計(jì)算機(jī)輔助精液檢查及精子形態(tài)分析在不孕癥診療中的應(yīng)用價(jià)值探討

成艷君，李雪梅，楊則寶，吳正中，林碎玲，楊宇霞，郭水興

（廣東省深圳市婦幼保健院 生殖醫(yī)學(xué)中心，廣東 深圳 518000）

男性生育能力評(píng)價(jià)的關(guān)鍵參數(shù)是其精子質(zhì)量及精子形態(tài)。精液檢查是最基本的了解精液質(zhì)量的檢查方法，臨床應(yīng)用較廣[1]。傳統(tǒng)的精子分析是通過顯微鏡觀察，使得診斷的準(zhǔn)確性、靈敏度和客觀性降低。計(jì)算機(jī)輔助精液分析（computer assisted sperm analysis, CASA）在國內(nèi)外生殖中心已被作為檢查男性不孕的常規(guī)項(xiàng)目，其能提高診斷客觀性和準(zhǔn)確性，并減少診斷人員的工作量[2]。本文選擇了100例不孕男性患者和100例已育男性患者進(jìn)行計(jì)算機(jī)輔助精液檢查及精子形態(tài)分析，并探討其價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取100例2015年1月-2016年1月在本院進(jìn)行不孕不育檢查的精液標(biāo)本作為研究組，本組患者年齡24～54歲，平均（39.8±5.4）歲。納入標(biāo)準(zhǔn) ：①性生活正常，未采取避孕而1年以上不孕者 ；②沒有明顯附睪或睪丸異常者；③患者臨床資料完整，能積極配合治療且簽署了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①生殖器外傷或患有遺傳疾病者；②性功能障礙者；③女方因素引起的不孕。同時(shí)選取100 例已育男性的精液標(biāo)本作為對(duì)照組，本組男性年齡23～54歲，平均（38.7±4.9）歲。兩組年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 標(biāo)本采集

進(jìn)行精液檢查前，兩組均禁欲2 d～1周，手淫法取精液于干燥潔凈的消毒采精杯中，混勻，37℃完全液化。檢測(cè)精液量、pH值、顏色、黏稠度及液化時(shí)間等一般性狀；形態(tài)學(xué)分析采用手工方法。

1.3 方法

精液完全液化后，吸取5 μl于精子計(jì)數(shù)板上，利用全自動(dòng)精子質(zhì)量分析系統(tǒng)檢測(cè)兩組的精液標(biāo)本，至少觀察并記錄200條精子的密度、總活動(dòng)率、向前運(yùn)動(dòng)比例及動(dòng)力學(xué)參數(shù)。精子形態(tài)分析采用拉薄計(jì)數(shù)和Diff-Quick染色法。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)《人類精液及精子－宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》（第5版）[3]判斷精子正常與否：①精液量不低于1.5 ml；②pH值不低于7.2；③精子密度不低于15×106/ml；④射精后1 h內(nèi)，精子總活動(dòng)率仍超過40%，前向運(yùn)動(dòng)的精子超過32%。

檢測(cè)精子的密度和活動(dòng)力以及動(dòng)力學(xué)參數(shù)： 直 線 速 度（straight line velocity, VSL）、曲 線 速 度（curvilinear velocity, VCL）、 平 均速 度（average path velocity, VAP）、 前 向 性（straightness, STR）、 線 性 指 數(shù)（linearity,LIN）、 振 動(dòng) 指 數(shù)（wobble, WOB）、 精 子 頭部 擺 動(dòng) 振 幅（amplitude of lateral head, ALH）及 擺 動(dòng) 頻 率（ciliary beat frequency, CBF）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精液指標(biāo)對(duì)比

兩組的精液量、密度及向前運(yùn)動(dòng)的精子比例比較發(fā)現(xiàn)，研究組顯著降低（P＜0.05），而pH值和總活動(dòng)率兩組沒有明顯差異（P＞0.05），見表1。

2.2 精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)比

兩組精子標(biāo)本的動(dòng)力學(xué)參數(shù)中VSL、VAP、STR、LIN、WOB、ALH、CBF差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），僅曲線速度（VCL）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。此外，精子形態(tài)正常率兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 兩組精液指標(biāo)對(duì)比 （±s）

表1 兩組精液指標(biāo)對(duì)比 （±s）

注：?與對(duì)照組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) 精液量/ml pH值 密度/(×106/ml) 總活動(dòng)率/% 向前運(yùn)動(dòng)比例/%對(duì)照組 100 3.1±1.2 7.25±0.11 58±28 63±16 34±12研究組 100 3.8±1.3? 7.23±0.12 74±30? 64±14 50±15?

表2 兩組動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)比 （±s）

表2 兩組動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)比 （±s）

注：?與對(duì)照組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) VSL/(μm/s) VCL/μm VAP/(μm/s) STR/% LIN/% WOB/% ALH/μm CBF/Hz對(duì)照組 100 18.5±2.3 36.0±7.0 33.0±3.0 68.0±6.0 42.0±3.0 47.0±5.0 1.2±0.3 4.2±1.6研究組 100 13.1±3.0? 37.0±8.0 21.0±3.0? 60.0±5.0? 34.0±4.0? 58.0±4.0? 2.0±0.4? 5.1±1.5?

3 討論

據(jù)調(diào)查男性精子數(shù)量在過去50年里幾乎減少了一半，更糟糕的是每年仍然以2.1%速度在減少，具體表現(xiàn)為劣質(zhì)和畸形的精子在逐年增多，活力低、穿透力差、受孕率隨之下降，因此導(dǎo)致男性不育的群體越來越大[4]。所以，不斷進(jìn)步的社會(huì)，高速發(fā)展的醫(yī)學(xué)，促使人們?cè)絹碓疥P(guān)注男性生育能力，這其中最為關(guān)注的是精子質(zhì)量分析診斷問題。

男科疾病診斷中，精液分析不僅能了解到精液質(zhì)量如何，為少精癥、畸精癥、弱精癥及無精癥提供重要的依據(jù)，另外，還可以透過精液分析來了解男性的生殖系統(tǒng)或內(nèi)分泌器官的功能狀態(tài)，為診斷和治療男性不育癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)[5]。目前，作為一套現(xiàn)代精液分析手段，并結(jié)合先進(jìn)圖像處理技術(shù)及計(jì)算機(jī)技術(shù)的CASA，不僅能夠改正傳統(tǒng)檢測(cè)方法存在的信息少、用時(shí)較長、主觀性較高及準(zhǔn)確性差等缺點(diǎn)，還能提供準(zhǔn)確的不育和人工授精信息，增強(qiáng)檢測(cè)水平，減輕工作強(qiáng)度，所以在診斷男性疾病中廣受歡 迎[6]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，觀察組中精子密度、精子量、射精1 h內(nèi)精子的活動(dòng)率及前向運(yùn)動(dòng)精子比例顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），說明這些都是導(dǎo)致男性不育的主要原因，另外動(dòng)力學(xué)參數(shù)表明研究組顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）， 表明研究組精子的運(yùn)動(dòng)參數(shù)有問題，精子運(yùn)動(dòng)的前向性、速度及線性都區(qū)別于正常精子，這或許也是引起男性不育的一個(gè)原因。因此，為了提高不育癥診斷率，將傳統(tǒng)精液檢測(cè)與動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)合，可以更真實(shí)的評(píng)估男性生育能力。

綜上所述，評(píng)測(cè)男性生育能力可以采用計(jì)算機(jī)輔助精液檢查及精子形態(tài)分析的方式，從而為不孕癥診斷及治療方面提供可靠的依據(jù)。

[1]馬國燕, 盧靜, 景麗. 精子功能檢測(cè)在男性不育診治中的應(yīng)用 [J]. 中國計(jì)劃生育學(xué)雜志, 2015, 23(1)： 61-63.

[2]黃曉華. 計(jì)算機(jī)輔助精液檢測(cè)及精子形態(tài)分析在不孕癥診療中的運(yùn)用[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志, 2015, 23(9)： 104-105.

[3]陳振文, 谷龍杰. 精液分析標(biāo)準(zhǔn)化和精液質(zhì)量評(píng)估——WHO《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》(第5版)出版[J]. 中國計(jì)劃生育學(xué)雜志, 2012, 20(1)： 58-62.

[4]李維娜, 朱文兵, 唐章明, 等. 16 835例中國不育男性的精液質(zhì)量分析[J]. 中南大學(xué)學(xué)報(bào)： 醫(yī)學(xué)版, 2014, 39(2)： 157-160.

[5]毛金觀, 蔡文偉. 無精子癥、少弱精子癥患者精子質(zhì)量與精漿果糖相關(guān)性研究[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(3)： 395-396.

[6]徐新蓉, 孟安勤, 龔國富. 計(jì)算機(jī)輔助精液分析與人工常規(guī)精液分析的比較[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志, 2014, 35(21)：2959- 2960.