激活酪氨酸酶的增色素中藥對(duì)黑素細(xì)胞作用的研究進(jìn)展

梁一彪，李錦靈，王暉

(廣東藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

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激活酪氨酸酶的增色素中藥對(duì)黑素細(xì)胞作用的研究進(jìn)展

梁一彪，李錦靈，王暉

(廣東藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

酪氨酸酶的活性降低和黑素細(xì)胞的含量減少是引起毛發(fā)早白的主要原因。本文就幾種中藥對(duì)酪氨酸酶的激活作用及對(duì)黑素細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行綜述，并簡(jiǎn)要介紹其作用原理，為其用于研究天然植物染發(fā)劑提供理論依據(jù)。

酪氨酸酶； 黑素細(xì)胞； 中藥； 染發(fā)劑

隨著社會(huì)的不斷發(fā)展，人們的工作和生活壓力不斷增加，加上遺傳、代謝、營(yíng)養(yǎng)、睡眠等種種原因，許多青年人過(guò)早出現(xiàn)白發(fā)已成為普遍現(xiàn)象。人們常通過(guò)使用染發(fā)劑來(lái)掩蓋白發(fā)，而傳統(tǒng)染發(fā)劑中常含有Pb、Ni、Co等重金屬物質(zhì)，長(zhǎng)期使用可引起各種中毒現(xiàn)象如生育畸形、器官損害等[1]，因此開(kāi)發(fā)安全的天然植物染發(fā)劑日益受到重視。中醫(yī)認(rèn)為，肝腎不足、氣血虧虛、血熱偏盛、情志煩勞等均能引起頭發(fā)變白[2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，毛發(fā)早白有以下幾個(gè)因素：酪氨酸酶活性降低[3]、遺傳因素[4]、微量元素異常[5]、氧化應(yīng)激[6]、維生素缺失[7]以及其他原因如染色體異常[8]等，其中以酪氨酸酶的活性降低，導(dǎo)致黑素細(xì)胞合成減少為主要原因。本文將著重對(duì)幾種中藥對(duì)酪氨酸酶與黑素細(xì)胞的作用進(jìn)行綜述，旨在為天然植物染發(fā)劑的研究與開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

1 酪氨酸酶與黑素合成的關(guān)系

在哺乳動(dòng)物中，黑色素是在黑素細(xì)胞的黑素小體里合成的。它的合成主要由3種酶調(diào)控：酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1(tyrosinase-related protein-1,TRP-1)、酪氨酸酶相關(guān)蛋白-2(tyrosinase-related protein-2,TRP-2)。這3種酶的基因同屬于酪氨酸酶基因家族。其中TYR是黑素合成過(guò)程中最為關(guān)鍵的1種限速酶，其活性和表達(dá)決定著黑素生成的產(chǎn)量和速度。另外，酪氨酸酶基因家族蛋白受小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)的調(diào)節(jié)，它是黑素細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化起關(guān)鍵性調(diào)控作用；同時(shí)MITF作為黑色素合成過(guò)程中的重要轉(zhuǎn)錄因子，可以直接結(jié)合酪氨酸酶基因家族的啟動(dòng)子區(qū)域，一方面指導(dǎo)它們?cè)诤谒丶?xì)胞中特異性表達(dá)，另一方面參與外界刺激對(duì)黑素細(xì)胞中黑素生成的調(diào)控[9]。

黑素細(xì)胞是人體表皮中產(chǎn)生黑色素的特異性細(xì)胞，黑色素在其特有的器官黑素小體中合成。TYR是黑素形成過(guò)程中的關(guān)鍵限速酶，TRP-1在黑素小體的生物合成中，可提高真黑素與褐黑素的比值，增加黑素的合成。與此同時(shí)，TRP-1和TRP-2還可與TYR結(jié)合形成復(fù)合物，從而調(diào)節(jié)酪氨酸酶活性。此外，人黑素細(xì)胞中存在著雌激素受體(estrogen receptor,ER)，雌激素通常與ER結(jié)合后直接或間接地激活細(xì)胞外信號(hào)通路。絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路是細(xì)胞外信號(hào)引起細(xì)胞生理反應(yīng)的共同途徑，其信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)與ER調(diào)控關(guān)系密切[10]。近年來(lái)很多研究[11]發(fā)現(xiàn)MAPK信號(hào)通路參與了黑素細(xì)胞中黑素生成的調(diào)控。

2 中藥對(duì)酪氨酸酶及黑素細(xì)胞的影響

2.1 何首烏

何首烏為蓼科植物何首烏(PolygonummultiflorumThunb.)，具有解毒消癰截虐、潤(rùn)腸通便等功效，其炮制品制何首烏具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨等功效[12]?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，何首烏提取物在一定濃度范圍內(nèi)，對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞能以濃度依賴方式促進(jìn)細(xì)胞增殖、激活TYR活性和誘導(dǎo)黑色素生成，并能顯著增加TYR和MITF的基因表達(dá)與蛋白合成[13]。

何首烏主要成分二苯乙烯苷,可誘導(dǎo)TYR重要轉(zhuǎn)錄因子MITF的激活，同時(shí)可上調(diào)環(huán)磷腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的磷酸化表達(dá)水平。CREB是MITF的一個(gè)重要轉(zhuǎn)錄因子，可與MITF基因的啟動(dòng)子區(qū)特異性結(jié)合從而間接地誘導(dǎo)TYR基因的表達(dá)。同時(shí)二苯乙烯苷能通過(guò)激活p38 MAPK信號(hào)途徑來(lái)誘導(dǎo)TYR和MITF的表達(dá)，從而促進(jìn)黑素的合成[9,14]。吳瓊[15]以不同濃度的何首烏水提液處理小鼠B16F1黑素瘤細(xì)胞，結(jié)果表明何首烏水提液具有增強(qiáng)B16F1黑素瘤細(xì)胞黑素合成及TYR活性作用，同時(shí)還能促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖。通過(guò)基因水平的測(cè)定證明，此激活作用是通過(guò)激活酪氨酸酶家族的基因表達(dá)和激活黑素合成過(guò)程中關(guān)鍵的調(diào)控因子MITF來(lái)實(shí)現(xiàn)的。姜澤群[9]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，何首烏水提物在1 mg/mL時(shí)可上調(diào)TYR活性達(dá)2.9倍(P<0.01)，黑色素生成量提高了82.4%(P<0.01)。吳可克等[16]在考察8味中藥的水提物和乙醇提物對(duì)TYR的激活作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，何首烏的乙醇提物在12 mg(原生藥100 mg/mL)水平對(duì)TYR激活率達(dá)86.9%。許夢(mèng)玲[17]采用RT-PCR方法，用不同濃度的何首烏醇提液處理小鼠B16F1黑素瘤細(xì)胞，結(jié)果表明何首烏醇提液能夠促進(jìn)細(xì)胞中黑素合成相關(guān)基因的表達(dá)，其中TYR、TRP-2和MITF基因的表達(dá)結(jié)果比較明顯，而且這些基因的表達(dá)量與何首烏醇提液的濃度成一定的劑量相關(guān)性。

石璐緣等[18]采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法，體外評(píng)價(jià)制何首烏水提物、乙醇提取物及制何首烏中大黃素、大黃素甲醚等主要單體成分對(duì)體外TYR活性的影響，結(jié)果未在制何首烏中發(fā)現(xiàn)能夠在體外有效激活TYR活性的成分。而制何首烏作用于黑素細(xì)胞后對(duì)TYR活性的影響以及制何首烏是否可通過(guò)其他途徑促進(jìn)黑素細(xì)胞中黑素的生成從而產(chǎn)生烏發(fā)效果還有待進(jìn)一步研究。

2.2 黑芝麻

黑芝麻為脂麻科植物脂麻(SesamumindicumL.)的干燥成熟種子，具有補(bǔ)肝腎、益精血、潤(rùn)腸燥功效[19]，是我國(guó)傳統(tǒng)的滋補(bǔ)食品。近年來(lái)研究表明黑芝麻對(duì)TYR的激活以及促進(jìn)黑色素生成具有較強(qiáng)作用。

研究發(fā)現(xiàn)，黑芝麻的主要成分芝麻素促進(jìn)黑素生成的機(jī)理之一是增加TYR的活性，促進(jìn)并上調(diào)TYR在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上的表達(dá)。芝麻素可通過(guò)激活p38 MAPK和cAMP依賴的蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信號(hào)通路來(lái)上調(diào)TYR和MITF基因的表達(dá)，從而促進(jìn)B16黑素瘤細(xì)胞中黑素的生成。另外，芝麻素還可以促進(jìn)p38 MAPK和CREB的磷酸化表達(dá)水平升高，并引起MITF的持續(xù)激活，從而促進(jìn)黑素的合成[9,20-21]。

徐繼敏[22]用黑芝麻水提液處理鼠B16F1黑素瘤細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)，調(diào)控黑色素合成的轉(zhuǎn)錄因子MITF的轉(zhuǎn)錄和翻譯大幅增加，MITF對(duì)其下游基因TYR的調(diào)控是直接和有效的，但對(duì)TRP-1和TRP-2的調(diào)控效果不明顯，因此推測(cè)黑芝麻水提液促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)黑素合成的可能機(jī)理是，通過(guò)激活細(xì)胞調(diào)控因子MITF的轉(zhuǎn)錄和翻譯，調(diào)控黑素合成途徑的關(guān)鍵酶TYR基因的表達(dá)增加，從而合成更多的黑色素。姜澤群等[23]通過(guò)檢測(cè)黑芝麻水提物對(duì)黑素含量及TYR的影響，其結(jié)果顯示，黑芝麻水提物在2 mg/mL時(shí)可上調(diào)TYR活性達(dá)1.66倍(P<0.01)，黑素生成量提高60%(P<0.01)。其進(jìn)一步研究也證明黑芝麻水提物是通過(guò)提高M(jìn)ITF和TYR的基因表達(dá)和蛋白合成水平來(lái)激活TYR的活性，進(jìn)而促進(jìn)黑素生成量增加。

2.3 補(bǔ)骨脂

補(bǔ)骨脂為豆科植物補(bǔ)骨脂(PsoruleacorylifoliaL.)的干燥成熟果實(shí)，具有溫腎助陽(yáng)、納氣平喘、溫脾止瀉等多種藥理作用[24]，目前較多應(yīng)用于臨床的是其光敏作用，主要用于治療白癜風(fēng)。補(bǔ)骨脂中的香豆素類(lèi)物質(zhì)補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素和甲氧補(bǔ)骨脂素等具有光敏作用，外用配合局部照射UVA可以促進(jìn)皮膚黑色素的形成。補(bǔ)骨脂的95%乙醇提取物對(duì)TYR有明顯的激活作用，因此認(rèn)為補(bǔ)骨脂系通過(guò)提高TYR的活性使黑色素生成的速度和數(shù)量增加[25]。8-甲氧補(bǔ)骨脂素(8-MOP)是補(bǔ)骨脂的有效成分之一，雷鐵池等[26]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了8-MOP能以濃度依賴方式提高TYR活性和黑素含量，較對(duì)照組高2～3倍，且在50 μmol/L、100 μmol/L濃度時(shí)作用效果最強(qiáng)。有研究表明補(bǔ)骨脂可以明顯促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞分泌干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)，進(jìn)而促進(jìn)黑素細(xì)胞表面的c-kit受體表達(dá)增加，上調(diào)其下游的轉(zhuǎn)錄因子MITF表達(dá)，明顯增加了黑素細(xì)胞TYR的分泌，并表明補(bǔ)骨脂素誘導(dǎo)黑素生成作用與PKA信號(hào)傳導(dǎo)途徑參與調(diào)節(jié)有關(guān)[27-28]。唐曉琴等[29]利用血清藥理學(xué)方法，通過(guò)測(cè)定含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)的A375人黑素瘤細(xì)胞增殖及黑素生成，結(jié)果顯示補(bǔ)骨脂不僅能顯著促進(jìn)A375人黑素瘤細(xì)胞增殖，還能顯著促進(jìn)黑素的合成。

然而李永偉等[30]則認(rèn)為，補(bǔ)骨脂對(duì)體外培養(yǎng)的黑素細(xì)胞酪氨酸酶基因蛋白的表達(dá)有抑制作用。王錫元等[31]的研究亦證明當(dāng)補(bǔ)骨脂濃度超過(guò)一定的程度時(shí)，對(duì)TYR的活性可由激活變?yōu)橐种?。王帥等[10]的研究結(jié)果顯示，當(dāng)補(bǔ)骨脂素濃度為1 μmol/L時(shí)，黑素合成量?jī)H為72%，對(duì)黑素合成有顯著的抑制作用(P<0.01)；TYR活性為84%，對(duì)TYR有顯著抑制作用(P<0.01)；與空白對(duì)照組相比，補(bǔ)骨脂素組TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表達(dá)明顯降低，差異有顯著性意義(P<0.05，P<0.01)，說(shuō)明補(bǔ)骨脂安全劑量作用于A375細(xì)胞后，能顯著抑制細(xì)胞黑素合成及TYR活性，并能通過(guò)抑制A375細(xì)胞中TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表達(dá)來(lái)抑制黑素合成，參與了補(bǔ)骨脂素對(duì)黑素生成的調(diào)控。因此補(bǔ)骨脂對(duì)黑素合成的作用是通過(guò)哪些途徑或環(huán)節(jié)需要繼續(xù)深入研究。

2.4 女貞子

女貞子為木犀科植物女貞(LigustrumlucidumAit.)的干燥成熟果實(shí)，具有滋補(bǔ)肝腎、明目烏發(fā)功效[32]。女貞子也是治療白癜風(fēng)的常用中藥。研究表明女貞子具有增強(qiáng)TYR的活性和黑色素的合成作用[33]。孫宇等[34]通過(guò)研究中藥對(duì)體外培養(yǎng)的人頭皮毛囊生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明女貞子醇提物對(duì)體外培養(yǎng)的人頭皮毛囊生長(zhǎng)具有增強(qiáng)作用，可促進(jìn)黑素細(xì)胞c-kit受體蛋白的表達(dá)，能增強(qiáng)黑素細(xì)胞TYR mRNA的表達(dá)及活性，促進(jìn)黑色素的生成[35]。李永偉等[35]通過(guò)觀察女貞子提取物對(duì)黑素細(xì)胞增殖、黑素含量及與黑素細(xì)胞遷移密切相關(guān)的c-kit基因和黑素合成關(guān)鍵酶TYR基因的蛋白表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)女貞子提取物可使黑素含量增加15%，TYR基因表達(dá)增加16.55%。張迪敏等[36]發(fā)現(xiàn)女貞子的兩個(gè)重要單體酪醇(tyrosol)和齊墩果酸(oleaolic Acid)可能是女貞子激活TYR、促進(jìn)黑素合成的主要活性成分。其研究結(jié)果顯示，酪醇雖不能刺激黑素細(xì)胞增殖，但能提高TYR活性、加速黑素合成，并能上調(diào)黑素細(xì)胞TYR和TRP-1的mRNA表達(dá)，推測(cè)酪醇至少部分地通過(guò)在轉(zhuǎn)錄水平上上調(diào)TYR和TRP-1基因表達(dá)而使黑素細(xì)胞的TYR活性增強(qiáng)、黑素合成增加。而齊墩果酸可能主要通過(guò)影響TYR基因表達(dá)而增強(qiáng)黑素細(xì)胞的生物學(xué)活性。酪醇和齊墩果酸是否也能促進(jìn)黑素細(xì)胞c-kit受體蛋白的表達(dá)及其相應(yīng)的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

2.5 墨旱蓮

墨旱蓮為菊科植物鱧腸(EcliptaprostrataL.)的干燥地上部分，具有滋補(bǔ)肝腎、涼血止血功效[37]。近年來(lái)有報(bào)道墨旱蓮在離體實(shí)驗(yàn)中有促進(jìn)TYR活性使黑素合成增加的作用[33]。涂彩霞等[38]將墨旱蓮乙醇提取物作用于小鼠B16黑素瘤細(xì)胞，運(yùn)用RT-PCR測(cè)定TYR及TRP-1/2 mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示墨旱蓮具有上調(diào)TYR mRNA的作用，而對(duì)TRP-1/2 mRNA表達(dá)量未見(jiàn)有上調(diào)作用，說(shuō)明墨旱蓮?fù)ㄟ^(guò)上調(diào)TYR mRNA表達(dá)來(lái)增加TYR的量，從而促進(jìn)黑素合成。李永偉等[30]通過(guò)篩選白癜風(fēng)治療中使用概率最高的50種中藥并研究其對(duì)細(xì)胞外TYR活性作用，其結(jié)果表明墨旱蓮提取物對(duì)黑素細(xì)胞c-kit基因的表達(dá)具有促進(jìn)作用。而雷鐵池等[39]通過(guò)觀察89味中藥乙醇提取物對(duì)蘑菇酪氨酸酶的影響，認(rèn)為墨旱蓮對(duì)TYR并無(wú)激活作用。上述研究結(jié)果的不同，可能與實(shí)驗(yàn)方法有關(guān)。

2.6 薄荷

薄荷為唇形科植物薄荷(MenthahaplocalyxBriq.)的干燥地上部分，具有疏散風(fēng)熱、清利頭目、利咽、透疹等功效[40]，主要成分為揮發(fā)油，臨床上常用于治療流行性感冒、頭痛目赤、身熱等癥[41]，而較少見(jiàn)有關(guān)于薄荷對(duì)TYR及黑素作用的報(bào)道。

邰曉曦等[42]通過(guò)對(duì)薄荷進(jìn)行提取分離來(lái)初步研究其對(duì)TYR的激活作用，指出對(duì)TYR激活作用的成分應(yīng)是極性較大的苷類(lèi)化合物。馬景昕等[43]采用原位雜交方法檢測(cè)了包括薄荷在內(nèi)的7種中藥對(duì)TYR基因表達(dá)的影響，同時(shí)用多巴-氧化酶法及Schmrol法觀察其致色素作用，結(jié)果顯示薄荷可上調(diào)TYR mRNA水平、促進(jìn)黑素細(xì)胞的增殖和黑素合成。涂彩霞[44]利用RT-PCR方法從細(xì)胞水平檢測(cè)薄荷對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞黑素合成及TYR活性的影響，結(jié)果顯示薄荷未見(jiàn)有上調(diào)TYR mRNA的作用，推測(cè)可能是通過(guò)轉(zhuǎn)錄后修飾提高TYR活性作用而促進(jìn)黑素合成。薄荷激活TYR活性、促進(jìn)黑素合成的有效成分及其機(jī)理仍有待深入研究。

2.7 丹參

丹參為唇形科植物丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根和根莖，具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛等功效[45]。已有研究[39]證明丹參乙醇提取物對(duì)蘑菇TYR活性和黑色素生成量呈劑量相關(guān)的激活與上調(diào)，可提高治療白癜風(fēng)的療效，但丹參用于烏發(fā)的研究在國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少。孫婧等[46]利用不同溶劑對(duì)丹參的提取并測(cè)定其提取物對(duì)TYR激活率發(fā)現(xiàn)，乙醚提取液的激活效果最好，激活率為129.00%，而丹參的甲醇提取物對(duì)TYR的激活率為77.78%，但其提取率比乙醚的提取率約多80%，因此選用甲醇為提取劑。通過(guò)在不同溶劑萃取甲醇提取液所得各萃取物中乙醚萃取物對(duì)TYR的激活率最高，為103.8%，因此用甲醇做提取劑再用乙醚萃取可得到較多的有效成分，對(duì)TYR的激活率可達(dá)266.7%。王建華等[47]應(yīng)用多巴色素法測(cè)定了10種中藥的50%乙醇提取物對(duì)TYR的激活作用，結(jié)果表明丹參的激活率最高，為157.9%。而丹參激活TYR活性的有效成分及其作用機(jī)理仍有待深入研究。

2.8 黃芩

黃芩為唇形科植物黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi.)的干燥根，具有清熱燥濕、瀉火解毒等作用[48]，其藥理作用廣泛，且已有許多研究證明黃芩具有激活TYR活性，調(diào)節(jié)黑素生成的作用。黃芩苷為黃芩主要成分之一，羅增香等[49]以補(bǔ)骨脂素為對(duì)照，通過(guò)測(cè)定黃芩苷對(duì)黑素細(xì)胞的增殖、TYR活性及黑素生成的影響，結(jié)果顯示黃芩苷在濃度在10～40 μg/mL之間顯示較好的促進(jìn)黑素細(xì)胞生長(zhǎng)作用；激活TYR活性方面，黃芩苷的作用較對(duì)照組有明顯促進(jìn)作用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。劉璋等[50]的研究結(jié)果顯示，加入黃芩提取物后，各實(shí)驗(yàn)組合成黑素能力明顯增強(qiáng)，呈濃度依賴性關(guān)系，在1.0 g/L時(shí)黑素含量最高，細(xì)胞增殖率為(436.67±12.90)%，為0.01 g/L組的3～4倍；黃芩提取物對(duì)TYR活性的影響與調(diào)節(jié)黑素含量結(jié)果相同，當(dāng)黃芩質(zhì)量濃度在0.01～1.0 g/L時(shí)對(duì)TYR活性的調(diào)節(jié)呈濃度依賴性關(guān)系，最佳質(zhì)量濃度為1.0 g/L。也有專家認(rèn)為，黃芩對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性有明顯抑制作用，能明顯減少細(xì)胞內(nèi)黑色素的含量。通過(guò)研究黃芩等中藥提取物對(duì)B16黑色素細(xì)胞的增殖、細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性及黑色素合成的影響，結(jié)果表明黃芩苷在1 mg/mL的高濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞增殖有顯著抑制作用；對(duì)酪氨酸酶活性也有明顯的抑制作用[51]。周敏等[52]亦認(rèn)為黃芩苷可通過(guò)降低細(xì)胞增殖及酪氨酸酶活性抑制紫外線誘導(dǎo)的細(xì)胞反應(yīng)。各專家的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有所差異，可能與實(shí)驗(yàn)方法或黃芩提取物的濃度有關(guān)，具體原因有待進(jìn)一步研究。

2.9 茵陳

茵陳為菊科植物濱蒿(ArtemisiascopariaWaldst. et Kit.)或茵陳蒿(ArtemisiacapillarisThumb.)的干燥地上部分，具有清熱利尿、利膽退黃功效[53]。目前研究較多的是其保肝利膽等藥理作用，鮮見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道其調(diào)節(jié)TYR活性及黑素合成作用[54]。雷鐵池等[39]的研究結(jié)果表明茵陳對(duì)TYR活性和黑素生成量呈劑量依賴性激活和上調(diào)，低濃度組對(duì)TYR激活率最高，為(263.89±61.8)%，高濃度組對(duì)黑素生成上調(diào)率最高，為(181.3±12.9)%。葉孝兆等[55]以TYR抑制劑的篩選模型為基礎(chǔ)，研究含苯丙烯酸類(lèi)化合物的單味中藥提取物對(duì)TYR活性的影響，結(jié)果顯示，茵陳提取物對(duì)TYR的抑制率為：水提取物為-23.5%，95%乙醇提取物為-27.8%，石油醚提取物為-10.9%，說(shuō)明茵陳提取物對(duì)TYR具有激活作用。茵陳激活TYR活性的有效成分及其作用原理還有待研究。

3 天然植物染發(fā)劑的現(xiàn)狀

天然染發(fā)劑是指以植物中提取的有機(jī)物質(zhì)為主要成分的染發(fā)劑，對(duì)頭發(fā)不產(chǎn)生原發(fā)性刺激，也不易引起皮膚過(guò)敏。盡管其染發(fā)效果、尤其是染黑發(fā)效果尚不盡如人意，但相較于市場(chǎng)上使用較多的化學(xué)合成染發(fā)劑，其毒性更低，使用安全，一直受到人們的重視[56]。

目前應(yīng)用較為成功的是散沫花(LawsoniaalbaLam.)，也稱海娜，其主要著色成分為2-羥基-1,4-萘醌(指甲花醌，lawsone)。當(dāng)海娜漿液覆蓋在毛發(fā)表面時(shí)，2-羥基-1,4-萘醌分子從海娜遷移到毛干表皮的角蛋白分子上并與之結(jié)合，當(dāng)光線照射在海娜染色毛發(fā)表面上并被反射時(shí)，毛發(fā)與結(jié)合在角蛋白分子上的2-羥基-1,4-萘醌分子共同作用使毛發(fā)呈現(xiàn)一定的顏色[57]。劉玉勤[58]發(fā)明的黑米色素人發(fā)黑色染發(fā)劑，以從黑米中提取的天然色素為染發(fā)色素，利用染發(fā)劑與空氣接觸時(shí)，通過(guò)空氣中氧氣對(duì)黑米色素的氧化使黑米色素在人發(fā)上著色并附著，達(dá)到人發(fā)染黑的目的。蔡向源[59]研制了一種由何首烏、生地、旱蓮草、蟛蜞菊和靛青組成的中草藥植物染發(fā)劑，不僅可直接在頭發(fā)表面形成黑色保護(hù)薄膜達(dá)到染發(fā)目的，還具有涼血解毒、殺菌、滋養(yǎng)頭皮、護(hù)理毛囊和頭發(fā)的作用。周飛駿[60]發(fā)明的一種以丁香為滲透劑的非氧化永久型中藥染發(fā)水，以中草藥為原料，采用兩種藥水配套使用。使用時(shí)兩種染發(fā)水的染色成分聚合成黑色的顏料大分子，可保持一個(gè)半月以上不褪色。肖子英等[61]發(fā)明的烏飯樹(shù)植物黑發(fā)霜以烏飯樹(shù)葉提取物為主染色劑，對(duì)毛發(fā)蛋白質(zhì)親和力強(qiáng)，染黑效果可持續(xù)3個(gè)月。

但目前所使用的許多烏發(fā)產(chǎn)品都是通過(guò)漂染來(lái)是頭發(fā)變黑，隨著人的新陳代謝不斷進(jìn)行，新生成的頭發(fā)仍然為白色，并未從根本上解決是頭發(fā)變黑的問(wèn)題。而酪氨酸酶是產(chǎn)生黑色素的主要限速酶，若將含有可激活酪氨酸酶活性的植物提取物的染發(fā)劑深入毛囊以激活酪氨酸酶的活性便可促進(jìn)毛發(fā)黑素的生成，亦即尋求某種烏發(fā)劑，使該種烏發(fā)劑直接對(duì)酪氨酸酶進(jìn)行修飾，激活黑色素從而達(dá)到烏發(fā)的目的[62]。

4 結(jié)語(yǔ)

許多中藥已被發(fā)現(xiàn)并證明具有激活TYR活性、增加黑素合成的作用，但不同學(xué)者的研究結(jié)果有所不同，其中原因眾多，可能與酶促反應(yīng)結(jié)果受許多因素影響有關(guān)，也可能受中藥的產(chǎn)地、提取方法及濃度等因素影響。此外，多數(shù)研究雖篩選了一些激活TYR活性、增加黑素合成的單味中藥或中藥單體，但其作用的確切機(jī)理尚不太清楚[63]，且此類(lèi)中藥來(lái)源植物的科、屬、種之間似乎并無(wú)太大關(guān)聯(lián)，也無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)支持。雷鐵池等[39]篩選出中醫(yī)治療白癜風(fēng)74首方劑中高頻次出現(xiàn)的89味中藥，觀察這些中藥乙醇提取物對(duì)蘑菇TYR和黑素量的影響，其結(jié)果顯示的對(duì)TYR激活作用明顯的前12味中藥之間看不出有任何植物分類(lèi)學(xué)上的聯(lián)系，說(shuō)明從植物分類(lèi)學(xué)角度來(lái)尋找有效藥物并非理想。有望各專家從其他途徑研究中藥對(duì)TYR活性及黑素生成的調(diào)節(jié)作用。

目前市售的染發(fā)劑多為化學(xué)合成染發(fā)劑，其中所含的重金屬以及芳胺類(lèi)化合物、氧化劑、多元酚等容易引發(fā)安全問(wèn)題及環(huán)境污染問(wèn)題，使得天然染發(fā)劑安全、環(huán)保和具有特殊藥用價(jià)值的優(yōu)越性更為突出。但天然植物染發(fā)劑也存在著諸多缺點(diǎn)，如天然色素的成分復(fù)雜，色相不穩(wěn)定，天然色素的牢固度不理想等，這些因素制約著天然植物染發(fā)劑的發(fā)展。隨著天然植物染發(fā)劑著色技術(shù)研究的不斷深入，將給天然植物染發(fā)劑帶來(lái)新的活力。

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(責(zé)任編輯：王昌棟)

Progress of enhancing pigment traditional Chinese medicine of activating tyrosinase on melanocytes

LIANG Yibiao,LI Jinling,WANG Hui

(SchoolofTraditionalChineseMedicine,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou510006,China)

The main reasons of gray hair owe to the reduction of tyrosinase activity and deficiency of melanocytes.In this paper,several kinds of traditional Chinese medicine (TCM) on the activation of tyrosinase and regulation of melanocytes are reviewed.And the potential mechanism is introduced as a theoretical basis for study of natural plant hair dye.

tyrosinase; melanocytes; traditional Chinese medicine; hair dye

R285.1

A

1006-8783(2016)06-0811-06

10.16809/j.cnki.1006-8783.2016061901