兩種國產(chǎn)降鈣素原試劑性能比較

岑偉明，梁寶環(huán)

(東莞康華醫(yī)院，廣東東莞 523080)

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·臨床研究·

兩種國產(chǎn)降鈣素原試劑性能比較

岑偉明，梁寶環(huán)

(東莞康華醫(yī)院，廣東東莞 523080)

摘要:目的對兩種國產(chǎn)降鈣素原試劑進(jìn)行準(zhǔn)確度及精密度等性能指標(biāo)的比較，確定兩種試劑的優(yōu)劣。方法收集臨床標(biāo)本，分別使用三種試劑進(jìn)行平行檢測，并記錄結(jié)果。采用SPSS 19.0分別進(jìn)行一元線性歸、秩和檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)來統(tǒng)計兩種國產(chǎn)試劑與進(jìn)口試劑的臨床定量檢測結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果試劑A與羅氏試劑的整體相關(guān)性良好，但兩者結(jié)果偏差較小，在3個臨界值下的兩者的診斷結(jié)果一致性較好；而試劑B與羅氏試劑的整體相關(guān)性良好，但兩者結(jié)果偏差較大，試劑B的結(jié)果偏高，在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結(jié)果一致性較差。兩者的重復(fù)性及批間精密度均符合試劑說明書要求，試劑B比試劑A的精密度略為優(yōu)秀，但無太大差別。結(jié)論試劑A與羅氏試劑的比對結(jié)果良好，整體結(jié)果比試劑B優(yōu)秀。

關(guān)鍵詞:降鈣素原；性能比對；準(zhǔn)確性

降鈣素原(下簡稱PCT)正常情況下由甲狀旁腺C細(xì)胞產(chǎn)生，正常情況下含量極低，通常小于0.1ng/ml。當(dāng)發(fā)生嚴(yán)重感染并有全身表現(xiàn)時，PCT水平明顯升高，最高可達(dá)5 000倍[1]。此時PCT大部分來源于甲狀腺以外器官的巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞，它們對細(xì)菌感染的反應(yīng)表現(xiàn)為PCT的合成與釋放，因此PCT的升高程度與感染程度成正相關(guān)趨勢。在臨床上一般將PCT檢測結(jié)果分為4個等級，即<0.5、0.5～2.0、2.0～10.0、≥10.0 ng/mL[2]，根據(jù)臨床文獻(xiàn)報道，若患者PCT值≥0.5 ng/mL時，即為陽性閾值[3]。一般認(rèn)為在呼吸道感染中，PCT>0.5 ng/mL強(qiáng)烈推薦使用抗生素，PCT>0.25 ng/mL可根據(jù)情況使用抗菌藥物治療，PCT<0.1 ng/mL停止抗菌藥物治療[4]，PCT對于臨床早期合理應(yīng)用抗生素有著極其重要的作用；此外，PCT還可以用來判斷治療的有效性、疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后[5]，故PCT試劑的準(zhǔn)確性對臨床的診斷至關(guān)重要。

我科檢測PCT采用羅氏電化學(xué)發(fā)光法(Elecsys BRAHMS PCT，羅氏公司)，有著快速(18分鐘出結(jié)果)，結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)勢，但由于需要用到大型精密儀器(羅氏Elecsys E170)，成本昂貴，并且由于種種原因?qū)е聼o法實(shí)現(xiàn)24小時不間斷報告。目前我科考慮轉(zhuǎn)用國產(chǎn)POCT的試劑以彌補(bǔ)這些劣勢，現(xiàn)在有兩種試劑待選，分別是方法學(xué)為熒光素增強(qiáng)免疫化學(xué)發(fā)光法的試劑A和方法學(xué)為免疫熒光層析法的試劑B?，F(xiàn)對兩種國產(chǎn)試劑與進(jìn)口羅氏試劑進(jìn)行臨床結(jié)果比對試驗(yàn)，以確認(rèn)試劑的性能是否能滿足要求。

1材料與方法

1.1比對試驗(yàn)標(biāo)本來源收集2014年6月26日至2014年7月11日的本院降鈣素原標(biāo)本95例作為試劑A與羅氏的比對測試標(biāo)本，同時收集2014年6月20日至2014年7月5日本院的降鈣素原標(biāo)本120例作為試劑B與羅氏的比對測試標(biāo)本；采集血清進(jìn)行檢測。

1.2精密度試驗(yàn)標(biāo)本來源收集數(shù)份上述血清經(jīng)過濾混合調(diào)配出兩種濃度的血清樣本，經(jīng)羅氏PCT試劑測定結(jié)果為1.72和78.24 ng/mL，每份樣本分裝為21管，其中1管分裝1.5 mL，用作重復(fù)性比對試驗(yàn)；剩余20管每管分裝200 μL，置于-20 ℃冰箱保存。

1.3試劑與儀器羅氏Elecsys BRAHMS PCT試劑，方法為電化學(xué)發(fā)光法，使用羅氏Elecsys E170全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行檢測；試劑A，方法為熒光素增強(qiáng)免疫化學(xué)發(fā)光法，使用配套儀器進(jìn)行檢測；試劑B，方法為免疫熒光層析法，使用配套儀器進(jìn)行檢測。

1.4方法

1.4.1臨床結(jié)果比對收集臨床標(biāo)本，分別使用三種試劑進(jìn)行平行檢測，并記錄結(jié)果。采用SPSS19.0分別統(tǒng)計兩種國產(chǎn)試劑與進(jìn)口試劑的臨床定量檢測結(jié)果的相關(guān)性，使用SPSS一元直線回歸分析，以相關(guān)系數(shù)(r2)>0.95，P<0.05表示其相關(guān)性良好；偏差分析采用配對秩和檢驗(yàn)。應(yīng)用配對卡方檢驗(yàn)和Kappa一致性檢查三者的臨床診斷結(jié)果的一致性，以卡方檢驗(yàn)P>0.05，kappa值大于0.75表示一致性較好。以羅氏PCT的結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)，分別計算試劑A與試劑B的PCT檢測結(jié)果的相關(guān)性和偏差，并分別以0.5、2.0、10.0 ng/mL為臨界值，計算兩種方法的特異性指標(biāo)。

1.4.2精密度(1)重復(fù)性比對：使用兩種國產(chǎn)試劑分別對高低兩個濃度的混合血清進(jìn)行測定20次重復(fù)測定，計算兩種試劑的精密度，按兩者試劑說明書要求，不精密度應(yīng)小于等于10%；(2)批間精密度比對：使用兩種國產(chǎn)試劑分別對兩個濃度的混合血清進(jìn)行測定測定，每天測定1次，測定20 d，計算兩種試劑的批間精密度，按兩者試劑說明書要求，不精密度應(yīng)小于等于15%。

2結(jié)果

2.1線性關(guān)系分析從臨床結(jié)果驗(yàn)證整體數(shù)據(jù)所得的線性回歸方程來看，試劑A與羅氏的PCT檢測數(shù)據(jù)有線性關(guān)系，回歸方程為Y=0.805X+0.495(r2=0.975、P<0.05)，提示兩者相關(guān)性良好，無統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異；試劑B與羅氏的PCT檢測數(shù)據(jù)也存在線性關(guān)系，回歸方程為Y=1.705X-0.027(r2=0.983、P<0.05)，提示兩者相關(guān)性良好，無統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異。秩和檢驗(yàn)的結(jié)果中，試劑A與羅氏兩者數(shù)值偏差較小，Z值為-0.960，P=0.337>0.05提示兩者的偏差無統(tǒng)計學(xué)意義；試劑B比羅氏結(jié)果偏高，Z值為-9.195，P=0.000<0.05提示兩者的偏差較大，統(tǒng)計學(xué)上有顯著性差異。

2.2一致性分析以羅氏PCT的結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，試劑A的PCT檢測結(jié)果在3個臨界值下的P值分別為0.375、0.500、1.000；Kappa值分別為0.894、0.939、1.000；提示兩種試劑盒對臨床診斷具有較好的一致性。而試劑B的PCT檢測結(jié)果在3個臨界值下的P值分別為0.000、0.125、1.000；Kappa值分別為0.787、0.848、1.000；提示兩者在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結(jié)果一致性較差，而臨界值在2和10 ng/mL時，兩者的診斷結(jié)果一致性較好。

2.3重復(fù)性試驗(yàn)計算得出試劑A的低濃度水平的不精密度為5.29%，而試劑B的不精密度為4.03%；而試劑A的高濃度水平的不精密度為2.18%，而試劑B的不精密度為2.21%，兩者的重復(fù)性結(jié)果均符合試劑說明書要求，而本次試驗(yàn)中低濃度水平試劑B的重復(fù)性比試劑A結(jié)果略為優(yōu)秀，高濃度水平則幾乎一致。

2.4批間精密度試驗(yàn)計算得出試劑A的批間不精密度為9.94%，而試劑B的批間不精密度為9.12%；而試劑A的高濃度水平的批間不精密度為4.34%，而試劑B的批間不精密度為3.42%，兩者的批間精密度結(jié)果均符合試劑說明書要求，而本次試驗(yàn)中高濃度水平試劑B的重復(fù)性比試劑A結(jié)果略為優(yōu)秀，低濃度水平則幾乎一致。

3討論

PCT由于可以及時準(zhǔn)確地反映患者機(jī)體受細(xì)菌感染的情況來指導(dǎo)臨床用藥，另一方面可以起到及時停止用藥，減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的作用，有著重要的臨床價值及社會效益。因此，檢測結(jié)果準(zhǔn)確性顯得非常的重要，必須合理選擇正確的試劑。目前檢驗(yàn)科檢測PCT常用的化學(xué)發(fā)光法試劑大都需要大型的進(jìn)口精密儀器及配套進(jìn)口試劑，使用和儀器維護(hù)成本昂貴，增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而且其對檢驗(yàn)場所環(huán)境、操作人員均有著較為嚴(yán)格的要求，故很難達(dá)到臨床快速檢測的要求。因此國產(chǎn)POCT試劑應(yīng)運(yùn)而生，其成本低廉，簡易輕便的操作特性使其可以實(shí)現(xiàn)床旁檢測，可以大大縮短的臨床標(biāo)本的周轉(zhuǎn)時間(TAT)，滿足臨床的需求。但由于POCT往往采用的是半自動的儀器分析，需要人工手動進(jìn)行前處理、加樣及反應(yīng)，結(jié)果十分容易受到人員因素影響，而且由于種種原因目前國產(chǎn)試劑質(zhì)量良莠不齊，為保證結(jié)果質(zhì)量，在投入使用前必須進(jìn)行性能驗(yàn)證，結(jié)果合格才能開始使用。

本文使用了兩種國產(chǎn)試劑分別與進(jìn)口試劑進(jìn)行平行檢測，從結(jié)果中可以發(fā)現(xiàn)試劑A與羅氏試劑的整體相關(guān)性良好，但兩者結(jié)果偏差較小，在3個臨界值下的兩者的診斷結(jié)果一致性較好；而試劑B與羅氏試劑的整體相關(guān)性良好，但兩者結(jié)果偏差較大，試劑B的結(jié)果偏高，在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結(jié)果一致性較差，在PCT結(jié)果濃度較低時，容易造成誤診，誤導(dǎo)臨床用藥，產(chǎn)生不良后果。兩者的精密度試驗(yàn)比對結(jié)果均能滿足試劑說明書要求，相對來說試劑B的精密度要比試劑A要略為優(yōu)秀，但二者并無太大差別。從整體上來說，試劑A與羅氏試劑的比對結(jié)果良好，整體結(jié)果比試劑B優(yōu)秀，且試劑及儀器的維護(hù)成本較低，在一定程度上既滿足了臨床快速檢測的需求，同時在較大程度上降低了檢驗(yàn)費(fèi)用，減輕了患者負(fù)擔(dān)，有較大的臨床應(yīng)用價值。

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(收稿日期：2016-01-05)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.039

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1108-02