丹參及復(fù)方制劑多指標(biāo)成分質(zhì)量控制方法研究

柳　意

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丹參及復(fù)方制劑多指標(biāo)成分質(zhì)量控制方法研究

柳意

（錦州師范高等?？茖W(xué)校，遼寧錦州 121000）

在中藥材中丹參屬于常用藥，水溶性酚酸類成分以及脂溶性二萜醌類成分是丹參的主要化學(xué)成分。數(shù)據(jù)顯示，丹參復(fù)方制劑在臨床應(yīng)用上已經(jīng)多達(dá)上百個(gè)種類。由此可見，控制丹參及其復(fù)方制劑的質(zhì)量十分必要?，F(xiàn)有報(bào)道過的丹參復(fù)方制劑質(zhì)量控制的方法難以全面評(píng)價(jià)其內(nèi)在質(zhì)量，某些方法還有待改進(jìn)。本文選擇丹參滴注液和丹參飲片這兩種丹參復(fù)方制劑，以丹參和其它主味藥的多指標(biāo)成分為質(zhì)量指標(biāo)，應(yīng)用反相高效液相二極管陣列檢測法，建立了測定丹參滴注液、丹參飲片這兩種丹參復(fù)方制劑中有效成分的方法，以此來全面評(píng)價(jià)其質(zhì)量。

丹參復(fù)方制劑；多指標(biāo)成分；質(zhì)量控制

中藥成分十分復(fù)雜，對其作用機(jī)理也沒有明確的認(rèn)識(shí)，但是其治療效果比較明顯，因此受到國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注，形成了一種研究熱潮。

1 丹參滴注液中四種水溶性成分含量測定

丹參滴注液可以治療心絞痛、冠心病等疾病，達(dá)到活血消腫、活血化瘀等效果。其中的有效成分包括迷迭香酸、丹參素、原兒茶醛及丹酚酸A、B、C等水溶性酚酸類成分[1]。下面應(yīng)用高效液相色譜二極管陣列檢測法測定迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B及原兒茶醛的含量，從而全面評(píng)價(jià)丹參滴注液的質(zhì)量。

1.1 試劑、儀器準(zhǔn)備

采購市場上某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的不同批次的丹參滴注液，分別為06060401、06042201、07030202。購進(jìn)純度大于98%的迷迭香酸，丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛則來自中國藥品生物制品檢定所。檢測儀器采用Agilent 1100全自動(dòng)高效液相色譜儀。

1.2 檢驗(yàn)方法、過程

（1）色譜標(biāo)準(zhǔn)。色譜柱應(yīng)該以 Diamonsil TMC18（250×4.6 mm，5μm）為準(zhǔn)，將5%冰乙酸和甲醇作為流動(dòng)相并進(jìn)行梯度洗脫，維持1.0 mL/min的流動(dòng)速度和30 ℃的柱溫，檢測波長為 286 nm，以20μL的進(jìn)樣量為宜。

（2）溶液準(zhǔn)備。供試品溶液的制作，在25mL的容量瓶中量入3mL的丹參滴注液，然后加入20%甲醇將其稀釋達(dá)到刻度值，搖勻后采用0.45μm的微孔濾膜過濾溶液，濾液就是供試品溶液。

對照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入適量迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛，然后加入20%甲醇將其稀釋達(dá)到刻度值，搖勻后配置成不同濃度的混合對照品溶液，即3.508、21.92、25.92和38.64μg/mL。

（3）檢驗(yàn)指標(biāo)。檢驗(yàn)指標(biāo)包括系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、回收率試驗(yàn)、重現(xiàn)性試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、檢測限、線性關(guān)系檢測以及樣品檢測。其中，線性關(guān)系檢測是指采用0.45μm微孔濾膜過濾混合對照品溶液，根據(jù)色譜標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行不同量的進(jìn)樣，即10μL、20μL、30μL、40μL、50μL、60μL、70μL。記錄每個(gè)組分的色譜峰面積，將其與進(jìn)樣量應(yīng)用線性回歸加以分析。

1.3 檢測結(jié)果

按照色譜標(biāo)準(zhǔn)，通過以上試驗(yàn)計(jì)算出迷迭香酸的平均回收率是 99.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.68%，線性范圍在0.2592~1.814 μg（r=1.0000）；丹參素的平均回收率是102.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.55%，線性范圍在0.2192~1.934 μg（r=0.9999）；丹酚酸 B 的平均回收率是102.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.49%，線性范圍在0.3864~2.705 μg（r=0.9999）；原兒茶醛的平均回收率是103.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.42%，線性范圍在0.0351~0.2456 μg（r=1.0000）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛這四種水溶性成分完全分離，因此這種方法可以全面分析丹參滴注液的質(zhì)量控制。

2 丹參飲片中五種水溶性成分含量的測定

2.1 試劑、儀器準(zhǔn)備

從市場上采購丹參藥材，購進(jìn)純度大于98%的迷迭香酸，丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛來自中國藥品生物制品檢定所。檢測儀器采用Agilent 1200全自動(dòng)高效液相色譜儀。

2.2 檢驗(yàn)方法、過程

（1）色譜標(biāo)準(zhǔn)。丹參飲片成分測定的色譜標(biāo)準(zhǔn)與丹參滴注液的標(biāo)準(zhǔn)相同，詳情參照上述內(nèi)容，不再贅述。（2）溶液準(zhǔn)備。供試品溶液的制作，在索氏提取器中加入適量的丹參藥材粉末和100mL的重蒸水,提取14個(gè)小時(shí)，采用0.45μm微孔濾膜過濾提取液，濾液就是供試品溶液。

對照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入適量的迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛，加入20%甲醇稀釋到刻度，將其分為濃度分別在35.08、109.6、129.6、148.4、193.2mg/L的溶液作為儲(chǔ)備。在10mL的容量瓶中分別吸取0.30、5.0、0.35、0.10、0.80mL的儲(chǔ)備液，加入20%的甲醇稀釋到刻度，把這個(gè)溶液分成濃度在1.052、54.8、4.536、1.484、15.46mg/L的混合對照品溶液。

（3）檢驗(yàn)指標(biāo)。檢驗(yàn)指標(biāo)與丹參滴注液成分的檢驗(yàn)指標(biāo)相同。根據(jù)色譜標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)確吸取丹參飲片的供試品溶液和混合對照品溶液，檢驗(yàn)6組分的理論塔板數(shù)和分離度，進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。線性關(guān)系檢測和精密度試驗(yàn)等指標(biāo)都與丹參滴注液的內(nèi)容相同，通過這些試驗(yàn)計(jì)算五種水溶性成分的相關(guān)數(shù)據(jù)。

2.3 檢驗(yàn)結(jié)果

按照色譜標(biāo)準(zhǔn)，通過以上試驗(yàn)計(jì)算出迷迭香酸的平均回收率是100.7 %，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是1.0%，線性范圍在0.0454~0.3175 μg（r=0.9999）；丹參素的平均回收率是100.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.96%，線性范圍在0.5480~3.836μg（r=0.9992）；丹酚酸 B 的平均回收率是101.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.88%，線性范圍在0.1546~1.082 μg（r=0.9999）；原兒茶酸的平均回收率是100.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是1.0%，線性范圍在0.0148~0.1039 μg（r=0.9999）；原兒茶醛的平均回收率是100.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差是0.60%，線性范圍在0.0105~0.07367 μg（r=0.9999）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛這五種水溶性成分完全分離，因此這種方法可以全面分析丹參飲片的質(zhì)量控制。

3 結(jié)束語

目前對于丹參及其復(fù)方制劑的研究程度不斷加深，加之色譜法的廣泛應(yīng)用，因此可以同時(shí)測定更多的有效成分含量，以此來分析其質(zhì)量控制。丹參復(fù)方制劑新品不斷進(jìn)入市場，但是缺乏應(yīng)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，因此需要加強(qiáng)研究，做好新藥的質(zhì)量控制。

[1] 王歡.丹酚酸B的含量測定方法研究進(jìn)展[J].江西中醫(yī)藥,2010,41(6):79-80.

[2]馬志剛,曹秋娥,丁中濤等.高效液相色譜法測定丹參及其復(fù)方制劑中的3個(gè)丹參酮[J].云南民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）,2013,22(6):391-393.

Study on quality control method of multi index components of Salvia miltiorrhiza and compound preparation

(Jinzhou Teacher's Training College, Jinzhou Liaoning 121000)

Salvia Chinese herbal medicines commonly used drugs belonging to the water-soluble phenolic acids and fat-soluble diterpene quinone component is the main chemical ingredient of Salvia. Data show that Salvia compound preparation in clinical applications have been up to hundreds of species. Thus, the control and quality of Salvia compound preparation is necessary. The method of preparation of compound Salvia quality control of existing reports over the difficult overall evaluation of its intrinsic quality, some of the methods could be improved. Salvia infusion fluid and paper chooses two Salvia Salvia Pieces compound, multi-index and other main ingredient of Salvia herb is quality indicators, reversed phase HPLC with diode array detection method for the determination of Salvia infusion fluid, Pieces Salvia Salvia both the active ingredient compound preparation methods, in order to fully evaluate its quality.

Salvia compound preparation; Multi-index component; Quality control

（責(zé)任編輯：吳 芳）

TG580.23+5

A

10.3969/j.issn.1672-7304.2016.06.042

1672–7304(2016)06–0095–02

柳意（1975-），女，吉林通化人，副教授，研究方向：中藥成分。