膠體磨法包合紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油的工藝研究＊

劉莉莉，張艷軍，劉 芳，李月婧，孟 瑾，吳 云，王振中＊＊

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 南京 210000；2.中藥制藥過(guò)程新技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 連云港 222001；3.中藥提取精制新技術(shù)重點(diǎn)研究室 連云港 222001；4.江蘇康緣陽(yáng)光藥業(yè)有限公司 南京 210000）

膠體磨法包合紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油的工藝研究＊

劉莉莉1，2，3，張艷軍1，2，3，劉 芳4，李月婧4，孟 瑾1，2，3，吳 云1，2，3，王振中1，2，3＊＊

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 南京 210000；2.中藥制藥過(guò)程新技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 連云港 222001；3.中藥提取精制新技術(shù)重點(diǎn)研究室 連云港 222001；4.江蘇康緣陽(yáng)光藥業(yè)有限公司 南京 210000）

目的：優(yōu)選膠體磨法制備紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油-β-CD包合物的最佳工藝。方法：以包合物得率和揮發(fā)油包合率為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)結(jié)合Box-Behnken 響應(yīng)面法，考察β-CD與水的比例、揮發(fā)油與β-CD的投料比和包合時(shí)間對(duì)包合工藝的影響；通過(guò)薄層色譜法初步驗(yàn)證紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油包合物是否形成。結(jié)果：確定紫蘇葉和荊芥揮發(fā)油包合的最佳工藝條件：紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的比例為1:9，β-CD與水的比例為1:3，包合時(shí)間23min。結(jié)論：膠體磨法制備包合紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油的工藝合理可行。

效應(yīng)面法 揮發(fā)油包合率 膠體磨 Box-Behnken設(shè)計(jì) 紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油

紫蘇葉為唇形科紫蘇屬紫蘇Perilla frutescens（L.）Britt.的干燥葉，為臨床常用中藥材，其中的揮發(fā)油具有抑菌、抗氧化性、抗過(guò)敏、鎮(zhèn)咳祛痰等功效[1]。荊芥為唇形科植物裂葉荊芥Schizonepeta tenuifolia Briq.的干燥地上部分，其總揮發(fā)油具有緩解支氣管平滑肌痙攣、抗過(guò)敏、鎮(zhèn)靜、祛痰、抗炎等作用[2]。由于揮發(fā)油具有易揮發(fā)、水溶性差和對(duì)胃腸道黏膜的刺激特性，為了降低其揮發(fā)性、增大水溶性、提高穩(wěn)定性，多將其制備成β-CD包合物。有關(guān)紫蘇葉的包合工藝，文獻(xiàn)報(bào)道較多，但紫蘇葉荊芥混合揮發(fā)油的包合工藝研究未見(jiàn)報(bào)道。膠體磨法包合揮發(fā)油具有包合溫度低、時(shí)間短、包合率高、產(chǎn)量高、適合工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)[3]。故本文采用膠體磨法，以包合率和包合物得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)結(jié)合 Box-Behnken響應(yīng)面法，對(duì)影響包合的主要因素進(jìn)行考察，優(yōu)選得到揮發(fā)油包合率高且包合物得率高的最佳包合工藝。

1 儀器與試藥

AWS（SA）型電子稱（上海英展機(jī)電企業(yè)有限公司）；TQ直筒式多能提取罐（溫州市森博輕工機(jī)械有限公司）；D2015W型攪拌器（上海梅穎浦儀器儀表有限公司）；CT-C-I 型熱風(fēng)循環(huán)烘箱（江陰市蘇新干燥設(shè)備有限公司）；PTHW 型調(diào)溫電熱套（上海耀裕儀器設(shè)備有限公司）；UV-2700型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本島津公司）；J4W-L60 型多功能膠體磨（溫州昊星機(jī)械設(shè)備制造有限公司）；BX-53型數(shù)碼光學(xué)顯微鏡（日本奧林巴斯公司）；β-環(huán)糊精（曲阜天利藥用輔料有限公司，批號(hào)：F1501021），其余試劑均為分析純。

本研究中的紫蘇葉樣品產(chǎn)地為安徽，經(jīng)江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司吳舟主管藥師鑒定為唇形科植物紫蘇的干燥葉；荊芥的產(chǎn)地為河北，經(jīng)江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司吳舟主管藥師鑒定為唇形科植物荊芥的干燥地上部分。

2 方法與結(jié)果

2.1 紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油的制備

取紫蘇葉100 kg，荊芥100 kg投入多功能提取罐中，加入10倍量水，蒸汽加熱，回流提取4 h，得紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油1 200 mL，置于4℃中貯存，備用。

2.2 包合物的制備方法和包合工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的測(cè)定

按試驗(yàn)設(shè)計(jì)，取實(shí)驗(yàn)量純化水和β-CD，于1 000 rpm下攪拌10 min使其混勻，在攪拌下，緩慢滴加紫蘇葉和荊芥混合油，繼續(xù)攪拌5 min使其混勻后倒入膠體磨（功率：11 kW，乳化細(xì)度2-50 μm，）中進(jìn)行擠壓包合一定時(shí)間后，放出包合物，40℃常壓干燥16 h，粉碎，稱重，得紫蘇葉和荊芥混合油-β-CD包合物。按下式計(jì)算包合物得率（%）。

取紫蘇葉和荊芥混合油-β-CD包合物，用適量無(wú)水乙醇淋洗包合物表面未包合揮發(fā)油，于常壓下干燥，稱重，得淋洗后包合物。取100 g淋洗后包合物置于圓底燒瓶中，加適量純化水，連接揮發(fā)油提取器，參照《中國(guó)藥典》2015年版一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法進(jìn)行揮發(fā)油測(cè)定。精密移取揮發(fā)油3 mL至揮發(fā)油提取裝置中，加300 mL的水提取5 h，平行試驗(yàn)3次，讀取揮發(fā)油體積，計(jì)算揮發(fā)油空白回收率，結(jié)果見(jiàn)表1[4]。

2.3 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果

2.3.1β-CD與水的比例對(duì)包合工藝的影響

按“2.2”項(xiàng)下包合物的制備方法，固定紫蘇葉和荊芥混合油與β-CD的比例為1:8，包合時(shí)間為30 min，考察β-CD與水的比例對(duì)包合物得率和包合率的影響。β-CD:水試驗(yàn)水平設(shè)有1:2、1:3、1:4、1:5和1:6。投料量和試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，隨著β-CD與水的比例的減小，包合物得率和包合率均呈先增后減的趨勢(shì)，但包合物得率的變化不明顯。當(dāng)β-CD與水的比例為1:3時(shí)，包合物得率和包合率均高于其它4個(gè)水平。因此，選擇β-CD與水的比例在1:2～1:4之間進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化以確定最優(yōu)的β-CD與水的比例。

2.3.2 紫蘇葉和荊芥混合油和β-CD比例對(duì)包合工藝的影響

按“2.2”項(xiàng)下包合物的制備方法，固定β-CD與水的比例為1:3，包合時(shí)間為30 min，考察β-CD與水的比例對(duì)包合物得率和包合率的影響。紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油：β-CD試驗(yàn)水平設(shè)有1:4、1:6、1:8、1:10和1:12[5]。投料量和試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的投料比在1:4-1:8之間時(shí)，隨著β-CD投料量的增加，揮發(fā)油包合率增加；紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的投料比為1:10時(shí)，揮發(fā)油包合率和包合物得率趨于平穩(wěn)。因此，選擇紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的投料比為1:6～1:10之間進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化，以確定紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的最優(yōu)比例。

2.3.3 包合時(shí)間對(duì)揮發(fā)油包合率的影響

按“2.2”項(xiàng)下包合物的制備方法，固定β-CD與水的比例為1:3，紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的比例為1:8，考察包合時(shí)間對(duì)包合物得率和包合率的影響。包合時(shí)間的試驗(yàn)水平設(shè)有10、20、30、40、和50 min。投料量和試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，隨著包合時(shí)間的增加，包合物得率和包合率均呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)；包合時(shí)間為30 min時(shí)，包合物得率和包合率均高于其它試驗(yàn)水平。因此，選擇包合時(shí)間為20-40 min之間進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化以確定最優(yōu)的包合時(shí)間。

表1 空白回收率結(jié)果

表2 β-CD與水的比例對(duì)包合工藝的影響（n=3）

表3 油/β-CD的投料比對(duì)包合工藝的影響（n=3）

表4 包合時(shí)間對(duì)包合工藝的影響（n=3）

2.4 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法（RSD）對(duì)工藝參數(shù)的優(yōu)化

2.4.1 Plackett-Burman設(shè)計(jì)篩選主因素

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，利用Design-Expert 8.0.6軟件中Box-Behnken設(shè)計(jì)對(duì)影響最大的3個(gè)因素3個(gè)水平（-1、1），即油和β-CD比例（1：6、1：8、1：10）、β-CD與水的比例（1：2、1：3、1：4）、包合時(shí)間（20、30、40 min）。Box-Behnken設(shè)計(jì)生成的17次試驗(yàn)（5個(gè)零點(diǎn)），試驗(yàn)結(jié)果以包合物得率和包合率為考察指標(biāo)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表5，各因素對(duì)考察指標(biāo)影響的方差分析見(jiàn)表6[6-8]。

根據(jù)表中的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，利用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)表5的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行二次多元回歸擬合，得包合物得率（R1）對(duì)β-CD:油/ g·mL-1（A）、水:β-CD/ mL·g-1（B）、包合時(shí)間（C）的二次多項(xiàng)回歸模型方程R1=+94.22+6.57A+0.32B-2.02C+2.20AB+1.42AC-0.13BC-9.75A2-3.26B2-1.17C2，相關(guān)系數(shù)R2=0.956 1；揮發(fā)油包合率（R2）對(duì)β-CD:油/ g·mL-1（A）、水：β-CD: / mL·g-1（B）、包合時(shí)間（C）的二次多項(xiàng)回歸模型方程R2=84.44+16.90A+0.47B-2.62C-0.62 AB-4.90AC+0.56BC-22.27A2-4.67B2-3.82C2，相關(guān)系數(shù)R2=0.991 5；這兩個(gè)模型的R2值分別為0.956 1、0.991 5，這說(shuō)明通過(guò)二次回歸得到包合物得率和揮發(fā)油包合率與試驗(yàn)擬合較好。同時(shí)，響應(yīng)面二次回歸方程方差分析結(jié)果見(jiàn)表6，結(jié)果顯示包合物得率（R1）和揮發(fā)油包合率（R2）建立的回歸整體模型均達(dá)到顯著（P＜0.05），失擬項(xiàng)不顯著（P＞0.05），因此R1、R2模型成立。

2.4.2 影響因素的響應(yīng)面曲線圖

2.4.2.1 影響包合物得率的主要因素分析

表6的結(jié)果顯示，包合物得率（R1）回歸方程的方差分析表明，A、A2項(xiàng)達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），C、B2項(xiàng)達(dá)顯著水平（P＜0.05）。同時(shí)由F值大小可以推斷，在所選擇的試驗(yàn)范圍內(nèi)，3個(gè)因素對(duì)包合率影響的排序?yàn)棣?CD:油比例（A）＞包合時(shí)間（B）＞水：β-CD比例（C）。

利用 Design-Expert 8.0.6 軟件，根據(jù)擬合模型繪制不同影響因素對(duì)包合物得率的三曲線圖，了解各因素的交互作用對(duì)包合物得率的影響。見(jiàn)圖1、圖2、圖3。

圖1顯示，包合物得率隨水:β-CD的比例增加先增加后緩慢減少，隨包合時(shí)間的增加無(wú)變化。圖2顯示，包合物得率隨β-CD:油的比例增加先增加后緩慢減少，隨包合時(shí)間的增加呈降低趨勢(shì)。圖3顯示，包合物得率隨水:β-CD的比例增加先增加后減少，隨β-CD:油的比例增加先增加后緩慢減少。

2.4.2.2 影響揮發(fā)油包合率的主要因素分析

表6的結(jié)果顯示，包合物得率（R2）回歸方程的方差分析表明，A、AC、B2、A2項(xiàng)達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），C、C2項(xiàng)達(dá)顯著水平（P＜0.05）。同時(shí)由F值大小可以推斷，在所選擇的試驗(yàn)范圍內(nèi)，3個(gè)因素對(duì)包合率影響的排序?yàn)棣?CD:油比例（A）＞包合時(shí)間（B）＞水與β-CD比例（C）。

表5 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表6 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)方差分析表

圖1 包合時(shí)間和水:β-CD的比例對(duì)包合物得率的影響

圖2 包合時(shí)間和β-CD:油的比例對(duì)包合物得率的影響

圖3 水:β-CD比例和β-CD:油比例對(duì)包合物得率的影響

利用Design-Expert 8.0.6軟件，根據(jù)擬合模型繪制不同影響因素對(duì)揮發(fā)油包合率的三維曲線圖，了解各因素的交互作用對(duì)揮發(fā)油包合率的影響。見(jiàn)圖4、圖5、圖6。

圖4顯示，揮發(fā)油包合率隨水:β-CD的比例增加先增加后緩慢減少，隨包合時(shí)間的增加先增加后緩慢減少。圖5顯示，揮發(fā)油包合率隨β-CD:油的比例增加先快速增加后緩慢減少，隨包合時(shí)間的增加趨于平穩(wěn)。圖6顯示，揮發(fā)油包合率隨β-CD:油的比例增加先迅速增加后緩慢減少，隨水:β-CD的比例增加先緩慢增加后趨于平穩(wěn)。

2.5 包合物鑒別

2.5.1 顯微鑒別

將紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油包合物、油與β-CD的混合物和β-CD分別置于顯微鏡下觀察，結(jié)果見(jiàn)圖7。由圖7可知，β-CD為板狀晶體，而包合物為無(wú)定形粉末，包合物已經(jīng)形成。由于晶格排列發(fā)生變化，故在顯微鏡下含藥包合物與β-CD形狀不同。

2.5.2 薄層色譜鑒別

2.5.2.1 荊芥揮發(fā)油薄層鑒別

采用薄層色譜法（TLC）對(duì)荊芥揮發(fā)油包合前后的化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。分別制備包合物的乙醇溶液樣品、β-CD的飽和乙醇溶液樣品、未洗滌的揮發(fā)油包合物以及荊芥揮發(fā)油的乙醇溶液對(duì)照品，吸取上述溶液各2 μL于硅膠G板上點(diǎn)樣，以氯仿-乙酸乙酯（9∶1）展開(kāi)后，將薄層板放在通風(fēng)處晾干，用香草醛-濃硫酸液顯色，結(jié)果荊芥揮發(fā)油在β-CD包合前后化學(xué)性質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化，β-CD對(duì)包合物中揮發(fā)油的測(cè)定無(wú)干擾[9]。見(jiàn)圖8。

2.5.2.2 紫蘇葉揮發(fā)油薄層鑒別

采用薄層色譜法（TLC）對(duì)荊芥揮發(fā)油包合前后的化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。分別制備包合物的乙醇溶液樣品、β-CD的飽和乙醇溶液樣品、未洗滌的揮發(fā)油包合物以及紫蘇葉揮發(fā)油的乙醇溶液對(duì)照品，吸取上述溶液各2 μL于硅膠G板上點(diǎn)樣，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）展開(kāi)后，將薄層板放在通風(fēng)處晾干，用5%香草醛-濃硫酸液顯色，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果荊芥揮發(fā)油在β-CD包合前后化學(xué)性質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化，β-CD對(duì)包合物中揮發(fā)油的測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖8。

2.5.3 紫外掃描法鑒別

分別將紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油、β-CD和油的混合物、β-CD、包合物用無(wú)水乙醇溶解，過(guò)濾，取濾液在200-500 nm處進(jìn)行紫外掃描，掃描結(jié)果見(jiàn)圖12。由圖9可知，揮發(fā)油、β-CD和油的混合物有紫外吸收，最大吸收波長(zhǎng)為250 nm，而β-CD、包合物無(wú)紫外吸收，說(shuō)明揮發(fā)油已經(jīng)被β-CD包合。

2.6 驗(yàn)證試驗(yàn)

優(yōu)選的紫蘇葉荊芥混合揮發(fā)油包合工藝應(yīng)在較高的包合率的同時(shí)，還應(yīng)有較高的包合物得率，同時(shí)還要考慮能耗等因素。對(duì)于多參數(shù)的優(yōu)化過(guò)程應(yīng)在相應(yīng)的影響因素等高線圖（圖1-圖6底部平面圖）重合區(qū)域進(jìn)行考察。在上述響應(yīng)面模型分析的基礎(chǔ)上，利用 Design-Expert 8.0.5b 軟件對(duì)Y1和Y2兩個(gè)二次回歸方程求解，得最佳工藝條件為：水與β-CD的比例為3.17，β-CD與紫蘇葉荊芥混合揮發(fā)油的比例為8.61，包合時(shí)間為23.15 min，包合物得率可達(dá)95.94%，包合率達(dá)88.41%。

圖4 包合時(shí)間和水:β-CD的比例對(duì)揮發(fā)油包合率的影響

圖5 包合時(shí)間和β-CD:油比例對(duì)揮發(fā)油包合率的影響

圖6 水:β-CD比例和β-CD:油比例對(duì)揮發(fā)油包合率的影響

圖7 顯微影像圖（10×10）

圖8 薄層包譜圖

圖9 紫外掃描圖

為檢驗(yàn)預(yù)測(cè)的結(jié)果，需對(duì)預(yù)測(cè)的最佳工藝條件進(jìn)行驗(yàn)證。為方便實(shí)際操作，將驗(yàn)證條件修正為：紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的比例為1:9， β-CD與水的比例為1:3，包合時(shí)間為23 min。

按此工藝條件進(jìn)行紫蘇葉荊芥混合揮發(fā)油包合，平行操作3次，得到包合物得率依次為91.57%、91.23%、90.89%（均值為91.23%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.30%），包合率依次為86.78%、87.07%和83.51%（均值為85.79%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.88%），二者的實(shí)驗(yàn)值與預(yù)測(cè)值比較，偏差為4.91%和2.97% [偏差[11]=（實(shí)測(cè)值-預(yù)測(cè)值）/預(yù)測(cè)值×100%]。試驗(yàn)結(jié)果表明，預(yù)測(cè)值與實(shí)際值的偏差較小，試驗(yàn)優(yōu)化紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油包合工藝的參數(shù)準(zhǔn)確可靠，具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)通過(guò)單因素分別考察了β-CD:油的比例、水與β-CD的比例、包合時(shí)間對(duì)包合物得率和揮發(fā)油包合率的影響，確定了影響包合物得率和揮發(fā)油包合率的主要因素，然后利用Design-Expert軟件的Box-Behnken設(shè)計(jì)法設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，建立了數(shù)學(xué)模型并通過(guò)方差分析，得出β-CD :油的比例、水與β-CD的比例及包合時(shí)間的交互作用都較強(qiáng)，同時(shí)表明影響包合物得率和揮發(fā)油包合率的因素主次關(guān)系為β-CD:油比例（A）＞包合時(shí)間（B）＞水與β-CD比例（C）。

響應(yīng)面法是采用多元非線性擬合、二項(xiàng)式回歸分析，囊括試驗(yàn)設(shè)計(jì)、建模、檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷暮线m性、尋求最佳組合條件等眾多試驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)技術(shù)，實(shí)驗(yàn)精確度優(yōu)于正交設(shè)計(jì)和均勻設(shè)計(jì)。本文在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選用 Box-Behnken 響應(yīng)面法優(yōu)化了紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油包合工藝，并得到了實(shí)際最佳工藝為：紫蘇葉和荊芥混合揮發(fā)油與β-CD的比例為1:9，β-CD與水的比例為1:3，包合時(shí)間23 min；在該條件下實(shí)際包合物得率為95.9%，揮發(fā)油包合率為88.4%，為工業(yè)化生產(chǎn)揮發(fā)油包合工藝提供了理論依據(jù)。

包合物制備完成后需對(duì)其進(jìn)行鑒別研究，而薄層色譜法常用于鑒別包合物的形成，以有無(wú)薄層斑點(diǎn)，斑點(diǎn)數(shù)和Rf值與原揮發(fā)油是否相同來(lái)驗(yàn)證包合物是否形成。本文通過(guò)薄層色譜法得到紫蘇荊芥包合物中提取的揮發(fā)油和原揮發(fā)油具有相同的色譜行為，而紫蘇荊芥油包合物（洗滌）無(wú)斑點(diǎn)，初步的驗(yàn)證了紫蘇荊芥包合物已形成。

膠體磨法制備揮發(fā)油包合物一方面具有產(chǎn)品得率高、包合時(shí)間短，另一方面包合過(guò)程無(wú)需加熱、占用空間小、設(shè)備投入少，適合企業(yè)工業(yè)化大量生產(chǎn)。此外，包合時(shí)揮發(fā)油分散劑對(duì)包合工藝有一定的影響，揮發(fā)油直接包合效果不好，需用一些有機(jī)溶劑來(lái)稀釋。文獻(xiàn)[12]報(bào)道，用來(lái)稀釋揮發(fā)油的分散劑一般選用乙醇；分散劑種類和量的不同對(duì)紫蘇荊芥油包合工藝有無(wú)影響以及影響程度如何有待進(jìn)一步研究。

1 劉娟,雷焱霖,唐友紅,等.紫蘇的化學(xué)成分與生物活性研究進(jìn)展.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2010, 21(7): 1768-1769.

2 李軍暉,曾南,沈映君.荊芥的藥理作用.四川生理科學(xué)雜志. 2004, 26(3): 133-136.

3 熊耀坤,張國(guó)松,魏惠珍,等.膠體磨制備冰片-β-環(huán)糊精包合物工藝研究.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2009, 21(1): 30-33.

4 張文超,陳玉漫,繆建文,等. 荊芥揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備工藝. 南通大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013, 12(2): 21-28.

5 王霏娜,俞菁,趙春霞. 用響應(yīng)面法優(yōu)化β-環(huán)糊精包合白術(shù)揮發(fā)油工藝. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào). 2008, 42(12): 2160-2165.

6 王博,任曉文,李洪起. 星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化銀杏酮酯包合物的制備工藝. 中草藥, 2011， 42(2): 262-265.

7 楊松濤,蘇丹,宋永貴.星點(diǎn)設(shè)計(jì)－效應(yīng)面法優(yōu)化香附揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合物制備工藝. 江西中醫(yī)藥, 2013, 355(44): 68-69.

8 劉玲,李小芳,文怡靜,等.星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)選穿心蓮提取物-β-環(huán)糊精包合物制備工藝.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2014, 20(2): 22-25.

9 王存琴,高慧琴,彭曉霞,等. 荊芥揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合技術(shù)的研究.中南藥學(xué). 2007, 5(2): 118-121.

10 肖忘重,唐路梅,夏新華,等.紫蘇、姜黃混合揮發(fā)油提取與包合工藝研究.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 33(7): 45-48.

11 王博,任曉文,李洪起,等.星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化銀杏酮酯包合物的制備工藝.中草藥, 2011, 42(2): 262-265.

12 郝晶晶,李海亮,龔慕辛.揮發(fā)油環(huán)糊精包合技術(shù)的研究進(jìn)展及存在問(wèn)題分析. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2013, 19(2): 352-356.

Optimizing the Inclusion Process of the Mixture Oil of Basil Leaves and Nepeta Using Colloid Mill Method

Liu Lili1,2,3, Zhang Yanjun1,2,3, Liu Fang4, Li Yuejing4, Meng Jin1,2,3, Wu Yun1,2,3, Wang Zhenzhong1,2,3
(1. Pharmacy College, Nanjing University of Chinese Medicine , Nanjing 210000, China;
2. State Key Laboratory of New-Tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Lianyungang 222001, China;
3. The Key Laboratory for the New Technique Research of TCM Extraction and Purification, Lianyungang 222001, China;
4. Jiangsu Kanion Sunshine Pharmaceutical Co. Ltd., Nanjing 210000, China)

This study aimed to optimize the inclusion process of basil leaves and nepeta by the response surface method to prepare the β-cyclodextrin (β-CD) complexes. Volatile oil-β-CD recovery ratio and volatile oil inclusion rate were involved in the evaluation indexes. The single factor test and Box-Behnken response surface method were applied to test the proportion of β-CD and pure water and materials input ratio of the volatile oil and β-CD, and observe the influence of the inclusion time on the inclusion process of volatile oil. Whether the mixture volatile oil inclusion of basil leaves and nepeta was synthesized needed to be proved primarily through thin layer chromatography method. As a result, the optimum essential oils inclusion process was figured out. The mixture ratio of the volatile oil of basil leaves and nepeta and β-CD was 1:9 (mL:g), and the ratio of β-CD and pure water was 1:3 (g:mL), and the inclusion time was 23 min. In conclusion, it was feasible to prepare mixture volatile oil inclusion complexes with basil leaves and negeta by the colloid mill method.

Response surface method, inclusion ratio of essential oils, colloid mill, Box-Behnken design, the mixture oil of basil leaves and nepeta

10.11842/wst.2016.04.013

R283

A

（責(zé)任編輯：馬雅靜，責(zé)任譯審：朱黎婷）

2015-11-24

修回日期：2016-02-15

＊ 科學(xué)技術(shù)部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)（2013ZX09402203）：現(xiàn)代中藥創(chuàng)新集群與數(shù)字制藥技術(shù)平臺(tái)，負(fù)責(zé)人：王振中。

＊＊ 通訊作者：王振中，博士，碩士生導(dǎo)師，主要研究方向：中藥新藥的研究與開(kāi)發(fā)。