褶紋冠蚌研究概況

王欽貴，謝紹河，，梁飛龍，林偉財（.廣東紹河珍珠有限公司，廣東　汕頭　558；.廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東　湛江　5405）

褶紋冠蚌研究概況

王欽貴1，謝紹河1，2，梁飛龍2，林偉財1
（1.廣東紹河珍珠有限公司，廣東汕頭515822；2.廣東海洋大學(xué)珍珠研究所，廣東湛江524025）

摘要：本文介紹了褶紋冠蚌生物學(xué)特征、人工育苗、母蚌養(yǎng)殖、珍珠培育、遺傳分析和病害防治技術(shù)等研究概況，提出了研究建議。

關(guān)鍵詞：褶紋冠蚌；生物學(xué)特征；珍珠培育；遺傳分析

褶紋冠蚌（Cristaria plicata Leach）隸屬于軟體動物門（Mollusca）、瓣鰓綱（Lamellibranchia）、真瓣鰓目（Eulamellibranchia）、蚌科（Unionidae）、冠蚌屬（Cristaria），又名“雞冠蚌”、“湖蚌”等。褶紋冠蚌內(nèi)臟團肥厚，適合在內(nèi)臟團中植入較大規(guī)格珠核，培育大型有核珍珠；其次，褶紋冠蚌個體大，珍珠質(zhì)分泌速度快，外套膜寬廣，殼間距較大，適合培育大型附殼造型珍珠；培育的珍珠呈褶紋和長圓形，紅色或粉紅色，但珍珠質(zhì)量不及三角帆蚌，多作為藥材、保健品和化妝品的原料［1-4］。目前，我國褶紋冠蚌內(nèi)臟團植核培育大型游離珍珠技術(shù)還處在實驗階段，現(xiàn)階段主要用于培育附殼造型珍珠。本文對褶紋冠蚌人工育苗、母蚌養(yǎng)殖、育珠和遺傳研究進展等進行綜述，詳細介紹附殼造型珍珠培育技術(shù)，以期為褶紋冠蚌的開發(fā)利用提供參考。

1　地理分布和生物學(xué)特性

1.1形態(tài)結(jié)構(gòu)和生活習性

褶紋冠蚌（Cristaria plicata）呈不等邊三角形，貝殼膨脹，殼面為黃褐色、黑褐色、淡青綠色，殼內(nèi)珍珠層乳白色、鮭白色、淡藍色或七彩色，蚌殼長高寬的比例約為3∶2∶1，分布于黑龍江、吉林、河北、山東、安徽、浙江、江西、湖北、湖南等地，我國幾乎各地均有分布。其耐污水能力較強，棲息在泥沙底的河流、湖泊和溝渠中，適宜生長水溫10～30℃，最適24～28℃，pH值4.5～9.5，生長速度快，3年殼長可達30～35 cm，殼寬20～25 cm，厚度8～10 cm，體質(zhì)量1.5 kg，一般壽命十幾年，最長達80年以上［1，5-6］。

褶紋冠蚌以單細胞藻類、有機碎屑和植物殘片為食，消化系統(tǒng)由唇瓣、口、食道、胃、腸、直腸和肛門組成，消化道管壁上有許多皺褶，黏膜上皮主要為纖毛柱狀細胞，在唇瓣、食道、胃、腸和直腸有少量黏液細胞，纖毛和黏液細胞在食物運輸中起主要作用，消化腺為復(fù)管狀腺，腺管上皮有消化細胞和嗜堿性細胞，消化細胞內(nèi)含許多囊泡和顆粒［7］。

1.2繁殖生物學(xué)

褶紋冠蚌雌雄異體，生殖腺由濾泡、生殖管和生殖輸送管組成，性腺發(fā)育分為增殖期、生長期、成熟期、排放期和休止期。性成熟年齡一般為3～4年，個體懷卵量20萬～30萬粒，每年有二次繁殖期，分別為3—4月和10—12月，每次排卵2～3次，成熟的雄蚌性腺外觀呈白色，針刺后有白色漿液流出，雌性為黃色，針刺后有顆粒狀物流出。鄧道貴等［8-9］研究表明，褶紋冠蚌繁殖期形成直徑約65～70 μm球形精子球，容納2 300多個精子，精子全長40～43 μm，由頭部、中段和鞭毛三部分組成，頭部為子彈頭形，長約2.6 μm，直徑1.5 μm，內(nèi)含細胞核；中段長約0.6 μm，最大直徑約1.8 μm；鞭毛長約37～40 μm；頂體退化。田津方等［10］研究發(fā)現(xiàn)，褶紋冠蚌具有雌雄同體和性轉(zhuǎn)化現(xiàn)象，在武漢南湖生長的褶紋冠蚌體長5 cm開始出現(xiàn)性別分化，體長約10 cm性腺成熟。

2　人工育苗和母蚌養(yǎng)殖

褶紋冠蚌人工育苗包括親蚌的選擇和培育、鉤介幼蟲的采集、寄生鉤介幼蟲的寄主魚培育、稚蚌培育等步驟。繁殖過程為雄蚌將成熟的精子排到水體中，借助入水管的水流進入雌蚌的鰓腔與卵子相遇而受精，受精卵在雌體鰓腔內(nèi)發(fā)育成為鉤介幼蟲。鉤介幼蟲發(fā)育成熟后脫離母蚌，再寄生到黃顙魚、鳙魚、鰱魚等魚的鰭條、鰓絲和皮膚上，吸收魚體的營養(yǎng)發(fā)育為幼蚌，然后自動脫離魚體，進入水底泥中生長，直到性成熟［1，11］。褶紋冠蚌母蚌的養(yǎng)殖包括稚蚌培育、幼蚌培育等過程，養(yǎng)殖水域要求沒有工、農(nóng)業(yè)污染，符合蚌體生長的理化指標，養(yǎng)殖方式采用“魚蚌混養(yǎng)”的生態(tài)養(yǎng)殖模式，以及科學(xué)的管養(yǎng)技術(shù)措施［1，12］。嚴維輝等［13］在開放型和封閉型水體中進行了三角帆蚌和褶紋冠蚌的生長對比試驗，三角帆蚌在兩種水體中的生長速度差異不顯著，而褶紋冠蚌在水質(zhì)肥沃、餌料食物豐富的封閉型水體中生長速度顯著高于開放型水體?？梢?，選擇餌料生物比較豐富的水域進行褶紋冠蚌養(yǎng)殖，不但可以充分利用輕度污染的肥沃水資源，還可以促進褶紋冠蚌的快速生長。

3　珍珠培育技術(shù)研究

3.1附殼珍珠培育概況

我國在13世紀就成功進行了河蚌養(yǎng)殖佛像珍珠實驗，現(xiàn)代大型附殼珍珠的養(yǎng)殖則始于20世紀60年代，生產(chǎn)方法是采用一定的技術(shù)措施在珍珠貝的貝殼珍珠層上固定各種形狀的模核，育珠貝（蚌）外套膜分泌珍珠質(zhì)沉積在模核上形成各種象形珍珠。培育淡水象形珍珠的河蚌主要為褶紋冠蚌，模核（像模）材質(zhì)為鋁、鉛、鋅、合成樹脂、塑料、蠟、蚌殼等［1-4］。國外附殼珍珠養(yǎng)殖研究比國內(nèi)晚600多年，1890年，日本的御木本辛吉借鑒中國河蚌養(yǎng)殖佛像附殼珍珠的方法，在馬氏珠母貝（Pinctada martensii）的貝殼與外套膜之間放入半球形珠核，于1893年培育出半圓附殼珍珠，1896年獲得專利權(quán)［1，14］。

國內(nèi)附殼珍珠的研究主要集中在模核材質(zhì)、手術(shù)部位、養(yǎng)殖籠具和育珠時間等方面［15-17］。附殼珍珠培育使用的模核有硬質(zhì)模核和軟質(zhì)模核兩種，但都具有不足之處。硬質(zhì)模核上刻畫的線條和圖紋容易造成育珠蚌外套膜受傷，導(dǎo)致育珠蚌成活率低、成珠率低。其次，育珠蚌貝殼具有一定的弧度，硬質(zhì)材質(zhì)的模核不易與貝殼珍珠層緊密結(jié)合，脫核率高，模核和貝殼之間所形成的空隙容易沉積污泥等異物，成珠質(zhì)量差。第三，使用軟質(zhì)模核，因貝殼的弧度會造成附殼造型珍珠變形，珍珠形狀差。針對附殼造型珍珠培育存在的優(yōu)質(zhì)珍珠比率低，效益差的狀況，謝紹河發(fā)明了由硬質(zhì)里模和軟質(zhì)外模組成的復(fù)合造型模核，將軟、硬兩種材質(zhì)的優(yōu)點結(jié)合在一起，有效提高了手術(shù)蚌的成活率和成珠率，大幅度提高了優(yōu)質(zhì)珍珠比率［17］。

3.2附殼珍珠培育技術(shù)

培育附殼象形珍珠使用的褶紋冠蚌，貝齡3～5年，殼長16～20 cm。手術(shù)時間以水溫18～20℃的春秋兩季為宜，此時蚌體分泌珍珠質(zhì)機能旺盛，珍珠上層快。如手術(shù)期間水溫過低，珍珠上層慢；水溫過高，蚌體手術(shù)后容易感染。手術(shù)前將精選的手術(shù)蚌洗刷干凈，在清水中暫養(yǎng)1 d，換水2～3次，讓蚌體排除體內(nèi)污泥及糞便等。利用1%濃度的高錳酸鉀溶液浸泡消毒5～10 min，然后將蚌體固定在手術(shù)臺上，開殼加塞，用1%濃度的高錳酸鉀溶液沖洗殼內(nèi)污物，再用海綿輕輕將外套膜邊緣部分的黏液擦去。用小片針將外套膜輕輕挑起，向深處剝離外套膜肌與蚌殼聯(lián)合處，剝開的寬度與模核寬度相當，寬度過大容易引起外套膜收縮，手術(shù)后污物容易進入，寬度過小，模核不能順利送入到預(yù)定位置。然后一手用送片針挑起剝離的外套膜，一手夾住涂有黏合劑的模核小心送到預(yù)定位置使模核緊貼殼面。根據(jù)模核大小，每蚌可黏貼1～2個模核，如黏貼2個，模核間距應(yīng)保持2 cm以上［1，16-17］。

3.3外套膜珍珠（無核、有核）培育技術(shù)

1958年，我國現(xiàn)代珍珠之父熊大仁教授［18］成功進行了淡水無核珍珠培育實驗，然后將技術(shù)推廣到十幾個省、市和自治區(qū)，開創(chuàng)了我國淡水無核珍珠培育工作。江蘇省蘇州水產(chǎn)研究所用1～2年褶紋冠蚌進行無核珍珠培育實驗，結(jié)果表明細胞小片的切取部位和接種位置影響到珍珠質(zhì)量［19］。任海等［20］進行了褶紋冠蚌優(yōu)質(zhì)珍珠的培育研究，認為1～2齡母蚌培育珍珠質(zhì)量較好。杜曉東等［21］指出褶紋冠蚌珍珠囊上皮細胞由植入的細胞小片外表皮細胞分裂增殖而來，珍珠囊上皮細胞在不同的發(fā)育時期合成不同的蛋白質(zhì)。羅夢良等［22］在褶紋冠蚌外套膜進行大型珍珠培育實驗，培育出43 mm，重21 g的擬全包被超大型珍珠。邱安東等［23］研究表明，褶紋冠蚌骨珠珍珠囊表皮細胞合成和分泌珍珠前體物質(zhì)的能力較光珠的強，因此，骨珠的形成速度比光珠快，光珠和骨珠珍珠囊表皮細胞合成和分泌蛋白質(zhì)的差異決定了光珠和骨珠的形成，光珠和骨珠珍珠囊表皮細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征可作為檢驗和預(yù)測人工培育珍珠質(zhì)量的細胞學(xué)標準。張元培等［24］研究表明，三角帆蚌（母本）與褶紋冠蚌（父本）雜交的子一代具有較好的育珠性能。李應(yīng)森等［25-26］研究了河蚌外套膜無核再生珠和有核再生珠培育技術(shù)。褶紋冠蚌外套膜植片和植核培育的無核珍珠和有核珍珠質(zhì)量不如三角帆蚌，因此價格低，其育珠研究資料比較少，內(nèi)臟團植核培育正圓游離珍珠技術(shù)研究則更加缺乏。

4　遺傳分析

生物群體的遺傳多樣性是評價生物資源狀況的一個重要依據(jù)，羅文等［27］采用RAPD和同工酶凝膠電泳的方法分析了三角帆蚌和褶紋冠蚌的遺傳多樣性，結(jié)果表明，三角帆蚌的遺傳多樣性比褶紋冠蚌豐富，兩群體的親緣關(guān)系比較接近，EST和LDH同工酶在褶紋冠蚌外套膜及內(nèi)臟團組織中的表達比三角帆蚌的復(fù)雜，兩種組織相比較則為內(nèi)臟團中的表達比外套膜復(fù)雜。α2M在動物先天性免疫中起著重要的作用，胡寶慶等［28］進行了褶紋冠蚌alpha2巨球蛋白（α2M）基因的分子克隆及序列分析，指出褶紋冠蚌和三角帆蚌α2M基因具有78%的一致性，相似性為85%。Yang等［29］研究了褶紋冠蚌過氧化氫酶的克隆、識別和蛋白質(zhì)特性，指出褶紋冠蚌過氧化氫酶氨基酸序列和動物、植物和細菌具有顯著的同源性。胡曉娟等［30］用RT-PCR方法分析了α2M基因mRNA在褶紋冠蚌中不同組織的表達以及在嗜水氣單胞菌刺激后血細胞的表達變化，表明α2M是褶紋冠蚌基礎(chǔ)免疫系統(tǒng)的重要組成部分。韓慶等［31］研究了洞庭湖褶紋冠蚌不同組織SOD同工酶，表明不同組織SOD同工酶的表達存在差異，表現(xiàn)出明顯的組織特異性。過氧化物還原酶6具有谷胱甘肽過氧化物酶和磷脂酶A2的雙重活性，在機體抗氧化保護及肺表面活性物質(zhì)代謝中有重要作用，胡寶慶等［32］研究了褶紋冠蚌過氧化物還原酶6基因的克隆及原核表達，發(fā)現(xiàn)過氧化物還原酶6基因cDNA全長1 617 bp，編碼218個氨基酸。謝彥海等［33］進行了褶紋冠蚌熱休克蛋白（HSP70）cDNA的克隆及mRNA在不同組織的表達研究，表明HSP70cDNA全長為2664 bp，編碼638個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，在血液、外套膜、鰓、閉殼肌和肝胰腺中均能檢測到HSP70的基因表達，經(jīng)熱休克或病原菌刺激后，蚌體各組織中HSP70 mRNA的表達顯著增加。劉曉妮等［34］用RACE-PCR方法從褶紋冠蚌血液中克隆出硫氧還蛋白（Trx）的cDNA，指出褶紋冠蚌硫氧還蛋白（Trx）的cDNA全長1 169 bp，開放閱讀框長度318 bp，編碼105個氨基酸。預(yù)測空間結(jié)構(gòu)由5個β折疊和4個α-螺旋組成，α-螺旋包圍β折疊形成緊密的球形。

5　病害防治

寄生蚌螨是淡水貝類的主要寄生蟲，文春根等［35］進行了褶紋冠蚌寄生蚌螨的群落結(jié)構(gòu)研究，認為彎弓蚌螨是巢湖的絕對優(yōu)勢種，太湖的優(yōu)勢種是丫紋蚌螨，次優(yōu)勢種為彎弓蚌螨，鄱陽湖的優(yōu)勢種是Unionicola spp.，次優(yōu)勢種為彎弓蚌螨，3個湖泊寄生蚌螨相似程度較低。吳丹等［36-37］指出褶紋冠蚌經(jīng)嗜水氣單胞菌感染后，血清中各種抗氧化指標的變化幅度比肝胰腺大，利用柱狀黃桿菌對褶紋冠蚌進行注射感染，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活性及谷胱甘肽、過氧化氫、丙二醛的含量變化比肝胰腺的變化大。Xie等［38］研究了褶紋冠蚌血細胞的形態(tài)和吞噬能力，認為褶紋冠蚌血細胞分為顆粒細胞和無顆粒細胞兩類，隨著水溫的升高血細胞數(shù)量顯著增加，水溫對血細胞的吞噬能力具有重大影響。吳浩彬等［39］對鄱陽湖地區(qū)4種蚌螨在褶紋冠蚌內(nèi)的生態(tài)位寬度和生態(tài)位重疊進行研究表明，彎弓蚌螨種群數(shù)量最大，丫紋蚌螨種群數(shù)量最?。粡澒鲵脱炯y蚌螨在外鰓分布最多，簇刺蚌螨在內(nèi)鰓分布最多，敏捷蚌螨在斧足上分布較多；彎弓蚌螨時間生態(tài)位寬度值最大，敏捷蚌螨最小；簇刺蚌螨與彎弓蚌螨時間生態(tài)位重疊值最大；4種螨對資源的競爭可能集中在時間上，彎弓蚌螨較適宜在褶紋冠蚌內(nèi)生存?？咕氖巧矬w內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一類小分子陽離子抗菌活性肽，具有強力的抗菌作用，防御素是抗菌肽家族中最具代表性的亞家族，直接作用于病原體細胞膜，因此靶細胞不會對其產(chǎn)生抗性，不會產(chǎn)生抗藥性和毒副作用。王鶴等［40］分析褶紋冠蚌防御素基因全序列，三級結(jié)構(gòu)預(yù)測顯示為一個α螺旋和兩個β折疊片組成，形成典型的CSαβ結(jié)構(gòu)；嗜水氣單胞菌刺激后，各組織的防御素基因表達均有變化，血液組織在12 h達到最大表達量，外套膜和肝胰腺組織在12 h表達量有下降，鰓組織24 h達到最低。

6　研究建議

我國目前生產(chǎn)淡水無核珍珠和有核珍珠的育珠蚌主要為三角帆蚌，而褶紋冠蚌主要用于培育附殼造型珍珠。褶紋冠蚌具有生長速度快、環(huán)境適應(yīng)力強等優(yōu)點，為了充分利用褶紋冠蚌的育珠產(chǎn)能，豐富育珠品種，應(yīng)加強對褶紋冠蚌游離珍珠培育技術(shù)的研究，重點解決其珍珠表面多瑕疵和珠光暗淡等問題，提高褶紋冠蚌培育游離珍珠的優(yōu)質(zhì)珠率，以進一步提升國內(nèi)淡水珍珠養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)效益。

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資助項目：廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專項（A201108A02，A201208A04，A201308A04）

中圖分類號：S966.23

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2091（2016）07-0051-04

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.07.010

收稿日期：（2015-09-07）

作者簡介：王欽貴（1985-），男，主要研究方向為珍珠養(yǎng)殖與加工.E-mail:xsh5760288@126.com

Progress on the culture of pearl mussel Cristaria plicata

Wang Qingui1，Xie Shaohe1，2，Liang Feilong2，Lin Weicai1
（1.Guangdong Shaohe Pearl Co.Ltd，Shantou Guangdong 515822，China；
2.Pearl Research Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang Guangdong 524025，China）

Abstract：The biological characteristics，artificial breeding，pearl mussel culture，pearl production，genetic analysis，and disease control techniques of pearl mussel Cristaria plicata were presented，and research suggestions were proposed.

Key words：Cristaria plicata；biological characteristics；pearl production；genetic analysis