禽霍亂與新城疫混合感染的診治

魯利萍，時(shí)紅星

（1.商丘市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，河南 商丘 476000；2.商丘市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

禽霍亂與新城疫混合感染的診治

魯利萍1，時(shí)紅星2

（1.商丘市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，河南 商丘 476000；2.商丘市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

禽霍亂又稱禽巴氏桿菌病、禽出血性敗血癥，是由多殺性巴氏桿菌引起的多種禽類的傳染病，多在高溫、高濕季節(jié)發(fā)生，雞、鴨、鵝等禽類較為易感，雞發(fā)病急，死亡快。發(fā)病雞食欲廢絕，飲欲增加，病雞出現(xiàn)精神沉郁，縮頭閉目，呼吸困難，口、鼻有黏性分泌物，雞冠青紫，拉黃綠色稀便等癥狀，單發(fā)性禽霍亂用高敏藥物治療效果明顯，但若在雞群病毒性疾病免疫效果不好，機(jī)體免疫力下降的情況下，禽霍亂易與病毒性疾病混合感染，特別是禽霍亂與雞新城疫的混合感染可造成雞大批死亡，給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。

案例一：160日齡，蛋雞，2000只雞，150日齡，120日齡注射禽流感H5滅活疫苗0.5ml，130日齡注射新支減滅活疫苗0.5ml，同時(shí)注射3倍量新城疫I系活疫苗，最后一次注射疫苗后采食量開始下降，飲水量增加，產(chǎn)蛋下降10%，病雞出現(xiàn)精神沉郁、咳嗽、拉稀的癥狀，有的雞口、鼻有黏性分泌物，個(gè)別雞有啄肛現(xiàn)象，產(chǎn)蛋下降50%，發(fā)病1～3d死亡，每天新發(fā)病10余只，病死雞10只左右。

剖檢變化：眼腫，眼結(jié)膜出血。胸肌出血。氣囊增厚，喉頭出血，喉、氣管有黏液性滲出物。肺有炎性滲出物。心冠脂肪出血。肝有針尖狀血點(diǎn)。卵巢出血，卵泡出血。胃黏膜變薄，腺胃乳頭出血，有的腺胃黏膜下出血。十二指腸出血，泄殖腔出血。

案例二：3000羽羅曼蛋雞，170日齡，120日齡注射新支減滅活疫苗0.5ml，同時(shí)注射2倍量新城疫I系活疫苗，130日齡注射禽流感H5滅活疫苗0.5ml，160日齡開始發(fā)病，病雞精神沉郁，羽毛松亂，縮頭、耷拉翅膀，鼻有黏性分泌物，有呼嚕、咳嗽癥狀，個(gè)別張口呼吸，肉髯暗紅或青紫色，拉灰白色稀便，產(chǎn)蛋下降50%。每天都有新增病例，每天病死8只左右。

剖檢變化：喉頭出血，心包內(nèi)有纖維性滲出物。臟腫大，質(zhì)脆，肝有灰白色針尖狀壞死灶，有的肝腹水，有的心源性肝臟腫大，肺有炎性滲出物。腺胃、肌胃交界處出血，腺胃黏膜出血，腺胃乳頭出血。盲腸扁桃體出血。腹膜炎，輸卵管炎，卵巢萎縮、壞死。

1 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

1.1 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)

1.1.1 涂片鏡檢。無菌操作采典型病例瀕死雞的心血、肝、脾組織進(jìn)行涂片，分別進(jìn)行革蘭氏和瑞氏染色，鏡檢，革蘭氏染色可見兩極濃染的卵圓形、紅色陰性小桿菌；組織涂片瑞氏染色可見兩極著色，中間較淺的球桿菌，血液涂片瑞氏染色，均被染成藍(lán)色或淡青色，紅細(xì)胞染成淡紅色，紅細(xì)胞內(nèi)有紫色的核。

1.1.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)。用滅菌接種環(huán)或滅菌棉簽無菌操作，采瀕死雞典型病變的肝、脾組織，分別接種鮮血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后看結(jié)果，鮮血瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出較為平坦、半透明的露滴樣不溶血小菌落；麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)；在肉湯培養(yǎng)基上可見均勻混濁，管底膠樣沉淀，灰白色菌環(huán)。挑取培養(yǎng)物涂片，革蘭氏染色，鏡檢可見兩端鈍圓、兩極濃染的卵圓形小桿菌。

1.1.3 生化試驗(yàn)。無菌操作采分離菌落做生化試驗(yàn)，48 h內(nèi)能分解葡萄糖、果糖、半乳糖、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖、肌醇、菊糖、水楊酸及鼠李糖。不液化明膠。靛基質(zhì)、過氧化酶和氧化酶均為陽性，不能產(chǎn)生尿素酶。M-R試驗(yàn)和V-R試驗(yàn)均為陽性。

1.1.4 動(dòng)物試驗(yàn)。無菌操作采集瀕死癥狀典型病雞，采集病變明顯肝、脾等組織，剪碎、研磨、用滅菌生理鹽水稀釋配制成1∶5乳液，皮下接種小白鼠2只，每只0.2ml，24h后2只全部死亡，涂片鏡檢革蘭氏染色為兩極濃染的陰性小桿菌；同時(shí)設(shè)對(duì)照組，對(duì)照注射生理鹽水2只，對(duì)照組2只全部存活。

1.2 藥敏試驗(yàn)

第一家病料試驗(yàn)結(jié)果：氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、林可霉素高敏；阿米卡星、新霉素、壯觀霉素、頭孢噻肟、磷霉素、慶大霉素、硫酸粘桿菌素、硫酸安普霉素中敏；多西環(huán)素、鏈霉素、紅霉素、阿莫西林、利福平低敏。

第二家病料試驗(yàn)結(jié)果：硫酸安普霉素、恩諾沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、林可霉素高敏，新霉素、阿米卡星、壯觀霉素、頭孢噻肟、慶大霉素、硫酸黏桿菌素、鏈霉素中敏，多西環(huán)素、紅霉素、阿莫西林、利福平、磷霉素低敏。

1.3 病原學(xué)檢測(cè)

1.3.1 組織采集與處理。取氣管、肺、腦等組織，按1∶5的比例加入生理鹽水，反復(fù)凍融3次，放入一次性1.5mlEP離心管中，加入一顆鋼珠，對(duì)稱放入組織粉碎機(jī)中粉碎，粉碎后高速離心機(jī)13000轉(zhuǎn)離心3min，取上清液200μl待用。或直接取泄殖腔拭子、咽喉拭子,反復(fù)凍融3次，高速離心，取上清液200μl待用。

1.3.2 核酸提取。核酸提取儀（磁珠法）提取備用，取18μl混合液、1μl酶混勻，分別加入5ul核酸提取液，瞬時(shí)低速離心。

1.3.3 熒光RT-PCR擴(kuò)增。取離心后陽性對(duì)照、陰性對(duì)照、樣品對(duì)照各5μl上清液放入熒光PCR儀進(jìn)行檢測(cè)，兩家病料新城疫病毒核酸為陽性。

通過臨床癥狀、剖檢變化、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)診斷為禽巴氏桿菌與新城疫的混合感染。

2 治療

病雞及時(shí)隔離，停止工作人員串崗及所有用具輪換使用，病死雞深埋無害化處理。徹底清除圈舍，徹底消毒，雞舍用2%的氫氧化鈉溶液消毒，雞舍用0.5%聚維酮碘溶液進(jìn)行帶雞消毒，每天消毒1次。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，合理飼養(yǎng)密度，通風(fēng)換氣良好。提供優(yōu)質(zhì)飼料與飲水。

藥物治療與預(yù)防：恩諾沙星、氧氟沙星、鹽酸環(huán)丙沙星因影響產(chǎn)蛋，用藥最好不超過5d。第一家病例大群雞飲水加入環(huán)丙沙星100mg/L，自由飲水，連用5d，隔離病雞用林可霉素注射，每日1次，連用5d，飲水加電解多維與5%葡萄糖。第6天用新城疫IV系4倍量飲水，同時(shí)注射新城疫滅活疫苗0.5ml。7d后回訪病雞死亡減少，14d后回訪大群基本好轉(zhuǎn)。第二家病例大群雞用10%氧氟沙星飲水，每100kg水加入50～100g，連用5d，隔離病雞用阿米卡星注射，每只雞5000IU，每日1次，連用5d，第6天用新城疫IV系4倍量飲水免疫，同時(shí)注射新城疫滅活疫苗0.5ml。10d后回訪，發(fā)病雞逐漸減少，15d回訪大群基本好轉(zhuǎn)。

3 綜合防控措施

保持圈舍清潔，徹底消毒。合理飼養(yǎng)密度，圈舍溫度、濕度適宜，特別是炎熱的夏季，圈舍做好通風(fēng)、降溫、除濕工作，嚴(yán)防高溫、高濕。做好新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊等病毒性疾病的預(yù)防。禽霍亂疫苗為細(xì)菌性疫苗，好多養(yǎng)殖戶不免疫此苗，養(yǎng)殖戶根據(jù)自己雞場(chǎng)疾病發(fā)生情況進(jìn)行適時(shí)免疫，或定期投喂增強(qiáng)免疫力、抗病的中藥預(yù)防。制定蛋雞雞新城免疫最佳免疫程序，蛋雞由于生產(chǎn)周期較長(zhǎng)，定期跟蹤檢測(cè)新城疫HI免疫抗體，0～30日齡雛雞，由于母源抗體下降較快，疫苗免疫有一定空白期，此階段要做好飼養(yǎng)管理及消毒工作來控制新城疫的發(fā)生；新城疫HI免疫抗體效價(jià)大于等于1∶16已達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，但由于氣候、飼養(yǎng)環(huán)境、個(gè)體抵抗力的差異等因素的影響，加上新城疫流行特點(diǎn)，4～10周齡新城疫HI免疫抗體至少在1∶64以上，才能保證育成階段不感染新城疫，開產(chǎn)前新城疫HI免疫抗體至少在1∶1024以上，才能做到開產(chǎn)到產(chǎn)蛋高峰期安全度過，所以要在90～100日齡左右開產(chǎn)前檢測(cè)蛋雞新城疫免疫HI抗體，根據(jù)新城疫免疫抗體效價(jià)適時(shí)免疫，新城疫疫苗的預(yù)防要滅活疫苗與新城疫I系活苗同時(shí)注射，以達(dá)到較高的HI抗體，保證蛋雞產(chǎn)蛋期穩(wěn)定。

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