• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    仔豬抗大腸桿菌性F4ac腹瀉病分子遺傳機理研究進展

    2016-03-19 10:21:46廖金龍柴晶黨歐陽婧
    安徽農(nóng)業(yè)科學 2016年13期
    關鍵詞:仔豬

    張 婷,廖金龍,柴晶黨,葉 丹,歐陽婧

    (江西科技師范大學生命科學學院,江西南昌 330013)

    ?

    仔豬抗大腸桿菌性F4ac腹瀉病分子遺傳機理研究進展

    張 婷,廖金龍,柴晶黨,葉 丹,歐陽婧*

    (江西科技師范大學生命科學學院,江西南昌 330013)

    摘要產(chǎn)腸毒素大腸桿菌F4ac(ETEC F4ac)是引發(fā)新生和斷奶前仔豬腹瀉病的最主要致病菌,分離和鑒別豬ETEC F4ac受體目的基因及因果突變位點成為豬ETEC F4ac腹瀉抗病育種的關鍵。對仔豬抗大腸桿菌性腹瀉病分子遺傳機理研究進展進行綜述,以期為培育種豬抗腹瀉病新品系奠定理論基礎。

    關鍵詞仔豬;ETEC F4ac;遺傳機理

    新生及斷奶仔豬腹瀉病是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的一種常見疾病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。據(jù)報道,在一些養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達的國家,新生仔豬腹瀉的發(fā)病率高達75.0%[1]。我國仔豬的腹瀉發(fā)病率也很高,全年平均發(fā)病率為46.5%[2]。研究表明,引發(fā)新生仔豬腹瀉病的致病菌主要是產(chǎn)腸毒素大腸桿菌F4ac(ETEC F4ac)[3]。ETEC F4ac的致病性取決于該致病菌是否與豬小腸上皮細胞表面刷狀緣的受體特異性結(jié)合。當該致病菌與小腸上皮細胞表面刷狀緣結(jié)合后,ETEC F4ac大量繁殖產(chǎn)生腸毒素,所產(chǎn)生的腸毒素致使腸上皮細胞分泌功能亢進,大量水和電解質(zhì)進入腸腔,造成腸腔中大量液體積蓄,超過了腸壁重吸收能力從而引起腹瀉。由此可見,仔豬小腸上皮細胞有無ETEC F4ac受體是仔豬被ETEC F4ac感染時是否發(fā)病的關鍵。無受體豬表現(xiàn)為抵抗型,有受體豬則表現(xiàn)為易感型[4]。分離和鑒別豬ETEC F4ac受體目的基因及因果突變位點成為豬ETEC F4ac腹瀉抗病育種的關鍵。筆者對仔豬抗大腸桿菌性腹瀉病分子遺傳機理研究進展進行了綜述,以期為培育種豬抗腹瀉病新品系奠定理論基礎。

    1產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)亞型

    產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)根據(jù)其侵染特點可分為5種亞型,分別為F4、F18、F5、F6和F41,在這5種亞型病原體中,F(xiàn)4和F18是斷奶仔豬腹瀉的主要致病菌[5]。F18主要引發(fā)斷奶仔豬水腫病和腹瀉病,而F4主要引發(fā)新生仔豬及早期斷奶仔豬腹瀉病[6]。研究表明,ETEC F18的受體基因為FUT1,F(xiàn)UT1基因在307位點處發(fā)生了A>G突變,該位點的突變決定了F18能否與受體結(jié)合從而導致腹瀉[7]。根據(jù)免疫學特征將ETEC F4分為ab、ac和ad 3種亞型[8],在這3種亞型中,F(xiàn)4ac是最主要的致病菌[4]。F4ac有2個分子量分別為210和240 ku的分泌型糖蛋白受體[9],這2種糖蛋白所含的β-連接的半乳糖是F4ac識別受體分子的重要組成部分。鑒別ETEC F4ac受體基因及其因果突變是目前國際上仔豬抗大腸桿菌性腹瀉研究的重點和熱點。

    2ETEC F4ac受體基因的定位研究

    Gibbons等[10]研究表明,豬ETEC F4ac受體為單基因控制,呈顯隱性遺傳模式。攜帶顯性基因S的仔豬對ETEC F4ac的黏附易感,隱性基因s純合仔豬則表現(xiàn)為抵抗型。F4ac受體基因的定位和鑒別得到了國內(nèi)外的重視。

    1995年,Edfors-Lilja等[11]利用歐洲野豬×大白豬資源家系群體為材料,經(jīng)過三代系譜的連鎖分析,將ETEC F4ac受體定位于13號染色體,與Tf基因緊密連鎖,發(fā)現(xiàn)F4ab和F4ac受體位點緊密連鎖,但這2個受體卻位于不同的位點。2002年,Python等[12]以大白豬和大白×長白三代家系為材料,利用13號染色體的微衛(wèi)星標記信息,將ETEC F4ac受體進一步定位于S0068和Sw1030之間,與其中的S0075和Sw225高度連鎖(θ=0.00)。該研究結(jié)果在1年后J?rgensen等[13]開展的基因定位研究中得到了驗證,他們還利用FISH和輻射雜種細胞克隆板技術(shù)揭示ETEC F4ac受體位于13號染色體q41區(qū)(SSC13q41),分別與人3號染色體的q28~q29和q21區(qū)同源。2009~2011年,Joller等[14]、Jacobsen等[15]和Rampold等[16]先后將ETEC F4ac受體進一步定位于5.7~3.1 cM,通過進一步的區(qū)間定位最終定位到LMLN-S0283較小區(qū)間。

    李玉華等[17]利用松遼黑豬和長白豬雜交群為試驗群體,開展了ETEC F4黏附表型分布等研究,Niu等[18]利用松遼黑豬和長白豬雜交群,采用增加微衛(wèi)星標記密度,開展基于家系不平衡檢測的精細定位,將F4ac受體基因定位于豬13號染色體S0283和SW1876區(qū)域約1.6 cM區(qū)間。

    Ren等[19]利用自身構(gòu)建的大規(guī)模白色杜洛克×二花臉資源家系群體,通過183個微衛(wèi)星位點和具有ETEC F4ac體外黏附表型的755個F2個體和390個F3個體開展了全基因組連鎖分析、IBD分析及斷點重組分析,將ETEC F4ac受體基因精細定位于13號染色體q41區(qū)(SSC13q41)臨近S0283的約3.5 cM區(qū)域。通過全基因組連鎖定位分析和目的區(qū)域的重組斷點事件分析,將目標區(qū)域縮小至UMNp595與 ALGA0072095之間2.3 Mb區(qū)域。以上工作推動了仔豬ETEC F4ac受體基因的研究進展。

    3ETEC F4ac受體位置候選基因研究

    鑒別SSC13q41區(qū)域的位置候選基因是目前ETEC F4ac受體研究的重點。大量免疫生化特性研究表明,黏蛋白型唾液糖蛋白(IMTGP)、74 ku的轉(zhuǎn)鐵蛋白(GV74)和小腸中性糖鞘H(mLad)符合ETEC F4ac受體的理化特征,其中黏蛋白型唾液糖蛋白與F4ab 和F4ac結(jié)合,但不與F4ad結(jié)合,且該糖蛋白的存在與新生仔豬對ETEC F4ab或F4ac的敏感性高度相關[5],因而成為ETEC F4ac受體候選基因選擇的重要依據(jù)。Kreuzev等[20]在獲得ETEC F4ac受體基因染色體定位信息后,選擇黏附素糖蛋白編碼基因(MUC基因家族)和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體基因(TFRC)進行研究,Python等[12]對TFRC、B3GnT5、B4GALT4和B4GALT4 4個基因進行了研究,但未發(fā)現(xiàn)與F4ac黏附表型顯著相關的候選基因和標記。

    J?rgensen等[13]在歐洲野豬×大白豬資源家系群體中,發(fā)現(xiàn)了Mucin4基因內(nèi)含子7的一個SNP標記與ETEC F4ac的黏附表型共分離。Peng等[21]與J?rgensen等[13]就該位點的影響效應開展了合作科研,發(fā)現(xiàn)該標記在所構(gòu)建的白色杜洛克×二花臉資源家系始祖動物中無多態(tài)性,而Peng等[21]的家系F2個體中有充分分離的ETEC F4ac黏附表型,這表明該SNP標記只與ETEC F4ac受體基因因果突變(causative mutation)呈一定連鎖不平衡的分子標記,不能解釋所有群體的ETEC F4ac受體遺傳基礎。

    在精細定位基礎上,Ren等[19]構(gòu)建了包括20個功能基因座位的SSC13q41人-豬高分辨率比較基因圖譜,并先后對該區(qū)域內(nèi)的黏附素13(MUC13)、黏附素20(MUC20)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(TFRC)3個位置候選基因開展了研究,雖獲得了一些可喜的結(jié)果,但未鑒別到與ETEC F4ac易感/抗性表型共分離的多態(tài)位點。Huang等[22]利用比較基因組法在該區(qū)域的黏附素4(MUC4)基因中開發(fā)了一個STS(sequence tagged site),并在位于內(nèi)含子區(qū)鑒別到一個與ETEC F4ac易感/抗性雖非共分離但呈強相關的SNP位點。

    筆者采用豬60K芯片,利用其中39720個有效SNPs開展全基因組關聯(lián)分析結(jié)合連鎖與連鎖不平衡分析,揭示MUC13基因為最可能的目的基因。在包括MUC13基因的2.3 Mb區(qū)域進一步搜尋和鑒別了193個SNPs標記,利用這些標記在已經(jīng)黏附表型測定的分布于10省(市)12個中國地方豬種和3個西方商業(yè)豬種共292個無相關個體中開展關聯(lián)分析,結(jié)果支持MUC13基因為目的基因。針對MUC13基因進一步試驗表明,MUC13基因編碼2個轉(zhuǎn)錄本(MUC13A 和MUC13B),2個轉(zhuǎn)錄本對應的等位基因MUC13A和MUC13B之間的差別在于其第2外顯子所含的高度串聯(lián)重復區(qū)和側(cè)翼的內(nèi)含子68 bp缺少,利用內(nèi)含子68 bp缺少差異作為標簽標記,在大樣本無相關個體中進行分析,結(jié)果表明,所有124 頭對F4ac抗性個體均為MUC13A純合子,而所有對F4ac易感的594頭豬至少含有一個MUC13B等位基因,進一步支持了MUC13為目的基因[23]。

    Ren等[19]進一步通過qRT-PCR試驗發(fā)現(xiàn)MUC13基因的表達量與黏附表型無關,由此推斷MUC13基因的因果突變屬于引起MUC13基因功能改變的編碼突變。進一步對除MUC13基因高GC含量、高度串聯(lián)重復的PTS區(qū)(富含脯氨酸、蘇氨酸和絲氨酸的區(qū)域)外的所有基因區(qū)域進行SNPs搜尋,鑒別到22個cSNPs和55個內(nèi)含子突變,將這些SNPs在遠緣群體中開展關聯(lián)分析,結(jié)果無一個與表型共分離SNP。由此推斷MUC13基因的因果突變極有可能位于高度串聯(lián)重復的PTS區(qū)。另外根據(jù)MUC型家族其他成員的研究,高度串聯(lián)重復的PTS區(qū)構(gòu)成MUC的糖基化結(jié)合位點,該位點賦予MUC重要的生物功能,因此,串聯(lián)重復的數(shù)目、長度及序列變異都將影響到糖基化的程度及類型,由此影響MUC蛋白的功能。由此可以判斷MUC13基因的因果突變位于高度串聯(lián)重復的PTS區(qū)。

    Fu等[24]開展了基于GWAS分析的ETEC F4ac受體基因精細定位,將目標區(qū)域定位至2.6 Mb區(qū)域,進一步確定該區(qū)域中的TNK2、ZNF148、HEG1、MUC13 和ITGB5 為最有可能的位置候選基因。Zhou等[25]將ETEC F4ac受體最重要的候選基因ITGB5和MUC13采用基因沉默策略開展功能分析,進一步證實了ITGB5和MUC13基因在ETEC 黏附過程中發(fā)揮重要的作用。

    Goetstouwers等[26]以大白、比利時長白以及大白與比利時長白的雜交豬種為研究對象,通過體外ETEC的鞭毛黏附性試驗以及全基因組關聯(lián)性分析,發(fā)現(xiàn)ETEC F4ac 的受體可能位于MUC13基因的鄰近區(qū)域。

    4展望

    雖然目前仔豬抗ETEC F4ac腹瀉目的基因鑒別取得了重大突破,對多個位置候選基因尤其是MUC13基因也開展了許多卓有成效的試驗,仍有以下尚未解決的關鍵問題:①真正的目的基因及其因果突變位點(causative mutation)尚未鑒別到;②因果突變位點功能分析尚未進行;③因果突變位點的遺傳起源進化也有待研究。因而對于真正解析豬F4ac腹瀉病分子機理而言,尚需開展大量深入的研究??梢圆捎矛F(xiàn)代分子生物學技術(shù)如通過目標區(qū)域捕獲測序或長片段擴增子測序等技術(shù)結(jié)合功能分析策略鑒別到目的基因及其因果突變位點,深入解析其分子機理及遺傳進化,進而全面揭示豬F4ac侵染腹瀉的抗病分子遺傳機理,為培育種豬抗腹瀉病新品系奠定理論基礎。

    參考文獻

    [1] NIELSON N C,HOGH P,BILLE N.Proceedings of the 1980 international pig veterinary society congress[R].Proceedings of the International Pig Veterinary Society Congress,1980.

    [2] 王紅寧.仔豬腹瀉成因及綜合防治技術(shù)措施[J].中國畜牧雜志,2006,42(6):58-60.

    [3]DONES,THOMSONJ,VARLEY.Proceedingsofthe15thinternationalpigveterinarysocietycongress[R].UniversityPress,1998.

    [4]MOONHW,HOFFMANLJ,CORNICKNA,etal.PrevalencesofsomevirulencegenesamongEscherichia coliisolatesfromswinepresentedtoadiagnosticlaboratoryinIowa[J].JournalofveterinarydiagnosticinvestigationofficialpublicationoftheAmericanAssociationofVeterinaryLaboratoryDiagnosticiansInc,1999,11(6):557-560.

    [5]SHIG,SONGN.EnterotoxigenicEscherichia coli(K88)induceproinflammatoryresponsesinporcineintestinalepithelialcells[J].Developmental&comparativeimmunology,2010,34(11):1175-1182.

    [6]NGELEKAM.IsolationandassociationofEscherichia coliAIDA-I/STb,ratherthanEAST1pathotype,withdiarrheainpigletsandantibioticsensitivityofisolates[J].VetDiagnInvest,2003,15(3):242-252.

    [7]KREUZERS,REISSMANNM,BROCKMANNGA.Newfastandcost-effectivegenetesttogettheETECF18receptorstatusinpigs[J].Veterinarymicrobiology,2013,163(3/4):392-394.

    [8]VANDBW,COXE,OUDEGAB,etal.TheF4fimbrialantigenofEscherichia colianditsreceptors[J].Veterinarymicrobiology,2000,71(3/4):223-244.

    [9]GRANGEPA,ERICKSONAK,ANDERSONTJ,etal.Characterizationofthecarbohydratemoietyofintestinalmucin-typesialoglycoproteinreceptorsfortheK88acfimbrialadhesinofEscherichia coli[J].Infection&immunity,1998,66(4):1613-1621.

    [10]GIBBONSRA,SELLWOODR,BURROWSM,etal.InheritanceofresistancetoneonatalE.colidiarrhoeainthepig:Examinationofthegeneticsystem[J].Theoretical&appliedgenetics,1977,51(2):65-70.

    [11]EDFORS-LILJAI,GUSTAFSSONU,DUVAL-IFLANY,etal.TheporcineintestinalreceptorforEscherichia coliK88ab,K88ac:Regionallocalizationonchromosome13andinfluenceofIgGresponsetotheK88antigen[J].Animalgenetics,1995,26(4):237-242.

    [12]PYTHONP,JORGH,NEUENSCHWANDERS,etal.Fine-mappingoftheintestinalreceptorlocusforenterotoxigenicEscherichia coliF4aconporcinechromosome13[J].Animalgenetics,2002,33(6):441-447.

    [13]J?RGENS?NCB,CIRERAS,ANDERSONSI,etal.LinkageandcomparativemappingofthelocuscontrollingsusceptibilitytowardsE.coilF4ab/acdiarrhoeainpigs[J].Cytogenetic&genomeresearch,2003,102(1/2/3/4):157-162.

    [14]JOLLERD,JORGENSONCB,BERTSCHINGERHU,etal.RefinedlocalizationoftheEscherichia coliF4ab/F4acreceptorlocusonpigchromosome13[J].Animalgenetics,2009,40(5):749-752.

    [15]JACOBSENM,KRACHTSS,ESTESOG,etal.RefinedcandidateregionspecifiedbyhaplotypesharingforEscherichia coliF4ab/F4acsusceptibilityallelesinpigs[J].Animalgenetics,2010,41(1):21-25.

    [16]RAMPOLDIA,JACOBSENMJ,BERTSCHINGERHU,etal.ThereceptorlocusforEscherichia coliF4ab/F4acinthepigmapsdistaltotheMUC4-LMLNregion[J].Mammaliangenomeofficialjournaloftheinternationalmammaliangenomesociety,2011,22(1/2):122-129.

    [17] 李玉華,邱小田,李何君,等.大腸桿菌F4在3個品種豬中的黏附模式[J].遺傳學報,2007,34(7):591-599.

    [18]NIUX,LIY,DINGX,etal.RefinedmappingoftheEscherichia coliF4ab/F4acreceptorgene(s)onpigchromosome13[J].Animalgenetics,2011,42(5):552-555.

    [19]RENJ,TANGH,YANX,etal.Apig-humancomparativeRHmapcomprising20genesonpigchromosome13q41thatharbourstheETECF4acreceptorlocus[J].Journalofanimalbreeding&genetics,2009,126(1):30-36.

    [20]KREUZERS,REISSMANNM,BROCKMANNGA.Newfastandcost-effectivegenetesttogettheETECF18receptorstatusinpigs[J].Veterinarymicrobiology,2013,163(3/4):392-394.

    [21]PENGQL,RENJ,YANXM,etal.Theg.243A>Gmutationinintron17ofMUC4issignificantlyassociatedwithsusceptibility/resistancetoETECF4ab/acinfectioninpigs[J].Animalgenetics,2007,38(4):397-400.

    [22]HUANGX,RENJ,YANXM,etal.Polymorphismsofthreegene-derivedSTSonpigchromosome13q41areassociatedwithsusceptibilitytoenterotoxigenicEscherichia coliF4ab/acinpigs[J].ScienceinChina,2008,51(7):614-619.

    [23]JUNR,XUEMINGY,HUASHUIA,etal.SusceptibilitytowardsenterotoxigenicEscherichia coliF4acdiarrheaisgovernedbytheMUC13geneinpigs[J].PlosOne, 2012, 7(9):44573.

    [24]FUWX,LIUY,LUX,etal.Agenome-wideassociationstudyidentifiestwonovelpromisingcandidategenesaffectingEscherichia coliF4ab/F4acsusceptibilityinswine[J].PlosOne,2012,7(3):32127-32127.

    [25]ZHOUCL,LIUZZ,LIUY,etal.GenesilencingofporcineMUC13andITGB5:CandidategenestowardsEscherichia coliF4acadhesion[J].PlosOne,2012,158(1/2):477-512.

    [26]GOETSTOUWERST,VANPOUCKEM,COPPIETERSW,etal.RefinedcandidateregionforF4ab/acenterotoxigenicEscherichia colisusceptibilitysituatedproximaltoMUC13inpigs[J].PlosOne,2014,9(8):105013.

    基金項目江西省自然科學基金項目(20143ACB21006 );江西省教育廳科技項目(GJJ14571);江西科技師范大學大學生創(chuàng)業(yè)、科研基金項目(20140801007,20140804075)。

    作者簡介張婷(1988- ),女,山東泰安人,碩士研究生,研究方向:分子遺傳學。*通訊作者,教授,博士,碩士生導師,從事分子抗病遺傳育種研究。

    收稿日期2016-03-22

    中圖分類號S 852.6

    文獻標識碼A

    文章編號0517-6611(2016)13-144-02

    Research Progress of the Molecular Genetic Mechanism Resistant to ETEC Diarrhea Disease in Piglet

    ZHANG Ting, LIAO Jin-long, CHAI Jing-dang, OUYANG Jing*et al

    (College of Life Science, Jiangxi Science & Technology Normal University, Nanchang, Jiangxi 330013)

    AbstractEnterotoxigenic Escherichia coli F4ac (ETEC F4ac) were major causes of diarrhea in piglets. Therefore, identification and isolation of piglet ETEC F4ac Receptor genes and causal mutations were the keys to diarrhea disease resistance breeding of piglet ETEC F4ac. In this research, the research progress on the molecular genetic mechanism resistant to ETEC diarrhea disease in piglet was reviewed, aiming at providing references for the research on new lines cultivation of anti-diarrhea piglet.

    Key wordsPiglet; ETEC F4ac; Genetic mechanism

    猜你喜歡
    仔豬
    春季仔豬白肌病如何防治
    仔豬強弱懸殊 要及時調(diào)整
    秋冬季仔豬保暖措施有哪些
    注意預防仔豬腹瀉
    仔豬鏈球菌病的診斷與防治
    仔豬黃痢及其防治
    仔豬
    仔豬水腫病的防治
    七招降低新購仔豬發(fā)病率
    仔豬水腫病的診治
    好男人在线观看高清免费视频| av国产免费在线观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产男靠女视频免费网站| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日本三级黄在线观看| 欧美乱妇无乱码| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 在线视频色国产色| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲天堂国产精品一区在线| or卡值多少钱| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产精品一区二区精品视频观看| 成人亚洲精品av一区二区| 麻豆国产av国片精品| 欧美zozozo另类| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲一区二区三区色噜噜| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 国产精品电影一区二区三区| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产精品亚洲av一区麻豆| 村上凉子中文字幕在线| 男男h啪啪无遮挡| 欧美国产日韩亚洲一区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 午夜福利在线观看吧| 一边摸一边抽搐一进一小说| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产69精品久久久久777片 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产私拍福利视频在线观看| 日韩欧美精品v在线| 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美日韩国产亚洲二区| 高清在线国产一区| 国产单亲对白刺激| 欧美日韩福利视频一区二区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲美女黄片视频| 我的老师免费观看完整版| 欧美精品亚洲一区二区| 成人欧美大片| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久精品成人免费网站| 51午夜福利影视在线观看| 99热只有精品国产| 搡老岳熟女国产| 男女午夜视频在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 超碰成人久久| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产69精品久久久久777片 | 一级作爱视频免费观看| 99在线人妻在线中文字幕| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久国产乱子伦精品免费另类| 成年版毛片免费区| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美久久黑人一区二区| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 桃色一区二区三区在线观看| 女警被强在线播放| 男插女下体视频免费在线播放| 精品免费久久久久久久清纯| 听说在线观看完整版免费高清| 日本 av在线| 亚洲真实伦在线观看| 少妇粗大呻吟视频| 精品福利观看| 国产成人av激情在线播放| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 麻豆av在线久日| av视频在线观看入口| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲中文av在线| 亚洲熟妇熟女久久| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 波多野结衣高清无吗| 久久国产精品影院| 国产精品亚洲美女久久久| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久久久国内视频| e午夜精品久久久久久久| 久久草成人影院| 三级毛片av免费| 午夜老司机福利片| 俺也久久电影网| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 中亚洲国语对白在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 香蕉丝袜av| 亚洲熟妇熟女久久| 美女免费视频网站| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲 国产 在线| 午夜福利18| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美午夜高清在线| 欧美午夜高清在线| 久久中文看片网| 亚洲av美国av| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久久久久大精品| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美zozozo另类| 亚洲五月天丁香| 亚洲五月天丁香| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日本一二三区视频观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美成狂野欧美在线观看| 久久久久国内视频| 成人手机av| 一本一本综合久久| av福利片在线| x7x7x7水蜜桃| 又爽又黄无遮挡网站| 免费在线观看成人毛片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产成人av教育| 亚洲黑人精品在线| 国产av不卡久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 日韩欧美国产一区二区入口| 婷婷精品国产亚洲av| 久久久久久久久免费视频了| 91老司机精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 免费在线观看日本一区| 亚洲中文日韩欧美视频| 日日夜夜操网爽| 一级毛片高清免费大全| 精品一区二区三区av网在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 正在播放国产对白刺激| 亚洲天堂国产精品一区在线| 午夜久久久久精精品| 午夜成年电影在线免费观看| 日本三级黄在线观看| 欧美大码av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产片内射在线| 国产人伦9x9x在线观看| xxx96com| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 丁香六月欧美| 欧美乱码精品一区二区三区| 超碰成人久久| 亚洲色图av天堂| 女同久久另类99精品国产91| 国产高清视频在线播放一区| 久久人人精品亚洲av| 国产精品久久久久久精品电影| 国产欧美日韩一区二区三| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 嫩草影院精品99| а√天堂www在线а√下载| 51午夜福利影视在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 最新在线观看一区二区三区| 国产精品久久电影中文字幕| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 99热这里只有是精品50| 日日夜夜操网爽| 久久久久免费精品人妻一区二区| 特级一级黄色大片| 婷婷亚洲欧美| 亚洲精品在线美女| 午夜福利在线在线| 男人舔奶头视频| 欧美在线黄色| 十八禁网站免费在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 一级毛片高清免费大全| 久久 成人 亚洲| 中文字幕av在线有码专区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 小说图片视频综合网站| 日韩欧美 国产精品| 一区福利在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 岛国在线观看网站| 悠悠久久av| www日本黄色视频网| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美日韩乱码在线| 亚洲五月天丁香| 国产成人影院久久av| 精品欧美国产一区二区三| 成年免费大片在线观看| 伦理电影免费视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产精品国产高清国产av| 在线观看免费视频日本深夜| 久久久久久九九精品二区国产 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 99在线视频只有这里精品首页| 美女 人体艺术 gogo| 欧美一级毛片孕妇| 日韩欧美国产在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 国产激情久久老熟女| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 午夜激情av网站| 国产爱豆传媒在线观看 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲色图av天堂| 亚洲 国产 在线| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 免费搜索国产男女视频| 免费看十八禁软件| 亚洲免费av在线视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 我的老师免费观看完整版| 丰满的人妻完整版| 亚洲一码二码三码区别大吗| 最近最新免费中文字幕在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 精品久久久久久成人av| 99热这里只有是精品50| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 搡老岳熟女国产| 天堂√8在线中文| 51午夜福利影视在线观看| 国产av又大| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品电影一区二区三区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产男靠女视频免费网站| 黄片小视频在线播放| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 日韩有码中文字幕| 久久伊人香网站| netflix在线观看网站| 在线a可以看的网站| 亚洲精品在线观看二区| 色综合亚洲欧美另类图片| 叶爱在线成人免费视频播放| 日韩大码丰满熟妇| 久久草成人影院| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美精品啪啪一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲,欧美精品.| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 色av中文字幕| 一级毛片高清免费大全| 国产黄片美女视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美午夜高清在线| 岛国在线免费视频观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 级片在线观看| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 1024香蕉在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| e午夜精品久久久久久久| 黄色毛片三级朝国网站| 黄色成人免费大全| 欧美在线黄色| 最近最新中文字幕大全免费视频| e午夜精品久久久久久久| 在线国产一区二区在线| 一进一出抽搐gif免费好疼| 99久久精品热视频| 舔av片在线| 黄片大片在线免费观看| 欧美中文日本在线观看视频| 波多野结衣巨乳人妻| 日本成人三级电影网站| 美女大奶头视频| 亚洲国产欧美人成| 午夜精品在线福利| 日本在线视频免费播放| 超碰成人久久| 免费看a级黄色片| av有码第一页| 黄片大片在线免费观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 精品欧美国产一区二区三| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲一区二区三区不卡视频| 精品日产1卡2卡| 久久久久久久久免费视频了| 国产精品99久久99久久久不卡| 日韩欧美精品v在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 俺也久久电影网| 色av中文字幕| 欧美性长视频在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 极品教师在线免费播放| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产精品电影一区二区三区| av福利片在线观看| 精品国产美女av久久久久小说| 免费搜索国产男女视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 又黄又粗又硬又大视频| 男人舔奶头视频| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久精品91无色码中文字幕| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产黄色小视频在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 99精品在免费线老司机午夜| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲av五月六月丁香网| 国产三级在线视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 老鸭窝网址在线观看| 日本三级黄在线观看| 国产精品免费视频内射| 国产av一区二区精品久久| 欧美zozozo另类| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产精品乱码一区二三区的特点| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美日韩乱码在线| 成人国语在线视频| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲乱码一区二区免费版| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 99久久精品国产亚洲精品| 天天一区二区日本电影三级| 国产在线观看jvid| 久久中文字幕一级| 免费看日本二区| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲成人国产一区在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品一区二区三区av网在线观看| 午夜视频精品福利| 国产三级黄色录像| 午夜激情福利司机影院| 中文资源天堂在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 黄色视频,在线免费观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美在线黄色| 中亚洲国语对白在线视频| 中文在线观看免费www的网站 | 90打野战视频偷拍视频| 欧美色视频一区免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 丝袜美腿诱惑在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 白带黄色成豆腐渣| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲国产欧美网| 色在线成人网| 久久精品国产亚洲av高清一级| 成人亚洲精品av一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| 国产高清视频在线观看网站| 国产真实乱freesex| 国产成人精品久久二区二区免费| 最好的美女福利视频网| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲在线自拍视频| 久久精品人妻少妇| 91av网站免费观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产精品免费视频内射| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄色毛片三级朝国网站| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲国产精品成人综合色| √禁漫天堂资源中文www| 日本黄色视频三级网站网址| 91成年电影在线观看| 久久草成人影院| 一级黄色大片毛片| www.999成人在线观看| 在线观看日韩欧美| 天天一区二区日本电影三级| 午夜免费观看网址| 一进一出抽搐动态| 不卡av一区二区三区| 亚洲片人在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产熟女xx| 男女午夜视频在线观看| 免费搜索国产男女视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲精品久久国产高清桃花| 欧美乱码精品一区二区三区| 丁香欧美五月| 久久久国产成人免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 十八禁网站免费在线| 成人国语在线视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲无线在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 一区二区三区高清视频在线| 欧美在线一区亚洲| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 90打野战视频偷拍视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美日韩乱码在线| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 搡老岳熟女国产| 亚洲人成电影免费在线| 国产黄片美女视频| 极品教师在线免费播放| 一本精品99久久精品77| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 99久久国产精品久久久| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲性夜色夜夜综合| 伦理电影免费视频| 最好的美女福利视频网| 黄片大片在线免费观看| 香蕉久久夜色| 国产高清视频在线观看网站| 婷婷丁香在线五月| 999久久久国产精品视频| 大型av网站在线播放| 波多野结衣巨乳人妻| 国产免费av片在线观看野外av| 久99久视频精品免费| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 一本精品99久久精品77| 欧美av亚洲av综合av国产av| 99在线视频只有这里精品首页| 婷婷亚洲欧美| 九九热线精品视视频播放| 精品久久久久久久久久久久久| 日韩免费av在线播放| 18美女黄网站色大片免费观看| 无限看片的www在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产激情久久老熟女| 久久精品人妻少妇| 国产成人影院久久av| 亚洲最大成人中文| 久久精品综合一区二区三区| 精品久久久久久久久久久久久| 国产精品久久久av美女十八| 99精品久久久久人妻精品| 手机成人av网站| 久久久国产精品麻豆| 91老司机精品| 日本 av在线| 桃红色精品国产亚洲av| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲国产精品999在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲一区中文字幕在线| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲五月天丁香| 欧美高清成人免费视频www| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产成人精品久久二区二区91| 男女那种视频在线观看| 在线永久观看黄色视频| 99久久综合精品五月天人人| 日韩精品青青久久久久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| 婷婷亚洲欧美| 亚洲九九香蕉| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲精品色激情综合| 国产久久久一区二区三区| 搡老岳熟女国产| 久久这里只有精品19| 老汉色∧v一级毛片| 在线观看午夜福利视频| 日本熟妇午夜| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲 欧美一区二区三区| 丰满人妻一区二区三区视频av | 免费无遮挡裸体视频| 一个人免费在线观看电影 | 精品高清国产在线一区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 一本精品99久久精品77| 婷婷六月久久综合丁香| 色综合欧美亚洲国产小说| 人人妻人人澡欧美一区二区| av福利片在线| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产精品久久视频播放| 欧美精品啪啪一区二区三区| 在线观看美女被高潮喷水网站 | aaaaa片日本免费| 嫩草影视91久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | av福利片在线| 久久久久久免费高清国产稀缺| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲18禁久久av| 亚洲av成人精品一区久久| 变态另类丝袜制服| 无限看片的www在线观看| 中国美女看黄片| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久性视频一级片| 精品不卡国产一区二区三区| 色播亚洲综合网| 欧美激情久久久久久爽电影| 欧美日韩乱码在线| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 国产激情偷乱视频一区二区| АⅤ资源中文在线天堂| 怎么达到女性高潮| 男女床上黄色一级片免费看| 高清在线国产一区| 两个人免费观看高清视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美在线黄色| 成人三级做爰电影| 啦啦啦免费观看视频1| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 中文字幕熟女人妻在线| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日本黄大片高清| 国产成人aa在线观看| 午夜福利高清视频| 国产成人aa在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av福利片在线| 18禁观看日本| 国产成人aa在线观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 无限看片的www在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 亚洲人与动物交配视频| 男人舔奶头视频| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲熟妇熟女久久| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 久久亚洲真实| 日本黄大片高清| 国产真实乱freesex| 日本五十路高清| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产三级在线视频| 精品日产1卡2卡| 国产高清激情床上av| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲av电影在线进入| 香蕉久久夜色| 岛国在线免费视频观看| 精品福利观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产99白浆流出| 热99re8久久精品国产| 国产亚洲精品第一综合不卡| 欧美一级毛片孕妇| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲天堂国产精品一区在线|