日糧脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦的生長(zhǎng)、體組成及脂肪酸組成的影響

孟晶，王中霞，汪海衛(wèi)（灌南縣海洋與漁業(yè)局，江蘇　灌南　222500）

日糧脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦的生長(zhǎng)、體組成及脂肪酸組成的影響

孟晶，王中霞，汪海衛(wèi)
（灌南縣海洋與漁業(yè)局，江蘇灌南222500）

摘要：研究了日糧中脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦的生長(zhǎng)、體組成及脂肪酸組成的影響。630尾初始重為（4.76±0.42）g克氏原螯蝦隨機(jī)分為六組（1～6組），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)35尾，用六個(gè)脂肪水平（1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%）飼料飼養(yǎng)60 d后測(cè)定蝦的生長(zhǎng)指標(biāo)、體組成和脂肪酸組成。結(jié)果表明，克氏原螯蝦的適宜日糧脂肪水平為7.89%～9.91%。

關(guān)鍵詞：克氏原螯蝦；生長(zhǎng)；體組成；脂肪酸

1　前言

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），俗稱克氏螯蝦、紅色沼澤螯蝦、小龍蝦等，在動(dòng)物分類學(xué)上隸屬甲殼綱，十足目，螯蝦科，原螯蝦屬。其肉中蛋白質(zhì)含量占鮮重的18%，脂肪0.3%，氨基酸總量占蛋白質(zhì)的77%，是一種高蛋白、低脂肪的健康食品，其外殼富含鈣、磷、鐵等營(yíng)養(yǎng)元素，可加工成飼料添加劑，也可作為甲殼素、幾丁質(zhì)和甲殼糖胺等工業(yè)原料，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、煙草、造紙、印染等領(lǐng)域［1］。由于克氏原螯蝦的養(yǎng)殖前景越來(lái)越好，人們對(duì)于其品質(zhì)和風(fēng)味的要求也越來(lái)越高，因此尋求一個(gè)具有高質(zhì)量的小龍蝦專用飼料對(duì)于小龍蝦的養(yǎng)殖發(fā)展具有重要的作用，也是一個(gè)迫切的研究課題。

2　材料與實(shí)驗(yàn)

2.1實(shí)驗(yàn)蝦

實(shí)驗(yàn)蝦購(gòu)自鹽城郊區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)，經(jīng)過(guò)5%食鹽水消毒后，馴養(yǎng)備用。馴化結(jié)束后，選擇健康無(wú)傷殘的630尾蝦苗，均重（4.76±0.42）g，隨機(jī)分配到18個(gè)水泥池中，每個(gè)水泥池35尾，然后將18個(gè)水泥池隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，分別投喂不同脂肪水平的實(shí)驗(yàn)飼料，飼養(yǎng)60 d。

2.2實(shí)驗(yàn)飼料

以優(yōu)質(zhì)進(jìn)口魚(yú)粉、豆粕、菜粕和花生粕為蛋白源，優(yōu)質(zhì)魚(yú)油為脂肪源，飼料原料均過(guò)60目篩，魚(yú)油的添加水平分別為0%、2%、4%、6%、8%和10%，飼料脂肪水平分別為1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%。配制成6組實(shí)驗(yàn)飼料，脂肪水平為1.82%、3.84%、5.79%、7.89%、9.91%和11.95%的飼料分別標(biāo)記為第1、2、3、4、5和6組，經(jīng)充分混合后加工成顆粒飼料，晾干后保存于冰箱中備用。飼料具體配方見(jiàn)表1、表2。

2.3飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)在18個(gè)1 m×1 m×0.8 m的水泥池中進(jìn)行，每個(gè)池底鋪設(shè)35支2.5 cm×8.0 cm的PV管作為蛻殼蝦棲息避難的場(chǎng)所。實(shí)驗(yàn)用水為曝氣后的自來(lái)水，水溫22～28℃，實(shí)驗(yàn)期間不間斷充氣，每天換水20%。每天投飼兩次，時(shí)間分別為7：00和18：00，投餌率為2%～4%，投喂之前吸除殘餌、糞便和蛻殼。

表1　實(shí)驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分含量

2.4生長(zhǎng)及形體指標(biāo)計(jì)算

飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，停止投喂48 h，對(duì)每尾蝦進(jìn)行稱重，解剖分離出肝胰腺和肌肉并稱重，分別計(jì)算增重率、特定生長(zhǎng)率、肝體指數(shù)和出肉率，計(jì)算公式如下：

增重率（%）=100×（Wf-Wi）/Wi

特定生長(zhǎng)率（%/d）=100×（lnWf-lnWi）/d

肝體指數(shù)（%）=100×（Wh/Wf）

出肉率（%）=100×（Wm/Wf）

式中：Wf和Wi分別為實(shí)驗(yàn)?zāi)┖蛯?shí)驗(yàn)初蝦體的質(zhì)量（g），Wh和Wm分別為實(shí)驗(yàn)?zāi)┪r肝胰腺和肌肉的質(zhì)量（g），d為飼養(yǎng)時(shí)間。

2.5相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

將肝胰腺和肌肉在-20℃冰箱中凍結(jié)后，真空冷凍干燥48 h，分別用凱氏定氮法和索氏抽提法測(cè)定肝胰腺和肌肉中的粗蛋白及粗脂肪含量。

表2　飼料脂肪酸組成

脂肪酸的測(cè)定：脂肪提取參照Folch方法。油脂的皂化及甲酯化方法參照Christie方法略有改進(jìn)。樣品皂化甲酯化后，直接上氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行分析。

檢索NIST質(zhì)譜圖庫(kù)，比較樣品質(zhì)譜圖與圖庫(kù)中標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，就可以確定樣品中脂肪酸種類，各脂肪酸相對(duì)含量的確定采用面積歸一化法計(jì)算。

2.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng) Excel 2007初步整理后，用SPSS18.0中的單因子方差分析（One-Way ANOVA）進(jìn)行Duncan法多重比較，顯著水平為（P＜0.05），極顯著水平為（P＜0.01）。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（X± SE）”形式表示。

3　結(jié)果與討論

3.1結(jié)果

3.1.1飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦生長(zhǎng)的影響不同脂肪水平飼喂的克氏原螯蝦基本生長(zhǎng)指數(shù)如表3所示。隨著飼料脂肪水平的增加，克氏原螯蝦的增重率和特定生長(zhǎng)率均先增加后降低；第5組蝦的增重率和特定生長(zhǎng)率最高，第4組蝦的增重率和特定生長(zhǎng)率與第5組蝦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異（P＞0.05）。以上結(jié)果說(shuō)明克氏原螯蝦飼料中的適宜脂肪含量在7.89%～9.91%之間。

用二次多項(xiàng)式的回歸模型，分析克氏原螯蝦的增重率與飼料脂肪水平之間的關(guān)系，得到的回歸方程為:Y=-0.7163X2+12.521X+197.76（圖1），當(dāng)X= 8.74%時(shí)增重率最高，因此克氏原螯蝦飼料中最適宜的脂肪水平為8.74%。肝體指數(shù)隨飼料脂肪水平的增加而升高，各脂肪組間出肉率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其中4和5組出肉率最高，第6組的出肉率最低。

3.1.2飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦體組成的影響克氏原螯蝦肝胰腺及肌肉中粗蛋白、粗脂肪含量的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。在蝦的肝胰腺中，粗蛋白的含量變化規(guī)律不一致，隨著飼料脂肪水平的增加而呈先降后增再降的趨勢(shì)；粗脂肪的含量為 65.52%～80.70%，并且隨脂肪水平增加呈增高的趨勢(shì)。對(duì)比兩個(gè)組織中粗蛋白和粗脂肪的含量數(shù)據(jù)可以看出，肝胰臟中含有的粗蛋白含量比肌肉中少，而其粗脂肪的含量卻比肌肉中的多。

表3　脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦生長(zhǎng)的影響

圖1　克氏原螯蝦的增重率與飼料脂肪水平之間的關(guān)系

3.1.3飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦脂肪酸組成的影響克氏原螯蝦肝胰腺及肌肉中脂肪酸組成的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4、表5?？耸显r的肝胰臟和肌肉中的脂肪酸種類主要以飽和脂肪酸（C16：0）、不飽和脂肪酸（C18：n-9）及高不飽和脂肪酸（C20：4n-3、C18：2n-6）為主，且各組分在總的脂肪酸中的比例有較大的不同。

表4　飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦體組成的影響

在肝胰腺中，第2組蝦的飽和脂肪酸（SFA）含量最低為34.93%，其他各組間SFA含量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；1組蝦的單不飽和脂肪酸（MUFA）含量最高，其他各組蝦的MUFA含量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；各組蝦的n-6系多不飽和脂肪酸（PUFA）含量和n-3/n-6系數(shù)無(wú)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；第1組蝦的n-3系PUFA含量、DHA/EPA系數(shù)和ARA/EPA系數(shù)最低，其他各組蝦的PUEA含量、DHA/EPA系數(shù)和ARA/EPA系數(shù)無(wú)明顯的差異（P＞0.05），DHA、EPA含量與其有相似的趨勢(shì)。在肌肉中，第1組蝦的飽和脂肪酸（SFA）含量最低，其他各組間SFA含量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；各組蝦n-3系PUFA含量先呈上升的趨勢(shì)，到第5組時(shí)趨于平穩(wěn)，相反n-6系PUFA含量先呈下降趨勢(shì)，到第5組時(shí)趨于平穩(wěn)，相應(yīng)的n-3/n-6系數(shù)和DHA的含量也表現(xiàn)出相似的變化趨勢(shì)，而對(duì)于DHA的含量變化則沒(méi)有規(guī)律，但5、6組的含量顯著高于其他組（P＜0.05）；各組蝦的EPA含量和DHA/EPA系數(shù)無(wú)顯著的變化（P＞0.05）；第1組蝦的ARA/EPA系數(shù)最高，其他各組蝦的ARA/EPA系數(shù)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3.2討論

3.2.1飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦生長(zhǎng)的影響本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦的生長(zhǎng)有極顯著的關(guān)系。隨著脂肪水平的增加，克氏原螯蝦的增重率、特定生長(zhǎng)率和出肉率也隨之先增高后降低；肝體指數(shù)則隨著飼料脂肪水平的增加而升高，這是由于飼喂過(guò)高的脂肪水平飼料，使脂肪沉積在肝臟中導(dǎo)致的。實(shí)驗(yàn)研究表明，脂肪水平在7.89%～9.91%范圍內(nèi)適合克氏原螯蝦的生長(zhǎng)，飼料中脂肪水平過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響克氏原螯蝦的生長(zhǎng)。具有類似結(jié)果的報(bào)道有：吳銳全等［3］的研究表明：羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenberii）飼料中脂肪含量為3.12%～11.11%時(shí)，對(duì)其生長(zhǎng)無(wú)顯著影響，并推薦羅氏沼蝦飼料中適宜的脂肪含量為5.11%～9.10%；虞冰如等［2］也認(rèn)為日本沼蝦飼料的適宜脂肪含量為6%～12%，脂肪水平繼續(xù)增高時(shí)，蝦的生長(zhǎng)率下降；蝦蟹類對(duì)脂肪需要量受到多種因素影響，但一般認(rèn)為需求量范圍為3%～10%，最適的添加量為5%～9%［4］。河蟹飼料中脂肪最高含量為8.7%時(shí)，河蟹生長(zhǎng)好，且不存在饑餓殘殺現(xiàn)象，成活率高［5］；Sheen和wu［6］對(duì)鋸緣青蟹脂類營(yíng)養(yǎng)研究結(jié)果表明，飼料中脂肪含量范圍從5.3%～13.8%時(shí)可滿足鋸緣青蟹的生長(zhǎng)。

3.2.2飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦體組成的影響

本實(shí)驗(yàn)表明，在肝胰腺和肌肉中，粗脂肪的含量都隨著脂肪水平的增加而升高，但是升高到一定水平，升高的梯度就變得比較穩(wěn)定，說(shuō)明飼料可消化能的增加會(huì)促使脂肪在肌肉的沉積和肝臟脂肪的生成增加，當(dāng)肝臟脂肪積累到一定程度時(shí)，有可能誘發(fā)脂肪肝，從而影響克氏原螯蝦的生長(zhǎng)。韓光明等［28］研究飼料脂肪水平對(duì)吉富羅非魚(yú)組織中脂肪含量結(jié)果表明，吉富羅非魚(yú)肌肉和肝臟的脂肪含量均隨飼料脂肪水平增加而升高，肌肉和肝臟組織中脂肪含量與飼料脂肪水平有顯著相關(guān)的影響。王朝明等［37］對(duì)于飼料脂肪水平對(duì)胭脂魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)、體組成和抗氧化能力的影響研究的結(jié)果也表明，隨著飼料脂肪水平增加，胭脂魚(yú)肌肉和肝胰臟的脂肪含量升高后趨于穩(wěn)定。這些研究結(jié)果都支持了該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)在飼料脂肪水平為9.91%時(shí)，蝦肌肉中粗脂肪含量稍微有點(diǎn)降低，這可能是在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一些外在的因素影響導(dǎo)致產(chǎn)生的誤差，但是對(duì)于肌肉中粗脂肪含量的整體變化趨勢(shì)沒(méi)有太大的影響。

表5　飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦肝胰腺脂肪酸組成影響

表6　飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成影響

在肝胰腺中，粗蛋白的含量隨著脂肪水平的增加呈先下降后升高再降低的趨勢(shì)，這說(shuō)明在飼料脂肪水平為7.89%～9.91%時(shí)，適合飼料中蛋白質(zhì)最大限度的參與機(jī)體的合成代謝，從而使肝胰臟中的蛋白質(zhì)含量增高。而在肌肉中粗蛋白含量隨脂肪水平的增加呈先升高后下降的趨勢(shì)，但是變化趨勢(shì)不是很明顯，這是因?yàn)槿占Z脂肪水平在一定范圍內(nèi)增加時(shí)，脂肪作為能量釋放供給魚(yú)體活動(dòng)需要，而日糧中蛋白質(zhì)則最大限度地參與機(jī)體的合成代謝，增加機(jī)體蛋白質(zhì)含量，當(dāng)脂肪水平過(guò)高時(shí)，蛋白質(zhì)的含量就會(huì)降低。鄭珂珂等［7］對(duì)飼料脂肪水平對(duì)瓦氏黃顙魚(yú)生長(zhǎng)及脂蛋白脂酶基因表達(dá)的影響的研究結(jié)果表明，瓦氏黃顙魚(yú)魚(yú)體粗蛋白隨著飼料脂肪水平的增加出現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)；國(guó)外學(xué)者在虹鱒魚(yú)（Oncorhynchus mikiss）、紅姑魚(yú)（Sciaenops ocellatus）、大西洋鮭（Salmon salar）等研究表明飼料中脂肪含量增加導(dǎo)致試驗(yàn)魚(yú)體蛋白質(zhì)下降。這些研究結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本相似。

3.2.3飼料脂肪水平對(duì)克氏原螯蝦脂肪酸組成的影響由對(duì)克氏原螯蝦的肝胰腺和肌肉中脂肪酸組成測(cè)定結(jié)果及飼料中脂肪酸組成測(cè)定結(jié)果（表1）可知，肝胰臟和肌肉中主要的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的種類與飼料中脂肪酸的種類相似，只是肝胰臟中少了C16：9和C18：n-3兩種脂肪酸，肌肉中少了C10：0脂肪酸。這與劉玉芳［8］對(duì)草魚(yú)、鯉魚(yú)、鰱、鳙、團(tuán)頭魴五種淡水魚(yú)脂肪酸組成研究分析所得到的結(jié)果相似。在肌肉和肝胰臟中，n-6PUFA含量隨飼料脂肪水平的增加而顯著下降，n-3PUFA隨飼料脂肪水平的增加而顯著增高。因?yàn)轸~(yú)油中含有大量的n-3PUFA，導(dǎo)致魚(yú)體肌肉和肝臟中的n-3 PUFA比例增加［9］；n-3/n-6系數(shù)隨著脂肪水平的增加而逐步增高，DHA/EPA和ARA/EPA系數(shù)除了第一組高以外，其他各組間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。這些變化趨勢(shì)與飼料中相應(yīng)的變化趨勢(shì)相似，與之前報(bào)道的魚(yú)體組織中脂肪酸組成受飼料中脂肪酸組成的影響很大［10-11］，組織中脂肪酸比例與飼料中脂肪酸比例呈線性關(guān)系［12-13］結(jié)果相似?？耸显r的肝胰臟和肌肉中的脂肪酸組成主要以飽和脂肪酸（C16：0）、不飽和脂肪酸（C18：n-9）及高度不飽和脂肪酸（C20：4n-3、C18：2n-6）為主要的脂肪酸種類，這與郭占林等［14］、王恒等［15］分別對(duì)紅螯光殼螯蝦幼蝦和羅氏沼蝦研究得到的肌肉中脂肪酸組成相似。水產(chǎn)飼料中n-3系脂肪酸有其特殊價(jià)值，魚(yú)油中的n-3脂肪酸（EPA，DHA）是魚(yú)蝦的促生長(zhǎng)劑及誘食劑，DHA是魚(yú)蝦幼體正常發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)因子［16］。而在肝胰臟和肌肉的脂肪酸組成中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼料中脂肪水平達(dá)到7.89%～9.91%時(shí)，EPA、DHA開(kāi)始呈下降趨勢(shì)。綜上所述，克氏原螯蝦飼料中適宜的脂肪水平為7.89%～9.91%。

4　結(jié)論

研究表明，脂肪水平在7.89%～9.91%范圍內(nèi)適合克氏原螯蝦的生長(zhǎng)，飼料中脂肪水平過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響克氏原螯蝦的生長(zhǎng)，其中最適宜的脂肪水平為8.74%。

隨著飼料脂肪水平的增高，克氏原螯蝦肝胰臟和肌肉中粗脂肪的含量隨之增高，在肝胰腺中，粗蛋白的含量隨著脂肪水平的增加呈先下降后增高再下降的趨勢(shì)，而在肌肉中粗蛋白含量隨脂肪水平的增加呈先升高后下降的趨勢(shì)，這說(shuō)明在飼料脂肪水平為7.89%～9.91%時(shí)，適合飼料中蛋白質(zhì)最大限度的參與機(jī)體的合成代謝。

肝胰臟及肌肉中的脂肪酸組成及主要的脂肪酸種類與飼料中脂肪酸組成和主要種類相似。

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中圖分類號(hào)：S962.3

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2091（2016）07-0019-08

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.07.005

收稿日期：（2016-01-21）

作者簡(jiǎn)介：孟晶（1989-），女，從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究工作.E-mai：352555181@qq.com

The effects of dietary lipid levels on the growth，body composition and fatty acid composition of Procambarus clarkii

Meng Jing，Wang Zhongxia，Wang Haiwei
（Guannan Marine and fisheries，The postcode of Guannan County，Lianyungang 222500，China）

Abstract：An experiment was conducted to investigate the effects of dietary lipid levels on growth，body composition and fatty acid composition of Procambarus clarkii.630 Procambarus clakii［average（4.76±0.42）g in initial body weight］were randomly divided into 6 groups（1～6 group）with 3 replicates per group and 35 clarkii per replicate in experiment.Offered the test diets with different lipid levels respectively（1.82%，3.84%，5.79%，7.89%，9.91%and 11.95%）and measured the growth performance，body composition and the fatty acid composition after keeping 60 days.Based on these observations，the optimal dietary lipid level could be devised to 7.89% ～9.91%for Procambarus clarkii.

Key words：Procambarus clarkii；growth；body composition；fatty acid