甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中根系活力、葉片光合特性及超微結(jié)構(gòu)的變化

李?；郏?，陳佰鴻,米寶琴，謝永東

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，甘肅 蘭州　730070； 2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，四川 雅安　625014)

?

甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中根系活力、葉片光合特性及超微結(jié)構(gòu)的變化

李?；?，毛娟1，陳佰鴻1,米寶琴1，謝永東2

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，甘肅 蘭州730070； 2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，四川 雅安625014)

摘要：【目的】 闡明甜櫻桃試管苗在煉苗移栽過(guò)程中發(fā)生的適應(yīng)性變化.【方法】 研究了甜櫻桃試管苗閉瓶煉苗5 d、開(kāi)瓶煉苗10 d、移栽10 d、移栽25 d、移栽80 d時(shí)的葉片光合特征參數(shù)、葉綠素?zé)晒馓匦约叭~綠體超微結(jié)構(gòu)，葉綠素含量、根系活力等生理特征的變化.【結(jié)果】 甜櫻桃幼苗在煉苗過(guò)程中葉片葉綠素含量、根系活力、最大凈光合速率、以及PSⅡ的最大光化學(xué)效率不斷升高，而在移栽后10 d均出現(xiàn)了顯著的下降；移栽過(guò)程中，初期由于對(duì)外界環(huán)境的不適應(yīng)，出現(xiàn)緩苗等情況，使得根系活力下降，葉片光合能力降低，但移栽80 d時(shí)葉綠體內(nèi)淀粉粒和嗜餓小體體積變大，片層結(jié)構(gòu)清晰、完整且有序，根系活力和葉綠素含量均在移栽80 d時(shí)顯著增大.【結(jié)論】甜櫻桃試管苗在煉苗移栽過(guò)程中葉片光合特性、超微結(jié)構(gòu)及根系活力隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，其葉片的光合效率明顯提高，并有大量的光合產(chǎn)物積累；同時(shí)根系吸收水分、養(yǎng)分的能力及抗逆能力都明顯增強(qiáng)，到移栽80 d時(shí)試管苗已完全適應(yīng)大田環(huán)境.

關(guān)鍵詞：甜櫻桃；試管苗；移栽；葉綠素?zé)晒猓还夂咸匦?/p>

甜櫻桃(PrunusaviumL)屬于薔薇科櫻桃屬典型櫻桃亞屬植物，原產(chǎn)亞洲西南部和歐洲南部的古老落葉果樹(shù)種，果實(shí)成熟最早，為“百果之先”，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1-2].甜櫻桃是歐洲甜櫻桃和歐洲酸櫻桃及其雜交種的總稱(chēng)，成熟時(shí)顏色鮮紅，玲瓏剔透，味美形嬌，營(yíng)養(yǎng)豐富，醫(yī)療保健價(jià)值頗高，又有“含桃”的.櫻桃的種子萌發(fā)率低，實(shí)生苗易感染病毒，扦插繁殖系數(shù)低，因而在生產(chǎn)實(shí)踐的應(yīng)用中受到很大的限制，采用莖尖、莖段外植體進(jìn)行櫻桃快速繁殖，可以提高優(yōu)良品種的繁殖系數(shù)和抗病能力，培育優(yōu)良砧木，而組織培養(yǎng)進(jìn)行果樹(shù)無(wú)性系快速繁殖其關(guān)鍵取決于試管苗的移栽成活率[3].

試管苗的馴化移植是組培快繁工作的重要技術(shù)環(huán)節(jié)之一，移栽成活率的高低直接影響經(jīng)濟(jì)效益.若稍有疏忽，則會(huì)造成大批幼苗死亡，使整個(gè)組培操作前功盡棄，造成巨大的損失.試管苗的馴化過(guò)程是試管苗由弱光、恒溫、近飽和濕度、無(wú)菌環(huán)境逐漸向自然環(huán)境條件轉(zhuǎn)化的過(guò)程，馴化過(guò)程較為復(fù)雜，技術(shù)難度較大[4].甜櫻桃脫毒試管苗的馴化移栽就是其中之一，具有較高的試管苗移栽成活率才能使甜櫻桃脫毒苗組培快速繁育技術(shù)實(shí)用化.由于光合作用是植物進(jìn)行生命活動(dòng)的關(guān)鍵[5-7]，所以近些年，對(duì)不同植物受到生物脅迫或非生物脅迫時(shí)MDA[8]、葉綠素、光合速率、根系活力[9]、熒光系數(shù)[10]等的研究受到越來(lái)越多的重視，而葉綠體又是其進(jìn)行的主要場(chǎng)所，所以隨著超微電鏡技術(shù)[11-13]的發(fā)展，研究其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化與葉片光合功能改變之間的聯(lián)系，從而有效提高光合效率變的尤為重要.本試驗(yàn)擬通過(guò)對(duì)甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中的生理指標(biāo)、葉片超微結(jié)構(gòu)變化的探究，以期為甜櫻桃無(wú)性繁殖及移栽提供一定的理論依據(jù).

1材料與方法

1.1植物材料

甜櫻桃試管苗(早大果)由天水市果樹(shù)研究所提供.

1.2甜櫻桃試管苗的接種、煉苗馴化及移栽

1.2.1試管苗閉瓶煉苗在MS+0.02 mg/L IAA大櫻桃試管苗繼代培養(yǎng)60 d后的試管苗在培養(yǎng)架上長(zhǎng)好后，迅速轉(zhuǎn)移到日光溫室中，將溫度控制在15～25 ℃，光照強(qiáng)度為90～100 μmol/ m2/ s，每天中午在瓶苗周?chē)鷩姙⒍啻戊F水，閉瓶煉苗5 d，讓試管苗逐漸接受強(qiáng)光照射.

1.2.2試管苗開(kāi)瓶鍛煉試管苗經(jīng)過(guò)5 d的生長(zhǎng)，將瓶口的繩子除去，將覆蓋在瓶口的塑料薄膜輕輕松動(dòng)，不可一次性揭除，應(yīng)慢慢透氣，逐步除去，待2～3 d后全部揭除，經(jīng)過(guò)10 d的生長(zhǎng)，部分幼苗長(zhǎng)出瓶口，適時(shí)移栽.

1.2.3試管苗的處理、移栽及管理移栽至花盆前，輕取苗子，清洗根部的培養(yǎng)基并用多菌靈800倍液進(jìn)行漂洗.移栽時(shí)花盆應(yīng)澆透水，然后將小拱棚用塑料薄膜蓋緊，保證濕度控制在95%以上，次日早晨將拱棚揭開(kāi)小口通風(fēng)5～10 min；中午若光照過(guò)強(qiáng)，應(yīng)在大棚上加蓋遮陽(yáng)網(wǎng)，若溫度過(guò)高，可用噴霧方法在小拱棚上灑水降溫；晚上繼續(xù)通風(fēng)5～10 min.移栽后前3 d必須控制溫度在20～25 ℃，濕度在90%以上，以后逐漸延長(zhǎng)通風(fēng)時(shí)間，1周后每隔2 d噴灑1次稀薄營(yíng)養(yǎng)液，1個(gè)多月后就可揭去小拱棚上的薄膜.

1.3甜櫻桃試管苗移栽前后生理指標(biāo)及超微結(jié)構(gòu)的測(cè)定

1.3.1根系活力的測(cè)定根系活力采用氯化三苯基四氮唑(TTC)法測(cè)定[14].

1.3.2葉綠素含量的測(cè)定采用日本柯尼美能達(dá)公司生產(chǎn)的SPAD-502 Plus葉綠素儀進(jìn)行葉綠素含量的測(cè)定.由于其含量與SPAD值之間極顯著的正相關(guān)性，可直接采用SPAD值來(lái)估計(jì)葉片中暗綠素濃度.

1.3.3葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測(cè)定采用LI-6400系列便攜式光合儀分別測(cè)定繼代培養(yǎng)60 d、閉瓶煉苗5 d、開(kāi)瓶煉苗10、移栽后10、25、80 d植株中間偏上位置健康葉片的葉綠素?zé)晒鈪?shù)，測(cè)定前葉片在LI-6400系列便攜式光合儀匹配的暗適應(yīng)夾中適應(yīng) 25～30 min，測(cè)得其穩(wěn)定光下熒光產(chǎn)量(Fs)、光下最大熒光產(chǎn)量(Fm')、光下最小熒光產(chǎn)量(Fo’)、初始熒光(F0)、最大熒光(Fm)、PSⅡ最大光化學(xué)效率(Fv/Fm).

1.3.4葉片光合速率的測(cè)定采用LI-6400系列便攜式光合儀測(cè)定葉片光合速率.

1.3.5葉片超微結(jié)構(gòu)的測(cè)定用不銹鋼刀片將甜櫻桃葉片切為大小約1 mm×2 mm小塊，放入盛有2.5%戊二醛的清潔小瓶中進(jìn)行前固定；3 h后用pH值為7.2的緩沖液清洗3次，每次10 min，再用1.0%四氧化鋨后固定；樣品變黑后1.5 h，再用緩沖液清洗3次，每次15 min；用丙酮進(jìn)行系列脫水，每次45 min；在裝有樣品的玻璃瓶里先倒入1/5的丙酮，再倒入1/5的環(huán)氧樹(shù)脂，浸透2 h；Epon812包埋72 h；對(duì)包埋好的樣品進(jìn)行修塊，使組織暴露出來(lái)；在德國(guó)Leica EMUC 7超薄切片機(jī)上將修好的組織作1～2 μm的半薄片；經(jīng)2%乙酸雙氧鈾及6%檸檬酸鉛染色；在日立H-600 IV型透射電子顯微鏡下觀察并拍照.

1.4數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用Excel 2003及SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)及方差分析，采用鄧肯氏新復(fù)極差法對(duì)不同處理的平均數(shù)間進(jìn)行比較.

2結(jié)果與分析

2.1甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中根系活力的變化

由圖1可知，從6月7日到6月22日，根系活力逐漸增強(qiáng)，各處理時(shí)間下的值差異均顯著；而7月2日即移栽后的第10天，發(fā)現(xiàn)根系活力出現(xiàn)了明顯的下降，這表明剛移栽的根系對(duì)新環(huán)境也許有一個(gè)適應(yīng)的過(guò)程；但隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，根系活力與7月2日相比，均出現(xiàn)顯著地增加，在9月12日時(shí)達(dá)到最大，表明此時(shí)根系處于活躍狀態(tài)，這一系列變化的過(guò)程，與后面葉綠素、熒光系數(shù)、光合效率及細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化趨勢(shì)一致，說(shuō)明根系的生長(zhǎng)、代謝和活力變化可直接影響到地上部的生長(zhǎng)發(fā)育，根系活力強(qiáng)，能更好的促進(jìn)葉綠素的合成、葉片對(duì)光能的利用，從而提高光合效率.

繼代培養(yǎng)60 d試管苗(6月7日)；閉瓶煉苗5 d(6月12日)；開(kāi)瓶煉苗10 d(6月22日)；移栽后10 d(7月2日)；移栽后25 d(7月17日)；移栽后80 d(9月12日).圖1　不同時(shí)期根系活力的變化Fig.1　The change of root vitality in different period

2.2甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中葉片葉綠素含量的變化

葉綠素是光合作用的重要色素，其含量在一定程度上能反映植株的光合強(qiáng)度、營(yíng)養(yǎng)水平及健康狀況.由圖2可知，從6月7日到6月22日，甜櫻桃試管苗隨著煉苗時(shí)間的延長(zhǎng)及接受的光照強(qiáng)度的不同，葉綠素的含量逐漸增加，且測(cè)定值之間差異顯著；7月2日即移栽后第10天，葉綠素含量略有降低，出現(xiàn)短暫的對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)狀態(tài)；之后隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，到7月17日、9月12日測(cè)定時(shí)，其含量又逐步增加，結(jié)合圖1，說(shuō)明移栽的植株已逐步適應(yīng)了外界環(huán)境，根系活力逐漸升高，光合能力增強(qiáng).

圖2　不同時(shí)期葉綠素含量的變化Fig.2　The change of chlorophyll content in different period

2.3甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化

由表1可知，F(xiàn)v/Fm在煉苗過(guò)程中量子產(chǎn)量有緩慢上升趨勢(shì)，但差異不顯著；7月2日即移栽后第10天其明顯下降，與移栽前相比差異顯著，之后隨著移栽時(shí)間延長(zhǎng)又呈現(xiàn)不明顯的增加趨勢(shì)，并在移栽80 d時(shí)達(dá)到最大.表明移栽后由于環(huán)境不適應(yīng)，試管苗可能出現(xiàn)短暫的緩苗時(shí)期，使得根系活力下降，光合作用也呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，也可能是PSⅡ?qū)⒐饽苻D(zhuǎn)變?yōu)殡妱?shì)能的能力明顯減弱.隨著試管苗移栽后對(duì)環(huán)境的適應(yīng)，根系活力逐漸上升，PSⅡ?qū)⒐饽苻D(zhuǎn)變?yōu)殡妱?shì)能的能力逐漸增強(qiáng).說(shuō)明在移栽馴化過(guò)程中葉片光活化酶的催化作用逐漸增強(qiáng)，PSⅡ反應(yīng)中心的能量捕獲效率不斷提高，這將促進(jìn)葉片光合能力的提高.

表1　不同時(shí)期葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化

2.4甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中葉片光合速率的變化

光合作用是衡量植物糖合成的重要生理指標(biāo)，蒸騰速率反映葉片對(duì)水分散失的調(diào)控能力.由表2可以看出，在煉苗過(guò)程中，隨著光照時(shí)間的延長(zhǎng)，光合速率增加，6月7日與6月22日測(cè)定差異顯著；7月2日即移栽后第10天，光合速率出現(xiàn)短暫的降低，7月17日測(cè)定，光合速率又出現(xiàn)上升，但不顯著，說(shuō)明移栽馴化過(guò)程中幼苗對(duì)外界光能和CO2的利用能力不斷提高，9月22日即移栽后80天時(shí)，光合速率達(dá)到最大，說(shuō)明幼苗已完全適應(yīng)新環(huán)境，開(kāi)始積累光合產(chǎn)物.而蒸騰速率則在開(kāi)瓶煉苗(6月22日)時(shí)出現(xiàn)了顯著地上升，移栽后又出現(xiàn)顯著下降，隨著移栽時(shí)間的延伸，出現(xiàn)不顯著的下降.

表2　不同時(shí)期氣體交換參數(shù)的變化

2.5甜櫻桃試管苗移栽過(guò)程中葉片超微結(jié)構(gòu)的變化

由圖3可以看出，從試管苗到移栽整個(gè)過(guò)程中，細(xì)胞之間有疏松-緊密-疏松-緊密的變化趨勢(shì)，細(xì)胞壁逐漸增厚；柵欄組織在試管苗時(shí)排列整密，煉苗期間變得紊亂，移栽后又恢復(fù)整密；隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，甜櫻桃幼苗葉片葉綠體形狀逐漸趨于豐滿，這是試管苗逐漸適應(yīng)環(huán)境的表現(xiàn)，其中移栽25 d時(shí)葉綠體形狀最飽滿，可以更有利于進(jìn)行光合作用；繼代培養(yǎng)60 d的試管苗中無(wú)淀粉粒，隨著煉苗出現(xiàn)少量淀粉粒、線粒體，移栽后淀粉粒明顯增多，葉綠體數(shù)量明顯增多，體積也明顯增大，且細(xì)胞中出現(xiàn)少量嗜鋨小體，數(shù)量并逐步增加，說(shuō)明隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，葉綠體逐漸發(fā)育成熟，光合機(jī)構(gòu)向著最有利于光合作用的方向變化，光合積累也逐漸增多.

A1-A4:未煉苗；B1-B4：閉瓶煉苗5 d；C1-C4：開(kāi)瓶煉苗10 d；D1-D4：移栽后10 d；E1-E4：移栽后25 d；F1-F4：移栽后80 d.Chl：葉綠體；G：葉綠體類(lèi)囊體；sg：淀粉粒；os：嗜餓顆粒；chM：葉綠體質(zhì)膜；TH：基質(zhì)類(lèi)囊體；V：液泡；Mch：線粒體；CW：細(xì)胞壁.圖3　不同時(shí)期不同倍鏡下葉片細(xì)胞的電鏡照片F(xiàn)ig.3　The photos of leaf cells from different electron microscope in the different period

3討論與結(jié)論

一直以來(lái)，試管苗的馴化移栽都是一個(gè)重要的問(wèn)題，因此，研究其在整個(gè)過(guò)程中的光合作用與葉片超微結(jié)構(gòu)變化之間的聯(lián)系尤為重要[15].本試驗(yàn)利用對(duì)比分析法分析甜櫻桃試管苗以及移栽后大田苗各階段生理指標(biāo)及細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)移栽后的大田苗與試管苗相比在各方面有了明顯的變化.

光合作用是衡量植物合成功能的重要生理指標(biāo)，葉綠體又是光合作用的主要部位，光合作用的實(shí)現(xiàn)依賴(lài)于葉綠素對(duì)光能的吸收，環(huán)境直接影響到葉綠素的合成[16].葉綠體數(shù)量、結(jié)構(gòu)和葉片形態(tài)特征是葉片乃至整個(gè)植株正常生長(zhǎng)發(fā)育的基本條件[17-19].葉綠體中基粒片層和基質(zhì)片層結(jié)構(gòu)的完整有序是光能轉(zhuǎn)換正常有效進(jìn)行的保證[20]，植物葉片的葉綠體內(nèi)基粒和基粒片層越多、片層排列越整齊致密，葉片光合能力就越強(qiáng)[21].本試驗(yàn)結(jié)果也表明，試管苗從馴化煉苗、移栽到適應(yīng)自然的環(huán)境條件這整個(gè)過(guò)程中，觀察其超微結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)現(xiàn)葉綠體、淀粉粒數(shù)量逐漸增多，體積也逐漸變大并出現(xiàn)嗜餓顆粒，葉綠體形狀由靠近細(xì)胞壁一面凸起的狹長(zhǎng)型逐漸變?yōu)槊嫦蛑醒胍号菀幻嫱蛊鸬呢S滿型.這很可能是在移栽馴化過(guò)程中葉綠體逐漸發(fā)育成熟，并與外界進(jìn)行有效的氣體交換，其形狀的改變?yōu)楣夂闲实奶岣咛峁┝擞辛Φ谋ＷC，這與濮曉珍[22]、藺經(jīng)[23]等人的研究結(jié)果相似；由于淀粉粒是葉綠體的基質(zhì)中所儲(chǔ)藏的光合產(chǎn)物，所以其數(shù)目和體積發(fā)生的變化說(shuō)明幼苗已適應(yīng)大田環(huán)境，進(jìn)入同化產(chǎn)物的積累期，這與韓艷婷[24]等人的研究結(jié)果相符；通常認(rèn)為嗜鋨小體是類(lèi)囊體降解以及脂質(zhì)類(lèi)降解物聚集的結(jié)果，它的產(chǎn)生可提高細(xì)胞質(zhì)濃度、降低滲透勢(shì)、保證水分和無(wú)機(jī)鹽類(lèi)營(yíng)養(yǎng)的吸收[25].同時(shí)結(jié)合根系活力(圖1)、葉綠素含量(圖2)、葉綠素?zé)晒鈪?shù)(表1)以及光合速率(表2)，發(fā)現(xiàn)在煉苗期間葉綠素含量、根系活力均出現(xiàn)了顯著地增加，隨之光合速率也呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，這與曹剛[26]的研究結(jié)果相似，說(shuō)明試管苗葉片在馴化過(guò)程中對(duì)光的利用能力逐漸增強(qiáng)，且對(duì)弱光也能很好的利用；由于剛移栽后對(duì)根系的傷害以及植株從恒溫、高濕、弱光、無(wú)菌環(huán)境轉(zhuǎn)為由于受到太陽(yáng)光直接照射而引起的溫差大、蒸騰作用強(qiáng)等各種逆境環(huán)境，使得根系活力、葉綠素含量顯著下降，從而光合速率也大幅度降低；隨后經(jīng)過(guò)短暫的緩苗后，試管苗適應(yīng)移栽后的環(huán)境，又開(kāi)始出現(xiàn)上升趨勢(shì)；葉片熒光參數(shù)的變化也是呈現(xiàn)先上升后降低再上升的趨勢(shì)，隨著煉苗時(shí)間的延長(zhǎng)，葉片具有較高的葉綠素含量、葉綠體緊貼細(xì)胞壁、個(gè)體大、片層清晰、排列有序，而移栽后10 d，外界環(huán)境造成逆境條件，使得葉綠體個(gè)體相對(duì)較小、片層結(jié)構(gòu)垛疊緊密，從移栽后25 d到80 d時(shí)，已逐步適應(yīng)逆境環(huán)境，所以其含量又逐步上升.這些都與電鏡里所觀察到的淀粉粒、葉綠體等的變化相符合，表明這些生理指標(biāo)變化的一致性以及相關(guān)性.

綜上所述，組培苗凈光合速率很低，而且剛出瓶的試管苗氣孔導(dǎo)度較大、蒸騰失水快，因此，移栽初期保持環(huán)境高的相對(duì)濕度是防止試管苗過(guò)度失水、保證其移栽成活的關(guān)鍵.但隨光照強(qiáng)度的增加，剛出瓶的試管苗的氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率有降低趨勢(shì)，說(shuō)明甜櫻桃試管苗的氣孔雖無(wú)關(guān)閉功能，卻有一定的調(diào)節(jié)能力，這與柏新富在一品紅試管苗上的試驗(yàn)結(jié)果相似.隨著出瓶移栽馴化時(shí)間的延長(zhǎng)和環(huán)境光照強(qiáng)度的增加，其凈光合速率、熒光產(chǎn)量逐漸升高，由此可以認(rèn)為，甜櫻桃試管苗移栽后光合性能迅速提高、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率大幅下降是其由半自養(yǎng)半異養(yǎng)向完全自養(yǎng)的轉(zhuǎn)化期，也是其氣孔恢復(fù)調(diào)節(jié)功能的重要時(shí)期，此期在保持適當(dāng)濕度的情況下，逐漸增加光照是甜櫻桃試管苗移栽成活的關(guān)鍵，即在移栽馴化初期減少水分散失、增強(qiáng)光合能力對(duì)提高試管苗的移栽成活率具有重要意義.

本研究探討了甜櫻桃試管苗在煉苗移栽過(guò)程中葉片光合特性、超微結(jié)構(gòu)及根系活力發(fā)生的一系列適應(yīng)性的變化，發(fā)現(xiàn)隨著移栽時(shí)間的延長(zhǎng)，甜櫻桃葉片的光合效率明顯提高，并有大量的光合產(chǎn)物積累；同時(shí)根系吸收水分、養(yǎng)分的能力及抗逆能力都明顯增強(qiáng)，到移栽 80 d時(shí)試管苗已完全適應(yīng)大田環(huán)境.

參考文獻(xiàn)

[1]Uraiwan A,Gaelle C,Veronoque D,et al.Linkage disequilibrium in French wild cherry germplasm and worldwide sweet cherry germplasm[J].Tree Genetics & Genomes,2012，8:737-755

[2]王計(jì)平,侯思宇,孫朝霞,等.歐洲大櫻桃的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(16):4809-4810

[3]周宇.中國(guó)櫻桃“對(duì)櫻桃”試管苗移栽影響因子研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2006,22(5):134-136

[4]夏國(guó)海,葉霞,趙冰梅,等.櫻桃組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J].中國(guó)果樹(shù),2003(3):46-50

[5]Xu J Z,Yu Y M,Peng S Z,et al.A modified nonrectangular hyperbola equation for photosynthetic light-response curves of leaves with different nitrogen status[J].Photosynthetica,2014,52 (1):117-123

[6]Mamoru N,Miwa S.Photosynthesis and artificial photosynthesis research [J].Research on Chemical Intermediate,2014,40:3163-3168

[7]Asaph B C,Matt J,Andrewd B L.Photosynthesis and the environment [J].Photosynthesis Research,2014,119:1-2

[8]汪月霞,孫國(guó)榮,王建波,等.NaCl脅迫下星星草幼苗MDA含量與膜透性及葉綠素?zé)晒鈪?shù)之間的關(guān)系[J].生態(tài)學(xué)報(bào),2006,26(1):122-129

[9]魏道智,寧書(shū)菊,林文雄.小麥根系活力變化與葉片衰老的研究[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2004,15(9):1565-1569

[10]溫國(guó)勝,田海濤,張明如,等.葉綠素?zé)晒夥治黾夹g(shù)在林木培育中的應(yīng)用[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2006,17(10):1973-1977

[11]Rafaqat A G,Lili Z,Basharat A,et al.Chromium-induced physiochemical and ultrastructural changes in four cultivars ofBrassicanapusL[J].Chemosphere,2015,120(2):154-164

[12]Moorea J P,Waldron M,Clindsey G G,et al.An ultrastructural investigation of the surface microbiota present on the leaves and reproductive structures of the resurrection plantMyrothamnusflabellifolia[J].South African Journal of Botany,2011,77(2):485-491

[13]Najeeb U,Xu L,Ali S,et al.Citric acid enhances the phytoextraction of manganese and plant growth by alleviating the ultrastructural damages inJuncuseffususL.[J].Journal of Hazardous Materials,2009,170:1156-1163

[14]ZOU Q.Guide for plant physiological experiment[M].Beijing China Agriculture Press,2000:173-174

[15]王愛(ài)勤,何龍飛,楊春林,等.蘆薈組培苗移栽前煉苗及其結(jié)構(gòu)與生理變化的研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2002,18(4):54-55

[16]Zeng X M,Shi X B,Shen Y G.Effects of truncated mutants of the ε subunit of chloroplast ATP synthase on the fast phase of millisecond delayed light emission of chloroplast and its ATP synthesis ability [J].Chinese Science Bulletin,2004,49(3):258-262

[17]Parida A K,Das A B.Salt tolerance and salinity effects on plants:a review [J].Ecotoxicology and Environmental Safety,2005,60(3):324-349

[18]秦玲,康文懷,齊艷玲,等.鹽脅迫對(duì)釀酒葡萄葉片細(xì)胞結(jié)構(gòu)及光合特性的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,45(20):4233-4241

[19]楊江山,常永義,種培芳.3個(gè)櫻桃品種光合特性比較研究[J].園藝學(xué)報(bào),2005,32(5):773-777

[20]Johnson Z,Barber R T.The low-light reduction in the quantum yield of photosynthesis:potential errors and biases when calculating the maximum quantum yield [J].Photosynthesis Research,2003,75(1):85-95

[21]孫璐,周宇飛,李豐先,等.鹽脅迫對(duì)高粱幼苗光合作用和熒光特性的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,45(16):3265-3272

[22]濮曉珍,尹春英,周曉波,等.鐵皮石斛組培苗移栽馴化過(guò)程中葉片光合特性、超微結(jié)構(gòu)及根系活力的變化[J].生態(tài)學(xué)報(bào),2012,32(13):4114-4122

[23]藺經(jīng),楊青松,王中華,等.梨雜種苗童區(qū)和成年區(qū)葉片光合熒光特征及超微結(jié)構(gòu)研究[J].果樹(shù)學(xué)報(bào),2011,28(5):750-754

[24]韓艷婷,楊國(guó)順,石雪暉,等.不同鎂營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)紅地球葡萄葉綠體結(jié)構(gòu)及光合響應(yīng)的影響[J].果樹(shù)學(xué)報(bào),2011,28(4):603-609

[25]Wei C X,Wang J J,Wang J B,et al.Effects of Na2CO3stress on the ultrastructure of mesophyII cells inPuccinelliatenuiflora[J].Acta Ecologica Sinica,2006,26(1):108-114

[26]曹剛.不同LED光質(zhì)對(duì)黃瓜和結(jié)球甘藍(lán)苗期生長(zhǎng)、光合特性及內(nèi)源激素的影響[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2013

(責(zé)任編輯李辛)

Changes in root vigor,photosynthetic properties and ultrastructures ofPrunusaviumtube seedlings during transplantation

LI Fu-hui1,MAO Juan1,CHEN Bai-hong1,MI Bao-qin1,XIE Yong-dong2

(1.College of Horticulture,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China;2.College of Horticulture,Sichuan Agricultural University,Yaan 625014,China)

Abstract：【Objective】 To explore the adaptation changes of Prunus avium tissue culture seedlings to field environment.【Method】 Tissue-cultured plantlets were avoid to the air for 5 days,exposure to the air for 10 days and 10 days,25 days,80 days after transplanting,the changes in photosynthesis parameters,chlorophyll fluorescence characteristics,ultrastructure,chlorophyll content,as well as root vigor in the course of transplant acclimation were determined.【Result】 The chlorophyll content,root vigor,the maximum photosynthetic rate and the PS II maximum photochemical efficiency gradually increased during the period of hardening-seedling,but decreased significantly after transplanting 10 days.In the early of the process of transplanting,because of the P.avium did not adapt to the external environment,a slow seeding recovering was appeared,made the root activity dropped and lower photosynthetic capacity.Internal structure of chloroplasts at 80 days after transplanting,for example,the volume of starch grains and osmiophilic material became larger,lamellar structure appeared clear,orderly and complete.At this time,the root vigor and chlorophyll content increased obviously.【Conclusion】 During smelting seedling and transplanting,the photosynthetic characteristics,ultrastructure and root activity of P.avium tube seedlings increased as the extension of transplanting time,the leaf photosynthetic efficiency obviously improved,and a large number of photosynthetic product accumulated.Root system's capacity to absorb moisture,nutrients and resilience enhanced obviously,the tube seedlings adapted to the field environment when transplanting 80 days.

Key words：Prunus avium；test-tube seedling;transplant;chlorophyll fluorescence;photosynthetic properties

通信作者：陳佰鴻，男，教授，主要研究方向?yàn)楣麡?shù)生理與生物技術(shù).E-mail:bhch@gsau.edu.cn

基金項(xiàng)目：甘肅省農(nóng)牧廳農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項(xiàng)目(GNCX-2013-38)

收稿日期：2015-04-15；修回日期：2015-05-25

中圖分類(lèi)號(hào)：S 662.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1003-4315(2016)01-0077-07

第一作者：李?；?1984-)，男，碩士研究生，研究方向果樹(shù)栽培生理.E-mail:714234378@qq.com