中藥鑒定學(xué)新技術(shù)新方法研究進(jìn)展

金立

摘 要：傳統(tǒng)的中藥鑒定具有快速、簡便的優(yōu)點(diǎn)；隨著當(dāng)前科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，新技術(shù)、新方法廣泛應(yīng)用于中藥鑒定，使得中藥鑒定的科學(xué)性、準(zhǔn)確性得到極大提高。本文主要介紹了中藥鑒定學(xué)新技術(shù)新方法研究的進(jìn)展，主要從分子鑒定技術(shù)、化學(xué)鑒定技術(shù)、性狀顯微鑒定新技術(shù)、生物效應(yīng)鑒定技術(shù)四方面進(jìn)行探討，希望能對同行有所幫助。

關(guān)鍵詞：中藥；鑒定；技術(shù)；方法

中圖分類號：R282.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 收稿日期：2015-11-12

一、分子鑒定技術(shù)

1.蛋白質(zhì)標(biāo)記技術(shù)

（1）抗血清鑒別技術(shù)。抗血清鑒別技術(shù)通過中藥中的抗原性物質(zhì)制作出所需要的抗體，采用抗體酶免疫試驗(yàn)或者酶聯(lián)免疫吸附法等鑒別中藥，如阿膠及其代用品采用抗血清進(jìn)行鑒別。

（2）蛋白質(zhì)電泳鑒別。是指根據(jù)中藥中所含蛋白質(zhì)分子的特性，采用電泳分離的方法對中藥進(jìn)行鑒定的方法。我們比較熟悉的如毛細(xì)管電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳，聚丙烯酰胺凝膠電泳可對果實(shí)種子、動(dòng)物類藥材進(jìn)行鑒定。

（3）同工酶鑒別技術(shù)。是指根據(jù)中藥中的同工酶分子活性、免疫性等特質(zhì)，通過對重要酶活性分析和電泳檢測來完成對中藥的鑒定的技術(shù)。

2.DNA分子鑒定

（1）DNA條形碼鑒定技術(shù)。2003年，加拿大分類學(xué)家PaulHebert提出了DNA條形碼。該方法是指利用基因組中一段公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)且較短的DNA片段作為物種標(biāo)記而建立的一種鑒定方法，通過對DNA進(jìn)行篩選確定DNA通用條形碼，利用生物信息學(xué)分析方法分析比對DNA數(shù)據(jù)，進(jìn)行物種鑒定。DNA條形碼由于鑒定快速準(zhǔn)確，已經(jīng)成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。與分子鑒定方法相比，DNA條形碼鑒定優(yōu)點(diǎn)包括鑒定結(jié)果可重復(fù)使用，通用性強(qiáng)，能建立數(shù)據(jù)庫和鑒定平臺(tái)。近年來，中藥DNA條形碼鑒定研究促進(jìn)了中藥鑒定技術(shù)的快速發(fā)展。

（2）基于PCR的分子鑒定技術(shù)。隨機(jī)和簡單限定引物的PCR標(biāo)記技術(shù)采用隨機(jī)引物對模板DNA進(jìn)行擴(kuò)增，如RAPD、AP-PCR等；或?qū)σ镞M(jìn)行簡單限定，如AFLP、ISSR、DALP、SRAP、TRAP等。目前主要用于生物遺傳關(guān)系和多樣性分析。PCR標(biāo)記技術(shù)研究的前提是事先掌握研究對象的DNA序列信息。

（3）基于分子雜交的DNA分子技術(shù)。RFLP是依據(jù)序列差異產(chǎn)生特定的限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)，從而導(dǎo)致酶切片段長度的變化或片段數(shù)量的增減，以此進(jìn)行鑒定。該項(xiàng)技術(shù)首次應(yīng)用到北沙參基原植物珊瑚菜的不同居群的鑒別，現(xiàn)在廣泛應(yīng)用到了柴胡等藥材或其基原植物的鑒定技術(shù)當(dāng)中。該方法所需DNA的量較大，對DNA的質(zhì)量要求也較高，因此在推廣方面受到了一定的限制。在保留酶切方法、簡化雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上建立了PCR-RFLP技術(shù)，已經(jīng)在靈芝、絞股藍(lán)等藥材鑒定方面得到了廣泛應(yīng)用。

二、化學(xué)鑒定技術(shù)

中藥化學(xué)鑒定的物質(zhì)基礎(chǔ)是其化學(xué)成分。中藥材所含成分復(fù)雜，因此必須選擇具有特征的少量化學(xué)成分進(jìn)行鑒定。早期的中藥理化鑒定多依據(jù)一類成分具有的化學(xué)特性來開展鑒定。TLC方法采用對照品、對照藥材或?qū)φ仗崛∥镞M(jìn)行隨行對照鑒定，得到應(yīng)用和普及。與色譜分離、分析技術(shù)的飛速發(fā)展相對應(yīng)，HPLC、GC、HPCE等方法及光譜聯(lián)用技術(shù)也有了相應(yīng)發(fā)展，在更高精確度反映中藥材化學(xué)組分?jǐn)?shù)和量等特征方面發(fā)揮著日益重要的作用。

三、性狀顯微鑒定新技術(shù)

物種的遺傳特征主要通過生物的性狀特征表現(xiàn)出來，因此物種特異性可采用中藥物種的方式進(jìn)行鑒定，因此發(fā)掘和明確有效中藥材鑒別性狀特征隨著技術(shù)進(jìn)步一直在不斷發(fā)展。中藥材性狀鑒別技術(shù)經(jīng)過長期積累和總結(jié)，已經(jīng)形成了豐富的鑒別經(jīng)驗(yàn)和有效方法：該方法是一種比較實(shí)用、快捷、有效的中藥材鑒定方法。生物學(xué)中的細(xì)胞學(xué)確定后，顯微鏡成為植物藥鑒別的重要方法。

四、生物效應(yīng)鑒定技術(shù)

中藥生物效應(yīng)鑒定以生物效應(yīng)為基礎(chǔ)，以生物統(tǒng)計(jì)為工具，運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，通過在一定條件下生物體對不同供試品所產(chǎn)生的反應(yīng)來測定中藥的生物活性與強(qiáng)度差異，并以此作為鑒定中藥的主要依據(jù)。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是直接與中藥的有效性和安全性相關(guān)，缺點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)方法專屬性強(qiáng)，通用性差。中藥生物效應(yīng)鑒定中的模型、參數(shù)、值、處理方法等關(guān)鍵問題，仍需要進(jìn)一步解決。

參考文獻(xiàn)：

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