鵝出血性壞死性肝炎的診斷和防控

馬 躍　遼寧省遼陽市動物疫病預(yù)防控制中心　111000

鵝出血性壞死性肝炎的診斷和防控

馬 躍遼寧省遼陽市動物疫病預(yù)防控制中心111000

鵝出血性壞死性肝炎又稱鵝呼腸孤病毒感染，是2001年以來在我國養(yǎng)鵝業(yè)出現(xiàn)的一種呼腸孤病毒病。該病主要危害1～10周齡鵝，其特征病變是肝臟兼具出血灶和壞死灶。該病由王永坤首先在江蘇發(fā)現(xiàn)，此后在全國許多地方的鵝群流行并造成危害。

1　病原分析

該病的病原為鵝呼腸孤病毒，屬呼腸孤病毒科、正呼腸孤病毒屬成員。若按國際病毒分類委員會的分類標(biāo)準(zhǔn)，可認(rèn)為GRV與禽呼腸孤病毒屬同種病毒，并可稱之為ARV的鵝源分離株。GRV具有典型呼腸孤病毒形態(tài)特征，即病毒粒子呈球形，無囊膜，呈二十面體對稱并有雙層衣殼結(jié)構(gòu)，直徑約76～86nm，核心（內(nèi)衣殼）直徑約51～57nm。GRV基因組為雙鏈RNA，分10個片段，按核酸電泳遷移率，分別為L組（L1、L2、L3）、M組（M1、M2、M3）和S組（S1、S2、S3、S4），編碼λ蛋白（λA、λB、λC）、μ蛋白（μA、μB、μN(yùn)S）和 σ蛋白（σC、σA、σB、σNS）。與ARV類似，GRV的S1片段為三順反子，除編碼σC蛋白外，還編碼非結(jié)構(gòu)蛋白P10 和P18（該命名來源于分子量），但P18與ARV的對應(yīng)蛋白（P17）缺乏序列相似性。

在瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)中，GRV與雞源ARVPR株存在交叉反應(yīng)，表明它們有共同的群特異性抗原。GRV與北京鴨“脾壞死病”和番鴨“新肝病”病原具有相近的遺傳進(jìn)化關(guān)系，但與番鴨“白點(diǎn)病”和匈牙利的鵝呼腸孤病毒之間存在明顯的序列差異。

病毒能在發(fā)育良好的鵝胚、鴨胚、番鴨胚和雞胚中繁殖，大多能致死胚胎。感染鵝胚、鴨胚和番鴨胚死亡率高達(dá)95％，而感染雞胚的死亡率為85％。胚胎死亡集中于接種后96～120小時。病毒也能在雞胚、鴨胚、番鴨胚和鵝胚成纖維細(xì)胞上復(fù)制，并產(chǎn)生細(xì)胞病變。GRV對乙醚、氯仿、胰蛋白酶不敏感，對酸、熱有較強(qiáng)抵抗力。GRV不能凝集禽類和哺乳動物紅細(xì)胞。

2　流行病學(xué)

不同品種的鵝對該病均易感。在自然條件下，該病主要發(fā)生于1～10周齡的鵝，尤以2～4周齡的鵝多發(fā)。發(fā)病率為10％～70％，死亡率為2％～60％。發(fā)病率和死亡率與日齡有密切關(guān)系，日齡越小，發(fā)病率和死亡率越高。4周齡以內(nèi)雛鵝發(fā)病率可達(dá)70％以上，死亡率達(dá)60％左右。而7～10周齡鵝的死亡率低，為2％～3％。青年鵝感染后多不出現(xiàn)明顯癥狀，種鵝感染后雖然無臨床癥狀，但對產(chǎn)蛋率和出雛率有一定影響，病毒可經(jīng)卵垂直傳播。該病無明顯的季節(jié)性，但與衛(wèi)生條件差、飼養(yǎng)密度過大、氣候驟變以及應(yīng)激因素有一定關(guān)系?；疾※Z生長受阻，飼料轉(zhuǎn)化率低。感染鵝群容易繼發(fā)感染細(xì)菌性疾病或其他病毒性疾病。

3　臨床癥狀

患病鵝生長受阻是該病的特征。按病程，該病可分為急性、亞急性和慢性3種類型，與患病鵝的日齡有著密切的關(guān)系。隨著感染發(fā)病鵝日齡的增長，其發(fā)病類型由急性轉(zhuǎn)至慢性。

急性型多發(fā)生于3周齡以內(nèi)雛鵝，病程為2～6天。患病雛鵝精神萎頓，食欲大減或廢絕，絨毛雜亂、無光澤，體小瘦弱，喙和蹼顏色淡，呈蒼白色，不能站立，行動緩慢、腹瀉。病程稍長的患鵝一側(cè)或二側(cè)跗關(guān)節(jié)或跖關(guān)節(jié)腫脹。亞急性和慢性型多發(fā)生于3周齡以上的鵝，病程為5～9天。患病鵝精神不佳，食欲減少，不愿站立，行動困難，呈跛行，跗關(guān)節(jié)、跖關(guān)節(jié)腫脹明顯。有些病例趾關(guān)節(jié)或腳和趾屈肌腱等部位腫脹。

4　診斷方法

根據(jù)大體病變可對該病做出初步診斷，確診需進(jìn)行病毒的分離和鑒定。

無菌采集?。ㄋ溃Z的病變肝臟和（或）脾臟，研磨，用滅菌PBS或Hank's液制成懸液。經(jīng)無菌處理后，接種10日齡SPF雞胚（或12日齡鵝胚、11日齡鴨胚、12～13日齡番鴨胚），每胚經(jīng)絨毛尿囊膜接種0.1mL，置于37～38℃環(huán)境中培養(yǎng)，大多數(shù)胚胎于接種后4～5天死亡。收獲死亡或有病變胚胎的尿囊液和絨毛尿囊膜制成勻漿保存。用已知抗血清在胚胎或雞胚成纖維細(xì)胞上進(jìn)行中和試驗(yàn)，或用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)對病毒分離株進(jìn)行鑒定。從含毒病料或病毒分離物提取RNA為模板，用GRV特異性RT-PCR進(jìn)行擴(kuò)增，可對GRV進(jìn)行快速檢測或鑒定。若回收擴(kuò)增產(chǎn)物測序并進(jìn)行序列分析，有利于比較待檢毒株與GRV已知序列的異同。

用含毒病料或病毒分離物 （1∶5稀釋），經(jīng)肌肉（1.0mL或爪墊（0.2mL）接種10日齡左右易感雛鵝，亦可用于該病的診斷。雛鵝一般于感染后5～6天發(fā)病，死亡雛鵝應(yīng)表現(xiàn)出與自然病例相同的病理變化。

5　防控措施

患病和帶毒鵝群是該病的重要傳染來源。GRV可經(jīng)卵垂直傳播，因此感染種群的蛋不能用于孵化。病毒可經(jīng)糞便排出，從而污染場地，造成疫病不斷擴(kuò)大。因此，應(yīng)淘汰或隔離病鵝，對場地進(jìn)行消毒?；疾※Z群容易繼發(fā)感染細(xì)菌性疾病，應(yīng)適當(dāng)使用藥物，以減少損失。