宮頸癌全切術(shù)對(duì)機(jī)體T細(xì)胞亞群及γ-干擾素表達(dá)水平的影響

馬麗

（河南省洛陽市中心醫(yī)院 婦科，河南 洛陽 471000）

宮頸癌是女性生殖道惡性腫瘤中的發(fā)病率和死亡率最高的疾病，手術(shù)和放化療是宮頸癌最常用的治療方法[1]。本研究采用檢測(cè)宮頸癌全切術(shù)前后血清中T細(xì)胞亞群及γ-干擾素（interferon-γ,IFN-γ）表達(dá)水平的變化，探討手術(shù)對(duì)機(jī)體免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

我們2014年1月‐2015年7月收集本院收治的Ⅱ、Ⅲ期宮頸癌術(shù)前患者60例，行廣泛性子宮切除術(shù)+附件切除術(shù)+盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)，平均年齡（52.32±9.18）歲。根據(jù)FIGO2014年的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，ⅡB期28例，ⅢA期32例。病理分級(jí)為高分化15例，中分化28例，低分化17例；腺癌27例，鱗癌24例，其他類型9例。選擇同期來醫(yī)院體檢的30名健康女性（無宮頸病變）作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理確診為宮頸癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)生廣泛轉(zhuǎn)移或者因其他基礎(chǔ)疾病不能承受手術(shù)，術(shù)前使用化療或免疫治療對(duì)免疫功能存在影響的。

1.2 相關(guān)檢查項(xiàng)目

T細(xì)胞亞群和IFN-γ于術(shù)前和術(shù)后第5天靜脈取血6 ml，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞亞群，采用全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀測(cè)定血清IFN-γ表達(dá)水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 T細(xì)胞亞群在手術(shù)前后表達(dá)水平的比較 （±s）

表1 T細(xì)胞亞群在手術(shù)前后表達(dá)水平的比較 （±s）

注：1）與對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與術(shù)前比較，P＜0.05。

組別 CD4+/% CD8+/% CD4+/CD8+/% INF-γ/（ng/L）對(duì)照組(n=30) 42.32±4.55 23.12±3.67 1.71±0.34 58.75±8.01宮頸癌組(n=60)術(shù)前 35.60±3.971） 28.12±2.931） 1.15±0.301） 47.65±8.411）術(shù)后 28.63±3.672） 33.63±3.242） 0.91±0.102） 31.47±7.232）

血清T細(xì)胞亞群、IFN-γ水平：宮頸癌患者術(shù)前CD4+、CD4+/CD8+計(jì)數(shù)和IFN-γ表達(dá)水平均低于對(duì)照組，CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。宮頸癌全切術(shù)后患者血清CD4+、CD4+/CD8+計(jì)數(shù)均降低，CD8+細(xì)胞升高，IFN-γ表達(dá)水平降低，與術(shù)前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

在大多數(shù)情況下，人乳頭狀瘤病毒感染是自限性的，可通過體液免疫和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)消除，這表明免疫調(diào)節(jié)在宮頸癌的發(fā)生中起重要作用[2]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的總數(shù)量是決定宮頸腺癌患者的存活率的決定因素。癌細(xì)胞的抗原性改變導(dǎo)致抗原提呈細(xì)胞功能受損，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)的抑制，增強(qiáng)腫瘤浸潤(rùn)的細(xì)胞毒性，患者免疫功能的降低導(dǎo)致腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，縮短了生存期[3-4]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在抑制免疫反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用，它們的作用取決于免疫反應(yīng)的抑制和其他促腫瘤成分：Th17細(xì)胞的數(shù)量，M2巨噬細(xì)胞極化，髓源性抑制細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cell,MDSC）和存在顯著濃度升高的細(xì)胞因子：腫瘤微環(huán)境中的白細(xì)胞介素-6 （interleukin-6,IL-6）、TNF-α和IL-10等[5]。其中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞最主要的免疫細(xì)胞為CD4+和CD8+，CD4+的減少和CD8+的增加都會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的下降，微環(huán)境中免疫系統(tǒng)抵御細(xì)菌和癌細(xì)胞的能力減退。

機(jī)體免疫細(xì)胞的微環(huán)境的破壞是腫瘤細(xì)胞賴以生長(zhǎng)和進(jìn)展的必備條件。當(dāng)前腫瘤患者的免疫系統(tǒng)一般分為3個(gè)不同的階段：消除、平衡和逃避。在消除階段，腫瘤特異性免疫細(xì)胞和分子被招募到腫瘤部位對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行破壞；平衡階段是一個(gè)動(dòng)態(tài)的狀態(tài)，腫瘤生長(zhǎng)與免疫預(yù)防之間的相互作用相互抵消；在逃避階段，一些惡性細(xì)胞可逃避免疫識(shí)別的能力，或不再對(duì)免疫效應(yīng)機(jī)制敏感。細(xì)胞免疫效應(yīng)機(jī)制已被證明在體外具有殺傷腫瘤的能力，腫瘤免疫細(xì)胞在消除階段，不同類型的免疫細(xì)胞被招募到腫瘤部位，包括T細(xì)胞、分泌抗體的B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（dendritic cells,DCs）不同亞群、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor-associated macrophages,TAM）和自然殺傷（natural killer,NK）細(xì)胞等。免疫系統(tǒng)被認(rèn)為是宮頸癌的重要介質(zhì)，腫瘤發(fā)生的慢性炎癥導(dǎo)致受損上皮細(xì)胞的DNA觸發(fā)，通過釋放的活性氧物質(zhì)或產(chǎn)生細(xì)胞因子，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。由于機(jī)體自身的免疫細(xì)胞缺乏一定的特異性，一些與免疫相關(guān)的因子開始成為研究的熱點(diǎn)，比如炎癥趨化因子、白介素及干擾素等，有些因子無論靈敏度還是特異性都比較高，可作為腫瘤預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物。

腫瘤的發(fā)生和細(xì)胞因子表達(dá)失調(diào)有密切關(guān)系[6]， 如 IFN-γ，TGF-β 和 IL-17β 等，IFN-γ抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，上調(diào)MHC I類和II類分子的表達(dá)，并刺激抗腫瘤免疫活性。IFN-γ和TNF-α在維持腫瘤患者免疫機(jī)制的正常運(yùn)轉(zhuǎn)中發(fā)揮著重要作用，一旦平衡遭到破壞，機(jī)體就會(huì)出現(xiàn)免疫功能低下，炎癥反應(yīng)的發(fā)生以及腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[7]。IFN-γ在腫瘤-宿主反應(yīng)中起著重要的作用，癌癥患者血漿和細(xì)胞內(nèi)IFN-γ水平顯著降低[8]。

本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者術(shù)前CD4+、CD4+/CD8+計(jì)數(shù)和IFN-γ表達(dá)水平均低于健康人群，CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)高于健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。宮頸癌全切術(shù)后患者血清CD4+、CD4+/CD8+計(jì)數(shù)均降低，CD8+細(xì)胞升高，IFN-γ表達(dá)水平降低，與術(shù)前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。檢測(cè)宮頸癌患者術(shù)前術(shù)后T細(xì)胞亞群和IFN-γ可為術(shù)后的免疫治療提供一定的指導(dǎo)意義。

[1]Fallala MS,Mash R.Cervical cancer screening:Safety,acceptability,and feasibility of a single-visit approach in Bulawayo,Zimbabwe[J].Afr J Prim Health Care Fam Med,2015,7(1):E1-7.

[2]Snyman LC,Dreyer G,Visser C,et al.The vaccine and cervical cancer screen (VACCS) project:Linking cervical cancer screening to HPV vaccination in the South-West District of Tshwane,Gauteng,South Africa[J].S Afr Med J,2015,105(2):191-194.

[3]Osińska I,Domaga?a-Kulawik J.Bronchoalveolar lavage in lung cancer-diagnostic value and assessment of the anti-cancer immune response[J].Postepy Hig Med Dosw (Online),2013,67(213):1119-1127.

[4]Jin C,Li J,Wang Y,et al.Impact of cellular immune function on prognosis of lung cancer patients after cytokine-induced killer cell therapy[J]Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(15):6009-6014.

[5]Domaga?a-Kulawik J,Osińska I[J].Pneumonol Alergol Pol,2014,82(3):286-299.

[6]Wang F,Xu J,Zhu Q,et al.Downregulation of IFNG in CD4(+) T cells in lung cancer through hypermethylation:a possible mechanism of tumor-induced immunosuppression[J]PLoS One,2013,8(11):e79064.

[7]Khaghanzadeh N,Samiei A,Ramezani M,et al.Umbelliprenin induced production of IFN-γ and TNF-α,and reduced IL-10,IL-4,Foxp3 and TGF-β in a mouse model of lung cancer[J].Immunopharmacol Immunotoxicol,2014,36(1):25-32.

[8]Black CC,Turk MJ,Dragnev K,et al.Adenocarcinoma contains more immune tolerance regulatory t-cell lymphocytes (versus squamous carcinoma) in non-small-cell lung cancer[J].Lung,2013,191(3):265-270.