外源性一氧化氮對(duì)骨折患者內(nèi)皮細(xì)胞及血小板功能的影響

劉先明，袁丹，黃勇全，楊德猛，王長庚，周旭東

(萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院，江西萍鄉(xiāng)337000)

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外源性一氧化氮對(duì)骨折患者內(nèi)皮細(xì)胞及血小板功能的影響

劉先明，袁丹，黃勇全，楊德猛，王長庚，周旭東

(萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院，江西萍鄉(xiāng)337000)

摘要：目的觀察外源性一氧化氮(NO)對(duì)骨折患者血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板功能的影響。方法將100例骨折手術(shù)患者隨機(jī)分為觀察組、對(duì)照組各50例，術(shù)后均予常規(guī)抗血栓治療，觀察組另吸入0.001%的NO 1次/d，共治療1周。治療前后檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞功能指標(biāo)[血漿活化蛋白 C(APC)、可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)]和血小板功能指標(biāo)[血小板聚集率、P-選擇素(CD62P)和血小板顆粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)]，并觀察血栓發(fā)生率。結(jié)果兩組治療前各指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，治療后除血漿APC升高外其余指標(biāo)均降低(P均<0.05)，且觀察組變化更明顯(P均<0.05) ；觀察組血栓發(fā)生率2%，低于對(duì)照組的10%，P<0.05。結(jié)論外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管內(nèi)皮細(xì)胞活化，降低骨折患者術(shù)后血栓形成率。

關(guān)鍵詞：多發(fā)骨折；外源性一氧化氮；內(nèi)皮細(xì)胞；血小板；靜脈血栓

血栓是骨折術(shù)后的常見并發(fā)癥，嚴(yán)重者下肢血栓后可出現(xiàn)肺栓塞或腦栓塞[1]。血小板和內(nèi)皮細(xì)胞活化是血栓的起始步驟，如能抑制二者活化，可有效抑制血栓形成，提高患者的術(shù)后安全性。研究表明[2]，一氧化氮(NO)可抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞活化，起到降低動(dòng)脈血壓的作用。2013年9月～2015年1月，我們?cè)诔Ｒ?guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合吸入外源性NO對(duì)骨折術(shù)后患者進(jìn)行干預(yù)，探討其對(duì)血栓形成的抑制作用。現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇萍鄉(xiāng)市人民院同期收治的骨折患者100例，男51例、女49例，年齡(62.3±2.9)歲；其中行切開復(fù)位內(nèi)固定術(shù)53例，全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)47例。排除有出血高危因素者，有抗血小板和抗凝藥物治療禁忌證者，入院1個(gè)月內(nèi)有質(zhì)子泵抑制劑服藥史、血小板顆粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)受體拮抗劑服藥史者，血小板計(jì)數(shù)<100×109/L者，肝腎等重要臟器功能不全和不配合研究者。將患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組各50例，其臨床資料具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均知情同意。

1.2治療方法兩組術(shù)后8 h開始皮下注射低分子肝素鈉2 500 U，1次/d。觀察組術(shù)后第2天用JC502-BG95 NO治療儀治療，吸入氧濃度80%、NO濃度0.001%；其間監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，維持其穩(wěn)定。兩組療程均為1周。

1.3內(nèi)皮細(xì)胞功能檢測(cè)治療前后取靜脈血，采用ELISA法檢測(cè)血漿活化蛋白 C(APC)、可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)，試劑盒購自美國RD公司，按說明書操作。

1.4血小板功能檢測(cè)治療前后取靜脈血，采用比濁法測(cè)定腺苷二磷酸(ADP)誘導(dǎo)血小板聚集率，采用ELISA 法檢測(cè)血漿P-選擇素(CD62P)和GPⅡb/Ⅲa，試劑盒購自美國RD公司，按說明書操作。

1.5血栓形成情況觀察采用西門子S2000彩超儀，探頭頻率50～100 MHz，分別探測(cè)雙下肢血栓形成情況。

2結(jié)果

2.1兩組內(nèi)皮細(xì)胞及血小板功能比較見表1。

2.2兩組血栓發(fā)生率比較觀察發(fā)生腓腸肌靜脈靜脈血栓1例，血栓發(fā)生率2%；對(duì)照組發(fā)生腓腸肌靜脈血栓2例，腘靜脈、脛后靜脈、脛前靜脈各1例，血栓發(fā)生率10%，觀察組靜脈血栓發(fā)生率明顯低于對(duì)照組(χ2=12.21，P<0.05)。

3討論

臨床上多采用低分子肝素鈉(鈣)預(yù)防術(shù)后血栓的發(fā)生，但對(duì)血小板的干預(yù)力度不夠，并且增加術(shù)后出血的風(fēng)險(xiǎn)[3]。

表1　兩組內(nèi)皮細(xì)胞及血小板功能比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組同時(shí)點(diǎn)比較，#P<0.05。

NO是一種多功能信號(hào)分子和細(xì)胞毒性因子[4]，其在血栓防治中的作用尚不明確。基于NO在高血壓和冠心病防治中的作用[5～7]，推測(cè)其可用于防治下肢深靜脈血栓。因此，本研究選取骨科下肢手術(shù)后患者作為研究對(duì)象，觀察NO對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和血小板功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除APC外，NO干預(yù)后觀察組血小板活化相關(guān)指標(biāo)和內(nèi)皮細(xì)胞活化相關(guān)指標(biāo)均明顯降低，最終血栓發(fā)生率也降低，說明其療效是可靠的。APC是環(huán)鳥甘酸(CGMP)的激活物，其升高可激活一氧化氮合酶(NOS)下游通路，導(dǎo)致舒血管因子升高[8～10]。吸入外源性NO的作用機(jī)制包括：①NO可與細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白結(jié)合, 形成亞硝酞血紅蛋白, 激活鳥苷酸環(huán)化酶,使細(xì)胞內(nèi)CGMP濃度增加,激活蛋白激酶G,從而降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，松弛血管平滑肌[9～11]。②NO可與血小板表面的膜受體結(jié)合，啟動(dòng)CGMP通路，抑制血小板骨架蛋白變化，抑制胞吞胞吐作用，最終導(dǎo)致聚集和釋放降低[12～14]。另外，本研究未發(fā)現(xiàn)吸入外源性NO所致的不良反應(yīng)，可能與吸入濃度較低有關(guān)。

綜上所述，外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管內(nèi)皮細(xì)胞活化，降低血栓形成率，且具有較高的安全性。但是，本研究納入樣本量不足，且選用NO濃度較低，并非最適濃度。因此，我們將采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)NO的吸入濃度及時(shí)間進(jìn)行比較，以探討更有效的治療濃度和時(shí)間。

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(收稿日期：2015-11-23)

中圖分類號(hào)：R683

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1002-266X(2016)10-0088-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.040