• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    摻假肉檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀

    2016-04-08 13:59:45李欣南關(guān)一夫遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心遼寧沈陽(yáng)006中國(guó)醫(yī)科大學(xué)生物與微生物教研室遼寧沈陽(yáng)000
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2016年5期
    關(guān)鍵詞:鑒別檢測(cè)技術(shù)

    李欣南,關(guān)一夫(.遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心,遼寧沈陽(yáng)006;2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)生物與微生物教研室,遼寧沈陽(yáng)000)

    ?

    摻假肉檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀

    李欣南1,關(guān)一夫2,*
    (1.遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心,遼寧沈陽(yáng)110016;2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)生物與微生物教研室,遼寧沈陽(yáng)110001)

    摘要:綜述近年來(lái)?yè)郊偃獾念?lèi)別。闡述摻假肉現(xiàn)狀的產(chǎn)生原因。收集、整理現(xiàn)有摻假肉鑒別檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展及現(xiàn)狀。剖析摻假肉檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì),為相關(guān)檢測(cè)技術(shù)研發(fā)人員提供技術(shù)參考和思路。

    關(guān)鍵詞:摻假肉;鑒別;檢測(cè)技術(shù)

    一部以中國(guó)美食為主題的大型紀(jì)錄片《舌尖上的中國(guó)》在各大媒體相繼播出后,掀起了飲食行業(yè)的軒然大波,人們?yōu)槊朗扯駸?、為美食的傳承而?dān)憂、為美食的精湛而驚羨。然而,潛伏的食品安全問(wèn)題卻不容忽視,“三聚氰胺”、“地溝油”、“瘦肉精”等有毒有害物質(zhì)危害著人們的健康。

    在眾多的食品安全事件中,最值得長(zhǎng)期、持續(xù)關(guān)注的應(yīng)該是摻假肉問(wèn)題。其原因主要有3個(gè)方面:(1)中國(guó)的畜禽肉品的消費(fèi)市場(chǎng)龐大。60年來(lái)我國(guó)年人均肉類(lèi)消費(fèi)量增長(zhǎng)了近13倍,肉類(lèi)消費(fèi)經(jīng)歷了由追求量的滿(mǎn)足轉(zhuǎn)向提高質(zhì)量的發(fā)展軌跡,目前正處于穩(wěn)步發(fā)展階段[1]。2013年據(jù)有關(guān)的機(jī)構(gòu)和專(zhuān)家測(cè)算,綜合考慮各種因素,我國(guó)未來(lái)10年,肉類(lèi)產(chǎn)品平均增長(zhǎng)速度從需求量來(lái)看不會(huì)低于5 %[2]。(2)中國(guó)畜禽養(yǎng)殖量龐大、交易市場(chǎng)分布零散,監(jiān)管盲點(diǎn)較多。以肉牛交易市場(chǎng)為例,有關(guān)資料統(tǒng)計(jì),全國(guó)肉牛交易市場(chǎng)大約3 000余個(gè),全國(guó)平均10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)一個(gè)肉牛交易市場(chǎng),這些交易市場(chǎng)中以小型市場(chǎng)為主??陀^地講,這些交易市場(chǎng)多為非專(zhuān)業(yè)化交易場(chǎng)所,不規(guī)范,市場(chǎng)管理水平低下,交易方式落后,存在很多監(jiān)管上的漏洞,為不法分子的不法行為提供了可乘之機(jī)。(3)肉類(lèi)尤其是牛肉、羊肉、驢肉等高價(jià)肉品摻假利潤(rùn)豐厚。隨著飼養(yǎng)成本的增加,牛肉、羊肉等肉品市價(jià)價(jià)格逐年攀升,其中牛肉和羊肉的市價(jià)分別由2011年的36元/kg和40元/kg上升到2013年的70元/kg和80元/kg。其間的獲利空間非常大,因此,不法分子為謀取暴利,不擇手段,在牛肉、羊肉等肉品中摻雜廉價(jià)肉品形式多樣。摻假肉主要集中在注水、注膠肉;牛、羊肉中摻雜鴨肉或豬肉;牛、羊肉與狗肉等肉類(lèi)食品中摻雜植物源性蛋白;再有,肉制品中摻雜狐貍?cè)狻⒑炎尤獾冉?jīng)濟(jì)動(dòng)物肉等形式也很常見(jiàn),已成食品行業(yè)的一大隱患。例如英國(guó)和愛(ài)爾蘭2013年1月中旬的“馬肉風(fēng)波”,2013年2月江蘇無(wú)錫制售假羊肉[3-4]以及2013年12月底的濟(jì)南沃爾瑪驢肉中摻雜狐貍?cè)馐录?。綜上,摻假肉已成為我國(guó)重要的食品安全事件。因此,我們必須堅(jiān)守科技陣營(yíng)、提高現(xiàn)代摻假肉鑒別水平,為加強(qiáng)食品安全監(jiān)管提供堅(jiān)實(shí)有力的技術(shù)支撐。

    傳統(tǒng)對(duì)肉品質(zhì)的鑒別方法主要是依賴(lài)于感官判斷和形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)[5]。但感官判斷和形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的局限性較大,尤其不適用于肉類(lèi)來(lái)源鑒別和加工產(chǎn)品的鑒別。國(guó)外對(duì)肉類(lèi)摻假檢驗(yàn)方法的研究起步較早,基本確立了以特征性的脂肪、蛋白質(zhì)、核酸作為靶標(biāo)物進(jìn)行肉類(lèi)摻假檢驗(yàn)的基本思路[6]。當(dāng)前主要分析手段有紅外光譜分析、色譜分析、核磁共振法、質(zhì)譜分析、免疫分析和DNA分析,這些現(xiàn)代技術(shù)的應(yīng)用大幅提高了檢驗(yàn)方法精度和準(zhǔn)確度。本文綜述了當(dāng)前常見(jiàn)摻假肉的類(lèi)型和檢測(cè)方法,并探討了不同檢測(cè)方法的適用性和優(yōu)缺點(diǎn),為建立符合市場(chǎng)需求的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)提供參考和借鑒。

    1 摻假肉檢測(cè)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀

    1.1注水肉

    注水肉是指在屠宰前一定時(shí)間給動(dòng)物灌水,或者屠宰后向肉內(nèi)注水制成。注水肉會(huì)降低肉類(lèi)的品質(zhì),容易造成病原微生物和病菌病毒的污染,同會(huì)加速肉類(lèi)產(chǎn)品變質(zhì)腐敗的速度,從而給人們的健康造成嚴(yán)重的危害。各種肉類(lèi)的自然(基準(zhǔn))含水量,可以用國(guó)標(biāo)法事先測(cè)定(標(biāo)定)出來(lái),按照國(guó)家規(guī)定的畜禽肉水分限量標(biāo)準(zhǔn)GB18394-2001《畜禽肉水分限量》規(guī)定豬肉、牛肉、雞肉的含水量>77 %,羊肉含水量>78 %,既可判為注水肉,或含水量超標(biāo)。注水肉的檢測(cè)技術(shù)主要有顯微鑒別法鏡、刀切法鑒別、紙片法、壓力損失法、滴水損失法、蒸煮損失法、冰凍法[7]。

    1.1.1干燥箱干燥法

    將樣品與砂和乙醇充分混合,混合物在水浴上預(yù)干,然后再(103±2)℃溫度下烘干至恒重,測(cè)其質(zhì)量損失。該法為GB/T9695.15-2008《肉與肉制品水分含量測(cè)定》所在第二法,亦為GB18394-2001《畜禽肉水分限量》的仲裁法。

    1.1.2蒸餾法

    樣品中加入新蒸餾的甲苯,連接冷凝管與水分接受管,將樣品中的水分與甲苯共同蒸餾,收集餾出液于接受管內(nèi),根據(jù)餾出液體積計(jì)算含量。該法由于甲苯毒性較大、且操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)不適宜大量樣品檢測(cè)。

    1.1.3紅外線干燥法(快速法)

    用紅外線加熱將水分從樣品中去除,再將干燥前后的質(zhì)量差計(jì)算成水分含量。市售紅外線快速水分分析儀,就是利用該原理設(shè)計(jì)改造的,水分測(cè)定范圍0 %~100 %,讀數(shù)精度0.01 %。

    1.1.4蒸煮損失法

    采取待檢精肉0.5 kg置于鍋中加水2 L煮沸1 h,取出肉塊放涼稱(chēng)重用熟肉重量除以鮮肉重量求得熟肉率正常的熟肉率大于50 %,而注水肉的熟肉率低于50 %[8]。

    1.1.5微電容法測(cè)量

    電容傳感器的電容量取決于介質(zhì)的檢點(diǎn)常數(shù),注水的肉介電常數(shù)要比沒(méi)有注水的肉高,因此,由于介電常數(shù)的差異使得所測(cè)電容不同,從而達(dá)到對(duì)肉含水量檢測(cè)的目的?,F(xiàn)在市面上很多注水肉檢測(cè)儀都是依據(jù)微電容法設(shè)計(jì)研發(fā)的,其準(zhǔn)確率較高,便于現(xiàn)場(chǎng)操作檢測(cè)。

    1.2注膠肉

    “注膠肉”是用食用膠和水的混合液注入牛羊體內(nèi),然后利用膠的凝固性將水分“鎖”住。有的屠宰戶(hù)在注膠的同時(shí),還加入一些食鹽和防腐劑,以延長(zhǎng)肉的保質(zhì)期。一頭250 kg的牛可注入40 kg~50 kg的“膠水”,而一頭100 kg的豬也可注入15 kg~35 kg。隨著注膠肉越來(lái)越多的出現(xiàn)在市場(chǎng)上,一些不法商販將卡拉膠、血水及一些工業(yè)原料注入肉里,使注膠肉比注水肉更難識(shí)別,危害極大。注膠肉檢測(cè)方法尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái),其檢測(cè)方法主要靠感官識(shí)別,而近紅外光譜技術(shù)和低場(chǎng)核磁共振技術(shù)的應(yīng)用也為注膠肉的檢測(cè)提供了新的檢測(cè)思路。

    1.2.1注膠肉的近紅外光譜快速判別分析

    楊紅菊等[9]采用近紅外透射光譜法,用一階導(dǎo)數(shù)對(duì)光譜進(jìn)行預(yù)處理,采用因子化法建立的定性判別模型能很好的對(duì)注膠肉和正常肉進(jìn)行判別,模型的正確判別率為100 %。該研究結(jié)果表明采用近紅外透射光譜和判別分析法相結(jié)合為注膠肉的快速判別分析提供了一種快速有效的篩選方法。

    1.2.1基于低場(chǎng)核磁共振技術(shù)的注膠肉快速檢測(cè)

    低場(chǎng)核磁共振(low field-nuclear magnetic resonance,LF-NMR)技術(shù)在研究很多與水分密切相關(guān)的食品性質(zhì)上具有特殊的優(yōu)勢(shì),利用氫原子核在磁場(chǎng)中的活動(dòng)特性,可以追蹤待測(cè)物質(zhì)(食品)中的氫原子特別是水,包括結(jié)合水、不易流動(dòng)水和自由水,觀察水分分布狀況及其隨著時(shí)間的變化而產(chǎn)生的改變[10],能夠獲得生物材料中不同狀態(tài)水分及其各自的相對(duì)含量等信息,且樣品無(wú)需經(jīng)過(guò)任何預(yù)處理,樣品需要量少,快速無(wú)損[11]。肌肉中的水分以結(jié)合水、不易流動(dòng)水和自由水3種形式存在[12]。研究表明,LF-NMR橫向弛豫時(shí)間(T2值)的差異可有效區(qū)分肉品中水分的3種分布狀態(tài):T2b=1 ms~10 ms反映和大分子緊密相連的水,可認(rèn)為其對(duì)應(yīng)結(jié)合水[13];T21=30 ms~60 ms反應(yīng)位于高度組織化的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)部的水或細(xì)胞內(nèi)水,可認(rèn)為其對(duì)應(yīng)不易流動(dòng)水[14];T22=100 ms~400 ms為肌原纖維蛋白外部的水或細(xì)胞外水,對(duì)應(yīng)于自由水[15]。人工強(qiáng)行注入肌肉中水分多以自由水存在,如混以淀粉、膠類(lèi)物質(zhì)則類(lèi)似不易流動(dòng)水,均可通過(guò)測(cè)定T2值及對(duì)應(yīng)峰值而識(shí)別。龐之列等[16]基于LF-NMR技術(shù),利用t21、A21、P21、L*這4項(xiàng)指標(biāo),建立了豬肉含水量的檢測(cè)方法,可檢測(cè)出不同含水量的豬肉。吳藝影等[10]利用低場(chǎng)核磁共振技術(shù)結(jié)合PCA法,不僅可以區(qū)分正常肉與注膠肉,還能區(qū)分不同種類(lèi)膠、以及同種膠不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)和注射膠水后不同時(shí)間的豬肉。LF-NMR技術(shù)作為新型檢測(cè)技術(shù),在注水肉和注膠肉的檢測(cè)鑒別上發(fā)揮了重要作用,同時(shí),也給摻假肉研究人員提供了新的研發(fā)思路。

    1.3肉種摻假

    肉種摻假由來(lái)已久,是零售市場(chǎng)和肉品加工業(yè)中普遍存在的問(wèn)題。主要是指以低價(jià)格的雞肉、鴨肉或其他病死動(dòng)物肉類(lèi)冒充高價(jià)牛、羊等肉類(lèi)。如在牛羊肉中摻雜鴨肉、雞肉并加入調(diào)味劑和色素制造出的牛、羊“肉卷、肉串”。皮毛動(dòng)物肉冒充牛、羊肉等,如狐貍?cè)?、貉子肉、貂肉等摻雜冒充驢、牛、羊肉。摻雜肉制造者手段高明,一般感官檢驗(yàn)很難分辨,因此,需要能夠準(zhǔn)確鑒別肉品種屬的方法對(duì)其進(jìn)行確證檢驗(yàn)。目前,摻雜肉鑒別方法主要有紅外光譜分析法、色譜法、質(zhì)譜法、酶聯(lián)免疫法和PCR法。

    1.3.1紅外光譜分析

    紅外光譜可用于有機(jī)物的檢測(cè),當(dāng)紅外光譜儀中發(fā)出的紅外光線,照射到待測(cè)物表面后,有機(jī)物能產(chǎn)生吸收特性,對(duì)發(fā)射的紅外光進(jìn)行吸收,然后產(chǎn)生出一個(gè)紅外光譜圖[17]。肉類(lèi)中含有豐富的蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、碳水化合物等,運(yùn)用紅外光譜法可以對(duì)肉中的有機(jī)物成分進(jìn)行定性、定量分析[18]。近年來(lái),中紅外光譜和近紅外光譜技術(shù)在肉類(lèi)摻假檢測(cè)方面都取得了諸多進(jìn)展,在不同物種之間的鑒別主要用于鑒別豬肉、羊肉、牛肉、雞肉等不同物種以及摻假肉,鑒別正確率在90 %以上[19]。如Osama等[20]用中紅外光譜檢測(cè)摻有牛腎臟或肝臟的碎牛肉,根據(jù)脂肪和瘦肉組織中蛋白質(zhì)、脂肪、水分含量的不同對(duì)肉類(lèi)產(chǎn)品加以辨別,能鑒別出摻假牛肉,識(shí)別出含10 %~100 %肝臟或腎臟的牛肉產(chǎn)品。Cozzolino等[21]對(duì)牛肉、羊肉、雞肉和豬肉的混合樣品進(jìn)行了近紅外光譜的鑒別分析,采用偏最小二乘方(PLS)回歸,通過(guò)建立測(cè)量光譜與樣品含量之間的校正模型對(duì)樣品種源進(jìn)行定性驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)其判別正確率超過(guò)80 %。紅外光譜技術(shù)可實(shí)現(xiàn)肉種摻假的快速、無(wú)損檢測(cè),但由于物質(zhì)在近紅外區(qū)吸收弱、靈敏度低,且建模工作難度大,因此,在實(shí)際應(yīng)用中限于作為初步篩選的方法使用。

    1.3.2色譜和質(zhì)譜分析

    肉中的一些蛋白質(zhì)、肽類(lèi)和氨基酸組成因物種來(lái)源的不同而存在差異,通過(guò)色譜定量、定性分析也能反映肉種摻假情況。Chung等[22]通過(guò)與物種相關(guān)的組氨酸二肽,利用反相柱高效液相色譜法可檢出肉及肉制品種類(lèi)。Giaretta等[23]采用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)豬肉和牛肉中的肌紅蛋白,以特征組分的色譜峰面積變化識(shí)別牛肉中摻入豬肉成分的含量。Christoph von Bargen等[24]利用HPLC-MS/MS技術(shù)和胰蛋白酶肽的特異性標(biāo)記,建立了一種檢測(cè)深加工樣品中的馬肉和豬肉的方法,可檢出牛肉基質(zhì)中0.24 %的豬肉或馬肉添加,方法分離效率高、靈敏度高。盡管色譜和質(zhì)譜分析具有高效、準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì),但需要大型儀器設(shè)備且分析成本昂貴,對(duì)操作人員技術(shù)水平要求較高,目前應(yīng)用范圍很小。

    1.3.3酶聯(lián)免疫分析

    酶聯(lián)免疫檢測(cè)分析技術(shù),是通過(guò)抗體特異性識(shí)別肉制品中物種特征性蛋白的方式檢測(cè)動(dòng)物源性成分,早在上個(gè)世紀(jì)90年代ELISA技術(shù)就已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用于肉類(lèi)的物種鑒別[25-26],可實(shí)現(xiàn)肉種摻假的定性和定量檢測(cè)。ELISA技術(shù)主要有直接法、間接法、雙抗體夾心法、直接競(jìng)爭(zhēng)法、間接競(jìng)爭(zhēng)法等幾種類(lèi)型[27]。常用于肉種摻假檢測(cè)的ELISA方法是間接法和雙抗體夾心法。目前ELISA方法的建立主要是利用抗體對(duì)肌肉和血清蛋白或熱穩(wěn)定性蛋白來(lái)鑒別不同種類(lèi)的動(dòng)物肉類(lèi)。例如Rencova等[28]利用不同的熱穩(wěn)定蛋白作抗原免疫兔,以多克隆抗體建立了敏感性較好的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,成功鑒別了熱加工的家禽、馬、袋鼠和老鼠的肌肉組織。酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法具有很高的特異性和靈敏度,操作簡(jiǎn)單、分析容量大、安全可靠、儀器成本較低,是當(dāng)前肉類(lèi)種屬快速篩選的首選方法。

    1.3.4DNA分析

    聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),可根據(jù)不同物種的基因保守序列的特異性進(jìn)行種屬的鑒別。相對(duì)于蛋白標(biāo)志物而言,DNA分子具有優(yōu)秀的熱穩(wěn)定性,不受肉制品熱加工的限制。Bartlet[29]利用法醫(yī)核苷酸序列信息的方法,首次建立了鑒定肉制品動(dòng)物源性的PCR方法。KarabasanavarNS等[30]對(duì)豬線粒體D-Loop環(huán)的基因序列設(shè)計(jì)特異性引物,建立豬肉的PCR鑒別方法,檢測(cè)靈敏度為0.1 %。PCR-RFLP與單重PCR過(guò)程類(lèi)似,但擴(kuò)增后需要進(jìn)行限制性?xún)?nèi)切酶酶解,生成特定的酶切片段,通過(guò)有無(wú)特定長(zhǎng)度的DNA片段就可以確定樣品種類(lèi)。高琳等[31]針對(duì)動(dòng)物線粒體細(xì)胞色素b基因建立了PCR-RFLP方法,可從6種生肉及7種加工肉制品中鑒別出豬源性和牛源性成分,所有樣品經(jīng)PCR擴(kuò)增均產(chǎn)生359 bp的片段,擴(kuò)增子采用Alu限制性酶切,所產(chǎn)生的片段差異可用于區(qū)分豬肉和牛肉。同普通PCR方法相比多重PCR可以實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)多種肉種的目的,且檢測(cè)成本低,適于基層檢測(cè)的需求。何瑋玲等[32]從動(dòng)物線粒體細(xì)胞色素b基因,篩選出一組特異性多重PCR引物,建立了豬肉、牛肉、羊肉和雞肉的通用引物多重PCR快速鑒別方法。

    PCR法操作簡(jiǎn)便可實(shí)現(xiàn)定性檢驗(yàn)和高通量篩選,但卻不能進(jìn)行定量分析,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)法(Real-time PCR)的開(kāi)發(fā)和使用彌補(bǔ)了這一缺憾。實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步,最后通過(guò)觀察熒光信號(hào)來(lái)對(duì)未知模板進(jìn)行定性、定量分析的方法。凌睿等[33]基于SYBR Green溶解曲線和Myostatin通用引物建立了一種新的快速、簡(jiǎn)便且成本低的肉類(lèi)摻假鑒別的方法,可避免假陰性檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)。

    環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)(LAMP)是由日本學(xué)者Notomi等[34]發(fā)展起來(lái)的一種新型基因檢測(cè)專(zhuān)利技術(shù),目前已經(jīng)開(kāi)發(fā)出基于LAMP法檢測(cè)肉制品動(dòng)物源性成分的方法,并取得了很好的效果。Amir Abdulmawjood[35]等人基于線粒體細(xì)胞色素b基因建立環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)方法檢測(cè)鴕鳥(niǎo)肉成分,該LAMP方法是結(jié)合使用實(shí)時(shí)熒光,肉制品中鴕鳥(niǎo)肉檢測(cè)限可達(dá)0.01%,檢測(cè)時(shí)間可在15min~20min內(nèi)完成,該LAMP方法具有良好的特異性和敏感性。楊麗霞等[36]針對(duì)豬肉線粒體DNA COXⅠ基因設(shè)計(jì)LMAP引物,通過(guò)擴(kuò)增產(chǎn)物電泳和重點(diǎn)染色法鑒定反應(yīng),并采用熒光檢測(cè)儀實(shí)施監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程,結(jié)果表明該LAMP方法能有效、特異地檢測(cè)出牛羊肉中的豬肉成分。

    2 展望

    隨著造假水平的提高,僅依靠視覺(jué)、味覺(jué)難以準(zhǔn)確判斷肉制品的真?zhèn)?。而目前適用范圍廣、準(zhǔn)確度高的DNA檢測(cè)方法又存在檢測(cè)成本過(guò)高的問(wèn)題,很難為消費(fèi)者所普及,不能?chē)?yán)格打擊假冒偽劣現(xiàn)象。對(duì)于肉制品尤其是冷鮮肉的摻假檢驗(yàn)更急需一些快速、準(zhǔn)確的篩查方法,這種快速檢測(cè)方法和產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)與研究將是科技工作者的重點(diǎn)研究方向。據(jù)報(bào)道[37],一種可在10min內(nèi)辨別肉類(lèi)是否摻假的“肉類(lèi)快速鑒別儀”已研發(fā)成功并通過(guò)鑒定。這種肉類(lèi)快速鑒別儀,利用動(dòng)物肌肉組織及骨髓中一種特殊蛋白隨加熱溫度顯現(xiàn)的變性程度差異,以及與試劑會(huì)發(fā)生顯色反應(yīng),進(jìn)行生肉種類(lèi)鑒別的快速檢測(cè),填補(bǔ)了肉類(lèi)摻假快速鑒別的空白。盡管該項(xiàng)技術(shù)還未被推廣應(yīng)用,但它卻體現(xiàn)了當(dāng)前摻假肉檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的方向,快速檢測(cè)技術(shù)和產(chǎn)品將成為該領(lǐng)域的技術(shù)瓶頸。此外,基因芯片[38-40]技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展,也將為建立快速摻假肉檢測(cè)方法開(kāi)辟新的路徑。

    目前應(yīng)用最廣的快速檢測(cè)方法諸如NIRS和ELISA均是借鑒了其他專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域的技術(shù)轉(zhuǎn)化而來(lái),因此,廣大研究人員應(yīng)打破專(zhuān)業(yè)界限,在交叉學(xué)科中尋求其他相關(guān)領(lǐng)域方法的轉(zhuǎn)換,讓摻假肉鑒別技術(shù)迅速、成熟的發(fā)展起來(lái),為廣大消費(fèi)者及執(zhí)法部門(mén)提供安全、快速、有效的檢測(cè)手段。

    參考文獻(xiàn):

    [1]王曉磊,司輝清.我國(guó)居民肉類(lèi)消費(fèi)研究[J].肉類(lèi)工業(yè),2011(4):1-3 [2]張?zhí)熳?我國(guó)肉類(lèi)食品產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工,2013 (12):16-17

    [3]王云松.魚(yú)肉以次充好潛藏多年[N].中國(guó)食品報(bào),2013-02-25(3)

    [4]逯文娟.從羊肉造假看食品安全監(jiān)管[J].食品安全導(dǎo)刊,2013(5): 13

    [5]趙立冬.肉類(lèi)食品摻假的鑒別方法[J].內(nèi)蒙古技術(shù)監(jiān)督,1996(1): 26

    [6]馮永巍,王琴.肉類(lèi)摻假檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品與機(jī)械, 2013, 29(4):237-240

    [7]劉登勇,艾迎飛,呂超,等.注水肉檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].肉類(lèi)工業(yè), 2012(1):54-56

    [8]趙慧梅,黃素珍.注水肉的鑒別檢驗(yàn)與處理[J].肉類(lèi)工業(yè),2007(1): 45-46

    [9]楊紅菊,姜艷彬,候東軍,等.注膠肉的近紅外光譜快速判別分析[J].肉類(lèi)研究,2008(11):62-64

    [10]吳藝影.基于低場(chǎng)核磁共振技術(shù)的注膠肉快速檢測(cè)[J].肉類(lèi)研究, 2013, 27(3):26-29

    [11]阮榕生.核磁共振技術(shù)在食品和生物體系中的應(yīng)用[M].北京:中國(guó)輕工出版社,2009:36

    [12]周光宏.肉品加工學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)版社,2009:30-31

    [13] Bertram H C,Karlsson A H,Andersen H J.The significance of cooling rate on water dynamics in porcine muscle from heterozygote carriers and non-carriers of the halothane gene-a low-field NMR relaxation study[J].Meat Science,2003,65(4):1281-1291

    [14] Bertram H C,Karlsson A H,Rasnmsen M,et al.Origin of multiexponential T2 relaxation in muscle myowater[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2001,49(6):3092-3100

    [15] Tornberg E,Andersson A,Gransson A.Water and fat distribution in pork in relation to sensory properties[M].UK:CAB International, 1993:239-258

    [16]龐之列,何栩曉,李春保.一種基于LF.NMR技術(shù)的不同含水量豬肉檢測(cè)方法研究[J].食品科學(xué),2014,35(4):142-145

    [17]馬利,孫長(zhǎng)華,張寶.紅外光譜技術(shù)在食品摻假檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)展[J].生命科學(xué)儀器,2010(8):3-6

    [18]陳建軍,譚佐軍,崔鵬,等.近紅外光譜技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用[J].紅外,2007,28(4):38-40

    [19]黃偉,楊秀娟,張燕鳴,等.近紅外光譜技術(shù)在肉類(lèi)定性鑒別中的研究進(jìn)展[J].肉類(lèi)研究,2014,28(1):31-34

    [20] Osama Al-Jowder, Marianne Defernez, E Katherine Kemsley, et al.Mid-Infrared Spectroscopy and Chemometrics for the Authentication of Meat Products[J].Agric.Food Chem,1999, 47(8):3210-3218

    [21] Cozzolino D,Murray I .Identification of animal meat muscles by visible and near infrared reflectance spectroscopy[J].LWT-Food Science and Technology,2004,37(4):447-452

    [22] Chung G S, Lee M H, Kim J M, et al.Differentiation the species of origin of meats on the basis of the contents of histidine dipeptides in muscle[J].JVet Sci, 1998, 40(2): 1-6

    [23] Giaretta N,Di Giuseppe A,Lipper M,et al.Myoglobin as marker in meat adulteration:A UPLC method for determining the presence of pork meat in raw beef burger[J].Food Chemistry,2013,141(3):1814-1820

    [24] Chritoph von Bargen, Jens Brockmeyer, Hans-Ulrich Humpf.A New HPLC-MS/MS Based Method for the Fast and Sensitive Detection of Horse and Pork in Highly Processed Food[J].J Agric Food Chem, 2014,8(27): 9428-9435

    [25] Kangéthe E K, Jones S J, Patterson R L.Identification of the species origin of fresh meat using an enzyme-linked immunosorbent assay procedure[J].Meat Science,1982,7(3):229-240

    [26] Macedo-Silva A,Barbosa S F,Alkmin M G,et al.Hamburger meat identification by dot-ELISA[J].Meat Science,2000,56(2):189-192

    [27]水小溪,蔡樂(lè),趙寶華.ELISA技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用[J].生命科學(xué)儀器,2008,6(10):51-53

    [28] Rencova E, Svoboda I, Necidova I.Identification by ELISA of poultry, horse, kangaroo, and rat muscle specific proteins in heat processed products[J].Veterinarni Medicina, 2000, 45(12): 353-356

    [29] Bartlett S E, Davidson W S.FINS(forensically informative nucleotide sequencing): a procedure for identifying the animal origin of biological specimens[J].Biotechniques.1992, 12(3): 408-411

    [30] Karabasanavara, S P Singhb, Deepak Kumarc, et al.Detection of pork adulteration by highly-specific PCR assay of mitochondrial D-loop[J].Food Chemistry,2014 ,15(145):530-534

    [31]高琳,徐幸蓮,周光宏.應(yīng)用PCR-RFLP法鑒別肉制品中的豬和牛源性成分[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,31(2):135-138

    [32]何瑋玲,張馳,楊靜,等.食品中4種肉類(lèi)成分多重PCR的快速鑒別方法[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,45(9):1873-1880

    [33]凌睿,薛建麗,楊軍,等.Real-Time PCR溶解曲線及Myostatin基因在肉類(lèi)摻假快速鑒別中的應(yīng)用[J].食品科技,2013,38(5):318-322

    [34] Notomi T,Okayama H,Masubuchi H, et al.Loop-mediated isothermal amplification of DNA[J].Nucleic Acids Res,2000,28(12):63

    [35] Amir Abdulmawjood, Nils Grabowski, Svenja Fohler, et al.Development of Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) Assay for Rapid and Sensitive Identification of Ostrich Meat[J].PLOS ONE 2014,9(6):100717

    [36]楊麗霞,付淑君,彭新凱.環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法檢測(cè)牛羊肉中的豬肉成分[J].食品與機(jī)械,2013,29(5):63-65

    [37]孟治軍.行業(yè)動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)產(chǎn)品加工,2013(9):71-72

    [38]陳永忠,譚曉風(fēng),Clapham D.基因芯片技術(shù)及其應(yīng)用前景[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào),2003,23(4):100-105

    [39]石豐運(yùn),繆建錕,張利平,等.運(yùn)用基因芯片技術(shù)檢測(cè)牛、山羊、豬和雞源性成分[J].生物工程學(xué)報(bào),2010, 26(6): 823-829

    [40] SASHWATI ROY,CHANDAN K SEN.cDNA Microarray Screening in Food Safety[J].Toxicology,2006,221(1): 128-133

    Present Situation of Testing Technology of Meat Adulteration

    LI Xin-nan1,GUAN Yi-fu2,*
    (1.Quality and Safety Testing Center for Veterinary Drugs,Animal Feed and Animal Products in Liaoning Province,Shenyang 110016,Liaoning,China;2.Key Laboratory of Medical Cell Biology,Ministry of Education,Department of Biochemistry and Molecular Biology,China Medical University,Shenyang 110001,Liaoning,China)

    Abstract:Review category adulterated meat in recent years.Expounds the causes of adulterated meat status.Collecting and sorting out the progress and present situation of the existing detection techniques to identify adulterated meat.Analysis of the development trend of meat adulteration detection technology,to provide technical reference and ideas for the correlation detection technology research and development personnel.

    Key words:adulterated meat;identification;detection technology

    DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2016.05.044

    基金項(xiàng)目:遼寧省農(nóng)業(yè)科技攻關(guān)計(jì)劃(2015202013)

    作者簡(jiǎn)介:李欣南(1978—),女(漢),博士在讀,研究方向:分子檢測(cè)技術(shù)、細(xì)菌耐藥性安全評(píng)價(jià)。

    *通信作者:關(guān)一夫(1955—),男(滿(mǎn)),教授,博士生導(dǎo)師,研究方向:生物分子檢測(cè)技術(shù)以及臨床應(yīng)用、腫瘤生物學(xué)。

    收稿日期:2014-10-20

    猜你喜歡
    鑒別檢測(cè)技術(shù)
    胎母輸血綜合征1例及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)
    粉色蛋白石與相似寶玉石品種的鑒別
    利用溶解性表,提高學(xué)生在酸、堿、鹽等物質(zhì)鑒別中的能力
    食品安全檢測(cè)技術(shù)研究現(xiàn)狀
    公路工程試驗(yàn)檢測(cè)存在的問(wèn)題及措施
    煤礦機(jī)電產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)
    顯微技術(shù)在牛黃清心丸(局方)質(zhì)量控制中的應(yīng)用
    血液檢驗(yàn)在貧血鑒別診斷中的作用探討
    今日健康(2016年12期)2016-11-17 19:20:27
    中藥肉桂與食用肉桂的比較與鑒別研究
    今日健康(2016年12期)2016-11-17 14:47:33
    鍋爐檢測(cè)應(yīng)用壓力管道無(wú)損檢測(cè)技術(shù)的分析
    久久精品人人爽人人爽视色| 欧美日韩综合久久久久久| 国产av精品麻豆| 亚洲精品视频女| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 精品国产一区二区久久| 天美传媒精品一区二区| 亚洲精品在线美女| 国产精品久久久av美女十八| 国产男女超爽视频在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲国产欧美网| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲经典国产精华液单| 91aial.com中文字幕在线观看| av网站在线播放免费| 亚洲欧美一区二区三区久久| 久久精品国产亚洲av天美| 黄片小视频在线播放| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲国产欧美在线一区| 99久国产av精品国产电影| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 免费在线观看完整版高清| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲熟女精品中文字幕| 青青草视频在线视频观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩av不卡免费在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 另类精品久久| 亚洲男人天堂网一区| 日韩一本色道免费dvd| 日本vs欧美在线观看视频| 久久久久久久精品精品| 婷婷成人精品国产| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产精品 国内视频| 99热网站在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 97在线人人人人妻| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩精品有码人妻一区| 午夜免费鲁丝| 久热久热在线精品观看| 久久久久精品人妻al黑| 又大又黄又爽视频免费| 国产成人a∨麻豆精品| 婷婷色av中文字幕| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 一区在线观看完整版| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产精品一二三区在线看| 日韩精品免费视频一区二区三区| a级毛片在线看网站| 成年女人毛片免费观看观看9 | 婷婷色麻豆天堂久久| 国产成人精品婷婷| 美女国产高潮福利片在线看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美日本中文国产一区发布| 最黄视频免费看| 青青草视频在线视频观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 人妻一区二区av| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲国产av新网站| 国产av国产精品国产| 久久久精品区二区三区| 欧美人与善性xxx| 亚洲精品自拍成人| 欧美精品av麻豆av| 久久久久网色| 少妇被粗大的猛进出69影院| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产免费福利视频在线观看| 日日撸夜夜添| 热99国产精品久久久久久7| 涩涩av久久男人的天堂| 熟女电影av网| 国产男人的电影天堂91| 9热在线视频观看99| 免费少妇av软件| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 性色avwww在线观看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| √禁漫天堂资源中文www| 午夜激情av网站| 老汉色∧v一级毛片| 国产精品蜜桃在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| www.自偷自拍.com| 新久久久久国产一级毛片| 国产成人精品一,二区| 久久久a久久爽久久v久久| 久久久国产欧美日韩av| 赤兔流量卡办理| 国产探花极品一区二区| 久久亚洲国产成人精品v| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 免费在线观看完整版高清| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产黄色免费在线视频| 日韩伦理黄色片| 亚洲欧美色中文字幕在线| 五月天丁香电影| 人妻系列 视频| 国产在视频线精品| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 老汉色∧v一级毛片| 久久久欧美国产精品| 叶爱在线成人免费视频播放| 大香蕉久久成人网| 婷婷色麻豆天堂久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 毛片一级片免费看久久久久| www日本在线高清视频| 大片免费播放器 马上看| 一区二区三区乱码不卡18| 久久精品夜色国产| 男人舔女人的私密视频| 精品亚洲成国产av| av有码第一页| 边亲边吃奶的免费视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 天美传媒精品一区二区| 国产精品久久久久久精品古装| 999精品在线视频| 高清在线视频一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲av电影在线进入| 日韩av在线免费看完整版不卡| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 日韩三级伦理在线观看| 久久青草综合色| 热re99久久国产66热| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美人与善性xxx| 国产成人精品久久二区二区91 | av女优亚洲男人天堂| 成年av动漫网址| 天天影视国产精品| 人妻一区二区av| 国产精品不卡视频一区二区| videosex国产| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品久久蜜臀av无| av天堂久久9| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产一级毛片在线| 久久久精品免费免费高清| 尾随美女入室| 日韩大片免费观看网站| 一级片'在线观看视频| 91久久精品国产一区二区三区| 国精品久久久久久国模美| 国产免费一区二区三区四区乱码| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产亚洲精品第一综合不卡| 欧美最新免费一区二区三区| 欧美日韩视频精品一区| 国产男女内射视频| 一级毛片我不卡| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲国产精品国产精品| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲美女视频黄频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 精品少妇内射三级| av卡一久久| 一个人免费看片子| 亚洲三级黄色毛片| 大香蕉久久网| 一级片免费观看大全| 久久精品国产a三级三级三级| 另类精品久久| 老女人水多毛片| 亚洲第一青青草原| 国产免费现黄频在线看| 久久久久精品人妻al黑| 久久久国产精品麻豆| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 不卡av一区二区三区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲人成电影观看| 国产精品三级大全| 亚洲精品国产av蜜桃| 黄频高清免费视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| av在线app专区| 成年美女黄网站色视频大全免费| 9色porny在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品国产av成人精品| 久久婷婷青草| 国产人伦9x9x在线观看 | 少妇人妻 视频| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲在久久综合| 大码成人一级视频| 国产精品久久久久久精品古装| 黄频高清免费视频| 国产1区2区3区精品| 男女无遮挡免费网站观看| 五月伊人婷婷丁香| a 毛片基地| 国产精品不卡视频一区二区| 婷婷色综合大香蕉| 日本av手机在线免费观看| 高清在线视频一区二区三区| freevideosex欧美| 日韩免费高清中文字幕av| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 18禁国产床啪视频网站| 欧美最新免费一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| 老司机亚洲免费影院| 韩国av在线不卡| 十八禁高潮呻吟视频| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 在线观看三级黄色| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲国产精品国产精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 中文欧美无线码| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 春色校园在线视频观看| 乱人伦中国视频| 人体艺术视频欧美日本| 视频区图区小说| 亚洲国产精品一区三区| 一级黄片播放器| 国产日韩欧美亚洲二区| 深夜精品福利| 亚洲一区二区三区欧美精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久精品国产a三级三级三级| 精品酒店卫生间| 日韩av不卡免费在线播放| 国产精品欧美亚洲77777| 最近2019中文字幕mv第一页| 在线天堂中文资源库| 国产男女内射视频| 老女人水多毛片| 免费观看a级毛片全部| 99久国产av精品国产电影| 国产探花极品一区二区| 男女国产视频网站| 91成人精品电影| 国产黄频视频在线观看| 午夜激情av网站| 夫妻性生交免费视频一级片| 在线观看国产h片| 高清在线视频一区二区三区| 最黄视频免费看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 中文字幕最新亚洲高清| 天天影视国产精品| 国产成人91sexporn| 丰满饥渴人妻一区二区三| 制服丝袜香蕉在线| 99九九在线精品视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 七月丁香在线播放| 黄色 视频免费看| 精品人妻偷拍中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产av一区二区精品久久| 久久久久久伊人网av| 久久久精品区二区三区| 男女免费视频国产| 丝袜美足系列| 国产精品二区激情视频| 欧美国产精品一级二级三级| 国产日韩欧美亚洲二区| 两性夫妻黄色片| 丝袜脚勾引网站| 国产免费现黄频在线看| 国精品久久久久久国模美| 少妇的逼水好多| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产精品无大码| 美女国产高潮福利片在线看| 免费观看av网站的网址| 热re99久久国产66热| 在线精品无人区一区二区三| 青春草亚洲视频在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 日韩大片免费观看网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一级,二级,三级黄色视频| 国产精品熟女久久久久浪| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 日本91视频免费播放| 国产熟女午夜一区二区三区| 下体分泌物呈黄色| 最近中文字幕2019免费版| xxxhd国产人妻xxx| 欧美黄色片欧美黄色片| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久这里有精品视频免费| 各种免费的搞黄视频| 飞空精品影院首页| 满18在线观看网站| 午夜福利影视在线免费观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久99热这里只频精品6学生| 久久婷婷青草| 日韩av免费高清视频| 99久久人妻综合| 久久99蜜桃精品久久| 99久国产av精品国产电影| 亚洲成色77777| 成人影院久久| 熟女av电影| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲少妇的诱惑av| 女人精品久久久久毛片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 又大又黄又爽视频免费| 美女视频免费永久观看网站| 国产黄频视频在线观看| 超碰97精品在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 国产成人精品久久二区二区91 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 免费高清在线观看日韩| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产成人精品福利久久| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久久欧美国产精品| 国产精品免费大片| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲内射少妇av| tube8黄色片| 国产成人91sexporn| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 精品久久久久久电影网| 十八禁高潮呻吟视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文字幕制服av| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 男男h啪啪无遮挡| 免费大片黄手机在线观看| 综合色丁香网| 亚洲精品美女久久av网站| 久久综合国产亚洲精品| 尾随美女入室| xxxhd国产人妻xxx| 九草在线视频观看| 大片免费播放器 马上看| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲人成77777在线视频| 免费观看性生交大片5| 捣出白浆h1v1| 一二三四中文在线观看免费高清| 看十八女毛片水多多多| 亚洲国产欧美网| 色94色欧美一区二区| 午夜福利视频精品| 色94色欧美一区二区| 91精品国产国语对白视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 啦啦啦在线免费观看视频4| 岛国毛片在线播放| 热re99久久国产66热| 午夜福利在线免费观看网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 大片免费播放器 马上看| 色94色欧美一区二区| 好男人视频免费观看在线| 90打野战视频偷拍视频| 性色avwww在线观看| 欧美激情高清一区二区三区 | 日本91视频免费播放| 国产97色在线日韩免费| 国产日韩欧美在线精品| 国产精品 欧美亚洲| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产精品久久久av美女十八| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲视频免费观看视频| 黄片播放在线免费| 女人久久www免费人成看片| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美+日韩+精品| 国产人伦9x9x在线观看 | 午夜福利视频精品| 99精国产麻豆久久婷婷| 五月天丁香电影| 天天操日日干夜夜撸| 成年人午夜在线观看视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美精品一区二区免费开放| 纯流量卡能插随身wifi吗| 视频区图区小说| 丝瓜视频免费看黄片| 极品人妻少妇av视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美av亚洲av综合av国产av | www日本在线高清视频| 久久99一区二区三区| 丝袜脚勾引网站| 最新的欧美精品一区二区| 一区二区三区激情视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 秋霞伦理黄片| av一本久久久久| kizo精华| 看免费av毛片| 国产av精品麻豆| 2021少妇久久久久久久久久久| 欧美精品一区二区大全| 韩国av在线不卡| 日本色播在线视频| 亚洲av在线观看美女高潮| 一级毛片 在线播放| 午夜福利视频在线观看免费| √禁漫天堂资源中文www| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产免费现黄频在线看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产福利在线免费观看视频| 9热在线视频观看99| 国产极品天堂在线| 国产成人欧美| 极品人妻少妇av视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产精品欧美亚洲77777| 久久亚洲国产成人精品v| xxxhd国产人妻xxx| 久久久久久久久久人人人人人人| 99久久精品国产国产毛片| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品免费视频内射| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| xxx大片免费视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 99热网站在线观看| 精品视频人人做人人爽| 观看美女的网站| 久久久国产精品麻豆| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 777米奇影视久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 午夜福利在线免费观看网站| 春色校园在线视频观看| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产探花极品一区二区| videossex国产| 久久人妻熟女aⅴ| av电影中文网址| 日韩一本色道免费dvd| 另类精品久久| 日本vs欧美在线观看视频| 伊人久久国产一区二区| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲av综合色区一区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 热re99久久国产66热| 国产一区二区三区综合在线观看| 午夜免费鲁丝| 国产午夜精品一二区理论片| 97在线视频观看| 日韩视频在线欧美| 免费在线观看黄色视频的| 三级国产精品片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 最近手机中文字幕大全| 伦理电影大哥的女人| 久久久久久久精品精品| 国产伦理片在线播放av一区| 中文字幕最新亚洲高清| 午夜福利一区二区在线看| 一级毛片 在线播放| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产 精品1| 久久久国产精品麻豆| 高清不卡的av网站| 欧美+日韩+精品| 在线观看美女被高潮喷水网站| kizo精华| 搡老乐熟女国产| 亚洲精品一二三| 一级毛片电影观看| 黄色一级大片看看| www日本在线高清视频| 黄片无遮挡物在线观看| videos熟女内射| 搡老乐熟女国产| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 丝袜脚勾引网站| 日本午夜av视频| 久久久a久久爽久久v久久| 国产人伦9x9x在线观看 | 国产精品熟女久久久久浪| 久久99精品国语久久久| 新久久久久国产一级毛片| 大片电影免费在线观看免费| 老汉色av国产亚洲站长工具| 性色avwww在线观看| 国产精品国产三级专区第一集| www.自偷自拍.com| 精品一区在线观看国产| 大香蕉久久网| 日韩 亚洲 欧美在线| av免费观看日本| 国产精品久久久av美女十八| 黄色怎么调成土黄色| 国产av精品麻豆| 青春草国产在线视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 两个人免费观看高清视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 男女免费视频国产| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久久国产一级毛片高清牌| 日韩在线高清观看一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 欧美另类一区| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产精品免费视频内射| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 免费看不卡的av| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲精品自拍成人| 久久精品国产亚洲av天美| 伦理电影免费视频| 久久国产精品大桥未久av| 人妻系列 视频| 亚洲av.av天堂| 宅男免费午夜| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品国产三级专区第一集| 国产乱人偷精品视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 美女主播在线视频| 国产精品久久久av美女十八| 校园人妻丝袜中文字幕| 寂寞人妻少妇视频99o| 飞空精品影院首页| 多毛熟女@视频| 美女高潮到喷水免费观看| 少妇 在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 婷婷色综合大香蕉| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区久久| 只有这里有精品99| 久久国产精品男人的天堂亚洲| av在线播放精品| 精品福利永久在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产片内射在线| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 看十八女毛片水多多多| 亚洲五月色婷婷综合| 久久久久视频综合| 国产一区二区激情短视频 | 日本色播在线视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 最新的欧美精品一区二区| 久久久a久久爽久久v久久| av在线播放精品| 日韩一本色道免费dvd| 日本91视频免费播放| 久久久久久久精品精品| 一级,二级,三级黄色视频| 涩涩av久久男人的天堂| 啦啦啦中文免费视频观看日本|