血漿D-二聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值

?

·綜述·

血漿D-二聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值

石恩榮 綜述，周格琛 審校

(柳州市工人醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545005)

關(guān)鍵詞:血漿D-二聚體； 檢測(cè)； 應(yīng)用價(jià)值

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)纖溶酶降解產(chǎn)生的最終產(chǎn)物，其抗原性較強(qiáng)，濃度的升高是體內(nèi)纖溶系統(tǒng)的激活和血栓形成的證據(jù)之一，也是臨床上溶栓治療療效觀察的重要指標(biāo)。目前，隨著方法學(xué)的不斷更新，血漿D-二聚體的檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于多種疾病的診斷，對(duì)臨床上的許多疾病的早期診斷，療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估有重要的臨床價(jià)值，受到臨床越來(lái)越多的重視。該文對(duì)D-二聚體的檢測(cè)在靜脈血栓塞疾病的形成，心腦血管疾病，彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)，惡性腫瘤等疾病的診斷和療效監(jiān)測(cè)，病情的觀察及預(yù)后的臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行綜述。

1D-二聚體的產(chǎn)生

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)血漿纖溶酶作用形成的一種特異性代謝產(chǎn)物，體內(nèi)濃度的升高是繼發(fā)性纖溶的特異性指標(biāo)[1]。在血栓的形成過(guò)程中纖維蛋白原通過(guò)凝血酶作用形成不穩(wěn)定的血漿纖維蛋白單體，它們之間以非共價(jià)鍵結(jié)合，在a和Ca2+作用下，經(jīng)r鍵結(jié)合形成不溶性的和穩(wěn)定的交聯(lián)纖維蛋白聚合體[2],交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)纖溶酶作用，纖溶酶溶解酶降解血漿中的纖維蛋白凝塊轉(zhuǎn)變成多種可溶片段(X、Y、D、E等碎片)[3]，經(jīng)r鏈的交聯(lián)形成r鍵鏈結(jié)的兩個(gè)D片段即D-二聚體。其相對(duì)分子質(zhì)量為180×103，半衰期為8 h,經(jīng)腎臟代謝。因此，D-二聚體是血漿交聯(lián)纖維蛋白的特異性代謝產(chǎn)物，如果引起繼發(fā)性纖溶活性增強(qiáng)時(shí)，體內(nèi)D-二聚體濃度也相應(yīng)升高，是反映機(jī)體纖溶亢進(jìn)和高凝狀態(tài)分子標(biāo)志物之一。

2D-二聚體的檢測(cè)方法

目前D-二聚體的檢測(cè)實(shí)質(zhì)上是包含對(duì)D-二聚體的纖維蛋白片段的測(cè)定，有賴于單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展。常用的檢測(cè)方法包括乳膠凝集法，膠體金免疫滲透法，酶聯(lián)免疫吸附法，免疫比濁法。

2.1乳膠凝集法測(cè)定原理為血漿中的D-二聚體與吸附D-二聚體單抗的乳膠顆粒結(jié)合形成肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，熊志剛等[4]研究表明此方法操作簡(jiǎn)單，快速適用于急診快速檢測(cè)。但是存在主觀差異性，靈敏度較低，只能做篩查，不適用于大批量的標(biāo)本檢測(cè)。

2.2膠體金免疫滲透法基于免疫濾滲實(shí)驗(yàn)原理D-二聚體與濾過(guò)膜的單抗結(jié)合，然后與膠體金偶聯(lián)的D-二聚體單克隆抗體發(fā)生反應(yīng)后產(chǎn)生顏色變化，再通過(guò)光度計(jì)定量檢測(cè)結(jié)果[5]。該方法不僅簡(jiǎn)單快速，而且不受其他因素影響，適用于單個(gè)或批量標(biāo)本的及時(shí)定量檢測(cè)。

2.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)ELISA是將D-二聚體單抗包被于固相載體上，血漿中的D-二聚體與包被在固相載體上的D-二聚體抗體結(jié)合再與酶標(biāo)記的D-二聚體抗體結(jié)合形成復(fù)合物，與底物顯色后定量測(cè)定D-二聚體，顏色的深淺與D-二聚體含量呈正相關(guān)。此方法不受FDP、Fib、血紅蛋白,膽紅素等因素干擾，因此結(jié)果更精確。但此方法操作時(shí)間長(zhǎng)，不適合急診標(biāo)本測(cè)定。但是已有改進(jìn)的快速型進(jìn)行單個(gè)標(biāo)本的測(cè)定[6]。

2.4免疫比濁法D-二聚體與吸附D-二聚體特異性抗體的乳膠顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)，在405 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)透射光的強(qiáng)度的變化來(lái)測(cè)定D-二聚體的含量。封莉等[7]研究表明該方法檢測(cè)快速，穩(wěn)定準(zhǔn)確，是由自動(dòng)化儀器完成檢測(cè)，自動(dòng)稀釋，具有較高的靈敏度和精密度，可為臨床提供準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)，便于臨床診斷，病情觀察和用藥監(jiān)測(cè)。

3D-二聚體的臨床應(yīng)用

3.1VTE的排除診斷深靜脈血栓(DVT)和肺栓塞(PE)稱為靜脈血栓栓塞(VTE)，是臨床上常見(jiàn)的一種血栓性疾病。D-二聚體對(duì)VTE的早期排除診斷已在臨床上廣泛應(yīng)用。VTE患者體內(nèi)血漿D-二聚體濃度明顯高于正常健康組，表明患者存在繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)和血栓的形成，可作為排除靜脈血栓栓塞的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法[8]。因此D-二聚體檢測(cè)陰性可以有效排除血栓性栓塞疾病，而不必進(jìn)行進(jìn)一步檢查。若D-二聚體陽(yáng)性則須進(jìn)一步影像學(xué)檢查以明確診斷[9]。張健華等[10]研究表明檢測(cè)血漿D-二聚體水平有助于臨床對(duì)患者VTE形成的危險(xiǎn)性進(jìn)行監(jiān)測(cè)，對(duì)臨床早期發(fā)現(xiàn)及預(yù)防具有重要的指導(dǎo)意義。

3.2心、腦血管疾病冠心病和腦梗是最常見(jiàn)的心腦血管疾病特別是急性心肌梗死和缺血性腦卒中，心、腦血管疾病患者的D-二聚體明顯升高，升高的程度與預(yù)后有直接關(guān)系。Charoensri等[11]研究結(jié)果表明冠心病患者D-二聚體高于健康者。水平高低與心、腦血管硬化程度呈正相關(guān)且顯示D-二聚體可用于評(píng)估冠心病患者病變程度，預(yù)測(cè)和預(yù)后。D-二聚體在急性心梗治療上也有應(yīng)用價(jià)值，可指導(dǎo)溶栓。Matsumoto等[12]等研究表明，急性腦卒中患者D-二聚體水平升高與心、腦梗死范圍呈正相關(guān)。臨床上動(dòng)態(tài)觀察D-二聚體的變化發(fā)現(xiàn)其水平高低和梗死范圍有關(guān)而且和病情進(jìn)展有關(guān)，因此D-二聚體含量的變化可以預(yù)測(cè)腦梗死范圍和預(yù)后，給臨床進(jìn)行積極干預(yù)，預(yù)防復(fù)發(fā)有重要作用。研究顯示，急性腦?；颊逥-二聚體水平升高是快速診斷腦卒中的有效生化檢測(cè)方法[13]。

3.3DICDIC是一種以繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)為特征的獲得性全身血栓出血綜合征[13]。DIC的發(fā)生是多系統(tǒng)疾病嚴(yán)重并發(fā)癥的表現(xiàn)[14]。主要表現(xiàn)為微循環(huán)阻塞，出血栓塞和溶血等。當(dāng)DIC發(fā)生時(shí)，由于繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，大量的纖維蛋白降解，交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物D-二聚體就會(huì)大量增加[15]。在DIC形成的早期即有D-二聚體升高，D-二聚體在DIC診斷中陽(yáng)性率是100℅。如D-二聚體正?？膳懦鼶IC診斷[16]。刁翔文等[17]研究結(jié)果顯示，血漿D-二聚體是DIC的敏感指標(biāo)。D-二聚體水平與患者體內(nèi)的纖溶狀況呈正相關(guān)，隨著病程的變化而相應(yīng)增高，病情越嚴(yán)重預(yù)后越差，因此機(jī)體內(nèi)D-二聚體水平高低可作為DIC病情變化，療效評(píng)估的指標(biāo)。

3.4惡性腫瘤惡性腫瘤患者大多伴有凝血和纖溶異常，隨著腫瘤病情進(jìn)展D-二聚體增高，體內(nèi)高凝狀態(tài)加重。有凝血活性亢進(jìn)和繼發(fā)纖溶狀態(tài)，易發(fā)生血栓和DIC[18]。Ay等[19]進(jìn)行一項(xiàng)前瞻性研究，結(jié)果表明D-二聚體水平高低與癌癥患者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯相關(guān)，可作為癌癥患者的預(yù)后，因此有學(xué)者認(rèn)為,D-二聚體是一種可能的預(yù)后標(biāo)志物[20]。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)D-二聚體水平對(duì)惡性腫瘤患者的預(yù)后和療效觀察有重要意義。

4小結(jié)

綜上所述，D-二聚體是體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的特異性指標(biāo)。D-二聚體的檢測(cè)在臨床上得到廣泛的應(yīng)用，成為臨床凝血檢查的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。隨著方法學(xué)的提高，D-二聚體檢測(cè)方法具有高度敏感性和陰性預(yù)測(cè)能力。對(duì)VTE，心腦血管疾病，DIC，惡性腫瘤等許多疾病的診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)估等具有重要的臨床指導(dǎo)作用，隨著認(rèn)識(shí)和研究深入相信D-二聚體將有更廣闊的臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]Zamagni E,Brioli A,Tacchetti P,et al.Multiple myeloma,venous thromboembolism,and treatment-related risk of thrombosis[J].Semin Thromb Hemost,2011,37(3)：209-219.

[2]李丹丹,馬聰.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].血栓與止血，2011，17(3)：138-141.

[3]王梅,王金良.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(1):82-84.

[4]熊志剛,張慶怡.乳膠凝集法和免疫比濁法檢測(cè)D聚體結(jié)果比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(2):219-220.

[5]李莉.兩種檢測(cè)D2聚體方法的比較[J].中外醫(yī)療,2012,7(20):74-75.

[6]許文榮,王建中.臨床血液學(xué)檢驗(yàn)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2012:313-328.

[7]封莉,吳興福,王鳳平.淺析提高免疫比濁法測(cè)定D2聚體的準(zhǔn)確性[J].血栓與止血學(xué),2012,18(5):224-226.

[8]King A.Thrombosis:selective D-dinmer testing improves efficiency of DVT diagnosis[J].Nature Reviews Cardiology,2013,10(3):118.

[9]Bates SM,Jaeschke R,Stevens SM,et al.Diagnosis of DVT:antithrombotic therapy and prevention of thrombosis,9th ed:american college of chest physicians evidence-based clinical practice guidelines[J].Chest,2012,141(2):351-418.

[10]張健華,徐丹,張麗芬,等.不同年齡段下肢骨折病人檢測(cè)血漿D2聚體的臨床意義[J].血栓與止血學(xué),2012,18(5):227-228.

[11]Charoensri N,Pornratanarangsi S.D-dimer plasma levels in NSTE-ACS patient[J].J Med Assoc Thai,2011,94(1):39-45.

[12]Matsumoto M,Sakaguchi M,Okazaki S,et al.Relationship between plasma D-Dimer level and cerebral infarction volume in patients with nonvalvular atrial fibrillation[J].Cerebrovasc Dis,2013,35(1):64-72.

[13]Montaner J,Mendioroz M,Ribó M,et al.A panel of biomarkers including caspase-3 and D-dimer may differentiate acute stroke from stroke-mimicking conditions in the emergency department[J].J Intern Med,2011,270(2):166-174.

[14]余杏,姚敏,魏小斌,等.血漿D2聚體在臨床疾病診斷中的應(yīng)用[J].海南醫(yī)學(xué),2012,23(6):129-130.

[15]王梅,王金良.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,2(1):88-90.

[16]Bates SM.D-dimer assays in diagnosis and management of thrombot-ic and bleeding disorders[J].Semin Thromb Hemost,2012,38(2):673-682.

[17]刁翔文,陳雅瑩,田婧,等.彌漫性血管內(nèi)凝血98例臨床分析[J].醫(yī)學(xué)信息,2011,6(1):11-13.

[18]Kono T,Ohtsuki T,Hosomi N,et al.Clinical characteristics of is-chemic stroke in elderly patients with cancer[J].Nihon Ronen Igakkai Zasshi,2011,48(1):57-62.

[19]Ay C,Dunkler D,Pirker R,et al.High D-dimer levels are associat-ed with poor prognosis in cancer patients[J].Haematologica,2012,97(8):1158-1164.

[20]Nagy Z,Horvath O,Kadas J,et al.D-dimer as a potential prognostic marker[J].Pathol Oncol Res,2012,18(3):669-674.

(收稿日期：2015-12-04)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.025

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)06-0779-02

作者簡(jiǎn)介：石恩榮，男，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)研究。