，溫度介于40.8～41.7℃之間；部分羊只表現(xiàn)出精神不佳、步態(tài)不穩(wěn)、食欲不振、反芻停止，喜臥，不愿運(yùn)動；偶見后驅(qū)癱瘓羊只；觀察可見部分羊眼睛潮紅、出血；有流膿性和清鼻液，口角處可見混有泡沫的唾液；選擇病情較為嚴(yán)重的羊只觸摸可見咽喉部腫脹、頜下淋巴結(jié)水腫，呼吸緩急；圈內(nèi)可見不成型糞便，偶見褐色血糞。病程長短不一，一般3～5 d，部分羊只臨死前出現(xiàn)抽搐、磨牙等神經(jīng)癥狀。

3 剖檢變化

選擇臨近死亡的病死羊5只進(jìn)行現(xiàn)場剖解，其中有3只出現(xiàn)尸僵不全?？梢娭饕K器呈現(xiàn)廣泛性出血，淋巴結(jié)水腫出血；肺臟有膿性分泌物滲出、出血和肝變區(qū)，心胞積液；腹腔積液，膽囊充盈，肝臟腫大，邊緣可見出血點(diǎn)，脾臟鈍圓有出血點(diǎn)；真胃粘膜易剝離，有潰瘍，內(nèi)容物有成團(tuán)狀的塑料薄膜。

另隨即采集同群羊抗凝全血20份，帶回實驗室檢測。

4 實驗室診斷

4.1 病料采集

無菌采集心包液、肺臟、肝臟、脾臟、淋巴、胸腔積液等病變器官和組織[1-3]，帶回實驗室。

4.2 染色鏡檢

將無菌采集的病料抹片后經(jīng)革蘭氏染色，鏡檢可見視野里呈現(xiàn)藍(lán)紫色、圓形或卵圓形、成雙或短鏈狀排列，偶見桿菌出現(xiàn)；肝、脾病料中可見病原菌有莢膜。

采集的20份血液中有14份可見附紅細(xì)胞體存在，8份血液檢出焦蟲。

4.3 分離培養(yǎng)

將病料分別在普通瓊脂平板、5%綿羊血瓊脂平板、營養(yǎng)肉湯和腦心浸液培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)18～32 h，挑取單個菌落做純培養(yǎng)，同時進(jìn)行革蘭氏染色，觀察其形態(tài)和培養(yǎng)特性[4-5]。

結(jié)果顯示，該菌在普通培養(yǎng)基上生長不良或不生長，需要添加血清、血液、葡萄糖等營養(yǎng)物質(zhì)；在血平板上可見小于1.0 mm、灰白色、β溶血、表面光滑、邊緣整齊的菌落。經(jīng)革蘭氏染色鏡檢可見視野里呈現(xiàn)革蘭氏陽性球菌，多數(shù)成對存在，少數(shù)呈短鏈狀排列。液體培養(yǎng)中染色呈現(xiàn)革蘭氏陽性鏈狀排列的球菌。

4.4 生化鑒定

對分離的菌株純培養(yǎng)后保存，后委托新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所經(jīng)全自動微生物鑒定系統(tǒng)（VITEK2 Compact）鑒定為鏈球菌。

5 藥敏試驗

藥敏紙片購自杭州濱河微生物試劑有限公司，按照說明書進(jìn)行操作。結(jié)果顯示，鏈球菌對氟苯尼考、頭孢噻肟、左氟沙星、環(huán)丙沙星敏感，其余20余種藥物為中敏或耐藥。

6 治療

（1）對發(fā)病羊只及時隔離治療。應(yīng)用敏感藥物氟苯尼考治療，每日2次，連用5 d；（2）針對血液中檢出附紅細(xì)胞體和焦蟲這一病情，建議應(yīng)用長效針劑土霉素注射預(yù)防該病[6]；（3）同時在飲水中添加復(fù)合多維以增強(qiáng)動物機(jī)體抵抗力；（4）建議應(yīng)用羊鏈球菌氫氧化鋁甲醛滅活苗，2～3倍劑量皮下注射[7]，來年注意提前采取預(yù)防措施。通過采取以上措施，4 d后再無新病例出現(xiàn)，1周后羊群恢復(fù)正常。

7 小結(jié)與討論

本病發(fā)生沒有明顯的季節(jié)性，且一八一團(tuán)所在的阿勒泰地區(qū)屬于羊鏈球菌病的高發(fā)地區(qū)，同時2016年開春以來氣溫低、雨水多，青綠飼料缺乏，導(dǎo)致動物抵抗力下降而發(fā)病。建議今后要做好羊舍的消毒和管理，添加維生素或牛羊用舔舐磚，做好免疫接種工作，也是控制本病的有效手段。有條件的地區(qū)，可以結(jié)合本地分離株，篩選出疫苗候選菌株，制作自家滅活疫苗預(yù)防本病，會達(dá)到良好的控制效果。

[1]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)（第四版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[2]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)（第五版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006.

[3]姚火春.獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)（第二版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[4]李健強(qiáng)，李六金.獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)[M].陜西：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，1999.

[5]李素健，趙萬軍，韓猛立，等.小尾寒羊鏈球菌病的診斷與治療[J].新疆農(nóng)墾科技，2015，38（5）：26-27.

[6]趙萬軍，蒲新竹，韓猛立，等.一八一團(tuán)育肥羊常見多發(fā)病調(diào)查與防治[J].新疆農(nóng)墾科技，2015，38（6）：36-36.

[7]趙萬軍，胡鵬，蒲新竹，等.綿羊鏈球菌病的診斷與防治[J].甘肅畜牧獸醫(yī)，2015，45（6）：50，52.

2016—07—28

新疆農(nóng)墾科學(xué)院院引導(dǎo)計劃（72YYD201409）、兵團(tuán)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技攻關(guān)與成果轉(zhuǎn)化計劃（2016AC018）。

*通訊作者：韓猛立（1980-），男，助理研究員，從事動物傳染病的診斷與防治研究。E-mail：hanmenglimm@163.com。