大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液脫鹽的作用

陳麗麗，趙 利，袁美蘭，白春清，馮 飛，王 璐（江西科技師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，國(guó)家大宗淡水魚(yú)加工技術(shù)研發(fā)分中心，江西省生物加工過(guò)程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330013）

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大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液脫鹽的作用

陳麗麗，趙 利*，袁美蘭，白春清，馮 飛，王 璐
（江西科技師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，國(guó)家大宗淡水魚(yú)加工技術(shù)研發(fā)分中心，江西省生物加工過(guò)程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330013）

摘 要：為了脫除草魚(yú)蛋白水解液中的鹽，本研究篩選了4 種型號(hào)大孔吸附樹(shù)脂DA201-C、DA201-M、SQT-67 和D002，對(duì)水解液中草魚(yú)多肽的吸附能力進(jìn)行測(cè)定，并進(jìn)行靜態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的吸附效果較好，其吸附量隨草魚(yú)多肽質(zhì)量濃度的增加而增加；體積分?jǐn)?shù)75%的乙醇對(duì)大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的洗脫效果最佳；DA201-C大孔吸附樹(shù)脂對(duì)水解液脫鹽的最佳條件為上樣流速0.5 BV/h，上樣質(zhì)量濃度為30 mg/mL，水清洗速率為2 BV/h，洗脫采用體積分?jǐn)?shù)75%的乙醇以2 BV/h的流速洗脫，在此條件下大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)水解液的脫鹽率達(dá)97.17%。

關(guān)鍵詞：草魚(yú)；蛋白水解液；大孔吸附樹(shù)脂；吸附；解吸

引文格式：

陳麗麗,趙利,袁美蘭,等.大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液脫鹽的作用[J].食品科學(xué),2016,37(5):84-88.DOI:10.7506/

spkx1002-6630-201605016.http://www.spkx.net.cn

CHEN Lili,ZHAO Li,YUAN Meilan,et al.Desalination of grass carp protein hydrolysate using macroporous adsorption resin[J].Food Science,2016,37(5):84-88.(in Chinese with English abstract)DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605016.http://www.spkx.net.cn

魚(yú)蛋白水解物（fish protein hydrolysate，F(xiàn)PH）是魚(yú)蛋白經(jīng)過(guò)蛋白酶水解而得到的，它同時(shí)具有魚(yú)蛋白原有的一些優(yōu)點(diǎn)，例如氨基酸比例平衡、必需氨基酸含量高、賴氨酸含量豐富和消化吸收好等，還具有多肽的一些特殊功能特性及相關(guān)生物活性。

研究證明小分子肽相比于大分子蛋白和游離氨基酸吸收性更好[1]，同時(shí)FPH還具有特殊的生理活性，例如抗氧化、抗疲勞和增強(qiáng)免疫力等，因此越來(lái)越受到人們的廣泛關(guān)注。FPH有蛋白質(zhì)含量高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富、運(yùn)輸貯存方便快捷的優(yōu)勢(shì)，是內(nèi)陸和山區(qū)居民良好的蛋白質(zhì)來(lái)源[2]。早在20世紀(jì)，日本已經(jīng)開(kāi)發(fā)出適合高血壓患者使用的低分子魚(yú)肽[3]。國(guó)外對(duì)魚(yú)蛋白的研究利用主要集中在近海魚(yú)類方面[4-6]，國(guó)內(nèi)則主要研究低值海魚(yú)和魚(yú)下腳料酶法水解產(chǎn)物的功能特性、營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)和風(fēng)味強(qiáng)化等。酶法水解魚(yú)蛋白制備的肽具有良好的理化性質(zhì)和功能性質(zhì)[7-8]。但是草魚(yú)（Ctenopharyngodon idellus）蛋白在酶法水解制備草魚(yú)多肽時(shí)，反應(yīng)體系的pH值會(huì)隨著水解度的增加而逐步降低，所以反應(yīng)過(guò)程中需要不斷用堿來(lái)維持反應(yīng)體系pH值恒定，從而導(dǎo)致樣品中存留大量無(wú)機(jī)鹽，對(duì)草魚(yú)多肽的口感、純度及活性產(chǎn)生不良影響，所以必須對(duì)草魚(yú)蛋白水解液進(jìn)行脫鹽處理。目前對(duì)生物活性物質(zhì)的脫鹽方法主要有透析、超濾、納濾等。但這些方法對(duì)小分子物質(zhì)脫鹽效果不佳或無(wú)法實(shí)現(xiàn)。盡管電滲析可以用于小分子物質(zhì)脫鹽，但回收率不高，能源消耗較大[9]。

生物活性物質(zhì)較常用的脫鹽方法有離子交換樹(shù)脂法和大孔吸附樹(shù)脂法。大孔樹(shù)脂吸附的作用主要是通過(guò)分子間疏水相互作用對(duì)分子進(jìn)行吸附，因此大孔吸附樹(shù)脂不僅可以脫鹽還可以保留水解物中的疏水性肽段。大孔吸附樹(shù)脂是由苯乙烯、二乙烯苯、二甲丙烯酸酯等聚合而成的網(wǎng)狀孔穴結(jié)構(gòu)，為非離子的高分子吸附劑，具有成本低、選擇性好、吸附容量大、回收率高、容易再生等特點(diǎn)[10-11]。大孔吸附樹(shù)脂按其極性大小和所選用的單體分子結(jié)構(gòu)不同，可分為非極性、中極性和極性三類。大孔吸附樹(shù)脂具有吸附性強(qiáng)、解吸附容易、機(jī)械強(qiáng)度好、流體阻力小、條件溫和、設(shè)備簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于從水溶液中分離低極性或非極性的化合物[12]。

本實(shí)驗(yàn)研究大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液的最佳脫鹽工藝條件，并在此基礎(chǔ)上對(duì)不同水解度的草魚(yú)多肽進(jìn)行脫鹽，為后續(xù)草魚(yú)多肽的開(kāi)發(fā)利用提供有利依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

草魚(yú)，購(gòu)于南昌市樂(lè)買佳超市。

Alcalase堿性蛋白酶 丹麥Novozymes公司；大孔吸附樹(shù)脂（DA201-C、DA201-M、SQT-67、D002） 江蘇蘇青水處理工程集團(tuán)有限公司；95%食用乙醇 南昌市天邦化工有限責(zé)任公司；牛血清白蛋白 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司；其他試劑均為分析純。

1.2儀器與設(shè)備

DELTA-320精密pH計(jì) 瑞士梅特勒-托利多公司；HZ-8812S多用途水浴恒溫振蕩器 江蘇華利達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司；TDL-5A離心機(jī) 上海菲恰爾分析儀器有限公司；大孔吸附樹(shù)脂層析柱系統(tǒng) 上海滬西分析儀器廠有限公司；JJ-2高速組織搗碎機(jī) 上海標(biāo)本模型廠；層析柱 上海華美實(shí)驗(yàn)儀器廠；HB-402微波耦合酶反應(yīng)器 江南大學(xué)；S212恒速攪拌器 上海申順生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1多肽質(zhì)量濃度和水解度的測(cè)定

蛋白質(zhì)含量測(cè)定：采用Folin-酚法[13]；水解度測(cè)定：pH-Stat法并參照袁斌等[14]的方法。

1.3.2草魚(yú)水解液的制備[15]

稱取已絞碎的魚(yú)肉300 g于酶反應(yīng)器中，加入4 500 mL水，開(kāi)啟攪拌器攪拌均勻（200 r/min），調(diào)節(jié)水浴溫度為55 ℃，1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為9.0，待底物溫度上升至設(shè)定溫度55 ℃時(shí)，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.8% 的Alcalase堿性蛋白酶進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)程中用1 mol/L NaOH溶液維持反應(yīng)體系pH 9.0恒定。酶解3 h后95 ℃條件下滅酶5 min。待水解液冷卻至25 ℃后加入1 mol/L HCl，直至體系pH值為7.0，5 000 r/min離心20 min后，取上清液，上清液即為草魚(yú)水解液。

1.3.3大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理

將不同型號(hào)大孔吸附樹(shù)脂浸泡在無(wú)水乙醇中，使用時(shí)取適量用無(wú)水乙醇洗至220 nm波長(zhǎng)處無(wú)吸收峰，再用去離子水充分潤(rùn)洗，50 ℃條件下真空干燥備用。

1.3.4大孔吸附樹(shù)脂的篩選

取250 mL錐形瓶若干，分別加入不同型號(hào)經(jīng)過(guò)預(yù)處理的樹(shù)脂10 g，用無(wú)水乙醇充分溶脹，然后加入去離子水洗凈乙醇。再向其中加入100 mL質(zhì)量濃度為30 mg/mL的草魚(yú)蛋白水解液[16]。將錐形瓶放入水浴恒溫振蕩器中，120 r/min室溫振蕩12 h，使樹(shù)脂與料液充分接觸。振蕩結(jié)束后靜置30 min，測(cè)定上清液中草魚(yú)多肽的質(zhì)量濃度，并計(jì)算不同型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液的吸附率和吸附量。脫鹽率、吸附率、吸附量和解吸率的計(jì)算方法分別見(jiàn)下式。

式中：Κ1為吸附后溶液的電導(dǎo)率/（?S/cm）；Κ0為原液電導(dǎo)率/（?S/cm）；ρ0為草魚(yú)蛋白水解液的起始質(zhì)量濃度/（mg/mL）；ρ1為吸附平衡時(shí)草魚(yú)蛋白水解液的質(zhì)量濃度/（mg/mL）；ρ2為解吸液質(zhì)量濃度/（mg/mL）；V為溶液的體積/mL；m0為干樹(shù)脂質(zhì)量/g；VD為洗脫液體積/mL。

1.3.5大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的靜態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn)

取250 mL錐形瓶若干，分別加入DA201-C大孔吸附樹(shù)脂10 g，用無(wú)水乙醇充分溶脹，然后加入去離子水洗凈乙醇。接著向錐形瓶分別加入質(zhì)量濃度為30、24、18、12、6 mg/mL的草魚(yú)蛋白水解液100 mL。將錐形瓶放入水浴恒溫振蕩器中，120 r/min室溫振蕩12 h，使樹(shù)脂與料液充分接觸。振蕩結(jié)束后靜置30 min，測(cè)定上清液中草魚(yú)多肽質(zhì)量濃度，并計(jì)算DA201-C大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)蛋白水解液對(duì)多肽的吸附量。

將在質(zhì)量濃度為30 mg/mL條件下已經(jīng)達(dá)到吸附平衡的DA201-C大孔吸附樹(shù)脂10 g放入250 mL錐形瓶中，分別用體積分?jǐn)?shù)15%、35%、55%、75%和95%的乙醇200 mL進(jìn)行洗脫，測(cè)定解吸率。

1.3.6DA201-C大孔吸附樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)

1.3.6.1不同流速對(duì)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附性能的影響

經(jīng)過(guò)預(yù)處理的DA201-C大孔吸附樹(shù)脂用無(wú)水乙醇充分溶脹后裝入2.5 cm×60 cm層析柱，用質(zhì)量濃度為24 mg/mL的草魚(yú)蛋白水解液分別以0.5、1.0、2.0 BV/h的流速流經(jīng)層析柱，用紫外檢測(cè)儀檢測(cè)流出液在220 nm波長(zhǎng)處的吸光度，以A220 nm＝0.01為穿透點(diǎn)[16]，得到不同流速時(shí)草魚(yú)多肽溶液的穿透體積，收集洗脫峰，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后得到脫鹽草魚(yú)多肽。

1.3.6.2不同樣品質(zhì)量濃度對(duì)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附性能的影響

將質(zhì)量濃度分別為7.5、15、30 mg/mL的草魚(yú)多肽溶液以0.5 BV/h的流速流經(jīng)層析柱，同樣地，用紫外檢測(cè)儀檢測(cè)流出液在220 nm波長(zhǎng)處的吸光度，以A220 nm＝0.01為穿透點(diǎn)[16]，得到不同質(zhì)量濃度時(shí)草魚(yú)多肽溶液的穿透體積和穿透點(diǎn)動(dòng)態(tài)吸附量。

1.3.6.3DA201-C大孔吸附樹(shù)脂的動(dòng)態(tài)解吸

將質(zhì)量濃度為30 mg/mL的草魚(yú)多肽溶液以0.5 BV/h的流速上樣，到達(dá)穿透點(diǎn)后停止上樣。用去離子水分別以1、2、4 BV/h的流速洗滌層析柱，洗脫液每5 mL收集1 管，測(cè)定其電導(dǎo)率，直至洗脫液的電導(dǎo)率與去離子水相當(dāng)。合并清洗液測(cè)定多肽質(zhì)量濃度，計(jì)算不同清洗速率下的草魚(yú)多肽損失率。水清洗結(jié)束后用75%的乙醇進(jìn)行洗脫，以2.0 BV/h的流速流經(jīng)層析柱，每5 mL收集1 管，直到其吸光度A220 nm＜0.01為止，繪制動(dòng)態(tài)解吸曲線，并計(jì)算草魚(yú)多肽的總損失率。

2　結(jié)果與分析

2.1大孔吸附樹(shù)脂的初篩選

表1　不同型號(hào)的樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)多肽吸附性能Table 1 Adsorption capacity of different resins towards grass carp peptides

由表1可知，對(duì)草魚(yú)多肽吸附性能最好的大孔吸附樹(shù)脂為DA201-C，吸附率達(dá)到了62.7%。大孔吸附樹(shù)脂飽和吸附能力受大孔吸附樹(shù)脂的比表面積和選擇吸附性等因素的影響[17-18]，DA201-C樹(shù)脂是非極性樹(shù)脂，是由偶極矩很小的單體聚合制得，不帶任何功能基團(tuán)，孔表的疏水性較強(qiáng)，可通過(guò)與多肽內(nèi)的疏水部分的作用吸附溶液中的有機(jī)物[19]。所以DA201-C大孔吸附樹(shù)脂的良好吸附性能也可能是由于其具有較大的比表面積（1 200～1 400 m2/g）和對(duì)草魚(yú)多肽較好的選擇性。

2.2大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的靜態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn)

2.2.1大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)曲線

圖1　25 ℃條件下大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)曲線Fig.1 Adsorption kinetics of DA201-C for grass carp peptides at 25 ℃

由圖1可知，大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的吸附在2 h之前上升較快，尤其在1 h之前多肽吸附量增加非常迅速，而2 h之后曲線趨于平緩，這說(shuō)明此時(shí)大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)多肽的吸收已經(jīng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡。草魚(yú)多肽的初始質(zhì)量濃度對(duì)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附平衡時(shí)的吸附量有較大的影響，質(zhì)量濃度越大，平衡時(shí)的吸附量就越大。

2.2.2大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的靜態(tài)解吸

圖2　不同體積分?jǐn)?shù)乙醇對(duì)草魚(yú)多肽解吸性能的影響Fig.2 Desorption efficiencies of different concentrations of ethanol for grass carp peptides

大孔吸附樹(shù)脂對(duì)化合物的吸附作用主要是基于化合物的疏水基團(tuán)與非極性吸附劑之間的范德華引力，因此吸附樹(shù)脂對(duì)分子的吸附作用力微弱，只要改變體系的親水與疏水平衡，就可以引起吸附的增加或解吸。解吸附劑是以最能溶解吸附質(zhì)為原則，但要求沸點(diǎn)低、易于蒸餾回收，一般用溶劑的溶解度闡述來(lái)預(yù)測(cè)，對(duì)于非極性樹(shù)脂，洗脫劑溶解度愈小，洗脫能力愈強(qiáng)[16]，乙醇是最常用的大孔吸附樹(shù)脂的解吸劑，而且安全無(wú)毒。由圖2可知，解吸率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加而增加，體積分?jǐn)?shù)75%乙醇的解吸率最高，達(dá)到78.85%，草魚(yú)多肽在體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇溶液中的溶解度降低則可能是該體積分?jǐn)?shù)下乙醇溶液解吸率降低[20]。此外，由于不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇的極性不同，與不同肽段親和力不一樣，所以不同乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)草魚(yú)多肽的洗脫效果不同。

2.3大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的動(dòng)態(tài)吸附

2.3.1不同上樣流速對(duì)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附性能的影響

圖3　不同上樣流速時(shí)草魚(yú)多肽的穿透曲線Fig.3 Breakthrough curves at different feed flow rates

由圖3可知，隨著上樣流速的增加，流出液穿透點(diǎn)的通液量逐步提前。上樣流速?gòu)?.0 BV/h降低到0.5 BV/h時(shí)，穿透點(diǎn)通液量增加了140%。綜上所述，草魚(yú)多肽的上樣流速確定為0.5 BV/h。大孔吸附樹(shù)脂DA201-C屬于非極性吸附劑，孔隙的表面疏水性較強(qiáng)，它最適合在極性溶劑中吸附非極性物質(zhì)，其作用力主要是范德華引力[21]。大孔樹(shù)脂吸附過(guò)程一般需要經(jīng)歷3 個(gè)階段：液膜擴(kuò)散、顆粒內(nèi)擴(kuò)散、吸附反應(yīng)，整個(gè)過(guò)程可能是一步或多步控制[22]。吸附反應(yīng)是在一定的溫度下進(jìn)行的，當(dāng)溶劑與樹(shù)脂接觸時(shí)，溶液中的吸附質(zhì)被樹(shù)脂吸附，經(jīng)過(guò)足夠長(zhǎng)的時(shí)間，吸附質(zhì)在兩相中的分配達(dá)到一個(gè)定值，即吸附平衡狀態(tài)[23]（實(shí)際上是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的過(guò)程）。所以過(guò)快的上樣速率會(huì)使多肽溶液在還沒(méi)有完成液膜擴(kuò)散、顆粒內(nèi)擴(kuò)散時(shí)就流出層析柱，樹(shù)脂的吸附量就會(huì)下降。但是上樣速率過(guò)低，上樣時(shí)間就會(huì)隨之延長(zhǎng)。

2.3.2不同樣品質(zhì)量濃度對(duì)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附性能的影響

圖4　不同樣品質(zhì)量濃度時(shí)的草魚(yú)多肽穿透曲線Fig.4 Breakthrough curves at different sample concentrations

在大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)于草魚(yú)多肽的吸附過(guò)程中，吸附量隨著上樣質(zhì)量濃度的增大而增大，吸附量與底物質(zhì)量濃度的關(guān)系符合Frendich和Langmur經(jīng)典吸附方程[24-27]。在上樣流速為0.5 BV/h的條件下，用紫外檢測(cè)儀檢測(cè)流出液在220 nm波長(zhǎng)處的吸光度，以A220 nm＝0.01為穿透點(diǎn)[16]，得到不同質(zhì)量濃度時(shí)草魚(yú)多肽溶液的穿透體積和穿透點(diǎn)動(dòng)態(tài)吸附量。在上樣流速為0.5 BV/h的條件下，DA201-C大孔吸附樹(shù)脂對(duì)不同質(zhì)量濃度草魚(yú)多肽的穿透曲線見(jiàn)圖4，隨著上樣質(zhì)量濃度的提高，流出液的穿透點(diǎn)通液量迅速減小。隨著上樣質(zhì)量濃度的增大，DA201-C大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)多肽的吸附量從31.1 mg/g上升到52.5 mg/g，穿透點(diǎn)通液量從83 mL下降到35 mL。綜合考慮吸附量與平衡時(shí)間，選擇30 mg/mL為最佳上樣質(zhì)量濃度。

2.4大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的動(dòng)態(tài)解吸

2.4.1大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的脫鹽率

圖5　大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的脫鹽作用Fig.5 Desalination efficiency of DA201-C for grass carp peptides

由圖5可知，用去離子水洗滌層析柱時(shí)，洗脫液的電導(dǎo)率先升高后降低，洗脫液體積達(dá)到75 mL左右時(shí)出現(xiàn)一個(gè)洗脫峰，在洗脫體積達(dá)到100 mL以后，電導(dǎo)率趨于平穩(wěn)。此時(shí)草魚(yú)多肽溶液中的鹽分已幾乎被水洗脫出來(lái)，根據(jù)公式（1）計(jì)算得出脫鹽率為97.17%，未被吸附的多肽含量很少。不同水清洗流速下，電導(dǎo)率隨水清洗液體積的變化曲線基本一致。

圖6　不同水洗脫速率條件下草魚(yú)多肽的損失率Fig.6 Effect of different water flow rates on peptide loss rate

孫旭等[28]研究了不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇溶液對(duì)玉米多肽的靜態(tài)解吸效果，結(jié)果表明水對(duì)玉米多肽的解吸率達(dá)到了9.42%。由圖6可知，水清洗速率分別為1、2、4 BV/h時(shí)多肽的損失率分別為7.12%、6.93%、9.51%。所以選擇水清洗速率最佳條件為2 BV/h。因?yàn)樵诖肆魉傧拢缮衔目芍?，?jì)算得出脫鹽率為97.17%，多肽的損失率也最小，為6.93%。主要是因?yàn)樗牧魉贂?huì)影響溶質(zhì)向樹(shù)脂表面擴(kuò)散，流速太大或太小均會(huì)增加草魚(yú)多肽的損失率。

2.4.2大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的解吸率

圖　77　7755%乙醇對(duì)大孔吸附樹(shù)脂DA201-C動(dòng)態(tài)解吸曲線Fig.7 Dynamic desorption curve of grass carp peptides from DA201-C(using 75% ethanol as eluent)

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由圖7可知，隨著解吸液體積的增加，草魚(yú)多肽質(zhì)量濃度先增加后減小，大約在160 mL時(shí)出現(xiàn)洗脫峰后曲線趨于平緩。由此可見(jiàn)，草魚(yú)多肽的部分組分不能很好地溶解在75%乙醇中，無(wú)法完全洗脫，這可能是導(dǎo)致解吸曲線拖尾的原因。為了盡量避免多肽的損失，以便后續(xù)測(cè)定其活性，將洗脫體積選擇為200 mL，這樣既能保證草魚(yú)多肽的回收率，也能減少解吸液的體積。

3　結(jié) 論

比較不同大孔吸附樹(shù)脂對(duì)草魚(yú)多肽的吸附能力，確定大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)草魚(yú)多肽的吸附效果最佳；大孔吸附樹(shù)脂DA201-C的吸附量隨草魚(yú)多肽的質(zhì)量濃度增加而增加；75%乙醇對(duì)吸附樹(shù)脂的洗脫效果最佳。

DA201-C大孔吸附樹(shù)脂脫鹽的最佳條件為：上樣流速0.5 BV/h，上樣質(zhì)量濃度為30 mg/mL，水清洗速率為2 BV/h，洗脫采用75%乙醇以2 BV/h的流速洗脫。在此條件下大孔吸附樹(shù)脂DA201-C對(duì)酶解液的脫鹽率達(dá)97.17%。

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Desalination of Grass Carp Protein Hydrolysate Using Macroporous Adsorption Resin

CHEN Lili,ZHAO Li*,YUAN Meilan,BAI Chunqing,FENG Fei,WANG Lu
(Jiangxi Province Key Laboratory for Bioprocess Processing,National R&D Branch Center for Freshwater Fish Processing,College of Life Science,Jiangxi Science and Technology Normal University,Nanchang 330013,China)

Abstract:In order to remove salt from grass carp protein hydrolysate,four macroporous adsorption resins including DA201-C,DA201-M,SQT-67 and D002 were selected for the highest adsorption capacity for grass carp peptides through static adsorption and desorption experiments.The results showed that DA201-C had the best adsorption efficiency for grass carp peptides.Its adsorption quantity increased with increasing concentration of grass carp peptides.Seventy-five percent ethanol revealed the best elution efficiency for DA201-C.The optimal conditions for the desalinationof grass carp peptides with DA201-C were determined as follows:the sample at 30 mg/mL was passed through the column at a flow rate 0.5 BV/h,and then the column was washed with at a flow rate of 2 BV/h and eluted with 75% ethanol at 2 BV/h.Under these conditions,the desalination efficiency of grass carp peptides was 97.17%.

Key words:grass carp; protein hydrolysate; macroporous adsorption resin; adsorption; desorption

中圖分類號(hào)：TS254.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-6630（2016）05-0084-05

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605016

*通信作者：趙利（1967—），女，教授，博士，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)。E-mail：lizhao618@hotmail.com

作者簡(jiǎn)介：陳麗麗（1986—），女，助教，碩士，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)。E-mail：328181539@qq.com

基金項(xiàng)目：江西省大宗淡水魚(yú)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（JXARS-04-贛中片）；江西科技師范大學(xué)校級(jí)重點(diǎn)項(xiàng)目（2014XJZD005）；江西省科技廳科技支撐重大項(xiàng)目（20152ACF60008）

收稿日期：2015-05-04