利用煙葉副產(chǎn)物輔以棉籽殼栽培杏鮑菇

周佳燕，肖 梅，趙 峰，高 琴，李 娜，朱啟法

（安徽皖南煙葉有限責(zé)任公司，安徽 宣城 242000）

利用煙葉副產(chǎn)物輔以棉籽殼栽培杏鮑菇

周佳燕，肖 梅，趙 峰，高 琴，李 娜，朱啟法*

（安徽皖南煙葉有限責(zé)任公司，安徽 宣城 242000）

利用煙葉副產(chǎn)物添加不同比例棉籽殼栽培杏鮑菇（Pleurotus eryngii），以棉籽殼為主培養(yǎng)料作為對(duì)照，試驗(yàn)表明，廢棄煙葉渣及秸稈添加一定比例的棉籽殼可以用來栽培杏鮑菇；棉籽殼在栽培料中加入比例為25%時(shí)，有利于杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)，縮短子實(shí)體采收時(shí)間，產(chǎn)量提高；經(jīng)檢測(cè)，子實(shí)體中SOD（superoxide dismutase，超氧化物歧化酶）、CAT（catalase，過氧化氫酶）酶活性及MDA（malondialdehyde，丙二醛）指標(biāo)均與對(duì)照組差異不大，且子實(shí)體可溶性蛋白、可溶性糖含量分別為19.08 mg·g－1、4.721 μg·g－1，均高于對(duì)照組中子實(shí)體含量，可進(jìn)一步探索。

煙葉渣；煙秸稈；杏鮑菇；棉籽殼

中國(guó)作為世界煙草種植大國(guó)，每年煙葉采收后會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄秸稈。對(duì)于廢棄煙秸稈的利用，研究報(bào)告顯示煙秸稈被用來造紙[1]、種植食用菌[2－4]、作生物肥[5]等，但多數(shù)仍被直接還田或焚燒。煙草在田間管理、烘烤、分級(jí)、復(fù)烤等過程中也會(huì)產(chǎn)生大量廢棄煙葉。對(duì)這部分廢棄煙葉則被用于提取煙堿制成農(nóng)藥，提取茄尼醇生產(chǎn)輔酶Q10藥物，提取新鮮煙葉的大豆蛋白作為飼料添加劑等[6－8]。

杏鮑菇（Pleurotus eryngii） 為木腐菌，有很強(qiáng)的分解木質(zhì)素和纖維素的能力[9]。而廢棄煙葉渣及秸稈含有大量的木質(zhì)素和纖維素，其營(yíng)養(yǎng)完全可以滿足杏鮑菇生長(zhǎng)需要[2，10]。筆者在前期研究基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)，同時(shí)在廢棄煙葉渣及秸稈中加入棉籽殼對(duì)杏鮑菇生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，因此希望進(jìn)一步嘗試將兩者結(jié)合并添加不同比例的棉籽殼，從而篩選出適宜杏鮑菇生長(zhǎng)的栽培料配方，為煙葉副產(chǎn)物的處理探索一種適宜的處理方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及地點(diǎn)

1.1.1 菌種

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）興科11號(hào)菌株，由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所提供。

1.1.2 培養(yǎng)料

試管種培養(yǎng)基：PDA（Potato Dextrose Agar，馬鈴薯葡萄糖瓊脂）培養(yǎng)基。

對(duì)照組栽培料：棉籽殼78%、麥麩15%、玉米粉5%、石膏1%、石灰1%，自然pH，含水量65%，作對(duì)照。

1.1.3 其它主料

廢棄煙葉渣及秸稈，由安徽皖南煙葉有限責(zé)任公司提供，當(dāng)年產(chǎn)、干燥、無霉變。

1.1.4 試驗(yàn)地點(diǎn)

浙江大學(xué)作物所實(shí)驗(yàn)室。

1.2 方法

1.2.1 廢棄煙葉渣及秸稈栽培料制備

廢棄煙葉去煙堿：加5倍以上的水，均勻攪拌，水溫加到65℃左右，用NaOH調(diào)節(jié)pH為11，浸泡10 h～11 h，自然冷卻后，用清水漂洗，使之pH接近7，撈出，烘干，切絲。廢棄煙葉完成上述去煙堿后備用[10]。將干燥的煙秸稈粉碎至1 mm～3 mm備用[2－3]。

將烘干后的煙葉渣、煙秸稈末，按照一定比例，添加不同比例的棉籽殼，輔之相同比例的麩皮、玉米粉、生石灰、石膏混合均勻，設(shè)置6種配方（表1），裝入1 100 mL塑料栽培瓶中，每個(gè)配方重復(fù)6瓶，隨機(jī)排列。裝瓶前加水預(yù)濕12 h，含水量控制在65%左右，充分濕潤(rùn)。裝瓶后密封，在121℃高溫高壓下滅菌120 min。

表1 杏鮑菇不同培養(yǎng)料配方Tab.1 Proportion of each test formula for Pleurotus eryngii cultivation

1.2.2 菌絲及子實(shí)體產(chǎn)量測(cè)定方法

將接種完成的栽培瓶移入25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)，每隔3 d觀察1次，檢查并記錄菌絲滿瓶生長(zhǎng)狀況、菌絲滿瓶時(shí)間、雜菌污染瓶數(shù)。

將搔菌后的栽培瓶，移入光照培養(yǎng)箱，設(shè)置溫度17℃，濕度75%～85%，光照500 lx～1 000 lx，每隔3 d觀察記錄子實(shí)體長(zhǎng)勢(shì)、采收時(shí)間、單瓶產(chǎn)量，綜合比較篩選出適宜的配方。

1.2.3 子實(shí)體營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

將篩選出的適宜配方及對(duì)照組（CK）培養(yǎng)的杏鮑菇，分別進(jìn)行取樣，重復(fù)3次，測(cè)量子實(shí)體營(yíng)養(yǎng)成分?？扇苄蕴菧y(cè)定參照蒽酮比色法[11]；可溶性蛋白含量測(cè)定參照考馬斯亮藍(lán)G－250染色法[12]；超氧化物歧化酶（SOD）活性測(cè)定參照王愛國(guó)等[13]方法；過氧化氫酶（CAT）活性測(cè)定參照高錳酸鉀滴定法[14]；丙二醛（MDA）含量測(cè)定參照硫代巴比妥酸法[15]。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

采用SAS 8.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行因子分析和綜合分析，評(píng)估各個(gè)群體間最小顯著差異范圍（P＜0.05）。

2 結(jié)果

2.1 菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)狀況比較

不同培養(yǎng)料中杏鮑菇菌絲、子實(shí)體生長(zhǎng)狀況見表2。

表2 不同培養(yǎng)料中杏鮑菇菌絲、子實(shí)體生長(zhǎng)狀況Tab.2 Growth and fruiting of Pleurotus eryngii in different substrates

由表2可知，配方B中當(dāng)棉籽殼含量為25%時(shí)，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間最短為（32±1）d、61 d，且菌絲長(zhǎng)勢(shì)良好污染率為0，均優(yōu)于對(duì)照組配方；配方C中棉籽殼含量為35%，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間較之于其它配方最長(zhǎng)，同時(shí)菌絲開始出現(xiàn)污染，從配方C～配方E隨著棉籽殼比例的增加，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間均開始縮短，利于生長(zhǎng)。因此配方A～配方E中，配方B較適宜杏鮑菇菌絲及子實(shí)體生長(zhǎng)。

2.2 不同培養(yǎng)料杏鮑菇子實(shí)體單瓶產(chǎn)量

不同處理杏鮑菇子實(shí)體單瓶產(chǎn)量見圖1。

由圖1可知，各配方中杏鮑菇子實(shí)體單瓶產(chǎn)量，從配方A到配方B隨著棉籽殼量增加，單瓶產(chǎn)量增大；配方B（26%煙葉渣、33%煙秸稈、25%棉籽殼等）中杏鮑菇子實(shí)體的單瓶產(chǎn)量為247.4 g，與對(duì)照組（CK）中單瓶產(chǎn)量236.95 g相比差異顯著，并與其它配方相比差異極顯著；配方C（含35%棉籽殼）單瓶產(chǎn)量最低（為165.67 g），配方C～配方E隨著棉籽殼含量的增加，單瓶產(chǎn)量增大，配方E中單瓶產(chǎn)量為224.43 g，僅次于CK，差異顯著。

圖1 不同處理杏鮑菇子實(shí)體單瓶產(chǎn)量Fig.1 Single bottle yield of Pleurotus eryngii in different substrates

2.3 杏鮑菇子實(shí)體中SOD、CAT酶活性及MDA含量

杏鮑菇子實(shí)體中SOD、CAT酶活性及MDA含量見圖2、圖3和圖4。

圖2 子實(shí)體SOD酶活性Fig.2 SOD activity of fruiting body

圖3 子實(shí)體CAT酶活性Fig.3 CAT activity of fruiting body

圖4 子實(shí)體MDA含量Fig.4 MDA contents in fruiting body

配方B中杏鮑菇在菌絲生長(zhǎng)、子實(shí)體采收時(shí)間及子實(shí)體平均單瓶產(chǎn)量中都顯著優(yōu)于其它配方，因此選擇配方B與對(duì)照組CK進(jìn)行酶活及相應(yīng)品質(zhì)的測(cè)定比較。在子實(shí)體中對(duì)SOD、CAT等活性進(jìn)行比較，配方B與CK相差不大，差異不顯著；在MDA含量測(cè)定中，配方B與CK的測(cè)定值很接近，相對(duì)穩(wěn)定。

2.4 杏鮑菇中可溶性蛋白、可溶性糖含量

子實(shí)體可溶性糖含量見圖5、圖6。

圖5 子實(shí)體可溶性蛋白含量Fig.5 Contents of solute protein in fruiting body

圖6 子實(shí)體可溶性糖含量Fig.6 The content of polysaccharide in fruiting body

在配方B中子實(shí)體可溶性蛋白、可溶性糖含量分別為19.08 mg·g－1、4.721 μg·g－1，而對(duì)照組中含量分別為18.25 mg·g－1、4.716 μg·g－1。即配方B子實(shí)體中兩者含量要略優(yōu)于對(duì)照配方。在可溶性蛋白、可溶性糖含量表中，對(duì)配方B可進(jìn)一步開展研究。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，以煙葉渣及秸稈為杏鮑菇栽培主料，配以不同比例的棉籽殼，配方A、配方B隨著棉籽殼含量的增加，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間縮短，菌絲長(zhǎng)勢(shì)良好，沒有出現(xiàn)污染且子實(shí)體產(chǎn)量增加；配方B、配方C隨著棉籽殼含量的增加，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間延長(zhǎng)，菌絲出現(xiàn)污染；配方C當(dāng)棉籽殼含量達(dá)到35%時(shí)，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間達(dá)到最長(zhǎng)，子實(shí)體產(chǎn)量達(dá)到最低；配方C～配方E隨著棉籽殼含量的增加，菌絲滿瓶時(shí)間及子實(shí)體采收時(shí)間縮短，子實(shí)體產(chǎn)量也隨之增加。

配方B以煙葉渣及煙秸稈為主料配以25%的棉籽殼輔助相同含量的輔料，作為杏鮑菇栽培料對(duì)于杏鮑菇生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，在菌絲生長(zhǎng)狀況及子實(shí)體產(chǎn)量上都優(yōu)于目前市場(chǎng)上單獨(dú)以棉籽殼為栽培主料的配方。配方B子實(shí)體中SOD、CAT酶活性及MDA含量均與對(duì)照組中含量差異不大；配方B杏鮑菇子實(shí)體中可溶性蛋白及可溶性糖含量均高于對(duì)照組，因此以煙葉渣及煙秸稈為主料配以一定比例的棉籽殼有助于提高杏鮑菇子實(shí)體的部分品質(zhì)。

盡管利用廢棄煙葉渣及秸稈種植杏鮑菇，具有可行性，能一定程度上解決廢棄煙葉渣及秸稈的處理問題，同時(shí)能給杏鮑菇種植提供一種新的栽培料。但目前在其它品質(zhì)及食品安全方面并沒進(jìn)行全面試驗(yàn)測(cè)定對(duì)比，尚不能進(jìn)行規(guī)模推廣。需針對(duì)相關(guān)指標(biāo)作進(jìn)一步試驗(yàn)比較。因此在利用煙草副產(chǎn)物為主料配以一定比例的棉籽殼種植杏鮑菇方面還需開展進(jìn)一步的研究。

[1]葉協(xié)鋒，劉紅恩，孟琦，等.不同類型煙秸稈化學(xué)組分分析[J].煙草科技，2013（10）：76-79.

[2]林中麟，石建林，林雷通，等.煙稈代料栽培毛頭鬼傘初探[J].食用菌學(xué)報(bào)，2011，18（4）：28-30.

[3]林中麟，石健林，林雷通，等.煙稈替代木屑栽培真姬菇初探[J].食用菌，2011（3）：39-40.

[4]劉傳森.煙稈屑培養(yǎng)基栽培姬松茸試驗(yàn)[J].食用菌，2011（2）：27-28.

[5]葉協(xié)鋒，劉紅恩，孟琦，等.植煙土壤中煙稈腐解物污染的化學(xué)修復(fù)研究[J].三峽環(huán)境與生態(tài)，2011（1）：29-32.

[6]周國(guó)生，義勝輝，崔建軍，等.基于生物工程的廢次煙葉資源化技術(shù)研究[J].中國(guó)煙草科學(xué)，2013（1）：85-89.

[7]鄭奎玲，余丹梅.廢棄煙葉的綜合利用現(xiàn)狀[J].重慶大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，27(3)：61-64.

[8]LI DL,WEI GS,PU YL,et al.Function orientation,manage ment system and development of Enshi tobacco farmers spe cialty cooper-ative organization[J].Chinese Farmers'Cooper ative Study,2011,50(23):4981-4986.

[9]唐利華，高君輝，郭倩.杏鮑菇工廠化栽培中不同培養(yǎng)料配方的研究[J].食用菌學(xué)報(bào)，2009，16（3）：33-35.

[10]李殿殿，李志能，林娟.利用廢棄煙葉栽培糙皮側(cè)耳初探[J].食用菌學(xué)報(bào)，2011，18（4）：9-11.

[11]李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，2000.

[12]李娟，耀庭，曾偉，等.應(yīng)用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定總蛋白含量[J].粉末涂料與涂裝，2000，13（2）：118-120.

[13]王愛國(guó)，羅廣華，邵從本，等.大豆種子超氧化物歧化酶的研究[J].植物學(xué)報(bào)，1983，9（1）：77-84.

[14]李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，2000：165-167.

[15]湯章城.現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M].北京：科學(xué)出版

社，1999：53-55.

Cultivation of Pleurotus eryngii Using Tobacco By-products and Cotton Seed Hulls

ZHOU Jia-yan,XIAO Mei,ZHAO Feng,GAO Qin,LI Na,ZHU Qi-fa
(Anhui Wannan Tobacco Co.Ltd,Xuancheng,Xuancheng 242000,China)

Pleurotus eryngii was cultivated using different contents of cotton seed hulls and tobacco by－products.The substrates of cotton seed hulls was used as comparison.It was proved that the medium of waste tobacco leaf residues and straw's formulations with a certain contents of cotton seed hulls could be used to cultivate P.eryngii.When the content of cotton seed hulls reached 25%,it was good for mycelial growth,shortening the fruiting body recovery time and increasing production.Test showed that the SOD and CAT activity,and the content of MDA,in fruiting body was no significant differenc with control group,and the content of solute protein and polysaccharide in fruiting body were 19.08 mg·g－1and 4.721 μg·g－1respectively,which were both higher than those in fruiting body of control group.

tobacco leaf residues;tobacco straw;Pleurotus eryngii;cotton seed hulls

S646.9

A

1003-8310（2016）02-0032-04

10.13629/j.cnki.53－1054.2016.02.008

周佳燕（1988－），女，碩士，助理農(nóng)藝師，主要從事瓜果蔬菜生產(chǎn)技術(shù)研究。E－mail:2595064863@qq.com

*通信作者：朱啟法（1983－），男，本科，農(nóng)藝師，主要從事煙草農(nóng)業(yè)研究。E－mail:zhuqifa178@163.com

2016－01－10