四君子湯多糖分離純化對IEC-6細(xì)胞遷移藥效活性的影響＊

鄧 嬌，李茹柳，蔡佳仲，涂小華，陳蔚文

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)脾胃研究所 廣州 510006）

四君子湯多糖分離純化對IEC-6細(xì)胞遷移藥效活性的影響＊

鄧 嬌，李茹柳＊＊，蔡佳仲，涂小華，陳蔚文

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)脾胃研究所 廣州 510006）

目的：本研究對四君子湯多糖進(jìn)行提取和分離純化，觀察不同多糖樣品對小腸上皮細(xì)胞（IEC-6）遷移的影響，從而進(jìn)行多糖純化過程的藥效活性追蹤，為探討四君子湯多糖藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考。方法：①四君子湯水提醇沉得到四君子湯多糖1；經(jīng)Sevag法去蛋白得到四君子湯多糖2；經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析并超純水洗脫得到四君子湯多糖3a；經(jīng)Sephadex G-100葡聚糖凝膠柱層析并超純水洗脫得到四君子湯多糖4a和多糖4b；并以苯酚-硫酸法檢測各多糖樣品糖含量（以葡萄糖計(jì)）。②凝膠滲透色譜法（GPC）檢測四君子湯多糖3a、多糖4a和多糖4b純度。③在IEC-6細(xì)胞遷移模型上，觀察四君子湯多糖不同樣品促進(jìn)細(xì)胞遷移的藥效活性。結(jié)果：4種多糖樣品（四君子湯多糖1、2、3a、4b）糖含量分別為71.35%、75.45%、81.00%和98.50%，其促進(jìn)細(xì)胞遷移的最低有效劑量分別為200、100、50、30 mg·L-1；表明純化步驟最多的多糖4b糖含量最高、藥效最優(yōu)，且GPC法測得其為均一性多糖組分。結(jié)論：四君子湯多糖經(jīng)不同純化步驟后，糖含量和純度提高，藥效活性隨之增強(qiáng)，研究結(jié)果為探討四君子湯促進(jìn)細(xì)胞遷移的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供參考。

四君子湯多糖 分離純化 IEC-6細(xì)胞 細(xì)胞遷移

四君子湯有益氣健脾之功效，用于脾胃氣虛、胃納不佳、食少便溏者[1]。研究表明四君子湯有防治胃腸粘膜損傷、促進(jìn)消化吸收、調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)及胃腸激素、增強(qiáng)腸道免疫等作用[2]。胃腸粘膜損傷是胃腸病變的常見病理基礎(chǔ)，而上皮細(xì)胞遷移是胃腸粘膜損傷修復(fù)的重要步驟[3]。研究發(fā)現(xiàn)四君子湯總多糖對小腸上皮細(xì)胞（Intestinal Epithelial Cells-6，IEC-6）遷移有促進(jìn)作用，且藥效優(yōu)于組成四君子湯的各單味藥多糖[4]。本課題組研究發(fā)現(xiàn)，四君子湯對應(yīng)激性潰瘍大鼠胃粘膜損傷有防治作用，藥效機(jī)制可能與其增加胃和小腸粘膜多胺（精脒）有關(guān)[5]。本文在此基礎(chǔ)上，對四君子湯多糖進(jìn)行提取分離純化，并在IEC-6細(xì)胞遷移模型上，對四君子湯多糖不同樣品進(jìn)行促進(jìn)細(xì)胞遷移的藥效活性追蹤，探討四君子湯多糖促進(jìn)細(xì)胞遷移的活性組分，為研究四君子湯胃腸粘膜損傷修復(fù)的藥效物質(zhì)提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥材

人參為五加科植物Panax ginseng C.A.Mey.干燥根和根莖，3-4年生；白術(shù)為菊科植物Atractylodes macrocephala Koidz.干燥根莖，炒制；茯苓為多孔菌科真菌Poria cocos (Schw.) Wolf.干燥菌核；甘草為豆科植物Glycyrrhiza uralensis Fisch.的根，蜜炙；購于廣州同康藥業(yè)有限公司，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室童家赟講師鑒定。

1.2 試劑

胎牛血清（批號(hào)：1671324），高糖DMEM（批號(hào)：8115346），雙抗Pen Strep（批號(hào)：1677648），均為美國gibco公司產(chǎn)品；DEAE-52纖維素填料（英國Whatman公司，批號(hào)：10226431）；Sephadex G-100（瑞典GE Healthcare公司，批號(hào)：10107207）；S0208 TSK gel column（日本TOSOH公司，7.8 mm ×300 mm）；其它試劑均為分析純。

1.3 儀器

IX-71型熒光倒置相差顯微鏡（日本Olympus公司）；Waters 2695 高效液相色譜儀及2414型示差折光檢測器（美國Waters公司）；3111型CO2培養(yǎng)箱（美國Thermo Scientific公司）；R206型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司）；DLSB3030型低溫冷轉(zhuǎn)循環(huán)泵、SHB III D型循環(huán)水式多用真空泵和W201D型恒溫水浴鍋（鄭州長盛實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；VirTis凍干機(jī)（珠海市造鑫企業(yè)有限公司）；MVLTIF型離心機(jī)（美國Thermo Scientific公司）；UV-1800型紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；DZF6050型真空干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；2XZ(S)4型旋片式真空泵（上海德英真空照明設(shè)備有限公司）；BSZ-100自動(dòng)部分收集器（上海嘉鵬科技有限公司）。

1.4 細(xì)胞

大鼠小腸隱窩細(xì)胞（IEC-6）購自美國模式菌種收集中心（American Type Culture Collection，ATCC），批號(hào)：58541019。

2 方法與結(jié)果

2.1 四君子湯多糖樣品制備及含量檢測

2.1.1 四君子湯多糖1（以下簡稱“多糖1”）的制備及含量檢測

稱取人參、茯苓、白術(shù)、甘草藥材各300 g，粉碎，加入12倍量水（7.2 L），加熱提取2 h，紗布過濾，取濾液；藥渣按同法提取第2次，合并2次濾液，減壓濃縮至1.4 L，加乙醇至含醇量為75%，4 ℃靜置過夜，抽濾，沉淀溶于約1.6 L超純水，離心（8 400 rpm，15 min），取上清液，冷凍干燥得多糖1（68.18 g，相對于藥材得率為5.7%）；分光光度計(jì)以苯酚-硫酸法測得其糖含量（以葡萄糖計(jì)）為71.4%。

2.1.2 四君子湯多糖2的制備及含量檢測

多糖1以Sevag法去蛋白，氯仿與正丁醇體積比4：1配制Sevag試劑；取65 g多糖1溶于2 L純水中，取600 mL該溶液與400 mL Sevag試劑混合后倒入萃取瓶，用力振搖20 min，靜置6 h，出現(xiàn)上層水溶液層、中間白色蛋白層和下層有機(jī)相層，取上層水溶液；同法把溶于2 L純水的多糖1溶液全部萃取完畢，經(jīng)冷凍干燥，得四君子湯多糖2（47.7 g，相對于藥材得率為4.0%），苯酚-硫酸法測得其糖含量（以葡萄糖計(jì)）為75.5%。

2.1.3 四君子湯多糖3的制備及含量檢測

取“多糖2”2.15 g，經(jīng)DEAE-52纖維素柱（5.2 cm ×12.0 cm）層析，依次用3倍柱體積的超純水和0.1、0.3、0.5、0.8、1.0 mol·L-1NaCl溶液洗脫，流速2 mL·min-1，自動(dòng)收集器收集，每管5 mL，苯酚-硫酸法跟蹤檢測各管洗脫液多糖洗脫情況（見圖1）。

圖1顯示，四君子湯多糖2經(jīng)超純水和0.1、0.3 mol·L-1NaCl洗脫后，各有數(shù)管洗脫液可檢測到有多糖洗出；而經(jīng)0.5、0.8、1.0 mol·L-1NaCl洗脫后，各管吸光度基本為0，表明其基本無多糖洗出，因此取前3者分別合并各管多糖洗脫液，分別裝入透析袋，在流動(dòng)的蒸餾水中透析48 h后真空干燥，得到多糖3a（本次柱層析得1.43 g，換算成1 200 g四君子湯藥材累計(jì)應(yīng)得“多糖3a”32.19 g，相對于藥材得率為2.7%）、多糖3b（0.1 mol·L-1NaCl 洗脫部位，58.5 mg）和多糖3c（0.3 mol·L-1NaCl 洗脫部位，20 mg）。其中多糖3a所得量最高，苯酚-硫酸法測得其糖含量為81.0%，選擇該樣品進(jìn)一步分離純化。

2.1.4 四君子湯多糖4的制備及含量檢測

取“多糖3a”350 mg，加約20 mL超純水溶解，經(jīng)Sephadex G-100凝膠柱（3.2 cm × 84.0 cm）層析，3倍柱體積超純水洗脫，流速0.75 mL·min-1，自動(dòng)收集器收集，每管5 mL，苯酚-硫酸法跟蹤檢測各管洗脫液多糖洗脫情況（見圖2）；分別合并“峰1”和“峰2”多糖洗脫液，真空干燥，得四君子湯多糖4a（78.7 mg）和多糖4b（220 mg；換算成1 200 g四君子湯藥材累計(jì)應(yīng)得“多糖4b”19.85 g，相對于藥材得率為1.7%）；其中多糖4b（峰2）量較多，苯酚-硫酸法測得其糖含量（以葡萄糖計(jì)）為98.5%。

2.2 四君子湯多糖純度測定

高效液相凝膠滲透色譜法（Gel Permeation Chromatography，GPC）原理是根據(jù)被檢測多糖的分子體積（或相對分子質(zhì)量）實(shí)施分離，色譜圖峰反映了化合物的相對分子質(zhì)量分布，若顯示為單一對稱峰，表明其分子質(zhì)量分布相對集中，為均一性多糖組分。以GPC法檢測四君子湯多糖3a、多糖4a和多糖4b，HPLC條件：3種多糖樣品分別配制成1.0 mg·mL-1溶液；柱溫箱溫度：30 ℃；示差折光檢測器溫度：30 ℃；檢測器靈敏度：4；流動(dòng)相：超純水；流速：0.6 mL·min-1；進(jìn)樣量：20 μL。

圖1 四君子湯多糖2經(jīng)DEAE-52纖維素柱不同洗脫液洗脫曲線

圖2 四君子湯多糖3a經(jīng)Sephadex G-100凝膠柱超純水洗脫曲線

圖3 所示GPC法檢測結(jié)果，多糖3a色譜圖顯示3個(gè)峰，主峰（第二峰）保留時(shí)間為18.28 min，峰面積占86.43%，峰形不對稱，說明其為非均一性多糖組分；多糖4a色譜圖主要的第一、二峰保留時(shí)間分別為8.75 min和12.87 min，與多糖3a第一峰（11.28 min）出現(xiàn)時(shí)間較接近，可能有多糖3a第一峰所含組分；多糖4b色譜圖呈單一狹窄對稱峰，保留時(shí)間為18.27 min，峰面積達(dá)98.62%，表明其為均一性多糖組分，也與多糖3a主峰保留時(shí)間很接近，提示多糖4b可能主要保留了多糖3a的主峰成分。

2.3 四君子湯各多糖樣品對細(xì)胞遷移的影響[6]

細(xì)胞培養(yǎng)及給藥方法：細(xì)胞以6.25×104cells·cm-2接種于75 cm2培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)基為高糖DMEM加入10%FBS和2 mL雙抗；培養(yǎng)條件為37 ℃，飽和濕度，5% CO2；待細(xì)胞生長至80%-90%時(shí)，以每孔1×106個(gè)細(xì)胞接種于6孔板，培養(yǎng)24 h后進(jìn)行細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)：在6孔培養(yǎng)板中央用手術(shù)刀片輕輕劃一直線，用細(xì)胞刮刀沿直線將一側(cè)細(xì)胞刮干凈，PBS清洗2次，迅速加入培養(yǎng)基每孔2.5 mL；給藥方法：空白組每孔加培養(yǎng)基2.5 mL，陽性對照藥組加入含終濃度為5 μmol·L-1精脒的培養(yǎng)基2.5 mL，受試藥加入含各劑量的四君子湯多糖不同樣品；加藥后培養(yǎng)24 h，相差倒置顯微鏡觀察細(xì)胞越過劃痕線（即細(xì)胞遷移）情況，拍照，每孔從左至右選取6-10個(gè)視野進(jìn)行細(xì)胞遷移計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)每組3個(gè)復(fù)孔各視野的遷移細(xì)胞均數(shù)。所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計(jì)，采用單因素方差分析。

表1結(jié)果顯示，經(jīng)水提醇沉得到的四君子湯多糖1，僅有200 mg·L-1劑量組有促進(jìn)細(xì)胞遷移的作用（與空白組比較P＜0.01）。

表2結(jié)果顯示，經(jīng)水提醇沉和Sevag法去蛋白得到的四君子湯多糖2，100 mg·L-1和200 mg·L-1劑量組有促進(jìn)細(xì)胞遷移的作用（與空白組比較P＜0.05和P＜0.01）；提示經(jīng)初步純化后四君子湯多糖藥效活性可提高。

表3結(jié)果顯示，經(jīng)水提醇沉、去蛋白、DEAE-52纖維素柱層析并超純水洗脫后得到的四君子湯多糖3a，50、100、200 mg·L-1劑量組均有促進(jìn)細(xì)胞遷移的作用（與空白組比較P＜0.01）；提示進(jìn)一步純化后的四君子湯多糖藥效活性更高。

表4結(jié)果顯示，經(jīng)水提醇沉、去蛋白、DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-100凝膠柱層析并超純水洗脫后得到的四君子湯多糖4b，30 mg·L-1和60 mg·L-1劑量組有促進(jìn)細(xì)胞遷移的作用（與空白組比較P＜0.01）；提示四君子湯多糖經(jīng)不同純化過程后藥效活性逐步提高（見圖4）。

圖3 四君子湯多糖樣品高效液相色譜圖（示差折光檢測器）

表1 四君子湯“多糖1”對細(xì)胞遷移的影響（±s）

表1 四君子湯“多糖1”對細(xì)胞遷移的影響（±s）

注：與空白組比較，**P＜0.01。

組別n（視野數(shù)）劑量細(xì)胞遷移數(shù)/個(gè)空白組20 --102.6±21.7精脒組18 5 μmol·L-1166.7±48.9**四君子湯多糖1組18 50 mg·L-1101.9±16.7四君子湯多糖1組18 100 mg·L-1107.9±26.6四君子湯多糖1組18 200 mg·L-1156.0±31.2**

表2 四君子湯多糖2對細(xì)胞遷移的影響（±s）

表2 四君子湯多糖2對細(xì)胞遷移的影響（±s）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別n（視野數(shù)）劑量細(xì)胞遷移數(shù)/個(gè)空白組19 -156.8±31.9精脒組19 5 μmol·L-1236.2±53.6**四君子湯多糖2組18 50 mg·L-1171.3±39.4四君子湯多糖2組24 100 mg·L-1203.3±53.1*四君子湯多糖2組24 200 mg·L-1273.5±62.6**

表3 四君子湯多糖3a對細(xì)胞遷移的影響（±s）

表3 四君子湯多糖3a對細(xì)胞遷移的影響（±s）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別n（視野數(shù)）劑量細(xì)胞遷移數(shù)/個(gè)空白組30 -201.3±22.7精脒組24 5 μmol·L-1236.9±47.2*四君子湯多糖3a組27 50 mg·L-1284.7±56.3**四君子湯多糖3a組29 100 mg·L-1268.8±49.0**四君子湯多糖3a組24 200 mg·L-1249.5±48.6**

表4 四君子湯多糖4b對細(xì)胞遷移的影響（±s，n=30）

表4 四君子湯多糖4b對細(xì)胞遷移的影響（±s，n=30）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別劑量細(xì)胞遷移數(shù)/個(gè)空白組-196.6±28.0精脒組5 μmol·L-1234.6±41.4*四君子湯多糖4b組15 mg·L-1206.1±32.0四君子湯多糖4b組30 mg·L-1248.2±42.5**四君子湯多糖4b組60 mg·L-1240.7±32.6**

圖4 四君子湯“多糖4b”對IEC-6細(xì)胞遷移的影響（×100）

3 討論

多胺調(diào)控信號(hào)是小腸上皮細(xì)胞遷移的重要調(diào)控途徑[7]，本課題組研究發(fā)現(xiàn)，益氣健脾中藥黨參、白術(shù)、甘草、黃芪的提取物（如糖提取物、黃酮提取物、甲醇提取物等）有促進(jìn)小腸上皮IEC-6細(xì)胞遷移的作用，作用機(jī)制與其影響多胺介導(dǎo)鉀通道激活信號(hào)通路有關(guān)[6,8-16]。本實(shí)驗(yàn)室還對白術(shù)多糖調(diào)節(jié)IEC-6細(xì)胞遷移的活性組分進(jìn)行了初步的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析[17,18]。本文在上述益氣健脾單味中藥研究基礎(chǔ)上，開展益氣健脾方劑提取分離純化及藥理研究。

四君子湯是益氣健脾代表方，也是治療脾虛證的基本方，出自宋《太平惠民和劑局方》：“治榮衛(wèi)氣虛，臟腑怯弱，心腹脹滿，全不思食，腸鳴泄瀉，嘔噎吐逆，大宜服之。人參去蘆，甘草炙，茯苓去皮，白術(shù)各等分”；本文四君子湯組成和比例遵古方（人參、白術(shù)、茯苓、炙甘草組成為1：1：1：1），四味藥的化學(xué)成分復(fù)雜，但多糖是其共有的一類成分，因此選擇四君子湯多糖組分為受試藥，采取不同提取分離步驟以純化四君子湯多糖，并以促進(jìn)細(xì)胞遷移作為藥效活性追蹤指標(biāo)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過水提醇沉、Sevag法去蛋白、DEAE-52纖維素柱和Sephadex G-100凝膠柱層析并超純水洗脫等步驟，對四君子湯多糖進(jìn)行提取和分離純化后，得到的4個(gè)代表性多糖提取物——四君子湯多糖1、2、3a和4b，苯酚-硫酸法分光光度計(jì)測得其糖含量（以葡萄糖計(jì)）分別為71.35%、75.45%、81.0%和98.5%，提示經(jīng)分離純化后，四君子湯多糖的糖含量逐步提高。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，多糖1、2、3a、4b促進(jìn)細(xì)胞遷移的起效劑量分別為200、100、50、30 mg·L-1，表明四君子湯多糖經(jīng)分離純化后，促進(jìn)細(xì)胞遷移的藥效活性逐步提高，其中純度高、藥效活性較好的四君子湯多糖4b為均一性多糖組分，為后續(xù)對其進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)解析提供了參考。

多糖是近年研究較多的一類中藥組分（成分）[19]，如靈芝多糖、鐵皮石斛多糖、鹿茸多糖等具有抗氧化活性，且藥效隨多糖純度及含量的增加而升高[20-22]；松茸多糖有抗腫瘤活性，且純化后多糖比粗多糖藥效更優(yōu)[23]。以上研究以藥效活性為導(dǎo)向篩選多糖組分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著逐步分離純化，藥效活性也隨之增加。

生物活性導(dǎo)向分離是中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的重要研究方法之一[24]。張伯禮和王永炎院士指出，研究方劑要借鑒現(xiàn)代化學(xué)的研究方法，保持方劑的配伍特點(diǎn)，在研究過程始終貫徹在生物導(dǎo)向下的化學(xué)研究思路，努力做到藥效物質(zhì)與作用原理清楚，為構(gòu)建以組分配伍的現(xiàn)代中藥提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐；并提出對方劑科學(xué)問題的認(rèn)識(shí)是：方劑在病證結(jié)合、方證對應(yīng)、理法方藥一致的條件下，通過多組分作用在多靶點(diǎn)，融拮抗、補(bǔ)充、整合、調(diào)節(jié)等多種功效而起治療作用[25]。

方劑的組分研究是探討方劑科學(xué)問題的重要手段之一，本文對四君子湯多糖進(jìn)行提取分離純化及藥效活性觀察，為探討四君子湯促進(jìn)胃腸粘膜損傷修復(fù)的有效組分及其作用機(jī)制研究以及后續(xù)四君子湯多糖的結(jié)構(gòu)解析提供了參考。

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18 王一寓,劉嘉煒,司馬貞華,等.白術(shù)多糖調(diào)節(jié)IEC-6細(xì)胞遷移活性成分的分離和表征.高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào), 2015, 36(2): 299-305.

19 王超,康立源.中藥多糖的藥理學(xué)研究進(jìn)展.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2008, 10(3): 82-86.

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IEC-6 Cell Migration Ability Changes is Impacted by Polysaccharides Separated and Purified from Sijunzi Decoction

Deng Jiao, Li Ruliu, Cai Jiazhong, Tu Xiaohua, Chen Weiwen
(Pi-Wei Institute, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China)

This study aimed to observe the effects of different polysaccharide samples extracted, separated and purified from Sijunzi Decoction (SJZD) on migration ability of the small intestinal epithelial cells (IEC-6), and track the pharmacodynamic activities of polysaccharide in the purification process, in hoping of providing some references for the pharmacodynamic material research of SJZD. In this study, firstly, the pharmaceutical chemicals of the SJZD were extracted by different purification methods: polysaccharide 1 was separated by hot reflux and ethanol precipitation; polysaccharide 2 was obtained through removing protein by Sevag method; polysaccharide 3a was extracted using DEAE-52 fiber column and ultra pure water elution; while polysaccharide 4a and polysaccharide 4b was purified using Sephadex G-100 gel column chromatography through ultra pure water elution. Thus, glucose content of each sample was detected by phenol-sulfuric acid method. Secondly, the purity degrees of the four polysaccharides were tested by gel permeation chromatography (GPC). At last, effects of the various polysaccharide samples on the migration of IEC-6 cells were observed by the cell migration model. As a result, the glucose contents of the four polysaccharide samples (polysaccharide 1, 2, 3a, 4b) were 71.35%, 75.45%, 81.0% and 98.5%, respectively; and the lowest effective doses of cell migration ability were 200, 100, 50 and 30 mg·L-1, respectively. These results indicated that polysaccharide 4b was a sort of homogeneous polysaccharide with the highest glucose level and the optimal pharmacodynamics function through the most critical purification steps. It was concluded that the most critical purification method was efficiency in increasing the content and purity of glucose from SJZD and enhancing the pharmacodynamic activities of polysaccharide. All the results provided evidences for exploring pharmacodynamic materials of SJZD in improving cell migration abilities.

Sijunzi Decoction polysaccharide, separation and purification, IEC-6, cell migration

10.11842/wst.2016.04.008

R289

A

（責(zé)任編輯：朱黎婷，責(zé)任譯審：朱黎婷）

2016-01-06

修回日期：2016-01-14

＊ 國家自然科學(xué)基金委面上項(xiàng)目（81173254）：益氣健脾中藥對小腸上皮細(xì)胞遷移過程多胺信號(hào)通路中鈣離子調(diào)控的研究，負(fù)責(zé)人：李茹柳；廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研項(xiàng)目（20151190）：基于多胺信號(hào)通路探討四君子湯多糖促進(jìn)小腸上皮細(xì)胞遷移的作用機(jī)理，負(fù)責(zé)人：蔡佳仲。

＊＊ 通訊作者：李茹柳，博士，教授，主要研究方向：益氣健脾中藥作用機(jī)制及物質(zhì)基礎(chǔ)研究。