中藥對(duì)精子DNA損傷影響研究進(jìn)展

王志強(qiáng)，葛 君，陜文生（甘肅省婦幼保健院男科，甘肅 蘭州 730050）

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中藥對(duì)精子DNA損傷影響研究進(jìn)展

王志強(qiáng)，葛 君，陜文生
（甘肅省婦幼保健院男科，甘肅 蘭州 730050）

近年來，精子DNA損傷已成為衡量男性生育力的一個(gè)重要指標(biāo)［1］，同時(shí)也可能與輔助生育技術(shù)結(jié)果密切相關(guān)［2］。有研究表明［3］，不育患者精子DNA變性程度明顯高于正常生育者，其精液常規(guī)參數(shù)與精子DNA損傷之間呈顯著負(fù)相關(guān)，以精子DNA損傷為特征的精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)異常是男性不育、復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)以及輔助生殖技術(shù)治療失敗的重要原因之一。中醫(yī)治療男性不育癥有其獨(dú)有的優(yōu)勢(shì)，已形成一套完整實(shí)用的理論體系，綜述如下。

1 男性不育與精子DNA損傷

隨著輔助生殖技術(shù)的廣泛開展，精子評(píng)估已由傳統(tǒng)的精液常規(guī)分析向細(xì)胞-分子水平深入。目前發(fā)現(xiàn)，在男性不育癥患者中，有15%的患者精液常規(guī)檢查是正常的［4］，說明精液常規(guī)檢查已不能準(zhǔn)確的評(píng)估男性的生育能力。近幾年精子DNA損傷作一個(gè)新的熱點(diǎn)逐漸進(jìn)入男性不育的研究。精子DNA損傷可以使精子的受精能力下降，妊娠率降低，流產(chǎn)率增高，出現(xiàn)低妊娠、高不育、高流產(chǎn)。文獻(xiàn)報(bào)道，近20%的特發(fā)性不育與精子DNA損傷有關(guān)，其對(duì)生育的影響涉及多個(gè)環(huán)節(jié)，如受精、著床、植入以及胚胎存活等［5］。有研究指出，在不育癥患者中，精子DNA受損比率較正常人升高［6］。說明精子DNA損傷與男性不育密切相關(guān)，因此精子DNA損傷可作為一項(xiàng)新的預(yù)測(cè)男性生育能力的指標(biāo)應(yīng)用于臨床。對(duì)于精子DNA損傷程度的評(píng)估，學(xué)者們也提出了很多指標(biāo)，其中以DFI最為常用。DFI可以間接反應(yīng)精子遺傳物質(zhì)的完整性，因此對(duì)于不育癥的患者，可以通過DFI值的變化進(jìn)一步了解精子DNA損傷的程度，從而更好的用于評(píng)估、預(yù)測(cè)男性的生育能力及治療和預(yù)防。報(bào)道顯示，DFI與精子正常形態(tài)率呈負(fù)相關(guān)，表明精子DNA損傷可以影響精子的形態(tài)，可能與精子DNA損傷引起精子畸形率增高有關(guān)［7］。Derijck等［8］發(fā)現(xiàn)不育癥患者中，異常形態(tài)精子數(shù)目越多，DFI值越大，二者呈顯著正相關(guān)，且以精子頭部異常較明顯。由于DFI可以對(duì)精子DNA損傷做出準(zhǔn)確的判斷，因此DFI的檢測(cè)具有一定的臨床意義。

精子DNA損傷的機(jī)制主要包括以下幾種：①精子染色質(zhì)包裝與分離異常。在精子形成過程中，由于拓?fù)洚悩?gòu)酶作用和組蛋白超乙?；芯蛹?xì)胞都產(chǎn)生瞬時(shí)的DNA斷裂，有助于核蛋白組型轉(zhuǎn)換時(shí)釋放扭力。由于精子細(xì)胞具有構(gòu)象脆性，所以比體細(xì)胞產(chǎn)生更多的自發(fā)DNA損傷，而且精子細(xì)胞DNA損傷修復(fù)能力較弱［9］。另外，約有5%～15%不育男性完全缺乏魚精蛋白，過多的核組蛋白（＞15%）使染色質(zhì)致密性降低，容易受到外界環(huán)境的影響。動(dòng)物模型研究提示魚精蛋白缺乏與精子DNA損傷及IVF中精子受精能力的下降相關(guān)［10］。②氧化應(yīng)激?；尉雍桶准?xì)胞是精液中過量活性氧的主要來源，過量活性氧會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激，損傷精子DNA結(jié)構(gòu)完整性，產(chǎn)生畸形精子，這是一個(gè)相互作用的過程［11］。③細(xì)胞凋亡異常。精原細(xì)胞和精母細(xì)胞的早期凋亡主要通過Fas/FasL途徑以及 Caspase途徑介導(dǎo)，異常凋亡途徑可能會(huì)產(chǎn)生功能缺陷的精子。Sakkas等［12］研究表明，一些具有DNA損傷的生精細(xì)胞可能逃避了某些凋亡途徑，生成了帶有損傷DNA的精子。

2 中藥對(duì)精子DNA損傷的影響

中醫(yī)認(rèn)為，腎藏精，主生殖，腎精充盛促使天癸成熟，在男子則表現(xiàn)為精氣溢瀉，能和陰陽而有子，若腎精衰少，腎氣不足則無子［13］。脾為后天之本，主運(yùn)化水谷精微，為氣血生化之源。脾胃健則氣血充，生精有源，種子有望。健運(yùn)脾胃，補(bǔ)益后天，水谷精微而能聚精歸腎，精旺則子盛。治療以補(bǔ)腎健脾為根本，兼以疏肝、活血等。

張孝旭等［14］研究聚精丸對(duì)弱精子癥患者精子DNA完整性的影響，將59例按照精子DNA損傷參數(shù)（DFI）值異常與否分層研究，治療3個(gè)月后，精子密度、總數(shù)、活力、活率、畸形率、DFI與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明聚精丸可顯著提高弱精子癥患者精子密度、總數(shù)、活力、活率和精子DNA完整性。楊麗霞等［15］研究生精散對(duì)男性不育患者精子DNA損傷的修復(fù)作用，56例少、弱精子癥不育患者隨機(jī)分為中藥組和對(duì)照組，觀察兩組行IVF-ET周期中獲卵數(shù)、MII卵子數(shù)、受精數(shù)、卵裂數(shù)、可用胚胎數(shù)、種植率、臨床妊娠率及流產(chǎn)率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)生精散能夠明顯降低精子DFI值，提示其能夠通過對(duì)損傷DNA修復(fù)而提高精子質(zhì)量，改善IVF-ET治療患者的妊娠結(jié)果。金保方等［16］研究養(yǎng)精膠囊聯(lián)合鋅硒寶治療男性不育患者精子DNA完整性的影響。60例合并精子DNA完整性異常的不育患者隨機(jī)分為治療組與對(duì)照組各30例，治療3個(gè)月，檢測(cè)DFI和精液常規(guī)參數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)養(yǎng)精膠囊聯(lián)合鋅硒寶可顯著降低不育患者的精子DFI值，提示養(yǎng)精膠囊和鋅硒寶治療男性不育可顯著改善精子DNA完整性。王淑紅等［17］研究益腎生精方對(duì)弱精子癥不育患者精液質(zhì)量及精子DNA完整性的影響，采用自身對(duì)照方法，用單細(xì)胞凝膠電泳法測(cè)定精子DNA完整性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)精子總彗星細(xì)胞率較治療前顯著降低，提示益腎生精方具有提高不育癥患者精子活力及改善精子DNA損傷的作用。孫振高等［18］研究補(bǔ)腎中藥對(duì)精液參數(shù)及精子DNA質(zhì)量的影響。將68例腎陰虛型男性不育患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，觀察組服用六味地黃軟膠囊，對(duì)照組服用維生素E膠丸，12周為一療程。結(jié)果精子活動(dòng)力、精子畸形率、精子DNA碎片化指數(shù)改善觀察組較對(duì)照組明顯，說明補(bǔ)腎中藥可改善精液參數(shù)，其作用機(jī)制可能與改善精子DNA質(zhì)量有關(guān)。譚廣興等［19］研究養(yǎng)精贊育顆粒對(duì)弱精子癥患者精子DNA完整性的影響。弱精子癥86例口服養(yǎng)精贊育顆粒，通過吖啶橙試驗(yàn)（OAT）與計(jì)算機(jī)輔助精液分析（CASA）檢測(cè)DFI和精液常規(guī)參數(shù)。治療3個(gè)月，結(jié)果精子的活力和精子DNA的完整性顯著改善，補(bǔ)脾益腎是提高精子DNA完整性的有效方法。王英俊等［20］研究十子二仙湯對(duì)腎陽虛型弱精子癥患者的精子DNA完整率及精子頂體完整率的臨床效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)十子二仙湯能有效改善腎陽虛型弱精子癥的精子DNA完整率和頂體完整率。宋兵等［21］研究復(fù)方玄駒膠囊聯(lián)合維生素E對(duì)輕度少精子癥和（或）弱精子癥患者精子染色質(zhì)損傷的臨床療效。50例精液異常的不育患者隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，運(yùn)用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）及精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（SCSA）方法分析兩組患者治療前后精液常規(guī)參數(shù)和精子DNA損傷指數(shù)（DFI）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)方玄駒膠囊聯(lián)合維生素E治療可有效改善不育患者精液質(zhì)量，對(duì)精子染色質(zhì)損傷有一定的改善作用。陳逸青等［22］研究淫羊藿總黃酮對(duì)酗酒模型小鼠精子質(zhì)量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)淫羊藿總黃酮具有拮抗酒精對(duì)小鼠生殖系統(tǒng)的毒害作用。明顯改善酗酒小鼠的睪丸/附睪質(zhì)量指數(shù)，增加精子的數(shù)量與活力，減少酒精致精子畸形率，對(duì)酗酒小鼠精子細(xì)胞DNA損傷具有明顯的保護(hù)作用。

3 小 結(jié)

DNA是生物體內(nèi)最重要的遺傳物質(zhì)，在生命活動(dòng)過程中，DNA會(huì)不斷受到各種環(huán)境因素的攻擊而導(dǎo)致?lián)p傷。DNA損傷直接影響DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而影響細(xì)胞生長、發(fā)育、遺傳、代謝和繁殖等生命活動(dòng)［23］。精子DNA的完整性對(duì)遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞是必須的，任何形式的精子DNA損傷都與男性不育有直接關(guān)系，會(huì)導(dǎo)致男性生育力下降［24］。精子DNA的損傷能夠影響精子的受精能力、受精卵的分裂，以及胚胎的發(fā)育，但其病因錯(cuò)綜復(fù)雜，至今尚未找到確切致病原因，也尚未發(fā)現(xiàn)效果顯著且得到公認(rèn)的藥物。

目前研究認(rèn)為中藥可以起到抗氧化應(yīng)激作用而改善精子成熟的微環(huán)境，從而起到對(duì)精子 DNA 完整性的保護(hù)作用，提高精子質(zhì)量，促進(jìn)精子成熟，最終提高生育力。但是，尚缺少大量更深層機(jī)制的研究，很少從氧化應(yīng)激某個(gè)或多個(gè)通路入手探討其作用機(jī)制，未體現(xiàn)出中藥多途徑、多靶點(diǎn)作用的優(yōu)勢(shì)，因此還有大量研究工作需要完成。

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［中圖分類號(hào)］R256.59

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1004-2814（2016）04-0384-02

［基金項(xiàng)目］甘肅省中醫(yī)藥管理局科研課題（GZK-2014-48）

［通訊作者］陜文生

［收稿日期］2015-11-30