王 瑩
四川省自貢市四川衛(wèi)生康復(fù)職業(yè)學(xué)院 643000
中藥血清藥理學(xué)方法的研究進(jìn)展
王 瑩
四川省自貢市四川衛(wèi)生康復(fù)職業(yè)學(xué)院 643000
血清藥理學(xué)是指一種用含有藥物成分的血清施加于體外實(shí)驗(yàn)反應(yīng)體系的體外實(shí)驗(yàn)策略。目前已廣泛使用于中藥復(fù)方藥理作用機(jī)制的研究。本文主要闡述中藥血清藥理學(xué)方法在動(dòng)物選擇、給藥劑量和方法、采血時(shí)間等方面的研究進(jìn)展,并揭示了血清藥理學(xué)在中藥藥效研究中的重要性。
血清藥理學(xué);中藥;研究
中藥血清藥理學(xué)是探討和研究中藥藥效作用的體外實(shí)驗(yàn)方法,為成分復(fù)雜的中藥及粗提物制劑的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了真實(shí)、精準(zhǔn)、可靠的保障[1],受到了醫(yī)藥界人士的廣泛重視。當(dāng)前關(guān)于血清藥理學(xué)的研究越來(lái)越多,呈直線(xiàn)上升趨勢(shì),而相關(guān)的研究報(bào)道也隨之增多。鑒于此,本文主要對(duì)中藥血清藥理學(xué)方法的研究進(jìn)展進(jìn)行深入的論述。
一般情況下,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等。而不同動(dòng)物的血清成分是不同的,因此需要盡量選取與人類(lèi)生物學(xué)特征相似的物種,從而縮小動(dòng)物血清與人類(lèi)血清在生理、生化等相關(guān)狀態(tài)下的差異,降低因種屬差異造成的免疫問(wèn)題,提升實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)的真實(shí)性及有效性。對(duì)于體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),要盡可能使用同種類(lèi)的血清,進(jìn)而避免多樣種類(lèi)血清的影響。這是由于動(dòng)物在生理和病理狀態(tài)下對(duì)藥物的消化吸收程度不同,機(jī)體反應(yīng)也不同。換言之,就是正常動(dòng)物采集的血清和病理狀態(tài)下動(dòng)物采集的血清,其作用具有一定的差異性。有學(xué)者曾使用兩種方式制造的清肝化淤藥方,其中的含藥血清對(duì)人類(lèi)肝癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響顯示,病理狀態(tài)下和正常狀態(tài)下大鼠制造的含藥血清對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制效果是不同的,病理大鼠的含中藥血清能促使肝癌細(xì)胞的凋亡。
當(dāng)含藥血清參與到體外實(shí)驗(yàn)之后,原有的濃度將會(huì)被稀釋?zhuān)赡艹霈F(xiàn)假陽(yáng)性或陰性結(jié)果,當(dāng)然這也不排除藥物本身濃度過(guò)低所致。若使用臨床常用量與動(dòng)物等效劑量系數(shù)及培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度的積來(lái)計(jì)算給藥劑量,則可以部分彌補(bǔ)含藥血清在體外反應(yīng)系統(tǒng)中的稀釋程度。但缺點(diǎn)是血藥濃度并不能與給藥劑量呈等倍數(shù)上升,且藥味濃、劑量大的復(fù)方在給動(dòng)物灌服時(shí)存在一定的難度,最終導(dǎo)致達(dá)不到公式中所要求的量。若將含藥血清制備成凍干粉,灌服于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,則能夠在動(dòng)物血液中達(dá)到所需要的有效濃度,最終按照實(shí)驗(yàn)需求,提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血藥濃度,有利于血清保存。值得注意的是,體內(nèi)給藥并不是劑量越大,所得血清藥理療效越好,而是要根據(jù)臨床實(shí)際需要確定給藥劑量。當(dāng)然,也有部分人不知道采納多少的劑量為合適,此時(shí)可以通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)解決這個(gè)問(wèn)題。
在進(jìn)行中藥血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)前務(wù)必要確定適宜的給藥方法。由于是否禁食、給藥次數(shù)、給藥間隔時(shí)間等方面都會(huì)對(duì)血藥濃度產(chǎn)生一定的影響,加上食物可以改變腸胃的理化性質(zhì),干擾器官的功能狀態(tài),阻礙藥物在體內(nèi)的吸收,致使血藥濃度很難達(dá)到實(shí)驗(yàn)的要求,甚至連實(shí)驗(yàn)要求都達(dá)不到。因此,在實(shí)驗(yàn)前一定要考慮是否需要禁食及禁食的時(shí)間。正常狀況下,實(shí)驗(yàn)前應(yīng)禁食8~13小時(shí),保持空腹,避免其它因素影響。崔曉蘭等人發(fā)現(xiàn)3次給藥方法[3],給家兔灌服桂枝湯,單次給藥后1、2、3小時(shí)所搜集的含藥血清無(wú)抑制副流感病毒誘導(dǎo)細(xì)胞病變的效果;但如果每天給藥1次,持續(xù)給藥3天,最后一次給藥2小時(shí)后的血清,則有顯著抑制副流感病毒導(dǎo)致細(xì)胞病變的效果。另外還有人提出,每天給藥1次,持續(xù)給藥7~10天;或每隔一個(gè)半衰期給藥一次,持續(xù)4~6次。應(yīng)用中藥血清藥理學(xué)方法進(jìn)行研究,只有首先確定受試制劑的給藥方法,所取到的含藥血清才能充分展示其藥物所具有的療效。而應(yīng)用這些方法的目的在于使血藥濃度達(dá)到穩(wěn)定,之后再采血,更有利于藥物機(jī)制的具體研究。
倘若能夠在給藥的峰濃度時(shí)間階段內(nèi)采血?jiǎng)t效果更好,同時(shí)也能夠避免因有效物質(zhì)還未吸收或代謝殆盡而造成的假陰性結(jié)果。但若是不同藥物,或是同種藥物的不同有效成分,則它們達(dá)到峰濃度的時(shí)間會(huì)不盡相同。所以,要想采血達(dá)到統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)是有一定難度的。有相關(guān)學(xué)者認(rèn)為,大部分藥物的達(dá)峰時(shí)間是在給藥后的1~2小時(shí)。可將采血時(shí)間定為給藥之后的2小時(shí),也可連續(xù)給藥2次,期間間隔1小時(shí),在第二次給藥后1小時(shí)采血。李儀奎則表示每天給藥2次[4],持續(xù)給藥3天,最后一次給藥1小時(shí)后采血。還有一部分學(xué)者以含藥物血清抗血小板釋放5—HT和阻滯內(nèi)皮細(xì)胞鈣通道作用為指標(biāo),研究影響中藥血清藥理學(xué)方法開(kāi)展的重要原因——制備含藥物血清的采血時(shí)間,從而進(jìn)行時(shí)效關(guān)系的探討。結(jié)果表明:在給藥半小時(shí)后采血所得含藥血清作用最適宜;在達(dá)到近似穩(wěn)定狀態(tài)的血藥濃度后采血制備的血清檢驗(yàn)效果最好。而最有效靠譜的方法是首先對(duì)少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),再按照不同的實(shí)驗(yàn)需求,將不同時(shí)間采集的含藥血清進(jìn)行對(duì)比,最終確定采血時(shí)間。也有相關(guān)學(xué)者建議,對(duì)于含中藥或者是復(fù)方的血清制備,采血時(shí)間的確定還需要考慮復(fù)方的劑型及機(jī)體功能狀況,并聯(lián)合其藥效動(dòng)力學(xué)參數(shù)從而進(jìn)一步確定。
血清藥理學(xué)是一種新型的體外實(shí)驗(yàn)方法,相比傳統(tǒng)的將中藥粗制劑直接加入反應(yīng)系的方法優(yōu)勢(shì)更多。它不僅對(duì)中藥藥理機(jī)制的研究具有一定的促進(jìn)作用,還給中藥復(fù)方研究開(kāi)辟出了一條新思路。盡管部分學(xué)者在相關(guān)給藥方法、采血時(shí)間的研究中出現(xiàn)了較多不足,但可通過(guò)后期的逐漸完善,使血清藥理學(xué)方法更為科學(xué)和健全,以更加適應(yīng)血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的發(fā)展需求。
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1672-5018(2016)07-212-01