馬波沙星在健康小鼠和感染多殺性巴氏桿菌小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)比較

瞿　穎， 盧　燕， 孫美珍， 李曉虹， 仇珍珍， 曹長(zhǎng)福， 曾振靈

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院， 廣東 廣州 510642)

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馬波沙星在健康小鼠和感染多殺性巴氏桿菌小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)比較

瞿穎， 盧燕， 孫美珍， 李曉虹， 仇珍珍， 曹長(zhǎng)福， 曾振靈

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院， 廣東 廣州 510642)

摘要：【目的】建立小鼠肺部感染多殺性巴氏桿菌Pasteurella multocida模型，研究馬波沙星在健康小鼠和肺部感染的小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)，通過分析比較兩者的藥動(dòng)學(xué)參數(shù),優(yōu)化臨床給藥。【方法】采用氣管插管法對(duì)小鼠進(jìn)行肺部感染，對(duì)感染小鼠和健康小鼠按體質(zhì)量單劑量皮下注射2 mg·kg-1的馬波沙星，用高效液相色譜法測(cè)定血漿中馬波沙星的濃度。用WinNonlin5.2.1軟件提供的非房室模型處理血漿藥物濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)?！窘Y(jié)果】馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)得到的藥時(shí)曲線下面積(AUC)為4.58 μg·mL-1·h、峰質(zhì)量濃度(Cmax)為0.97 μg·mL-1、平均滯留時(shí)間(MRT)為5.62 h，均顯著高于(P<0.05)在健康小鼠體內(nèi)得到的AUC (1.67 μg·mL1·h)、Cmax(0.68 μg·mL-1)、MRT (2.63 h)，而表觀分布容積(V/F) 3.12 L·kg-1和體清除率(Cl /F) 0.42 L·kg-1·h-1均顯著低于(P<0.05)健康小鼠體內(nèi)的V/F (8.61 L·kg-1)和Cl/F (1.07 L·kg-1·h-1)?！窘Y(jié)論】多殺性巴氏桿菌感染顯著增加了馬波沙星的AUC、Cmax、MRT，并降低了V/F、Cl/F，而其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無顯著性差異。

關(guān)鍵詞：馬波沙星； 藥代動(dòng)力學(xué)； 多殺性巴氏桿菌； 肺部感染; 小鼠

藥代動(dòng)力學(xué)(Pharmacokinetics，簡(jiǎn)稱藥動(dòng)學(xué))主要研究藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝與棑泄過程及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)一些疾病可以改變藥物的吸收、分布、代謝及棑泄，而病理模型的藥動(dòng)學(xué)研究，尤其是疾病對(duì)抗菌藥的藥動(dòng)學(xué)影響，已成為獸醫(yī)藥動(dòng)學(xué)研究的重要內(nèi)容。因此，開展抗菌藥在疾病機(jī)體的藥動(dòng)學(xué)研究，將能更有效、更有針對(duì)性地制訂給藥方案，指導(dǎo)臨床合理用藥[1]。自從抗生素時(shí)代的到來，動(dòng)物感染模型就被廣泛用于評(píng)估抗生素在臨床治療時(shí)的藥效，而中性粒細(xì)胞減少的小鼠大腿模型和肺炎模型等也被廣泛用于抗生素藥物的PK/PD研究中[2-3]，從動(dòng)物模型上得到的藥效結(jié)果能夠較好地指導(dǎo)其在人醫(yī)及獸醫(yī)上的合理用藥[4]。多殺性巴氏桿菌Pasteurellamultocida是一種可引起多種動(dòng)物及人類感染發(fā)病的重要人畜共患性病原菌，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)危害嚴(yán)重，馬波沙星(Marbofloxacin)對(duì)多殺性巴氏桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性，本文探討馬波沙星在健康小鼠和肺部感染多殺性巴氏桿菌小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征，旨在為臨床制訂合理的給藥方案提供理論依據(jù) 。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器與試劑高效液相色譜儀：Waters Alliance2695型，包含四元梯度高精密度輸液泵、2475型熒光檢測(cè)器、真空在線脫氣系統(tǒng)。色譜分析柱：Hypersil BDS-C18，5 μm， 4.6 mm×250 mm，美國(guó)Thermo公司。Y型留置針：規(guī)格：0.9 mm(22 G)。

馬波沙星制劑：規(guī)格為50 mL∶5 g，保定冀中藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；馬波沙星對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.0%，氧氟沙星(Ofloxacin)對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 98.2%，均購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所；環(huán)磷酰胺，阿拉丁試劑公司產(chǎn)品；戊巴比妥鈉為翔博生物公司產(chǎn)品。三氯甲烷，氫氧化鈉，磷酸氫二銨和四丁集溴化銨均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

1.1.2溶液配制馬波沙星標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 000 μg·mL-1)：精密稱取馬波沙星對(duì)照品50.50 mg于50 mL棕色容量瓶中，用少量0.1 moL·L-1的NaOH溶液助溶，以超純水定容至刻度，置于-20 ℃冰箱保存。

氧氟沙星(內(nèi)標(biāo))儲(chǔ)備液：精密稱取10.18 mg氧氟沙星對(duì)照品于100 mL棕色容量瓶中，以超純水溶解定容至刻度，置于-20 ℃冰箱保存。

磷酸氫二銨-四丁基溴化銨緩沖液：準(zhǔn)確稱取4 g磷酸氫二銨和4 g四丁基溴化銨，超純水溶解后，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.7，定容至1 L，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后，超聲脫氣，備用。

0.01 g·mL-1戊巴比妥鈉溶液：準(zhǔn)確稱取0.1 g戊巴比妥鈉，溶于10 mL生理鹽水中，用0.22 μm濾膜，過濾除菌，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.1.3試驗(yàn)動(dòng)物與菌株6周齡雌性SPF-ICR小鼠，體質(zhì)量22～25 g，購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。購(gòu)買后自由采食，觀察1周，未出現(xiàn)任何異常反應(yīng)，進(jìn)行試驗(yàn)。

多殺性巴氏桿菌CVCC411，Heddleston血清型：2，購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.2方法

1.2.1建立小鼠肺部感染模型制備多殺性巴氏桿菌菌液:將凍存的多殺性巴氏桿菌CVCC411菌種復(fù)蘇，接種于胰蛋白大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)中，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期時(shí)，4 ℃，4 000 r·min-1離心富集，用生理鹽水重懸浮菌液，調(diào)整菌液濃度為108CFU·mL-1，備用。

小鼠肺部感染模型：在小鼠肺部感染前，建立小鼠中性粒細(xì)胞減少癥模型，即小鼠按劑量150 mg·kg-1·d-1，連續(xù)腹腔注射環(huán)磷酰胺4 d，小鼠再按劑量100 mg·kg-1·d-1腹腔注射環(huán)磷酰胺1 d，然后通過小鼠后眼眶靜脈叢穿刺采血，若中性粒細(xì)胞數(shù)量<100 mm-3，則小鼠達(dá)到免疫抑制，可以進(jìn)行下一步試驗(yàn)[5-6]。

小鼠肺部感染多殺性巴氏桿菌采用氣管插管法，操作步驟如下：用膠帶將Y型靜脈留置針 PVC 軟管橫向固定在木板上緣(軟管水平放置)，預(yù)先注入 0.05 mL上述制備的多殺性巴氏桿菌菌液在軟管內(nèi)；使用 0.01 g·mL-1戊巴比妥鈉溶液50 mg·kg-1麻醉小鼠，待小鼠舌頭可以拉出至口腔外時(shí)，用絲線掛住小鼠門牙將小鼠懸掛在60°傾斜的木板上；透射燈對(duì)準(zhǔn)小鼠頸部打開光源；調(diào)整小鼠傾斜角度，直至通過口腔可清晰看到聲門裂，手持套管針通過聲門裂，此時(shí)若成功插入氣道，事先注入套管針管內(nèi)液體會(huì)隨著呼吸左右波動(dòng)，以此確認(rèn)插管成功；用 0.8 mL 氣體將菌液沖入氣道內(nèi)，迅速?gòu)臍獾腊纬鎏坠茚?，懸掛約 5~10 s 后將小鼠放下保溫[7-9]。

小鼠肺部感染多殺性巴氏桿菌后，小鼠于感染后2、5、10、24 h分別處死，無菌取出小鼠的肺部，置于無菌玻璃研磨器內(nèi)，加入5 mL的無菌生理鹽水，研磨均勻，吸取0.1 mL菌液系列倍比稀釋，從每管稀釋液中吸取20 μL稀釋液，分別懸滴于1/4的TSA瓊脂平板上，晾干后置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h，平板進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)，單位為CFU。

1.2.2小鼠血漿中馬波沙星的檢測(cè)方法色譜條件及工作指標(biāo)： 流動(dòng)相為V(四丁基溴化銨-磷酸氫二銨緩沖液)∶V(甲醇)= 75∶25；流速為0.8 mL·min-1；熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)為295 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 500 nm。

樣品的前處理：根據(jù)單奇[10]報(bào)道的方法做了修改，血漿樣品解凍后，吸取100 μL樣品于離心管中，加入10 μL氧氟沙星，渦旋混勻，然后加入3 mL三氯甲烷，充分渦旋后，6 000 r·min-1離心10 min，將下層有機(jī)相轉(zhuǎn)移至試管中，在40 ℃水浴下吹干，用200 μL流動(dòng)相溶解，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾，置于進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)。20 μL樣品供HPLC分析。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：取適量馬波沙星標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 000 μg·mL-1)，用超純水稀釋成50.0、20.0、10.0、5.0、1.0、0.5、0.1 μg·mL-1的系列工作液。將上述工作液系列添加于空白小鼠血漿中，并添加一定量氧氟沙星，得到一系列標(biāo)準(zhǔn)添加樣品，渦旋混勻，按照上述“樣品的前處理”方法處理后，取20 μL樣品供HPLC分析，以馬波沙星與內(nèi)標(biāo)的色譜峰面積之比(S)為橫坐標(biāo)，以添加的藥物質(zhì)量濃度(C)為縱坐標(biāo)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)。

1.2.3馬波沙星在感染小鼠和健康小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究中性粒細(xì)胞減少的小鼠氣管接菌108CFU·mL-1，50 μL的多殺性巴氏桿菌CVCC411，肺部感染10 h后，將小鼠分為6組，每組4只，共24只感染小鼠，按小鼠體質(zhì)量單劑量皮下注射2 mg·kg-1的馬波沙星，采樣時(shí)間點(diǎn)為0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、12和24 h。每組的4只小鼠采取拼點(diǎn)法通過后眼眶靜脈叢采血[11]，即4只感染小鼠的血樣濃度拼成1條藥動(dòng)學(xué)曲線，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)有6個(gè)重復(fù)。未感染的健康小鼠共24只，按2 mg·kg-1劑量皮下注射馬波沙星，分組和血樣采集點(diǎn)與感染小鼠的分組和采樣點(diǎn)一致，將采集的血液置于含肝素抗凝劑的離心管中，離心10 min(4 ℃、4 000 r·min-1)，將血漿保存于-20 ℃條件下，待測(cè)。血漿樣品濃度的測(cè)定如“1.2.2”中“樣品前處理”所述。

2結(jié)果與分析

2.1小鼠氣管插管法成功率

試驗(yàn)中共成功進(jìn)行100多次小鼠氣管插管。插管后的小鼠成活率達(dá)到90%以上，少數(shù)小鼠死亡的原因是由于插管時(shí)間過長(zhǎng)，導(dǎo)致小鼠窒息，或者補(bǔ)氣速度過快，導(dǎo)致肺氣腫。氣管插管、滴注操作本身耗時(shí)為每只動(dòng)物 0.5~1 min，但由于麻醉處理及其他準(zhǔn)備操作耗時(shí)，平均每只動(dòng)物耗時(shí) 5~6 min(每批約為30次操作)。

2.2巴氏桿菌在感染小鼠肺部的生長(zhǎng)結(jié)果

Y型留置針軟管內(nèi)的多殺性巴氏桿菌菌液量為106.81CFU，小鼠氣管插管接菌后，小鼠于感染后2、5、10、24 h處死，無菌取出肺部，研磨，進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。巴氏桿菌在小鼠肺部生長(zhǎng)的各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)菌數(shù)量如表1所示。

表1不同時(shí)間點(diǎn)多殺性巴氏桿菌在小鼠肺內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量1)

Tab.1Colony counts of Pasteurella multocida in the lungs of infected mice at different time

感染時(shí)間/h肺部菌落計(jì)數(shù)log10CFU26.15±0.2156.60±0.15107.38±0.19248.92±0.40

1)表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，n=5。

由表1可以看出，該氣管插管法平行性較好，使得小鼠的肺部接菌量較為一致，感染2 h后測(cè)得的小鼠肺部菌量略少于初始的接菌量，表明通過該氣管插管法，大部分的菌液均分散于肺部中，小鼠感染10 h時(shí)，肺部菌量大約達(dá)到107.5CFU，而且小鼠表現(xiàn)出嗜睡，呼吸急促，沒有食欲等臨床癥狀，以此作為給藥治療的起始點(diǎn)。小鼠感染24 h后，表現(xiàn)出極度呼吸困難，結(jié)膜炎，瀕臨死亡的癥狀。

2.3檢測(cè)方法的特異性

小鼠血漿中馬波沙星在0.01~5.00 μg·mL-1范圍內(nèi)線性良好，絕對(duì)回收率≥81.81%，批內(nèi)變異系數(shù)為1.74%~7.67%，批間變異系數(shù)為5.60%~6.70%，小鼠血漿中馬波沙星的定量限為0.01 μg·mL-1，檢測(cè)限為0.005 μg·mL-1。

根據(jù)試驗(yàn)得到的色譜圖，馬波沙星的保留時(shí)間是9.28 min，而氧氟沙星的保留時(shí)間是12.18 min，馬波沙星和內(nèi)標(biāo)氧氟沙星分開，峰形良好，附近無雜質(zhì)峰干擾。

2.4馬波沙星在感染和健康小鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)比較

健康的小鼠和肺部感染多殺性巴氏桿菌10 h后的小鼠，分別單劑量皮下注射馬波沙星(2 mg·kg-1)獲得不同時(shí)間點(diǎn)血藥質(zhì)量濃度的實(shí)測(cè)值，見表2。

健康和感染的小鼠單劑量皮下注射馬波沙星后，血漿中馬波沙星的藥物濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)采用WinNolin5.2.1軟件提供的非房室模型進(jìn)行處理。根據(jù)血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，計(jì)算得到藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表3。

用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS對(duì)表3中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果表明，馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)的峰質(zhì)量濃度(Cmax)，藥時(shí)曲線下面積(AUC)，表觀分布容積(V/F)，體清除率(Cl/F)，一階矩曲線下面積(AUMC)，平均滯留時(shí)間(MRT)與在未感染小鼠體內(nèi)的值有顯著性差異(P<0.05)。而馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)的半衰期和達(dá)峰時(shí)間與在健康小鼠體內(nèi)的值差異不顯著(P>0.05)。

表2健康和感染多殺性巴氏桿菌的小鼠單劑量皮下注射2 mg·kg-1馬波沙星后的血藥濃度1)

Tab.2Plasma concentration of marbofloxacin after a single subcutaneous administration (2 mg·kg-1) in healthy mice and in mice with Pasteurella multocida infection

采血時(shí)間/h血藥質(zhì)量濃度/(μg·mL-1)感染小鼠健康小鼠0.0830.21±0.170.25±0.030.250.83±0.110.51±0.110.50.84±0.150.64±0.070.750.92±0.110.63±0.0710.86±0.130.58±0.0820.42±0.060.27±0.0840.37±0.050.07±0.0160.25±0.020.06±0.0180.20±0.020.04±0.01120.10±0.040.03±0.01240.02±0.00ND2)

表3健康和感染的小鼠皮下注射馬波沙星(2 mg·kg-1)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)1)

Tab.3Pharmacokinetic parameters of marbofloxacin after a single subcutaneous administration (2 mg·kg-1) in healthy and infected mice

組別λz/(h-1)t1/2λz/htmax/hCmax/(μg·mL-1)AUC/(μg·mL-1·h)健康小鼠0.12±0.025.65±0.690.63±0.140.68±0.041.67±0.16感染小鼠0.14±0.015.09±0.500.71±0.190.97±0.08*4.58±0.44*組別V∶F/(L·kg-1)Cl∶F/(L·kg-1·h-1)AUMC/(h·μg·mL-1·h)MRT/h健康小鼠8.61±0.721.07±0.134.40±0.692.63±0.24感染小鼠3.12±0.56*0.42±0.04*25.83±3.42*5.62±0.31*

3討論與結(jié)論

3.1關(guān)于小鼠肺部感染的方法選擇

研究馬波沙星在小鼠肺部感染多殺性巴氏桿菌情況下的藥動(dòng)學(xué)，最基礎(chǔ)的工作是建立小鼠肺部感染模型。藥動(dòng)學(xué)研究是多樣本的重復(fù)、統(tǒng)計(jì)的過程，重復(fù)包括相同和不同時(shí)間的重復(fù)，要求動(dòng)物間的個(gè)體差異要小，得出的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)才有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此在小鼠肺部感染方法的選擇上，筆者進(jìn)行了多種嘗試。

參考Craig等[2]采用的小鼠滴鼻法，小鼠麻醉后，用移液器吸取108CFU的肺炎鏈球菌菌液50 μL，進(jìn)行小鼠滴鼻。經(jīng)過多次重復(fù)試驗(yàn)，結(jié)果表明，該法并不適用。因?yàn)?0 μL的菌液并不能完全吸入肺部，而是大部分留在鼻腔中，部分小鼠能夠感染，而部分小鼠不能夠感染，使得動(dòng)物間的感染差異很大，試驗(yàn)的重復(fù)性不好。而采用暴露氣管法進(jìn)行小鼠肺部感染時(shí)，該法創(chuàng)傷性較大，小鼠手術(shù)后存活率較低，不利于后續(xù)的研究，因此不采用該法。

借鑒Ferran等[12]小鼠肺部感染巴氏桿菌的方法，將導(dǎo)管從口腔中插入氣管，將菌液注射入肺部，但其使用的是光纖引入口腔內(nèi)照明的自制設(shè)備進(jìn)行氣管插管，設(shè)計(jì)成本高。因此參考賈曉峰等[9]的小鼠氣管插管法，并做了相應(yīng)的改進(jìn)，利用簡(jiǎn)單的Y型留置針，冷光源及自制的小鼠固定簡(jiǎn)易裝置，就能迅速，準(zhǔn)確地進(jìn)行小鼠肺部感染。

3.2多殺性巴氏桿菌在小鼠肺部的生長(zhǎng)

小鼠感染多殺性巴氏桿菌后，肺部細(xì)菌數(shù)量隨著感染的時(shí)間持續(xù)增長(zhǎng)，感染10 h時(shí)，小鼠出現(xiàn)嗜睡，呼吸急促，沒有食欲等臨床癥狀，此時(shí)開始皮下注射馬波沙星，以模擬臨床實(shí)際過程中出現(xiàn)癥狀開始給藥治療。Ferran等[12]的研究中，小鼠肺部初始感染多殺性巴氏桿菌,肺部菌量為 1 000 CFU，感染32 h時(shí)，肺部菌量達(dá)到106~109CFU，而小鼠表現(xiàn)出呼吸困難，嗜睡，脫水的臨床癥狀，馬波沙星于這個(gè)時(shí)間點(diǎn)開始給藥。以模擬臨床上出現(xiàn)病癥后的給藥治療，本研究中小鼠給藥治療前的肺部多殺性巴氏桿菌的菌量為107CFU，小鼠表現(xiàn)出呼吸急促的癥狀，與Ferran等[12]報(bào)道的感染32 h后給藥相似，因此得到的數(shù)據(jù)具有可比性。

3.3馬波沙星在小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究

Ferran等[12]報(bào)道小鼠感染32 h后腹腔注射10 mg·kg-1的馬波沙星得到的AUC為27 μg·mL-1·h，體清除率為0.370 L·kg-1·h-1，Cmax為6.1 μg·mL-1，馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)為線性藥動(dòng)學(xué)，即獲得的AUC和Cmax與給藥劑量成正比。而本試驗(yàn)2 mg·kg-1馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)的AUC為4.58 μg·mL-1·h，體清除率為0.42 L·kg-1·h-1，Cmax為0.97 μg·mL-1，與Ferran等[12]報(bào)道的一致。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示馬波沙星在感染小鼠體內(nèi)得到的AUC為4.58 μg·mL-1·h、Cmax為0.97 μg·mL-1、MRT為5.62 h，均高于(P<0.05)在健康小鼠體內(nèi)得到的AUC(1.67 μg·mL-1·h)、Cmax(0.68 μg·mL-1)、MRT (2.63 h)，而表觀分布容積3.12 L·kg-1和體清除率0.42 L·kg-1·h-1均低于(P<0.05)健康小鼠體內(nèi)的表觀分布容積(8.61 L·kg-1)和體清除率(1.07 L·kg-1·h-1)。這表明急性的多殺性巴氏桿菌感染能夠顯著地改變馬波沙星在動(dòng)物體內(nèi)的分布、消除和代謝，感染動(dòng)物體內(nèi)體清除率下降可能是由于多殺性巴氏桿菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素使得動(dòng)物肝、腎組織遭到破壞，從而使得藥物的代謝變慢。

Ferran等[13]和Kesteman等[14]的研究中均表明動(dòng)物感染部位的菌量的高低會(huì)改變藥物的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，Ismail 等[15]研究了馬波沙星在健康奶牛和溶血性曼氏桿菌感染奶牛血漿的藥動(dòng)學(xué)特征，研究發(fā)現(xiàn)，馬波沙星在感染牛體內(nèi)AUC 明顯增大，高達(dá) 25.54 μg·mL-1·h，而健康奶牛的AUC僅為12.00 μg·mL-1·h。Abo-El-Sound等[16]研究了多殺性巴氏桿菌感染對(duì)馬波沙星在兔體內(nèi)肌注和靜注后藥動(dòng)學(xué)特征的影響，結(jié)果表明馬波沙星在感染兔體內(nèi)的Cmax、MRT、AUC及t1/2β均高于健康兔體內(nèi)得到的值，而體清除率低于健康兔體內(nèi)得到的值。

氟喹諾酮類抗菌譜較廣，為濃度依賴性藥物。研究表明，當(dāng)氟喹諾酮類藥物達(dá)到AUC/MIC≥125 h、Cmax/MIC≥10時(shí)，其對(duì)臨床病原菌起到很好的抗菌效果，而且Cmax/MIC為8~10，能減少藥物耐藥性的產(chǎn)生[16]。從本研究結(jié)果可以看出，馬波沙星在感染動(dòng)物體內(nèi)將達(dá)到更高的AUC/MIC和Cmax/MIC，因此可以達(dá)到優(yōu)化臨床給藥劑量并減少藥物耐藥性的效果。

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【責(zé)任編輯柴焰】

Comparison of pharmacokinetics of marbofloxacin in healthy mice and in mice infected with Pasteurella multocida

QU Ying, LU Yan, SUN Meizhen, LI Xiaohong, QIU Zhenzhen, CAO Changfu, ZENG Zhenling

(College of Veterinary Medicine， South China Agricultural University, Guangzhou 510642， China)

Abstract：【Objective】 On the basis of the establishment of a mouse lung model of Pasteurella multocida infection, the present study was conducted to characterize the pharmacokinetic properties of marbofloxacin in both healthy and infected mice, and to optimize clinical efficacy by analyzing and comparing the pharmacokinetic parameters.【Method】 Neutropenic mice were infected with P. multocida using endotracheal intubation. The lung infected and healthy mice were each administrated a single subcutaneous dose of 2 mg·kg-1marbofloxacin based on their body masses. Marbofloxacin concentrations in the plasma were measured by high performance liquid chromatography. The plasma drug concentration-time data were analyzed by the noncompartment model of WinNonlin5.2.1 software.【Result】For marbofloxacin in infected mice, the area under the plasma drug concentration-time curve (AUC) was 4.58 μg·mL-1·h, the maximum concentration (Cmax) was 0.97 μg·mL-1and mean residence time (MRT) was 5.62 h, which were all significantly higher compared to marbofloxacin in healthy mice with 1.67 μg·mL-1·h AUC, 0.68 μg·mL-1Cmax，and 2.63 h MRT (P<0.05). However, the apparent volume of distribution (V/F) was 3.12 L·kg-1and clearance (Cl/F) was 0.42 L·kg-1·h-1for marbofloxacin in infected mice, both were significantly lower than those in healthy mice with 8.61 L·kg-1V/F and 1.07 L·kg-1·h-1Cl/F (P<0.05).【Conclusion】 P.multocida infection significantly increased the AUC，Cmax，MRT of marbofloxacin, reduced the V/F，Cl/F，but had no significant impact on the other pharmacokinetic parameters of marbofloxacin.

Key words：marbofloxacin; pharmacokinetics; Pasteurella multocida; lung infection; mouse

中圖分類號(hào)：S859.7

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001- 411X(2016)02- 0014- 06

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金(31372480)

作者簡(jiǎn)介：瞿穎(1990—)，女，碩士研究生，E-mail：952605105@qq.com；通信作者：曾振靈(1963—)，男，教授，博士，E-mail: zlzeng@scau.edu.cn

收稿日期：2015- 05- 07優(yōu)先出版時(shí)間：2016- 01- 18

優(yōu)先出版網(wǎng)址：http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20160118.1513.002.html

瞿穎， 盧燕， 孫美珍，等.馬波沙星在健康小鼠和感染多殺性巴氏桿菌小鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)比較[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2016,37(2):14- 19.